抗流感藥物靶點(diǎn)及其抑制劑

1、抗流感藥物靶點(diǎn)及其抑制劑流感病毒是一種負(fù)螺旋單鏈RNA病毒，屬于正黏病毒科。根據(jù)病毒核蛋白（nucleoproteins,NP及基質(zhì)蛋白（matrixproteins,M1的抗原決定簇不同，流感病毒被分為三類：甲型（A）、乙型（B）、丙型（C）。流感病毒顆粒結(jié)構(gòu)大致相似（如圖1）,自內(nèi)而外可分成核心、基質(zhì)蛋白以及包膜三部分。病毒子通常呈圓形，長(zhǎng)絲狀。甲型和乙型流感病毒核酸有八個(gè)RNA?段，負(fù)責(zé)編碼十種蛋白，包括血凝素（HA、神經(jīng)氨酸酶（NA、酸性蛋白（PA）、堿性蛋白1（PB。、PB2核蛋白（NP、基質(zhì)蛋白（M1）、離子通道蛋白（M2、非結(jié)構(gòu)蛋白（NS1）、核輸出蛋白（NEP或NS2。此外，大

2、多數(shù)甲型流感病毒還有線粒體靶向的寡聚PB1-F2蛋白1,報(bào)道其與細(xì)胞凋亡以及病毒毒力有關(guān)。這些病毒RNA片段同NP結(jié)合并纏繞形成病毒核糖核蛋白體（vRNP,vRNP再與三聚的RNA聚合酶（PAPB1、PB2結(jié)合形成核糖核甘酸，負(fù)責(zé)RNA勺復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，這種結(jié)合模式確保了病毒RNA寸于核酸酶保持敏感。丙型流感病毒只有七個(gè)RNAf段?；蚪M分節(jié)段的特點(diǎn)為流感病毒高頻率基因重配提供了條件。病毒核心被外部的脂蛋白膜包圍，在脂膜上有基質(zhì)蛋白M1,其是病毒顆粒的主要蛋白，并通過化學(xué)鍵結(jié)合到vRNPM2蛋白為具有離子通道活性的跨膜蛋白。乙型流感病毒缺乏M2蛋白，但是一種叫做BM2的蛋白可以起到類似M2蛋白作用

3、。病毒最外層的包膜是包裹基質(zhì)蛋白的磷脂雙分子層，該膜來(lái)源于宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜。膜表面具有兩類非常重要的“刺突”，即兩種糖蛋白，HA和NA乙型流感病毒表面抗原相對(duì)簡(jiǎn)單，僅有一種HA和一種NA對(duì)于甲型流感，根據(jù)病毒表面抗原HA及NA的不同，其可進(jìn)一步細(xì)分為16個(gè)HA型（H1H16）、9個(gè)NAH型（N1N9）2。圖1甲型流感病毒結(jié)構(gòu)模式圖3三種類型流感病毒的宿主范圍也是有區(qū)別的：甲型流感病毒能夠感染哺乳類動(dòng)物（人、豬、馬等）和禽類，乙型流感病毒主要在人類和豬間傳播，丙型流感病毒只在人類傳播。另外，三種病毒的變異性及危害性從大到小依次是甲型、乙型、丙型，因此，對(duì)人類危害性最大的是甲型流感病毒。流感病毒感

4、染及增殖過程圖2流感病毒感染及增殖機(jī)制4如圖2所示，流感病毒感染及增殖過程可大致分為黏附一內(nèi)吞一融合一去包膜一入核一vRN*成一蛋白合成一出核一組裝一出芽一釋放等階段。首先，流感病毒包膜表面抗原HA識(shí)別并粘附到宿主細(xì)胞膜表面糖脂或糖蛋白上的唾液酸（sialicacid,SA受體上，在粘附階段，神經(jīng)氨酸酶的唾液酸酶活性阻止HA與氣管上皮細(xì)胞粘液層唾液酸的結(jié)合，從而強(qiáng)化病毒感染。接著，在受體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)吞作用下，結(jié)合于宿主細(xì)胞表面的病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞并形成胞內(nèi)體（endosome。胞內(nèi)體內(nèi)的低pH條件啟動(dòng)HA“融合域”構(gòu)象轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致病毒包膜與胞內(nèi)體膜發(fā)生融合。與此同時(shí)，非糖基化基質(zhì)蛋白M2離子通道被

