藥物 第十四章 維生素類藥物的

1、 維生素維持正常生理功能所必需的、維生素維持正常生理功能所必需的、微量營(yíng)養(yǎng)微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，人體不能合成維生素。物質(zhì)，人體不能合成維生素。必須從外界食物中攝必須從外界食物中攝取。取。Christiaan Eijkman1929 諾貝爾生物醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)諾貝爾生物醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)公元前公元前3500年年-古埃及人發(fā)現(xiàn)能防治夜盲癥的物質(zhì)，也就是后來(lái)的維古埃及人發(fā)現(xiàn)能防治夜盲癥的物質(zhì)，也就是后來(lái)的維A。 1747年年-蘇格蘭醫(yī)生林德發(fā)現(xiàn)檸檬能治壞血病，也就是后來(lái)的維蘇格蘭醫(yī)生林德發(fā)現(xiàn)檸檬能治壞血病，也就是后來(lái)的維C。1831年年-胡蘿卜素被發(fā)現(xiàn)。胡蘿卜素被發(fā)現(xiàn)。195年年-科學(xué)家認(rèn)糙皮病是由于缺乏某種維生素而造成的科學(xué)家

2、認(rèn)糙皮病是由于缺乏某種維生素而造成的 1916年年-維生素維生素B被分離出來(lái)。被分離出來(lái)。 1917年年-英國(guó)醫(yī)生發(fā)現(xiàn)魚(yú)肝油可治愈佝僂病，隨后斷定這種病是英國(guó)醫(yī)生發(fā)現(xiàn)魚(yú)肝油可治愈佝僂病，隨后斷定這種病是 缺乏維缺乏維D引起的。引起的。1922年年-維維E被發(fā)現(xiàn)被發(fā)現(xiàn)1933年年-維維E首次用于治療首次用于治療分類分類水溶性水溶性VitB族族(B1、B2、B6、B12)VitC、葉酸、葉酸（VitM）、煙酸、）、煙酸、煙酰胺（煙酰胺（VitPP）脂溶性脂溶性VitA、D2、D3、 E、K1 等等 AB1CDE維生素維生素A的簡(jiǎn)介的簡(jiǎn)介是魚(yú)類肝臟中提取的一種不飽和脂是魚(yú)類肝臟中提取的一種不飽和脂肪

3、醇，又稱魚(yú)肝油。目前主要采用肪醇，又稱魚(yú)肝油。目前主要采用人工合成。人工合成。在體內(nèi)以視黃醇的形式儲(chǔ)存，缺乏會(huì)在體內(nèi)以視黃醇的形式儲(chǔ)存，缺乏會(huì)影響視色素的合成，導(dǎo)致夜盲癥，視影響視色素的合成，導(dǎo)致夜盲癥，視力減退。力減退。結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯黃色棱形，黃色棱形，62-64 淡黃色棱形，淡黃色棱形，57-58無(wú)定型，無(wú)定型，28-29去氫維生素去氫維生素VitA2去水維生素去水維生素VitA3易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)CH3CH2OHCH3H3CCH3CH3123456789123456789CH3H3CCH3CH3CH3CH2 溶解性溶

4、解性: :與三氯甲烷、乙醚、環(huán)已烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水與三氯甲烷、乙醚、環(huán)已烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。中不溶。 不穩(wěn)定性：不穩(wěn)定性：含有多個(gè)不飽和鍵，性質(zhì)不穩(wěn)定，易被空氣中氧或氧化劑氧化，易被含有多個(gè)不飽和鍵，性質(zhì)不穩(wěn)定，易被空氣中氧或氧化劑氧化，易被紫外光裂解，特別是在加熱和金屬離子存在時(shí)更易氧化變質(zhì)從而失活。紫外光裂解，特別是在加熱和金屬離子存在時(shí)更易氧化變質(zhì)從而失活。酸酸醛醛環(huán)環(huán)氧氧化化物物、氧氧化化劑劑紫紫外外線線、VitAVitAVitAOO2 性質(zhì)性質(zhì)紫外吸收：紫外吸收：共軛多烯醇側(cè)鏈結(jié)構(gòu)，在共軛多烯醇側(cè)鏈結(jié)構(gòu)，在325-328nm325-3

5、28nm之間有最大吸之間有最大吸收，可用于鑒別。收，可用于鑒別。CH3CH2ORCH3H3CCH3CH3123456789maxmax 相對(duì)生物相對(duì)生物效價(jià)效價(jià)順?lè)串悩?gòu)順?lè)串悩?gòu)維生素維生素A325.5100%全反式全反式新維生素新維生素Aa32875%2順順新維生素新維生素Ab320.524%4順順新維生素新維生素Ac310.515%2，4順順異維生素異維生素Aa32321%6順順異維生素異維生素Ab32424%2，6順順v天然維生素天然維生素A主要是反式主要是反式紫紫紅紅藍(lán)藍(lán)色色3SbClVitACHCl3可用于鑒別和含量測(cè)定可用于鑒別和含量測(cè)定 與三氯化銻呈色與三氯化銻呈色: :三氯甲烷三

6、氯甲烷+ +三氯化銻三氯化銻= =不穩(wěn)定的藍(lán)色不穩(wěn)定的藍(lán)色與三氯化銻呈色反應(yīng)與三氯化銻呈色反應(yīng)鑒別實(shí)驗(yàn)鑒別實(shí)驗(yàn)Vit ASbCl3CHCl3(無(wú)水無(wú)醇)藍(lán)色紫紅色（一）（一）Carr-Price反應(yīng)反應(yīng)-RCOOSbCl5+CH2藍(lán)色藍(lán)色紫紅紫紅+CH2-RCOOSbCl5條件：條件： 無(wú)水、無(wú)醇無(wú)水、無(wú)醇SbCl3水水SbOCl乙醇可使碳正離子的正電荷消失乙醇可使碳正離子的正電荷消失要求儀器和試劑必須干燥無(wú)水，要求儀器和試劑必須干燥無(wú)水，三氯甲烷必須無(wú)醇三氯甲烷必須無(wú)醇VitAVitAHCl去水去水無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇max為為326nm一個(gè)吸收峰一個(gè)吸收峰max為為350390nm三個(gè)吸收峰三

