多功能酶標儀spectramai3的操作規(guī)程

1、多功能幅標儀SpectraMaxi3的標準操作規(guī)程StandardOperationofSpectraMaxi3部門簽名/日期DepartmentSignature/Date起草人：樊小川，XiaochuanFanPreparedbyQC審核人：黃思佳，SijiaHuangReviewedbyQC審核人：褚夫蘭，F(xiàn)ulanChuReviewedbyQA批準人：張伯彥，BoyanZhangApprovedby質(zhì)量負責人頒發(fā)部門Issuedby質(zhì)量保證部-QA執(zhí)行日期EffectiveDate替換文件ReplacedForVersion00復審日期ReviewDate分發(fā)部門Distributed

2、toQAQC1 目的建立多功能酶標儀SpectraMaxi3的標準操作程序，規(guī)范SpectraMaxi3多功能酶標儀檢測時的操作。2 適用范圍本規(guī)程適用于所有對多功能酶標儀SpectraMaxi3的操作3 術語或定義多功能酶標儀：指功能較強、精度較高的單體臺式酶標儀，可檢測吸光度（Abs）、熒光強度（FL）、時間分辨熒光（TRF）、化學發(fā)光（Lum污。4 責任4.1 儀器負責人負責多功能酶標儀的日常及定期維護，出現(xiàn)故障時負責聯(lián)系廠家維修，保證運行正常。4.2 實驗操作人員需嚴格按照本規(guī)程執(zhí)行，保證儀器正常使用，每次用完后填寫儀器使用記錄，且使用后及時清理臺面，保持儀器潔凈。5 EHS5求N/A

3、6 程序6.1 儀器安裝儀器與電腦連接完畢并連接電源以后，按儀器背面的按鈕可以直接啟動儀器，經(jīng)過幾分鐘后的儀器自檢后就可以開始用于檢測。在連有電源的情況下，保持24小時開機，不要罩防塵罩以保持透氣，隔1-2月關機重啟一次。6.2 SoftMaxPro軟件操作基本步驟打開軟件點擊“SoftMaxPro”圖標，打開SoftMaxPro軟件，出現(xiàn)"PlateSetupHelper"對話框。若無則點擊kJ圖標。連接儀器點擊'Chooseadiffecientinstrument'，打開'InstrumentConnection'對話框，在“Avail

4、ibleInstruments”菜單中選擇儀器連接線與電腦所接的串口號（COM）選擇所購買白酶標儀型號SpectraMaxi3或添加模塊卡盒型號。最后點擊“OK鍵連接。儀器檢測參數(shù)設定點擊U圖標后出現(xiàn)“Settings”對話框，對話框最上方出現(xiàn)ReadMode（讀板模式）和ReadType（讀板類型）兩個選項，讀板模式有ABS優(yōu)吸收）、FL（熒光強度）、LUM比學發(fā)光）和TRF（M間分辨熒光）,讀板類型有終點檢測（Endpoint）、動力學（Kinetic）、單孔掃描（WellScan）和光譜掃描（Spectrum）四種。使用者根據(jù)實驗需要選擇合適的讀板模式和讀板類型。對話框下方左側(cè)列表有如下

5、選項，從上往下依次用鼠標點中選項，并在右欄中選擇對應的參數(shù)設定。7 ）Wavelengths（波長）可以選擇檢測幾種波長，光吸收模式最多為6種，其他模式均為4種。a）對于光吸收模式，可以在Lm1后面的框中填入檢測所用波長。b）對于熒光強度，時間分辨熒光和熒光偏振模式，可以在2個框中分別填入激發(fā)波長和發(fā)射波長。Cutoff一般選為自動（Auto）。c）對于化學發(fā)光模式，一般使用All'。當同時檢測不止一色化學發(fā)光的時候可填入相應的檢測波長。8 ）PlateType（板型）對于不同實驗可以選擇6-384孔板及其具體的板型。9 ）ReadArea（讀板區(qū)域）可用鼠標先選中起始孔按住不放，進行

6、拖曳直到選中微孔板上所有需要檢測的孔。10 PathCheck（光徑校正）僅用于光吸收模式，即將微孔板檢測得到的原始光吸收值通過參比校正到1cm光徑長度時的光吸收值?？蛇x擇“WaterConstant"（以水做參比）和“CuvetteRefence”（在比色皿中加入相應溶液預讀一次作為參比）。一般情況下可以不用校正。11 shake選中BeforeFirstRead后可以選擇讀板之前震板，可選擇0-999秒。一般不選擇。12 SpeedRead可加速讀數(shù)速度，為準確所讀數(shù)值，默認不加速，一般不選擇。13 MoreSettingReadorder可按實驗要求選擇按列(Column)、排

7、(Row)或者孔(Well)掃描讀數(shù)。全部設定完后按對話框右下角的“OK確認，回到"PlateSetupHelper"對話框。6.2.4檢測樣品分組設定按回鍵后出現(xiàn)TemplateEdite'對話框，先用鼠標拖曳選中要進行編輯的孔,被選中的空會變黑，然后點擊Groups欄中的下拉菜單選擇所要進行的分組。具體設定步驟如下：1)設定本底參照(BLANK)進入上述界面后，點擊AssignmentOption欄中的下拉菜單選中“Plateblank則其他的數(shù)據(jù)結(jié)果均顯示為扣除本底平均值的結(jié)果。2) 設定標準樣品(Standards)當有一系列已知濃度梯度的樣品做為標準樣品時