5、激活，形成進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)膜的內(nèi)向質(zhì)子流，引發(fā)基質(zhì)蛋白M1與vRNP的解離。然后，vRNPt轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞核，啟動(dòng)病毒遺傳信息的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。RdR叫及NP對(duì)流感病毒的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制具有重要意義。新合成的NP以及RNAK合酶也被轉(zhuǎn)入細(xì)胞核，與新和成的vRN閡合形成子代vRNP在非結(jié)構(gòu)性的核輸出蛋白NEP/NS2s基質(zhì)蛋白M1介導(dǎo)下，核內(nèi)形成的子代vRNPM轉(zhuǎn)運(yùn)出宿主細(xì)胞核進(jìn)入細(xì)胞漿，經(jīng)裝配形成成熟病毒顆粒。出芽后的新病毒顆粒仍然通過HA-SA鍵吸附于宿主細(xì)胞表面,經(jīng)NA水解SA釋放子代病毒，造成病毒的擴(kuò)散與傳播5?？沽鞲胁《景悬c(diǎn)及其抑制劑預(yù)防和治療流感，通常采用疫苗和抗流感化學(xué)藥物。流感病毒不斷地變異，常規(guī)

6、疫苗可能難以預(yù)防治療新病毒引發(fā)的流感大爆發(fā)，因此，抗流感化學(xué)藥物研究具有非常重要的意義。總的來(lái)說，目前的抗流感化學(xué)藥物有兩個(gè)大的研究方向，分別針對(duì)流感病毒本身功能蛋白和宿主細(xì)胞潛在靶點(diǎn)?；谒拗鞯目沽鞲胁《景袠?biāo)及抑制劑基于宿主的抗流感病毒靶標(biāo)包括蛋白酶和囊泡質(zhì)子ATP酶以及激酶等，然而這類藥物對(duì)于非感染組織的潛在毒性還有待評(píng)價(jià)。(1)蛋白酶前體蛋白HA0剪切位點(diǎn)的性質(zhì)決定了能夠剪切HA0的宿主蛋白酶類型，直接影響病毒嗜組織性和致病力。在高致病性H5和H7禽流感病毒中，HA0剪切位點(diǎn)含有多堿基序列，可被宿主細(xì)胞內(nèi)廣泛存在的堿性氨基酸蛋白酶或者PC6蛋白酶剪切，引起鳥類致死性的全身感染6,7。然而

7、，在一般的甲型流感病毒中，蛋白酶剪切位點(diǎn)表達(dá)的是單個(gè)精氨酸殘基，只能被內(nèi)蛋白酶識(shí)別，同時(shí)這種蛋白酶僅在鳥類腸道以及鳥類與哺乳動(dòng)物的呼吸道中表達(dá)，極大地限制病毒在宿主體內(nèi)的傳播8,9o事實(shí)上，如圖3所示，已知的蛋白酶抑制劑，包括奈英司他(Nafamostat)、卡莫司他(Camostat)等，均對(duì)甲、乙型流感病毒表現(xiàn)出較好的體內(nèi)外選擇性抑制作用5。MafamofStatCamrastatNlorakini圖3蛋白酶及V-ATPase抑制劑(2)囊泡質(zhì)子ATP酶(V-ATPase)選擇性V-ATPase抑制劑通過升高前溶酶體內(nèi)部pH,從而抑制HA從非融合構(gòu)象向融合構(gòu)象的轉(zhuǎn)化，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)病毒復(fù)制的抑制