7、個(gè)吸收峰CH3CH2ORCH3H3CCH3CH3123456789CH2五個(gè)共軛雙鍵五個(gè)共軛雙鍵六個(gè)共軛雙鍵六個(gè)共軛雙鍵最大吸收峰紅移最大吸收峰紅移（二）（二）UV法法維生素A在無(wú)水乙醇溶液中溶解,立即進(jìn)行UV掃描,在360nm處有一最大吸收峰.當(dāng)鹽酸水浴加熱30s,迅速冷卻,此過(guò)程發(fā)生脫水反應(yīng),掃描時(shí)出現(xiàn)三個(gè)吸收峰USP 顯色劑顯色劑 磷鉬酸磷鉬酸 規(guī)定斑點(diǎn)顏色和規(guī)定斑點(diǎn)顏色和Rf值值BP 對(duì)照品法對(duì)照品法 顯色劑顯色劑 三氯化銻三氯化銻（三）（三）TLC法法展開(kāi)劑：展開(kāi)劑： 環(huán)己烷環(huán)己烷-乙醚（乙醚（80：20）均顯藍(lán)色斑點(diǎn)，維生素醇（均顯藍(lán)色斑點(diǎn)，維生素醇（ Rf= 0.1） 維生素醋酸

8、酯（維生素醋酸酯（ Rf= 0.45） 維生素棕櫚酸酯（維生素棕櫚酸酯（ Rf= 0.7） 酸值 取乙醇與乙醚各15ml，置錐形瓶中，加酚酞指示劑5滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至顯粉紅色，再加本品2.0g，振搖使溶解，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，酸值應(yīng)不大于2.0（附錄VIIH）雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查過(guò)氧化值取本品1.0g，加冰醋酸-三氯甲烷（6:4）30ml，振搖使溶解，加碘化鉀的飽和溶液1ml，振搖1分鐘，加水100ml與淀粉指示液1ml，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定至紫藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）

9、不得過(guò)1.5ml。雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查維生素維生素A的測(cè)定的測(cè)定CHP收載三種收載三種UVHPLC三氯化銻法三氯化銻法含量測(cè)定含量測(cè)定（一）（一）UV法（三點(diǎn)校正法）法（三點(diǎn)校正法）維生素維生素A在在325328nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)有最大吸收，可用紫外的波長(zhǎng)范圍內(nèi)有最大吸收，可用紫外法進(jìn)行含量測(cè)定但維生素法進(jìn)行含量測(cè)定但維生素A原料常混有雜質(zhì)如：原料?；煊须s質(zhì)如： 對(duì)維生素對(duì)維生素A有影響的雜質(zhì)主要有以下幾種：有影響的雜質(zhì)主要有以下幾種： (1)VA2 (345350nm)和和VA3 (2)維生素維生素A的氧化產(chǎn)物的氧化產(chǎn)物 (3)維生素維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)活性的聚合物在光照下產(chǎn)生的無(wú)活性的聚合物

10、 (4)維生素維生素A的異構(gòu)體等。的異構(gòu)體等。 以上這些雜質(zhì)在以上這些雜質(zhì)在310nm-340nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)有吸收，的波長(zhǎng)范圍內(nèi)有吸收，干擾維生素干擾維生素A的測(cè)定。的測(cè)定。維生素維生素A的氧化產(chǎn)物的氧化產(chǎn)物維生素維生素A在光照下產(chǎn)生的無(wú)活性的聚合物在光照下產(chǎn)生的無(wú)活性的聚合物3. 波長(zhǎng)的選擇波長(zhǎng)的選擇 1 VitA的的 max（如（如VitA酯酯 328nm） 2 3 分別在分別在 1的兩側(cè)各選一點(diǎn)的兩側(cè)各選一點(diǎn)測(cè)定對(duì)象：測(cè)定對(duì)象：VitA醋酸酯時(shí)，醋酸酯時(shí)，ChP2015規(guī)定規(guī)定nmnmnmnm12340,316,328321211313276AAA測(cè)定對(duì)象：測(cè)定對(duì)象： VitA醇時(shí)，醇

11、時(shí)，ChP2015規(guī)定規(guī)定nmnmnm334,310,325321求求求效價(jià)求效價(jià))(%cm1樣樣 lCAcm(%)%)(1樣（1）基本步驟）基本步驟換換算算因因數(shù)數(shù)）效效價(jià)價(jià)（樣樣樣樣 %)(cm1)(Eg/IU4. 測(cè)定方法測(cè)定方法A選擇，選擇，A328測(cè)定或測(cè)定或A328校正校正求標(biāo)示百分含量求標(biāo)示百分含量（1）第一法（直接測(cè)定法，適用于純度高的）第一法（直接測(cè)定法，適用于純度高的維生素維生素A醋酸酯的測(cè)定醋酸酯的測(cè)定）1）方法）方法 取樣品適量，精密稱定，加環(huán)己烷溶解取樣品適量，精密稱定，加環(huán)己烷溶解在在300、316、328、340、360nm測(cè)吸收度，以確定最測(cè)吸收度，以確定最大吸

12、收波長(zhǎng)（大吸收波長(zhǎng)（ A328或或A328校正校正）。）。b.判斷法判斷法 最大吸收波長(zhǎng)在最大吸收波長(zhǎng)在326-329nm之間，且之間，且5個(gè)波長(zhǎng)下的絕對(duì)值個(gè)波長(zhǎng)下的絕對(duì)值差值均不超過(guò)差值均不超過(guò)0.02時(shí)，可直接用時(shí)，可直接用328nm波長(zhǎng)處的測(cè)得的吸波長(zhǎng)處的測(cè)得的吸收度值求得吸收系數(shù)。收度值求得吸收系數(shù)。 a.計(jì)算吸收度比值（計(jì)算吸收度比值（Ai/A328）：與中國(guó)藥典的吸收度比值相）：與中國(guó)藥典的吸收度比值相比較，判斷每個(gè)差值的絕對(duì)值是否超過(guò)比較，判斷每個(gè)差值的絕對(duì)值是否超過(guò)0.02。最大吸收波長(zhǎng)在最大吸收波長(zhǎng)在326-329nm之間，計(jì)算之間，計(jì)算5個(gè)波個(gè)波長(zhǎng)下的絕對(duì)差值，如果有一個(gè)或

