AKTA-Primer-層析系統(tǒng)在天然產(chǎn)物分離中-實(shí)驗(yàn)

1、AKTA Primer 層析系統(tǒng)的應(yīng)用技術(shù)層析系統(tǒng)的應(yīng)用技術(shù)專業(yè)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)lPrinciples of Operation for Chromatography Techniques現(xiàn)代柱層析技術(shù)的原理GelFiltrationIonExchangeHydrophobic InteractionAffinity Reversed Phase基本知識(shí)層析介質(zhì)層析介質(zhì)l硅膠l氧化鋁l聚酰胺l大孔樹脂l分子篩凝膠l離子交換凝膠l親和層析介質(zhì)l反相層析介質(zhì)基本知識(shí)AKTA-分離和純化各類生物分子天然蛋白質(zhì)重組和融合蛋白質(zhì)肽類寡核苷酸質(zhì)粒病毒抗生素生物堿, TCM。等等基本知識(shí)AKTA Primer 系統(tǒng)

2、組成系統(tǒng)組成AKTA Prime + PrimeViewAKTA Primer AKTA Prime 主機(jī)主機(jī)組分收集器控制面板系統(tǒng)泵AKTA Primer AKTA Prime 主機(jī)主機(jī)AKTA Primer AKTA Prime 流程圖流程圖AKTA Primer AKTA Prime 流程圖流程圖面板操作按鈕及簡(jiǎn)要操作命令面板操作按鈕及簡(jiǎn)要操作命令面板操作按鈕面板操作按鈕面板操作按鈕面板操作按鈕按OK進(jìn)入子菜單；按ESC退到上級(jí)菜單；按上下箭頭，可選擇菜單命令、調(diào)整參數(shù)等。面板操作按鈕面板操作按鈕分布收集器前進(jìn)一管停止程序或方法運(yùn)行梯度運(yùn)行過程中，按此鍵，系統(tǒng)將保持當(dāng)前濃度運(yùn)行，而流速和

3、分步收集繼續(xù)，再按一下，繼續(xù)梯度運(yùn)行按此鍵，系統(tǒng)暫停運(yùn)行，包括泵和收集，再按一下，繼續(xù)操作命令簡(jiǎn)介操作命令簡(jiǎn)介l主菜單預(yù)編好的方法模板運(yùn)行保存的方法手動(dòng)運(yùn)行編輯方法將方法拷入電腦或拷回檢查系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)定系統(tǒng)參數(shù)l子菜單以Manual Run為例：操作命令簡(jiǎn)介操作命令簡(jiǎn)介單位 ml、min濃度 %B收集單位 ml、min、drop收集數(shù)量 （每管）限壓 （保護(hù)層析柱） MPa緩沖閥位 1-8樣品閥位 waste、load、inject開始梯度 （長(zhǎng)度ml/目標(biāo)濃度%B）流速 ml/minPrimeView軟件系統(tǒng)軟件系統(tǒng)-數(shù)據(jù)采集數(shù)據(jù)采集AKTA Primer 運(yùn)行曲線圖譜（Curve）：記錄系統(tǒng)

4、采集到的全部數(shù)據(jù)，系統(tǒng)開始運(yùn)行后，自動(dòng)開始記錄，結(jié)束后，自動(dòng)保存。運(yùn)行日志（Logbook）：記錄系統(tǒng)收到的所有指令A(yù)KTA Primer PrimeView數(shù)據(jù)采集數(shù)據(jù)采集選擇瀏覽曲線及設(shè)定曲線顏色設(shè)定X，Y軸的坐標(biāo)范圍AKTA Primer 實(shí)驗(yàn)題目實(shí)驗(yàn)題目蛋白質(zhì)脫鹽蛋白質(zhì)脫鹽l實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解層系技術(shù)的理念，基本操作和應(yīng)用2.掌握分子篩層析的原理，了解其用途；3.熟悉AKTA Prime 的操作。l實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)的基本內(nèi)容實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料l層析介質(zhì) 葡聚糖凝膠G25l分離對(duì)象 脫除含1M硫酸銨的小牛血清中的鹽l實(shí)驗(yàn)試劑 0.15M的氯化鈉溶液實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)l設(shè)置限壓0.3MPa。l排盡注射器內(nèi)的空氣，從上樣閥注入樣品環(huán)，注射器放在原位不拔出。實(shí)驗(yàn)思考題實(shí)驗(yàn)思考題l蛋白質(zhì)分離純化的方法有哪些？請(qǐng)列舉2種以上，并闡述其原理。l利用凝膠層析法分離混合樣品時(shí)，怎樣才能得到較好的分離效果？l現(xiàn)有含谷氨酸(Glu)、甘氨