8、。針對(duì)該靶點(diǎn)的化合物有1994年報(bào)道的Norakin(如圖3)。針對(duì)流感病毒自身功能蛋白的靶點(diǎn)及抑制劑該類化學(xué)藥物根據(jù)病毒作用部位不同，可分為三大類，分別針對(duì)病毒核心(RdRPNP、病毒基質(zhì)蛋白(M2、病毒包膜突觸(HANA,下面就它們的抑制劑作簡(jiǎn)單介紹。(1) RdRP流感病毒RdRF®化中高度保守，與哺乳動(dòng)物的RNAIK合酶完全不同，流感病毒RdRFW時(shí)具有復(fù)制酶和核酸內(nèi)切酶活性。感染早期階段，RdRP以vRNA為模板合成mRNA具有轉(zhuǎn)錄功能；病毒感染晚期，RdRP構(gòu)象轉(zhuǎn)變，以vRNAJ模板合成互補(bǔ)的cRNA再以合成的CRN,模板合成vRNA從而實(shí)現(xiàn)復(fù)制功能。RdRFtt異三聚的

9、PAPB1、PB2三個(gè)亞基構(gòu)成，也稱為3P復(fù)合體。PB1位于3P復(fù)合體的核心，其N端和C端分別與PA亞基的C端、PB2亞基N端相連，形成穩(wěn)定蛋白復(fù)合物。PB1亞基通過不同構(gòu)象結(jié)合vRNAcRNA分別合成mRNA或cRNA、vRNA從而履行轉(zhuǎn)錄、復(fù)制功能。其構(gòu)象的轉(zhuǎn)換也是PB2帽子結(jié)合位點(diǎn)與內(nèi)切酶活性位點(diǎn)激活的一個(gè)原因10。如圖4所示，化合物A是近年報(bào)道的靶向PB1的化合物，其IC50值為0.5川產(chǎn)。PB2亞基具有多重功能。首先，PB2亞基318-483位氨基酸殘基區(qū)域能夠與宿主mRN閨物帽結(jié)構(gòu)結(jié)合12,從而啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程。其次，PB2亞基C端678-757位氨基酸殘基區(qū)域存在二重核定位信號(hào)(NS

10、L,與RNAK合酶通過核孔轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核內(nèi)有關(guān)。第三，PB2亞基能夠增強(qiáng)聚合酶復(fù)合物的穩(wěn)定性，這可能是PB2亞基能夠增強(qiáng)流感病毒對(duì)外界溫度適應(yīng)性的原因13。最后，研究發(fā)現(xiàn)PB2亞基R702、K627分別與病毒宿主選擇性14、致病性15有密切關(guān)系。如圖4所示，化合物B為近年報(bào)道的靶向PB2的化合物，其抑制A/H3N2的IC50為7.5川產(chǎn)。ABCDE)FRigviririT-705圖4RdRP的抑制齊1JPA也是3P復(fù)合體一個(gè)非常重要的亞基。YuanT和Dias18分別在MpMrn+存在下，獲得了PA亞基N末端的晶體結(jié)構(gòu)，驗(yàn)證了PA亞基內(nèi)存在核酸內(nèi)切酶活性位點(diǎn)，也表明該核酸內(nèi)切酶具有雙離子介導(dǎo)的作

11、用機(jī)制。其次，PA亞基為磷酸化蛋白，1247位氨基酸殘基區(qū)域是其介導(dǎo)蛋白質(zhì)水解的功能區(qū)，其水解活性與聚合酶活性呈正相關(guān)19。再者，PA亞基也能夠與vRNAcRNA0動(dòng)子特異性結(jié)合，163178位氨基酸的突變，導(dǎo)致PA亞基與cRNAg合力降低，聚合酶活性的抑制20。另外，PA亞基124139及186247兩個(gè)氨基酸殘基區(qū)域存在兩個(gè)核定位(NSD信號(hào)，這與PB1亞基穿核運(yùn)輸及核內(nèi)聚集相關(guān)21。2008年，通過共沉淀結(jié)晶的方法，He等22獲得了H5N1亞型AIV的PA-PB1N蛋白復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)，由于二者相互作用的殘基在甲型流感中高度保守，這為新一代抗流感藥物的設(shè)計(jì)提供了新靶標(biāo)。2012年，Mur