13、幾個(gè)超過(guò)長(zhǎng)下的絕對(duì)差值，如果有一個(gè)或幾個(gè)超過(guò)0.02，應(yīng)，應(yīng)按以下的方法進(jìn)行判斷：按以下的方法進(jìn)行判斷： A328校正校正=3.52（2 A328 A316-A340）（1）第一法（直接測(cè)定法，適用于純度高的）第一法（直接測(cè)定法，適用于純度高的維生素維生素A醋酸酯的測(cè)定醋酸酯的測(cè)定）1）方法）方法 取樣品適量，精密稱定，加環(huán)己烷溶解取樣品適量，精密稱定，加環(huán)己烷溶解在在300、316、328、340、 360nm測(cè)吸收度，測(cè)吸收度， 確定確定A2）計(jì)算）計(jì)算 a.吸光系數(shù)吸光系數(shù)E1%1cm b.求效價(jià)（求效價(jià)（IU/g）：效價(jià)指每）：效價(jià)指每g供試品所含維生素供試品所含維生素的的A的國(guó)際單位

14、數(shù)。的國(guó)際單位數(shù)。 1IU=0.344g全反式維生素全反式維生素A醋酸酯醋酸酯換算因子1%1cmE IU/g= %),(1max/純）效價(jià)（換算因子cmEgIU每克純品相當(dāng)多少個(gè)單位（每克純品相當(dāng)多少個(gè)單位（IU）?1IU=0.344g全反式維生素全反式維生素A醋酸酯醋酸酯2907000g344. 0g101g/IU6 ）效效價(jià)價(jià)%)(1純）效價(jià)（換算因子cmEgIU1900 醇醇維維生生素素 Ag300.0IU1 3330000g300. 0g101g/IU6 ）效效價(jià)價(jià)%)(1純）效價(jià)（換算因子cmEgIU1830c.求維生素求維生素A占

15、標(biāo)示量的百分含量占標(biāo)示量的百分含量100%L100WWDA%標(biāo)示量換算因子）標(biāo)示量（AA328或或A328校正校正D供試品的稀釋倍數(shù)供試品的稀釋倍數(shù)換算因子換算因子維生素維生素A醋酸酯在環(huán)己烷中醋酸酯在環(huán)己烷中1900； 維生素維生素A醇在異丙醇中醇在異丙醇中1830W為平均內(nèi)容物重量；為平均內(nèi)容物重量；W為稱取內(nèi)容物重量（供試品取用量）為稱取內(nèi)容物重量（供試品取用量）L 比色池厚度比色池厚度標(biāo)示量為處方中規(guī)定的每粒中所含的國(guó)際單位數(shù)標(biāo)示量為處方中規(guī)定的每粒中所含的國(guó)際單位數(shù) VitAD膠丸中膠丸中VitA的含量測(cè)定的含量測(cè)定 精密稱取本品精密稱取本品(規(guī)格規(guī)格10000VitAIU/丸丸)裝

16、量差異裝量差異項(xiàng)下（平均裝量項(xiàng)下（平均裝量0.08262g/丸）的內(nèi)容物丸）的內(nèi)容物 0.2399g 至至250ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量取量取2.0ml，置另一，置另一20 ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻。以環(huán)己烷為空白，測(cè)定最大吸收波刻度，搖勻。以環(huán)己烷為空白，測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)為長(zhǎng)為328nm，并在下列波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度為，并在下列波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度為A300 ：0.354A316 ：0.561A328 ：0.628A340 ：0.523A360 ：0.216A300 /A328 ：0.555A316/A328

17、 ：0.907A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.811A360/A328 ：0.299 求本品中維生素求本品中維生素A的含量？的含量？A300 /A328 ：0.564A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.833A360/A328 ：0.344 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 + 0.010.01 0 + 0.02 + 0.04 605.0523.0561.0628.0252.3252.3340316328328AAAA校正=%)3%15(%7 .3%100328328)(328AAAf校正

18、 %0 .99%1001000008262. 010020125022399. 01900605. 0%100)ml100/g(C1900A%328 標(biāo)標(biāo)示示量量平平均均丸丸重重標(biāo)標(biāo)示示量量校校正正適用于維生素適用于維生素A醇醇（等吸收比法） 第一法無(wú)法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法第一法無(wú)法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法 皂化法、皂化法、6/7A法法 （2）第二法）第二法iKOHAnmmlIUVitAVitAS處測(cè)、于稀釋至溶解異丙醇除去植物油的干擾甘油和脂肪酸鹽植物油醇醋酸酯皂化液揮干乙醚乙醚提取乙醇334325310300/159/水溶性水溶性脂溶性脂溶性 判斷判斷 max是否在是否在323327nm之間之

19、間取未皂化樣品采用取未皂化樣品采用色譜法純化后再測(cè)色譜法純化后再測(cè)定定 計(jì)算計(jì)算325300AA是是否否 判斷判斷 A300 /A325 是否大于是否大于0.73是是否否取未皂化樣品采用色譜取未皂化樣品采用色譜法純化后再測(cè)定法純化后再測(cè)定 計(jì)算計(jì)算A325(校正校正) 334310325325260455528156A.A.A.A 校校正正%100AAAf325325)(325 校校正正03%3% 校校正正325A325A 校校正正325Af高效液相色譜法高效液相色譜法流動(dòng)相：正己烷異丙醇（流動(dòng)相：正己烷異丙醇（9973）檢測(cè)波長(zhǎng)：檢測(cè)波長(zhǎng)：325nm系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)考察分離度系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)考察

20、分離度是否能將維生素是否能將維生素A醋酸酯順式和反式分開(kāi)醋酸酯順式和反式分開(kāi)三氯化銻比色法三氯化銻比色法藍(lán)藍(lán)色色 3SbClVitAmax 618nm620nm標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)曲線法 SbOClSbClOH32缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：呈色不穩(wěn)定呈色不穩(wěn)定 （5 10s內(nèi)）內(nèi)）水分干擾水分干擾與標(biāo)準(zhǔn)曲線溫差與標(biāo)準(zhǔn)曲線溫差1專屬性差專屬性差三氯化銻有腐蝕性三氯化銻有腐蝕性優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便 快速快速維生素維生素A共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)乙烯共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)乙烯性質(zhì)：脂溶性；不穩(wěn)定，可與三氯化銻呈色性質(zhì)：脂溶性；不穩(wěn)定，可與三氯化銻呈色鑒別：三氯化銻反應(yīng)；鑒別：三氯化銻反應(yīng)；UV；TLC含量測(cè)定：含量測(cè)定： 紫外

21、紫外-分光光度法（三點(diǎn)校正）分光光度法（三點(diǎn)校正） 三氯化銻比色法三氯化銻比色法AB1CDENNNH2CH2NSCH3OHH3C12345123456Cl , HCl氨基嘧啶環(huán)噻唑環(huán)亞甲基氯化氯化4-甲基甲基-3(2-甲基甲基-4-氨基氨基-5-嘧啶基嘧啶基)甲基甲基-5-（2-羥基乙基）噻唑鎓鹽酸鹽羥基乙基）噻唑鎓鹽酸鹽結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素維生素B1（鹽酸硫胺）（鹽酸硫胺）第二節(jié)第二節(jié) 維生素維生素B1的分析的分析結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素維生素B1為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚水溶液呈酸性水溶液呈酸性1.

