車間空氣細(xì)菌含量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

1、v1.0可編輯可修改車間空氣細(xì)菌含量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：mA -03-8008-0第1頁(yè)共7 頁(yè)第次修改一、適用范圍：本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了出口食品車間的工藝衛(wèi)生及成品微生物的標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于實(shí)罐一、三車間、面食車間工藝衛(wèi)生，公司所有產(chǎn)品的成品微生物檢驗(yàn)及生產(chǎn) 用水的水質(zhì)檢驗(yàn)。二、術(shù)語：1、工藝衛(wèi)生：指食品加工工藝過程中衛(wèi)生指標(biāo)控制情況，一般包括操作者的手、操作案臺(tái),直接接觸食品的工器具、空氣落菌、半成品、車間用水等的微生物衛(wèi)生情況。2、內(nèi)包裝材料：直接接觸食品的包裝材料，包括塑料袋，塑料片等。3、菌落總數(shù)：指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、PH需

2、氧性質(zhì)等)，所得 1ml(g)檢樣中所含菌落的總數(shù)。本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果，只包括一群在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。4、大腸菌群：指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣，需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽抱桿菌。三、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：物品項(xiàng)目單位細(xì)菌總數(shù)大腸菌群備tb操作臺(tái)、工器具個(gè)/100cm2WX 10450生加工區(qū)不得檢出熟加工區(qū)操作者手個(gè)/只掌面WX 104<50生加工區(qū)不得檢出熟加工區(qū)空氣落菌個(gè)/平板<50/生加工區(qū)<30/熟加工區(qū)內(nèi)包裝材料個(gè) /100cm2& X 102不得檢出微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：mA -03-8008-0第2 頁(yè)共7頁(yè)次修改半成品個(gè)/g

3、 （ml）WX105WX103生加工區(qū)w X 105不得檢出熟加工區(qū)成品按各種產(chǎn)品成品標(biāo)準(zhǔn)四、檢驗(yàn)方法：（一）工藝衛(wèi)生：生產(chǎn)正常進(jìn)行時(shí)，每周檢驗(yàn)一次。1、車間工藝衛(wèi)生檢驗(yàn)大腸菌群的檢驗(yàn)方法：培養(yǎng)基: 大腸菌群菌落計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。成份：蛋白月東10克氯化鈉5克磷酸氫二鉀（K2HPO4 2克或 K2HP043H2a乳糖10克去氧膽酸鈉1克瓊脂15克檸檬酸鐵俊2克中性紅克或克（國(guó)產(chǎn)）蒸儲(chǔ)水1000ml制法：蛋白月東、氯化鈉、磷酸氫二鉀加入蒸儲(chǔ)水加熱溶解，并用10瞰酸鈉溶液調(diào)，加瓊脂溶化再加檸檬酸鐵俊、去氧膽酸鈉溶解后，補(bǔ)充消耗水份，用250ml三角瓶分裝。每瓶分裝 100ml高壓滅菌，同時(shí)分裝 對(duì)性紅水

4、溶液20ml, 20幅1糖溶液50ml進(jìn)行滅菌處理，采用 8磅20 分鐘滅菌。臨用前以無菌操作向每瓶（ 100ml培養(yǎng)基）中加中性紅水溶液和 20幅1糖溶液5ml。工器具取樣方法取樣面積100或50cm2（冬天取100 cm2 ,夏天取 50cm2）用消毒棉簽沾無菌蒸儲(chǔ)水揩拭，然后放入10ml無菌生理鹽水中，充分振搖制成原液。再順次以10倍遞增稀釋，取合適稀釋倍數(shù)接種培養(yǎng)。微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)第3頁(yè)編號(hào)：mA -03-8008-0共7 頁(yè)8第次修改接種與培養(yǎng):用無菌吸管分別吸取樣液 1ml注入滅菌平皿，做兩個(gè)平皿，倒入冷至45c左右的培養(yǎng)基約15ml,搖勻凝固后，再在上層倒入 3-5ml培養(yǎng)基，待凝