12、atore23通過虛擬篩選發(fā)現(xiàn)圖4所示化合物C,其可以干擾PAPB1蛋白正確結(jié)合，具抑制病毒斑形成的ED。為20因左右。2013年，Massari24報(bào)道了化合物D,也是PA-PB1N相互作用抑制劑，結(jié)構(gòu)如圖4所示，其對(duì)A/H1N1亞型AIV的EC。一般為20m2014年，PaganO25報(bào)道了兩個(gè)化合物(如圖4所示化合物E、F),其抑制A/H1N1亞型AIV的IC50均為1帥利巴韋林(Ribavirin)和Favipiravir(T-705)是兩個(gè)核音類的RdRP抑制劑(圖4),IC50值分別為6.837M1郵前者很早就已上市，是一種廣譜抗病毒藥物，后者目前處于臨床田期(日本)。T-705是

13、一種前藥，代謝活化后，通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合GTP抑制流感病毒RdRP與Ribavirin比較，其不影響宿主DNA/RNA勺合成，僅輕度抑制宿主次黃喋吟核甘酸脫氫酶，高劑量下無(wú)顯著細(xì)胞毒性，安全性更高。同時(shí)，T-705對(duì)NAI、M2I耐藥病毒株也有效26。因此，T-705是一個(gè)具有很大市場(chǎng)潛力的藥物。(2) NP核蛋白占病毒蛋白總量的30%,其N端含有一個(gè)RNA合區(qū)域以及兩個(gè)核蛋白-核蛋白相互作用區(qū)域。NP作為結(jié)構(gòu)蛋白組成vRNP與病毒宿主的特異性也有關(guān)，同時(shí)，參與病毒復(fù)制的多個(gè)階段，包括：在雙重核定位信號(hào)作用下，vRNR!入宿主細(xì)月fi核過程；vRNA宿主細(xì)胞核內(nèi)的合成；通過與PB1和PB2的相互作

14、用對(duì)多聚酶活性的調(diào)節(jié)；通過與M1/NS2相互作用對(duì)vRNP出核的調(diào)控。NP含有一種胞漿聚集信號(hào)，通過與絲狀肌動(dòng)蛋白相互作用，導(dǎo)致NP在病毒感染后期滯留在胞漿。2006年，Ye等完成了對(duì)A/WSN/3琬感病毒NP晶體結(jié)構(gòu)的解析，揭示了NP尾環(huán)介導(dǎo)的NP聚合。不同亞型的A型流感病毒尾環(huán)的組成氨基酸進(jìn)化中高度保守，其上30個(gè)氨基酸殘基的單個(gè)突變就可導(dǎo)致NP聚合能力的完全喪失，因此，尾環(huán)上的結(jié)合口袋成為NP靶向抗流感藥物的潛在靶點(diǎn)。2006年，香港大學(xué)袁國(guó)勇課題組28發(fā)現(xiàn)了名為nucleozin的小分子化合物，具靶向NP聚集，阻斷NP轉(zhuǎn)運(yùn)入核，從而抑制H1N1H3N2H5N1亞型AIV的感染，證實(shí)了N

15、P可作為抗流感靶點(diǎn)。2012年，丁克課題組29通過對(duì)nucleozin的改構(gòu)，發(fā)現(xiàn)了化合物G(如圖5),其針對(duì)各種H3N2H1N1的IC50值的范圍為0.54.6M對(duì)金剛烷胺耐藥的A/WSN/33(H1N1)奧司他韋耐藥的A/WSN/1933(H1N1,274Y)病毒株也有一定效果。該類化合物結(jié)構(gòu)如圖5所示。NuclcozirGSchyfinBM27709圖5NP及HA的抑制劑(3) M2金剛烷胺、金剛乙胺為兩個(gè)最具代表性的M2離子通道抑制劑，僅對(duì)甲型流感有效。這兩個(gè)藥物在臨床上使用多年，耐藥性問題突出。但是，這類藥物能夠促進(jìn)外呼吸道擴(kuò)張從而增加攝氧量，使得其在抗流感中仍然具有重要價(jià)值。耐藥毒