22、溶解性溶解性性質(zhì)性質(zhì)噻唑環(huán)、嘧啶環(huán)共軛雙鍵噻唑環(huán)、嘧啶環(huán)共軛雙鍵12.5g/ml鹽酸溶液（鹽酸溶液（9 1000）max = 246nm藍(lán)色熒光硫色素環(huán)合開(kāi)環(huán)并與嘧啶環(huán)上氨基噻唑環(huán)正丁醇鐵氰化鉀氧化 OH1%1cmE406 4362.硫色素?zé)晒夥磻?yīng)硫色素?zé)晒夥磻?yīng)3.UV雜原子的反應(yīng)，能與某些生物堿沉淀試劑反應(yīng)，雜原子的反應(yīng)，能與某些生物堿沉淀試劑反應(yīng)，生成組成恒定的沉淀，可用于鑒別和含量測(cè)定。生成組成恒定的沉淀，可用于鑒別和含量測(cè)定。4.與生物堿沉淀試劑反應(yīng)與生物堿沉淀試劑反應(yīng)5.氯化物的特性氯化物的特性與與NaOH共熱，形成硫化鈉，硝酸鉛生成黑共熱，形成硫化鈉，硝酸鉛生成黑色沉淀；色沉淀；6

23、.硫元素反應(yīng)硫元素反應(yīng)7.紅外光譜特征紅外光譜特征二、鑒別試驗(yàn)（一）硫色素?zé)晒夥磻?yīng)為維生素B1所特有NNNH2CH3CH2NSCH2CH2OHCH3Cl-HClNaOHNNNH2CH3CH2SCH2CH2OHCH3NCOHNaH2ONNCH3NNSCH2CH2OHCH3NaNNCH3NNSCH2CH2OHCH3H環(huán)合NNCH3NNSCH2CH2OHCH3NaNNCH3NNSCH2CH2OHCH3O2H硫色素Thiochtome溶于丁醇，顯藍(lán)色熒光維生素維生素B1VitB1 4242HgIHBHgIK 淡黃淡黃H+白色白色硅鎢酸硅鎢酸 H+ OH4WO12OHSiOB23222 白色扇形白色扇形

24、苦酮酸苦酮酸 H+沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng) 2KIIIHIB2 紅色紅色H+ PbSNaSVitBAcPbNaOH OHNHAgNOAgCl白白3HNO 3HNO藍(lán)藍(lán)淀粉試紙淀粉試紙 KIMnOClS元素反應(yīng)元素反應(yīng)Cl-反應(yīng)反應(yīng)硫元素反應(yīng)和氯化物反應(yīng)硫元素反應(yīng)和氯化物反應(yīng)H+Company Logo三、含量測(cè)定三、含量測(cè)定非水溶液滴定法 Non-aqueous Titrimetry紫外分光光度法 UV硫色素?zé)晒夥?Thiochrone Fluoremetry高氯酸滴定液（高氯酸滴定液（0.1mol/L）的滴定度）的滴定度(T)為為16.86mg/ml。喹那啶紅亞甲藍(lán)喹那啶紅亞甲藍(lán)(紫紅紫紅天藍(lán)天藍(lán))

25、NNNH2CH3CH2NSCH2CH2OHCH3Cl-HCl維生素維生素B1分子中具有共軛雙鍵，在紫外區(qū)有吸收分子中具有共軛雙鍵，在紫外區(qū)有吸收10.1M HCl2H203H3PO4 buffer4alcohol246232255維生素維生素1的紫外吸收峰隨溶液的的紫外吸收峰隨溶液的pH變化而不同：變化而不同： pH2.0時(shí)，最大吸收波長(zhǎng)在時(shí)，最大吸收波長(zhǎng)在246nm處；處； pH7.0時(shí)，時(shí)，2個(gè)吸收峰：個(gè)吸收峰：232233和和266；可采用差示分光光度法，消除背景和可采用差示分光光度法，消除背景和輔料的干擾，測(cè)定其含量；輔料的干擾，測(cè)定其含量；片劑、注射劑片劑、注射劑= 421%cmE1

26、1（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的%=A = ECLChP11 標(biāo)示量標(biāo)示量% WEA %cm 100D 100平均片重平均片重（每（每ml）相當(dāng)于標(biāo)示量的）相當(dāng)于標(biāo)示量的 標(biāo)示量標(biāo)示量% VEA %cm 100D 100熒熒光光硫硫色色素素異異丁丁醇醇鐵鐵氰氰化化鉀鉀 VitBNaOH硫色素?zé)晒夥ǎ壕S生素硫色素?zé)晒夥ǎ壕S生素B1的專屬性反應(yīng)的專屬性反應(yīng)1、2. 方法VitB1鐵氰化鉀NaOH硫色素異丁醇熒光ex-365nmem-435nm+ NaOH + 鐵氰化鉀 + 異丁醇+ NaOH + 異丁醇對(duì)照液+ NaOH + 鐵氰化鉀 + 異丁醇+ NaOH + 異丁醇供試液SdAb

27、52 . 0dSbAml5數(shù)的供試品溶液中維生素gB13、（1） 靈敏度高，線性范圍寬。靈敏度高，線性范圍寬。（2） 專屬性強(qiáng)，氧化產(chǎn)物及代謝產(chǎn)物不干擾，可用于制劑專屬性強(qiáng)，氧化產(chǎn)物及代謝產(chǎn)物不干擾，可用于制劑分析，體液分析等，分析，體液分析等，但操作比較復(fù)雜，受干擾因素多但操作比較復(fù)雜，受干擾因素多。（3） 本法中使用的氧化劑，除鐵氰化鉀，尚可用氯化汞或本法中使用的氧化劑，除鐵氰化鉀，尚可用氯化汞或溴化氰溴化氰小結(jié)小結(jié)AB1CDE維生素維生素C是膠原蛋白形成所必需的，是膠原蛋白形成所必需的，有助于保持間質(zhì)的完整，維生素有助于保持間質(zhì)的完整，維生素C 缺乏可缺乏可導(dǎo)致齒齦腫脹，出血，皮下瘀點(diǎn)，