5、固后旋轉(zhuǎn)倒置平皿，于37c培養(yǎng)18小時(shí)，選擇合適稀釋倍數(shù)，控制菌落密度在每個(gè)平皿10個(gè)左右。結(jié)果報(bào)告：平板上出現(xiàn)的大腸菌群呈深紅色，菌落直徑大于。周圍可能有霧狀膽鹽沉淀，菌落形態(tài)有的邊緣整齊，呈圓形，扁平，有的邊緣不齊，表面凸起或呈波狀，且為玫瑰紅色。檢驗(yàn)即為陽性。每平方厘米上的大腸菌群數(shù) =測(cè)得的菌落數(shù)X稀釋度/取樣面積，每平方厘米上的大腸菌 群數(shù)不到一個(gè)的，可化為每平方上的個(gè)數(shù)。操作者手的檢驗(yàn)：方法同工器具的檢驗(yàn)，用滅菌的棉簽揩拭手掌面（手背不?。?，將棉簽放入已準(zhǔn)備好的滅菌生理鹽水中，震蕩搖勻，經(jīng)適當(dāng)稀釋吸入平皿中，每皿1ml,作兩個(gè)平皿，37c培養(yǎng) 18小時(shí)，取出計(jì)數(shù)，計(jì)算單位以一只掌

6、面的大腸菌群個(gè)數(shù)報(bào)告結(jié)果。2、車間工藝衛(wèi)生檢驗(yàn)菌落總數(shù)的檢驗(yàn)方法：取樣方法：工器具的取樣方法同，操作者手的取樣方法同，取合適稀釋倍數(shù)接種培養(yǎng)。接種與培養(yǎng)培養(yǎng)基：普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂。培養(yǎng)：選擇2-3個(gè)適宜的稀釋度，吸取 1ml樣液放入滅菌的平皿，每個(gè)稀釋度作2個(gè)平皿，倒入涼至45c左右的瓊脂搖勻，待凝固后翻轉(zhuǎn)倒置，于36±1C培養(yǎng)24小時(shí)計(jì)數(shù)。結(jié)果報(bào)告：工器具報(bào)告每平方厘米的細(xì)菌總數(shù)，操作者手報(bào)告每只掌面的細(xì)菌總數(shù)。3、車間工藝衛(wèi)生檢驗(yàn)：空氣中菌落總數(shù)的測(cè)定（沉降法）。培養(yǎng)基：普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂。操作方法：將培養(yǎng)基溶化加熱滅菌后，冷至45c左右，傾注滅菌的平皿內(nèi)，微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)編號(hào):mA -03-

7、8008-0次修改每皿約15ml, 36±1C培養(yǎng)24小時(shí)，檢查有無雜菌生長(zhǎng)。取無菌的平皿，在車間內(nèi)的前后、左右、中間九個(gè)點(diǎn)，各放置一個(gè)平皿，并打開皿蓋5分鐘后，蓋上皿蓋，于 36±1C培養(yǎng)24小時(shí)，檢查菌落生長(zhǎng)情況。計(jì)算菌落數(shù)。計(jì)算：每立方米菌落數(shù) =50000N/AT式中：A -所用平皿面積（cm2）T-平皿暴露于空氣中的時(shí)間（分）N-培養(yǎng)后，平皿上的菌落數(shù)。4、原料、半成品衛(wèi)生細(xì)菌檢驗(yàn)：菌落總數(shù)的測(cè)定：培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂。樣品準(zhǔn)備：以無菌操作，取 25克樣品，放入盛有 225ml滅菌生理鹽水的三角瓶?jī)?nèi)，充分振搖作成 1: 10的均勻稀釋液，用 1ml滅菌吸管，吸取 1:

8、 10的稀釋液1ml注入含有9ml滅菌生理鹽水 的試管內(nèi)作成1: 100的稀釋液。按上述操作順序作10倍遞增稀釋，每稀釋一次，換用一支1ml接種滅菌吸管。培養(yǎng)：選才i 2-3個(gè)適宜稀釋度，吸取1ml樣液放入滅菌的平皿，每個(gè)稀釋度作2個(gè)平皿，倒入冷至45c左右的瓊脂搖勻，待凝固后，翻轉(zhuǎn)倒置，36±1C培養(yǎng)24小時(shí)計(jì)數(shù)。結(jié)果報(bào)告：每克樣品中的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。大腸菌群的測(cè)定：培養(yǎng)基: 大腸菌群菌落計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。檢驗(yàn)方法：樣品制備：以無菌操作，取 25克樣品，放入盛有 225ml滅菌生理鹽水的三角瓶?jī)?nèi)，充分振 搖作成1: 10的均勻稀釋液，用1ml滅菌吸管，吸取1: 10的稀釋液1ml注入

