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1、果蠅的形狀觀察和飼養(yǎng)管理一、實驗?zāi)康牧私夤壍纳盍晳T,掌握果蠅飼養(yǎng)管理的方法,學習鑒定果蠅的雌雄性別,觀察果蠅某些遺傳性狀。二、實驗原理果蠅廣泛存在于全球溫帶及熱帶氣候區(qū),在果園、菜市場等地皆可見其蹤跡,目前已發(fā)現(xiàn)1000多種。果蠅以酵母菌為食,能發(fā)酵的水果或植物基質(zhì),都可用作果蠅的飼料。黑腹果蠅,雙翅目果蠅屬。生活史短,每12天左右即可完成一個世代;飼養(yǎng)容易,以玉米粉等做飼料就可以生長繁殖;繁殖能力強,每只受精的雌蠅可以產(chǎn)卵500個左右;突變型多,突變性狀多,多數(shù)是形態(tài)變異,容易觀察;染色體少、個體小,是一種很好的遺傳學實驗材料,是一種模式生物。1、果蠅的生活史果蠅是完全變態(tài)昆蟲,生活周期
2、可分為4個時期:卵、幼蟲、蛹和成蟲。最適培養(yǎng)溫度為2530°C。果蠅在25°C時,從卵至蠅需10天左右。由蛹羽化成的成蟲,雄性在12小時內(nèi)為處女蠅,24小時后開始產(chǎn)卵,每天每個成蟲可產(chǎn)50-75個卵,10天內(nèi)最高產(chǎn)卵總股數(shù)為400-500個。卵:白色,橢圓形,長約0.5mm,前端背面伸出一觸絲,附著在食物上。幼蟲:一齡二齡三齡,三齡體長4-5mm,幼蟲頭尖尾鈍,頭上有一黑色鉤狀口器。蛹:化蛹前三齡幼蟲停止攝食,爬到相對干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形狀由淡黃、柔軟逐漸硬化為深褐色。成蟲:剛羽化的果蠅蟲體較肥大,體表呈半透明,顏色逐漸加深,硬化。2、果蠅的雌雄鑒別表1果蠅雌雄形
3、狀比較觀察形狀雌性雄性體型較大較小腹部似橢圓形,較膨大,末端尖似圓筒狀,末端鈍圓腹部背面5條黑色條紋3條黑色條紋,前兩條細,后一條寬,呈一明顯的黑斑腹部腹面6個腹片4個腹片第一對前足無性梳有性梳3、果蠅常用突變性狀表2果蠅常用突變性狀影響部分野生型突變型眼色紅眼白眼體色灰體黑體剛毛直剛毛焦剛毛翅形長翅小翅4、果蠅飼料的配制果蠅是以酵母菌作為主要食料的,因此實驗室內(nèi)凡是能發(fā)酵的物質(zhì),都可用作果蠅的飼料,常用的飼料油玉米飼料、米粉飼料、香蕉飼料等。表3實驗室用果蠅培養(yǎng)基配方玉米粉蔗糖干燥酵母粉瓊脂水丙酸(防腐劑)10克9克1克1克100mL0.7mL三、動物與器材黑腹果蠅品系:突變型(三隱性、黑體
4、)藥品:乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、瓊脂、玉米粉、白糖。培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、電磁爐、解剖鏡、搪瓷杯、玻棒、鑷子、培養(yǎng)瓶、海綿塞、濾紙、酒精棉球、毛筆、麻醉瓶、白紙板。四、實驗內(nèi)容1、果蠅培養(yǎng)基配制(1) 清潔指管,蓋上適當大小的瓶塞,置高壓滅菌鍋內(nèi),以121°C,1.5大氣壓消毒15分鐘,冷卻備用。(2) 按配方稱取培養(yǎng)基各組分。先取一半水加入瓊脂于電磁爐上加熱溶解,再加入蔗糖煮沸。(3) 取剩余的水將玉米粉調(diào)成糊狀邊攪拌邊加入到瓊脂糖溶液中,煮沸。(4) 待稍冷后加入酵母粉和丙酸,充分調(diào)勻、分裝(20ml/管)。2、果蠅性別鑒定及形狀觀察取白紙板平置于桌面,將麻醉的果蠅倒于白紙板上。
5、于解剖鏡下進行性狀觀察,并記錄。五、思考題及注意事項1、通過對果蠅雌雄個體的鑒別,你認為哪幾個特征在鑒別中是主要的?答:黑色條紋和性梳。在實體鏡下即可清楚地觀察到雄蠅的三條條紋(第三條較寬)和雌蠅的五條黑色條紋。肉眼可以觀察到性梳為第一對附肢第二小節(jié)上的一個小黑點,若用顯微鏡觀察則可以觀察到清晰的梳狀結(jié)構(gòu)。相比之下,其他幾個特征就不太好觀察。首先是體型,在實體鏡下很難判斷哪個個體體型大或小(放大倍數(shù)不同),除非將雌雄蠅一同對比看,而用肉眼基本看不出體型的區(qū)別。腹部形狀也容易判斷錯。腹片由于沒有特殊眼色,也較難觀察數(shù)量差別。2、敘述配制培養(yǎng)基以及果蠅觀察時的注意事項。答:(1)玉米粉一定要先用涼
6、水拌勻后再加熱,不能直接倒入加熱的培養(yǎng)基中,否則容易聚集成團,不易溶解。配制的培養(yǎng)基容易出現(xiàn)塊狀,不易于果蠅的利用。(2) 酵母為活性物質(zhì),高溫易失活。因此應(yīng)當在培養(yǎng)基冷卻到50C左右時加入到培養(yǎng)基中,切勿將酵母粉加入到培養(yǎng)基中直接煮沸。(3) 將培養(yǎng)基倒入指瓶中時應(yīng)懸空,不要把培養(yǎng)基沾到指瓶壁上。如不慎沾到,應(yīng)用酒精棉球擦拭,擦拭過程中注意酒精不要滴到培養(yǎng)基上。(4) 本次觀察所用果蠅為已麻醉過的果蠅,應(yīng)注意如果在觀察過程中果蠅醒來,要及時再麻醉,不要讓其飛走。六、實驗結(jié)果1、三隱形個體的觀察觀察到個體為白眼,小翅,焦剛毛。由于實驗儀器無法顯示真實的顏色,無法判斷體色。腹部背面有三條黑色條紋(第三條較寬)的為雄性,有
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