28、關(guān)節(jié)及導(dǎo)致齒齦腫脹，出血，皮下瘀點(diǎn)，關(guān)節(jié)及肌肉疼痛，毛囊角化，嚴(yán)重缺乏可引起壞肌肉疼痛，毛囊角化，嚴(yán)重缺乏可引起壞血病。所以維生素血病。所以維生素C又稱為抗壞血酸。又稱為抗壞血酸。L-抗壞血酸(有生物活性)L-二酮古羅糖酸L-去氫抗壞血酸無(wú)生物活性結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)OOHHOO COHHCH2OH123456C3OH的的pKa = 4.17C2OH的的pKa = 11.572.酸性酸性一元酸一元酸1. 溶解性溶解性易溶于水，水中呈酸性；略溶于乙醇，不溶易溶于水，水中呈酸性；略溶于乙醇，不溶于三氯甲烷或乙醚于三氯甲烷或乙醚OOHHOO C OHHCH2OH123456L(+)抗壞血酸抗壞血酸活

29、性最強(qiáng)活性最強(qiáng)比旋度比旋度+20.5+21.5手性手性C（C4、C5）3. 旋光性旋光性*含有四個(gè)光學(xué)異構(gòu)體含有四個(gè)光學(xué)異構(gòu)體CH2OHOOOO C OHHCH2OHCHHOCHOHCOCOCOONa HH+OH-有活性有活性有活性有活性無(wú)活性無(wú)活性O(shè)HOO C OHHCH2OHHOO4.還原性還原性二烯醇結(jié)構(gòu)二烯醇結(jié)構(gòu)與堿反應(yīng)與堿反應(yīng)單單鈉鈉鹽鹽32CONa酮酮酸酸鹽鹽水水解解 NaOH5. 水解反應(yīng)水解反應(yīng)弱堿中生成單鈉鹽，弱堿中生成單鈉鹽，強(qiáng)堿中水解強(qiáng)堿中水解NaOH顯色糠醛衍生物糠醛吡咯脫水 H糖類的顯色反應(yīng)糖類的顯色反應(yīng)藍(lán)藍(lán)色色糠糠醛醛吡吡咯咯脫脫水水 HVitC50結(jié)構(gòu)與糖類相似結(jié)

30、構(gòu)與糖類相似6. 具糖的性質(zhì)具糖的性質(zhì)五碳糖五碳糖維生素維生素C7. UV特征特征維生素維生素C具有共軛雙鍵具有共軛雙鍵560265243%11maxmax cmOHHEnmnm去去氫氫抗抗壞壞血血酸酸 OVitC利用還原性：與氧化劑的反應(yīng)利用還原性：與氧化劑的反應(yīng)鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)OHOO C OHHCH2OHHOCH2OHOOOO C OHH O（一）與（一）與AgNO3反應(yīng)反應(yīng)去氫抗壞血酸去氫抗壞血酸黑色黑色（二）與（二）與2，6 - 二氯靛酚反應(yīng)二氯靛酚反應(yīng)無(wú)無(wú)色色二二氯氯靛靛酚酚， VitC62氧化型氧化型玫瑰紅色玫瑰紅色（酸性）（酸性）還原型還原型藍(lán)色藍(lán)色(堿性堿性)無(wú)色無(wú)色紅紅堿堿

31、性性酒酒石石酸酸銅銅 OCuVitC與堿性酒石酸銅反應(yīng)與堿性酒石酸銅反應(yīng)與與KMnO4反應(yīng)反應(yīng) MnKMnOVitC（三）與其他氧化劑反應(yīng)（三）與其他氧化劑反應(yīng)磚紅色沉淀磚紅色沉淀試劑褪色試劑褪色磷鉬酸磷鉬酸 鉬藍(lán)鉬藍(lán)與磷鉬酸反應(yīng)與磷鉬酸反應(yīng)VitC （四）薄層色譜法（四）薄層色譜法（五）糖類反應(yīng)（五）糖類反應(yīng)OHOOHOCCH2OHHOHOHOHOOCCH2OHOHHCH2OHCHOH(CHOH)2CCOHOOH2OCH2OHCH(CHOH)2CHOOH-CO2戊糖OCHO-3H2O糠醛NOCHH2O+50藍(lán)色NHN維生素維生素C可在三氯醋酸或鹽酸存在下水解、脫羧、生成戊糖，可在三氯醋酸或鹽

32、酸存在下水解、脫羧、生成戊糖，再失水，轉(zhuǎn)化為糠醛，加入吡咯，加熱至再失水，轉(zhuǎn)化為糠醛，加入吡咯，加熱至50 產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)生藍(lán)色0.01mol/L HClnmmax243 58554511E%cm （五）紫外光譜法（五）紫外光譜法BP2010雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查（一）溶液的澄清度與顏色檢查（一）溶液的澄清度與顏色檢查內(nèi)酯環(huán)水解內(nèi)酯環(huán)水解糠醛縮合呈色糠醛縮合呈色高于或低于高于或低于pH.0-6.0空氣、光線、溫度空氣、光線、溫度維生素維生素C C脫羧脫羧控制有色雜質(zhì)控制有色雜質(zhì)維生素維生素C（二）鐵、銅離子（二）鐵、銅離子（三）草酸的檢查（三）草酸的檢查p草酸與金屬離子作用形成沉淀；所以對(duì)草酸與金屬離子

33、作用形成沉淀；所以對(duì)Vc的原的原料，尤其是注射液，要進(jìn)行草酸檢查；料，尤其是注射液，要進(jìn)行草酸檢查；p加入加入CaCl2，比濁法；，比濁法；原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法（二）鐵、銅離子（二）鐵、銅離子原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法四、含量測(cè)定四、含量測(cè)定維生素維生素C維生素維生素C制劑制劑碘量法碘量法二氯靛酚法二氯靛酚法紫外分光光度法紫外分光光度法高效液相色譜法高效液相色譜法指示劑指示劑 淀粉指示液淀粉指示液（一）碘量法（一）碘量法原理：利用原理：利用Vc強(qiáng)的還原性強(qiáng)的還原性 IHAc 取本品約取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過(guò)的冷，精密稱定，加新沸過(guò)的冷水水100ml與稀醋酸