9、含有9ml滅菌 生理鹽水的試管內(nèi)微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)第5頁(yè)第作成1: 100的稀釋液。編號(hào)：A-03-8008-0共7頁(yè)次修改按上述操作順序作10倍遞增稀釋，每稀釋一次，換用一支1ml接種滅菌吸管。接種培養(yǎng)：用無菌吸管分別吸取樣液1ml注入滅菌平皿，作兩個(gè)平皿，倒入冷至 45c左右的培養(yǎng)基約 15ml,搖勻凝固后再在上層倒入3-5ml培養(yǎng)基旋轉(zhuǎn)平皿，覆蓋于表面，37c培養(yǎng)18小時(shí)，選擇合適稀釋倍數(shù)， 控制菌落密度在每個(gè)平皿10個(gè)左右陽性率最正確。結(jié)果報(bào)告：結(jié)果判定平板上出現(xiàn)的大腸菌群呈深紅色，菌落直徑大于。周圍可能有霧狀膽鹽沉淀， 菌落形態(tài)有的邊緣整齊，呈圓形，扁平，有的邊緣不齊，表面凸起或呈波狀，

10、且為玫瑰紅色。檢 驗(yàn)即為陽性。5、芽胞數(shù)的測(cè)定培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（但要以黃豆浸汁代替蒸儲(chǔ)水配制）。（如果鑒別是否為平酸菌可疑，可加 喊甲酚紫2m1/1000毫升）操作方法：無菌操作取半成品 50g,盛裝于已滅菌的三角燒瓶中，加生理鹽水50毫升，煮沸15分鐘，用無菌吸管分別吸取 1毫升注入二只平皿中，倒入涼至45c左右的培養(yǎng)基約 15 毫升搖勻，凝固后倒置，放入 37c恒溫箱中培養(yǎng) 48小時(shí)，直接計(jì)數(shù)。報(bào)告：二只平皿的平均菌落數(shù)就是每克半成品中所含的芽胞數(shù)。6、內(nèi)包裝材料衛(wèi)生細(xì)菌檢驗(yàn)：細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定 培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂 取樣方法用消毒棉簽沾無菌蒸儲(chǔ)水揩拭塑料袋內(nèi)面或塑料片表面，取樣面積100c

11、m2,然后放入10ml無菌生理鹽水中，充分振搖制成原液，再順次以10倍遞增稀釋，取合適稀釋倍數(shù)接種培養(yǎng)。接種與培養(yǎng)：選擇 2-3個(gè)適宜的稀釋度，吸取 1ml樣液放入滅菌的平皿，每個(gè)稀釋度作2個(gè)平皿，倒入涼至 45 c左右的瓊脂搖微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：mA -03-8008-0第6頁(yè)共7頁(yè)第次修改勻，待凝固后翻轉(zhuǎn)倒置，36±1C培養(yǎng) 24小時(shí)計(jì)數(shù)。結(jié)果報(bào)告：每100 cm2的菌落總數(shù)。大腸菌群的測(cè)定培養(yǎng)基: 大腸菌群計(jì)數(shù)培養(yǎng)基取樣方法：同接種與培養(yǎng)：用無菌吸管分別吸取樣液 1ml注入滅菌平皿，做兩個(gè)平皿，倒入涼至 45c左 右的培養(yǎng)基約15毫升搖勻，凝固后再在上層倒入 3-5m1培養(yǎng)基旋轉(zhuǎn)平皿，覆蓋于表面，37C 培養(yǎng)18小時(shí)，選擇合適稀釋倍數(shù)，控制菌落密度在每個(gè)平皿10個(gè)左右陽性率最正確。結(jié)果報(bào)告：平板上出現(xiàn)的大腸菌群呈深紅色，菌落直徑大于。周圍可能有霧狀膽鹽沉淀，菌落形態(tài)有的邊緣整齊，呈圓形，扁平，有的邊緣不齊，表面凸起或呈波狀，且為玫瑰紅色。檢驗(yàn)即為陽性。每平方厘米上的大腸菌群數(shù) =測(cè)得的菌落數(shù)X稀釋度/取樣面積