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文檔簡介
1、會計學1ELISA實驗原理方法儀器流程圖和注意實驗原理方法儀器流程圖和注意事項分析事項分析第1頁/共13頁第2頁/共13頁間接法等第3頁/共13頁 雙抗夾心法雙抗夾心法ELISA第4頁/共13頁 競爭法競爭法 ELISAELISA第5頁/共13頁第6頁/共13頁第7頁/共13頁實驗步驟實驗步驟加入加入稀釋稀釋好的待測血清每孔好的待測血清每孔100100ul, 3737孵育孵育40min40min加入加入100ul100ul酶標抗體酶標抗體, 37, 37孵育孵育30min30min洗板洗板3 3次次, ,每次每次1min1min洗板洗板3 3次次, ,每次每次1min1min第8頁/共13頁實
2、驗步驟實驗步驟加入加入100ulTMB100ulTMB底物液避光底物液避光室溫孵育室溫孵育15min15min終止反應終止反應: :每孔加每孔加1 1滴滴1010硫酸硫酸結(jié)果觀察結(jié)果觀察第9頁/共13頁第10頁/共13頁注意事項注意事項u加樣加樣:應將所加物加在:應將所加物加在ELISAELISA板孔的底部,并板孔的底部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。u洗板洗板:每次洗液加入后,應靜置:每次洗液加入后,應靜置1 1分鐘使清洗分鐘使清洗更加徹底。末次洗板盡量將水甩干。更加徹底。末次洗板盡量將水甩干。u液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動輕輕晃動3030秒,秒,混勻混勻液體。液體。u底物有底物有毒性毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,盡量,終止液對皮膚有腐蝕性,盡量避免接觸。避免接觸。第11頁/共13頁1:1001:2001:4001:8001:16001:32001:64001:12800陰性陰性血清血清陰性陰性血清血清100ul血清稀釋及加樣血清稀釋及加樣1:1001:2001:4001:8001:16001:3
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