34、與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于8.806mg的的C6H8O6。2、方法、方法原料藥原料藥（2）酸性環(huán)境）酸性環(huán)境 稀醋酸稀醋酸 （1）新沸冷）新沸冷H2O減慢減慢VitC被被O2氧化速度氧化速度（3）立即滴定）立即滴定 趕走水中趕走水中O2，減少減少O2的干擾的干擾3、注意事項(xiàng)、注意事項(xiàng)（4）附加劑干擾的排除）附加劑干擾的排除片劑片劑 過(guò)濾過(guò)濾注射劑注射劑 抗氧劑抗氧劑 丙酮丙酮

35、甲醛甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 （二）（二）2，6 - 二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法OHClClNHOH無(wú) 色還 原 型 酚 亞 胺Vit CH+去氫Vit C快速滴定，專屬性強(qiáng)，用于含快速滴定，專屬性強(qiáng)，用于含Vit CVit C的制劑與食品分析的制劑與食品分析ONOHClCl玫 瑰 紅有 氧 化 性自身指示終點(diǎn)自身指示終點(diǎn)1. 原理原理空空樣樣二二氯氯靛靛酚酚液液空空白白樣樣品品VVHAcHPO 32. 方法方法（2）快速滴定）快速滴定 2min內(nèi)內(nèi) （1）酸性環(huán)境）酸性環(huán)境 HPO3-HAc 穩(wěn)定穩(wěn)定VitC防止其他還原性物質(zhì)干擾防止其他還原性物質(zhì)干擾

36、（3）亦可剩余比色測(cè)定）亦可剩余比色測(cè)定 AVitC測(cè)測(cè)二二氯氯靛靛酚酚（定量過(guò)量）（定量過(guò)量）（測(cè)剩余染料）（測(cè)剩余染料）3.注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（4）二氯靛酚不穩(wěn)定，須臨用前配制并標(biāo)定）二氯靛酚不穩(wěn)定，須臨用前配制并標(biāo)定專屬性強(qiáng)，多用于含專屬性強(qiáng)，多用于含 Vc的制劑和食品的分析的制劑和食品的分析配制方法：配制方法：NaHCO3 42mg+水水50 ml，加二氯靛，加二氯靛酚鈉二水合物酚鈉二水合物0.5g +水水200 ml,過(guò)濾，即得。過(guò)濾，即得。標(biāo)定方法：用干燥的維生素標(biāo)定方法：用干燥的維生素C對(duì)照品進(jìn)行標(biāo)定對(duì)照品進(jìn)行標(biāo)定（三）高效液相色譜法（三）高效液相色譜法1、色譜條件、色譜條件2、標(biāo)

37、準(zhǔn)溶液的制備、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備3、血漿樣品的處理：酸性溶液沉淀蛋白法、血漿樣品的處理：酸性溶液沉淀蛋白法4、方法學(xué)考察、方法學(xué)考察5、測(cè)定、測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液制備：標(biāo)準(zhǔn)溶液制備： 取取V C對(duì)照品約對(duì)照品約25mg，精密稱定，置，精密稱定，置25ml量瓶中，加量瓶中，加10%偏磷酸稀釋至刻度，得維生素偏磷酸稀釋至刻度，得維生素C儲(chǔ)備液濃度為儲(chǔ)備液濃度為1mg/ml，置冰箱中，置冰箱中2保存，保存，3日內(nèi)可用。日內(nèi)可用。血漿樣品預(yù)處理：血漿樣品預(yù)處理： 取受試者靜脈血，立即置肝素化的離心試管中，取受試者靜脈血，立即置肝素化的離心試管中，3000rpm離心離心5min；取血漿；取血漿0.5ml，加入，加入

38、0.5ml 10%偏偏磷酸溶液，渦旋混合磷酸溶液，渦旋混合0.5min，離心，分取上清液，置，離心，分取上清液，置冰箱冰箱2貯存，直至測(cè)定。貯存，直至測(cè)定。穩(wěn)定性考察：穩(wěn)定性考察： VC在血漿中不穩(wěn)定，在在血漿中不穩(wěn)定，在5%偏磷酸溶液中也難偏磷酸溶液中也難以保持長(zhǎng)期穩(wěn)定，應(yīng)盡可能縮短藥物分離和處以保持長(zhǎng)期穩(wěn)定，應(yīng)盡可能縮短藥物分離和處理時(shí)間。理時(shí)間。樣品測(cè)定：樣品測(cè)定： 每天抽取的血樣應(yīng)當(dāng)日測(cè)定，每天建立一條標(biāo)每天抽取的血樣應(yīng)當(dāng)日測(cè)定，每天建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測(cè)定高、中、低濃度的雙樣本準(zhǔn)曲線，并隨行測(cè)定高、中、低濃度的雙樣本質(zhì)控樣品。質(zhì)控樣品。小結(jié)小結(jié)維生素維生素C（L抗壞血酸）抗壞血酸

39、） 烯二醇結(jié)構(gòu)烯二醇結(jié)構(gòu)性質(zhì)：水溶性；酸性；旋光性；還原性；水解性性質(zhì)：水溶性；酸性；旋光性；還原性；水解性 糖類性質(zhì)；紫外吸收特性糖類性質(zhì)；紫外吸收特性鑒別：硝酸銀反應(yīng)；二氯靛酚鈉反應(yīng)；鑒別：硝酸銀反應(yīng)；二氯靛酚鈉反應(yīng)； 氧化反應(yīng)；氧化反應(yīng)；TLC；糖類反應(yīng)；紫外；糖類反應(yīng)；紫外雜質(zhì)檢查：澄清度與顏色檢查雜質(zhì)檢查：澄清度與顏色檢查 鐵、銅離子檢查鐵、銅離子檢查 草酸檢查草酸檢查含量測(cè)定：碘量法；二氯靛酚滴定法；含量測(cè)定：碘量法；二氯靛酚滴定法； 高效液相色譜高效液相色譜 AB1CDESourcesv Sunlightv Foodsv Fortified Milkv Fish Oils Def