8、，點擊Groups欄中的“Standards”，再點擊“assign”進行標記，繼而點擊“series”進行設定，新出現(xiàn)的對話框中“Startfrom”中“ToptoBottom"、“BottomtoTop"、“LefttoRight”或“RighttoLeft”表示該組內(nèi)樣品排列次序，根據(jù)實驗進行選擇；右上方的“patternofReplicates”會自動顯示復孔數(shù)目；下方的“Startingvalue”表示起始樣品的濃度，可以在框內(nèi)填入相應數(shù)值，"Stepby”表示以什么方式設置濃度梯度，前面下拉框可以選擇“+、-、*、/"，后面框內(nèi)可以填入相應的

9、值，比如起始濃度是2,增加2,則選擇“+”，輸入“2”。設定完畢，點對話框右下角“OK確認。在上一界面中點右邊的“Edit”，新對話框中“SampleDescriptor”下的“Columnname'根據(jù)實驗情況命名，默認是ConcentrationUnits”后面可以填入適當?shù)臐舛葐挝唬O置好后退出“TemplateEdite3)設定未知樣品(Unknowns)對未知樣品進行分組設定時，進入“TemplateEd讓e”界面，選中微孔，點擊“Groups”欄“Unknown名下的“Unknowns',若未知樣品已知濃度，選"Unk-dilution”，具體設定同標準樣

10、品。4)有多個標準樣品或樣品時點Groups欄中的“add”，可以添加新組，其它設置同上。1.1.5 數(shù)據(jù)分析設定1)在“standardCurve”進行數(shù)據(jù)分析設定，點擊tS-jl圖標，進入PlotEdite-standardcurve'進行圖表設置，在該對話框中，“GrafeTitle”中填入該圖的名稱，即以后在數(shù)據(jù)計算中要引用的名字?！癙lotName中填入該條曲線的名稱，“X-Axis”和“Y-Axis”可以通過下拉欄選擇該曲線橫坐標和縱坐標所引用的數(shù)據(jù)，如選擇"Concentration”和“MeanValuef。在“PlotAttributes”中可選擇圖中每個點

11、的形狀和顏色。一張圖中可以有多條曲線，按“add”可在該圖中增加曲線。2) “CurveFit”右邊的下拉菜單可選擇曲線擬合的方式，如四參數(shù)方程“4-Parameter”，根據(jù)實驗要求進行選擇。1.1.6 設定溫度儀器可以設定溫度，可在室溫以上加溫。當開啟溫度控制后需使儀器的微孔板插槽置于關閉狀態(tài)保持所設溫度，如果處于打開狀態(tài)，儀器會發(fā)出報警聲，然后自動關閉微孔板插槽。1.1.7 參數(shù)設置保存實驗檢測參數(shù)都設定完畢后，所有檢測條件的設定、樣品類型的設定、實驗結(jié)果、數(shù)據(jù)分析結(jié)果等，可以另存為兩種格式：1) *.sda格式，即數(shù)據(jù)格式。該文檔含有包括參數(shù)設定，實驗數(shù)據(jù)，結(jié)果分析等所有實驗內(nèi)容。2)

12、 *.spr格式，即模版格式。該文檔含有參數(shù)設定，分析公式等實驗設定內(nèi)容，可以應用于多次重復實驗而使用統(tǒng)一模版。為避免覆蓋原有數(shù)據(jù)，每次使用需新建模板或?qū)贆z測模版讀數(shù)，禁止使用已保存的原始檢測數(shù)據(jù)作為模版。1.1.8 運行程序1） 按“open/close”可以控制儀器微孔板插槽的打開和關閉，微孔板插槽打開后，將酶標板水平放置到微孔板插槽，點“open/close”關閉微孔板插槽。2） 點擊U開始讀數(shù)。讀數(shù)完畢后保存文件即可。軟件安裝后默認用戶在做完實驗后自己保存數(shù)據(jù)。如果用戶希望每次實驗檢測后自動保存可以在“SaveDataAfterRead”前打勾。6.3 結(jié)果分析在實驗結(jié)束后，自動根據(jù)

13、所設參數(shù)進行結(jié)果分析以及曲線擬合。在結(jié)果中包括了所讀數(shù)值及曲線相關的數(shù)據(jù)，內(nèi)容包括樣品序號、樣品數(shù)值（value）、SD（StandardDeviation）值和CVS（coefficientofvariation）,在曲線圖下方，軟件還會自動計算出曲線的各種參數(shù)如EC50S等。數(shù)據(jù)分析完后，建議將其屬性更改為只讀，以防止誤刪。6.4 其他分析SpectraMaxi3還包括相關性分析等分析模塊，可根據(jù)不同實驗需要選用。6.5 儀器保養(yǎng)注意1）有良好的電源，保持24小時開機。2）保持避光和干凈的室內(nèi)環(huán)境，維持一定的濕度（30%-80%）。3）維持室內(nèi)比較恒定的溫度，以20-22度為最適宜。4）適用6-384孔板。96孔微孔板內(nèi)每孔可檢測100-300ul溶液，最佳檢測體積為200ul。384孔微孔板內(nèi)每孔可檢測50-100ul溶液，最佳檢測體積為80ul。5）檢測后的微孔板不要長期置于儀器插槽中，檢測完后就從儀器中取出，避免溶液蒸發(fā)腐蝕或損壞儀器內(nèi)部光路系統(tǒng)。如果為有腐蝕性或揮發(fā)性溶液，請帶蓋檢測。6）對于可見光吸收檢測，使用全透明微孔板；紫外光吸收檢測，使用紫外可透全透明微孔板；熒光強度和熒光偏振，使用黑色不透明板，需要檢測底讀的用黑色底透微孔板；化學發(fā)光和時間分辨熒光，使用白色不透明微孔板。7 附件N/A8 參考或引用文件SoftMa