40、iciencyv 佝僂病佝僂病v 牙齒松動(dòng)v 雞胸v 骨質(zhì)疏松v 腳成弓形 Function v促進(jìn)鈣、磷的吸收；v促進(jìn)骨骼和牙齒的正常生長(zhǎng)；v調(diào)節(jié)檸檬酸的代謝第四節(jié)第四節(jié) 維生素維生素D D的分析的分析HO-2HHOBUVHOHOBUVHO膽甾醇7-脫氫膽甾醇維生素 D3 (膽骨化醇) 維生素 D2(麥角骨化醇)麥角甾醇 維生素維生素D是一類抗佝僂病維生素的總稱，目前有是一類抗佝僂病維生素的總稱，目前有10多種，都是甾醇衍生物。多種，都是甾醇衍生物。HOHCH2H H HHHHCH3CH3CH3CH3CH3HOHCH2H H HHHCH3CH3CH3CH3 維生素維生素D2 維生素維生素D3

41、維生素維生素D2、D3無(wú)色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無(wú)色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，無(wú)味；遇光或空氣均易變質(zhì)。無(wú)臭，無(wú)味；遇光或空氣均易變質(zhì)。 溶解性溶解性:維生素維生素D2在三氯甲烷中極易溶解在三氯甲烷中極易溶解,在丙酮乙醇乙醚在丙酮乙醇乙醚中易溶；維生素中易溶；維生素D3在乙醇、丙酮、三氯甲烷或乙醚極易溶在乙醇、丙酮、三氯甲烷或乙醚極易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。不穩(wěn)定性不穩(wěn)定性:毒性增強(qiáng)毒性增強(qiáng).含有多個(gè)烯鍵，所以極不穩(wěn)定，宜氧含有多個(gè)烯鍵，所以極不穩(wěn)定，宜氧化變質(zhì)，效價(jià)降低，毒性增強(qiáng)?；冑|(zhì)，效價(jià)降低，毒性增強(qiáng)。旋光性旋光性:有五到

42、六個(gè)手性碳原子有五到六個(gè)手性碳原子,均具有旋光性均具有旋光性. 維生素維生素D2 6個(gè)手性碳原子個(gè)手性碳原子 維生素維生素D3 5個(gè)手性碳原子個(gè)手性碳原子 HOHCH2H H HHHHCH3CH3CH3CH3CH3HOHCH2H H HHHCH3CH3CH3CH3顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 甾類化合物甾類化合物氯仿溶液氯仿溶液 黃色黃色 紅色紅色 紫色紫色 綠色綠色紫外吸收特性紫外吸收特性 無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇 265nm 265nm 維生素維生素D D2 2 為為460460490490 維生素維生素D D3 3 為為465465495495醋酐醋酐硫酸硫酸E1cm1%E1%1cm二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)

43、 （一）顯色反應(yīng)（一）顯色反應(yīng)1 1與醋酐與醋酐- -濃硫酸反應(yīng)濃硫酸反應(yīng) 氯仿溶液氯仿溶液 黃色黃色 紅色紅色 紫色紫色 綠色綠色醋酐醋酐硫酸硫酸2 2與三氯化銻反應(yīng)與三氯化銻反應(yīng) 本品本品1,2-1,2-二氯乙烷二氯乙烷 三氯化銻試液三氯化銻試液 橙紅色橙紅色 粉紅色粉紅色 3 3其它顯色反應(yīng)其它顯色反應(yīng) 維生素維生素D D 三氯化鐵三氯化鐵 橙黃色橙黃色 二氯丙醇二氯丙醇 乙酰氯乙酰氯 綠色綠色 （二）比旋度鑒別（二）比旋度鑒別無(wú)水乙醇溶液無(wú)水乙醇溶液 維生素維生素D D2 2 比旋度為比旋度為102.5102.5至至107.5107.5 維生素維生素D D3 3 比旋度為比旋度為105

44、105至至112112 （三）其它鑒別方法三）其它鑒別方法 薄層色譜法、薄層色譜法、HPLCHPLC法法制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)制備衍生物測(cè)熔點(diǎn) 紫外、紅外吸收光譜紫外、紅外吸收光譜 （四）維生素（四）維生素D D2 2、D D3 3的區(qū)別反應(yīng)的區(qū)別反應(yīng)維生素維生素D D2 2 維生素維生素D D3 3 96%96%乙醇乙醇 10ml 取取0.1ml0.1ml 乙醇乙醇1ml1ml和和85%85%硫酸硫酸5ml5ml 紅色紅色max570nm 黃色黃色 max495nm 三、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查（一）麥角甾醇的檢查（一）麥角甾醇的檢查維生素維生素D D2 290% %乙醇溶液乙醇溶液 洋地黃皂苷溶液洋

45、地黃皂苷溶液 不得發(fā)生渾濁或沉淀不得發(fā)生渾濁或沉淀 （二）前維生素（二）前維生素D D的光照產(chǎn)物的光照產(chǎn)物（三）有關(guān)物質(zhì)檢查（三）有關(guān)物質(zhì)檢查Ch.P 2010NP-HPLC含量測(cè)定USP34-NF29化學(xué)法色譜法微生物法BP2010化學(xué)法色譜法光譜法四、含量測(cè)定四、含量測(cè)定正相高效液相色譜法正相高效液相色譜法 （一）維生素（一）維生素D D測(cè)定法測(cè)定法 含量以單位表示含量以單位表示每單位相當(dāng)于維生素每單位相當(dāng)于維生素D 0.025D 0.025g g 注意：計(jì)算的是維生素注意：計(jì)算的是維生素D D及前維生素及前維生素D D經(jīng)折經(jīng)折 算成維生素算成維生素D D的總量的總量u 固定相：硅膠u 流

46、動(dòng)相：正己烷正戊醇（997：3）u 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm第一法：用于無(wú)維生素A醇及其他干擾的供試品第二法：(1)皂化提取 ;(2)凈化用色譜柱系統(tǒng)分離收集維生素D，得供試品溶液B;(3)按第一法進(jìn)行測(cè)定。第三法：當(dāng)樣品經(jīng)皂化提取及凈化用色譜系統(tǒng)分離收集后，前維生素D峰仍受干擾時(shí)，采用此法。小結(jié)小結(jié)維生素維生素D抗佝僂病維生素的總稱抗佝僂病維生素的總稱性質(zhì)：脂溶性；不穩(wěn)定；旋光性；性質(zhì)：脂溶性；不穩(wěn)定；旋光性； 顯色反應(yīng)；紫外顯色反應(yīng)；紫外鑒別：顯色反應(yīng)；比旋度；鑒別：顯色反應(yīng)；比旋度； VD2、VD3區(qū)別區(qū)別雜質(zhì)檢查：麥角甾醇；雜質(zhì)檢查：麥角甾醇； 前維生素前維生素D光照產(chǎn)物；有關(guān)物質(zhì)光照產(chǎn)物

47、；有關(guān)物質(zhì)含量測(cè)定：含量測(cè)定： 三法三法AB1CDE主要講解第五節(jié)第五節(jié) 維生素維生素E的分析的分析維生素維生素E E早在早在2020世紀(jì)世紀(jì)2020年代就被人們年代就被人們發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)，EvansEvans和他的同事在研究生殖和他的同事在研究生殖過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，酸敗的豬油可以引起大過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，酸敗的豬油可以引起大鼠的不孕癥。鼠的不孕癥。是與生育有關(guān)的維生素的總稱是與生育有關(guān)的維生素的總稱1936 1936 年分離出結(jié)晶體年分離出結(jié)晶體1938 1938 年被瑞士化學(xué)家人工合成年被瑞士化學(xué)家人工合成維生素維生素E的顯微照片的顯微照片維維生生素素E膠膠囊囊名稱R1R2烴鏈相對(duì)活性-生育酚CH3CH3C

48、16H331.0-生育酚CH3HC16H330.5-生育酚HCH3C16H330.2-生育酚HHC16H330.1-生育酚CH3HC16H270.5 2R*(4R*,8R*)-3,4-二氫-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-三甲基十三烷基)-2H-苯并吡喃苯并吡喃-6-醇醋酸酯 -生育酚醋酸酯生物效價(jià) 右旋體 ： 消旋體 = 1.4 ：10（天然品）（天然品）（合成品）（合成品）l 性狀性狀:黃色或金黃色黃色或金黃色粘稠狀粘稠狀透明透明液體液體l 脂溶性脂溶性:溶于溶于丙酮、乙醇、乙醚或植物油丙酮、乙醇、乙醚或植物油等等有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑中中l(wèi) 水溶性水溶性:不不溶于水溶于水l 穩(wěn)定性

49、穩(wěn)定性:無(wú)氧時(shí)對(duì)熱、酸穩(wěn)定，對(duì)堿不穩(wěn)定，無(wú)氧時(shí)對(duì)熱、酸穩(wěn)定，對(duì)堿不穩(wěn)定， 對(duì)氧敏感，遇光可被氧化，對(duì)氧敏感，遇光可被氧化，色漸變深，色漸變深， OorOHHVitE醌醌型型化化合合物物生生育育酚酚l UV：乙醇溶液中：乙醇溶液中max284nm（一）（一） 硝酸反應(yīng)硝酸反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)CH3HOOCH3C16H33CH3H3C生育酚HNO3OOCH3C16H33H3CCH3O（橙紅色）生育紅維生素維生素E在硝酸酸性條件下，水解生成生育酚在硝酸酸性條件下，水解生成生育酚OCH3CH3CH3CH3CH3-COOC16H33HOOCH3CH3CH3CH3C16H33水解水解三氯化鐵聯(lián)吡啶

50、反應(yīng)三氯化鐵聯(lián)吡啶反應(yīng)紅紅色色生生育育醌醌對(duì)對(duì)生生育育酚酚聯(lián)聯(lián)吡吡啶啶 2FeKOHFeVitE3O（二）（二）OOH3CCH3OHCH3C16H33CH3CH3HOOCH3C16H33CH3H3C生育酚生育酚對(duì)對(duì)-生育醌生育醌+23F e3+2F eNNNN紅色紅色Fe3+Omax = 284nmmin = 254nm0.01%無(wú)水乙醇中無(wú)水乙醇中UV法法（三）（三）薄層板薄層板 硅膠硅膠G展開(kāi)劑展開(kāi)劑 環(huán)己烷環(huán)己烷 -乙醚（乙醚（4 ：1）顯色劑顯色劑 硫酸（硫酸（105 5） TLC法法（四）（四）VitE Rf = 0.7 -生育酚生育酚 Rf = 0.5 -生育醌生育醌 Rf = 0

51、.92,3,5-三甲基對(duì)二苯酚植醇+-生育酚-生育酚醋酸酯 三、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查 三、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查 （一）酸度（一）酸度游離醋酸游離醋酸（二）生育酚 硫酸鈰滴定液（硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黃二苯胺（亮黃灰紫）灰紫）生生育育醌醌對(duì)對(duì)生生育育酚酚 3422CeCe 利用游離生育酚的還原性，利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰 三、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查 1.原理原理2.試劑試劑 計(jì)算每ml硫酸鈰滴定液（0.01mol/L）相當(dāng)于0.002154g的游離生育酚%100WTV% 限量限量2.15%15. 2%1001 . 0002154.

52、00 . 1% 限量限量限量限量 (三)有關(guān)物質(zhì)的檢查 (四)殘留溶劑：環(huán)己烷的檢查四、含量測(cè)定四、含量測(cè)定GC法法（一）（一）1、選擇性好選擇性好靈敏度高靈敏度高速度快速度快分離效能好分離效能好揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、極性強(qiáng)極性強(qiáng)衍生化。衍生化。易受樣品蒸氣壓限易受樣品蒸氣壓限制制載氣載氣N2固定液固定液硅酮（硅酮（OV-17）擔(dān)體擔(dān)體硅藻土或高分子多孔小球硅藻土或高分子多孔小球柱溫柱溫265檢測(cè)器檢測(cè)器氫火焰離子化檢測(cè)器氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)內(nèi)標(biāo)內(nèi)標(biāo)正三十二烷正三十二烷 n 500 R2內(nèi)標(biāo)法加校正因子定量?jī)?nèi)標(biāo)法加校正因子定量2、VitE測(cè)定的色譜條件測(cè)定的色譜條件內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法供試液（樣品供試液（樣品+內(nèi)標(biāo)）內(nèi)標(biāo)）內(nèi)標(biāo)物內(nèi)標(biāo)物對(duì)照液（對(duì)照對(duì)照液（對(duì)照+內(nèi)標(biāo)）內(nèi)標(biāo)）是樣品中不存在的物質(zhì)是樣品中不存在的物質(zhì)與被測(cè)組分峰靠近與被測(cè)組分峰靠近能與各組分完全分離能與各組分完全分離與被測(cè)組分的量接近與被測(cè)組分的量接近樣品樣品 dl生育酚生育酚固定相固定相十八烷基硅烷鍵合硅膠十八烷基硅烷鍵合硅膠流動(dòng)相流動(dòng)相甲醇甲醇-水（水（49 ：1）檢測(cè)波長(zhǎng)檢測(cè)波長(zhǎng)2