16、株氨基酸突變區(qū)結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步闡明，為該類藥物解決耐藥問題提供了機(jī)遇30,31。同時(shí)，針對(duì)A/M2及BM2g白進(jìn)化高度保守區(qū)HXXXW1發(fā)抑制劑，有望得到對(duì)甲型、乙型流感均有效的藥物32。(4) HA流感病毒進(jìn)入靶細(xì)胞的過程需要酸性環(huán)境的誘導(dǎo)：在胞內(nèi)體低pH條件下，HA構(gòu)象改變，前體蛋白HA0經(jīng)蛋白酶剪切形成HA1和HA2暴露出隱藏在蛋白中的融合域，即HA2的疏水N端。HA2的N端插入胞內(nèi)體膜，每三分子的HA2即形成六螺旋束形“融合孔”，使得病毒膜與胞內(nèi)體膜融合，病毒基因組通過融合孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。而HAl負(fù)責(zé)與宿主細(xì)胞膜表面的唾液酸受體結(jié)合，介導(dǎo)病毒通過胞飲方式進(jìn)入細(xì)胞形成胞內(nèi)體。靶向HA的抗流感化

17、合物，根據(jù)機(jī)制不同可分為兩類：一類是阻止HAl與宿主細(xì)胞膜表面SAS體結(jié)合的黏附抑制劑，這類以fludase(DAS181為代表，其是一種新型唾液酸酶融合蛋白，目前處于Rb期臨床(美國(guó))；另一類是阻斷HA2介導(dǎo)的膜融合過程的融合抑制劑(抑制低pH誘導(dǎo)的HA構(gòu)象轉(zhuǎn)化)，這是人們研究較早的一類抑制劑，包括1997年報(bào)道的以BMY-27709為代表的水楊酰胺類、1998年報(bào)道的以stachyflin為代表的司他弗林類化合物。該類化合物結(jié)構(gòu)如圖5所示。(5) NA1967年，一種神經(jīng)氨酸酶類似物(DANA被Meindl等合成，然而，其對(duì)NA的抑制活性并不顯著，未能應(yīng)用于抗流感治療。1993年，伴隨著神

18、經(jīng)氨酸酶晶體結(jié)構(gòu)的解析33,vonItzstein34等對(duì)DANAS行了結(jié)構(gòu)改造，除了環(huán)上取代基手性的調(diào)整，將DANA5核的4位羥基用堿性的“瓜基替代，得到了第一個(gè)臨床使用的NAI扎那米韋(zanamivir)，其對(duì)NA的親和力較DAN*100倍。但是，其口服生物利用度低，目前臨床主要使用其吸入劑型。1997年，Kim等的用環(huán)己烯環(huán)替換扎那米韋的叱喃環(huán)，保證環(huán)上取代基空間伸展方向不變情況下，用疏水的3-戊氧基替代扎那米韋母環(huán)6位上連接的甘油基，將強(qiáng)堿性胴基用氨基替代，得到了奧司他韋(Oseltamivir)。該化合物于1999年被FDAft匕準(zhǔn)用于臨床。具能有效抑制流感病毒，同時(shí)，相對(duì)于扎那米

19、韋，其口服生物利用度大大提升，固體口服給藥途經(jīng)增加了患者的依從性，是目前使用最廣的NA產(chǎn),這也導(dǎo)致了其耐藥性積累速度最快。目前臨床使用較少的NAI還有在日本應(yīng)用的帕拉米韋（Peramivir）以及拉尼那米韋（Laninamivir）,其中拉尼那米韋屬于目前唯一長(zhǎng)效NAI。對(duì)于奧司他韋耐受，又不能噴霧吸入扎那米韋的患者，可以考慮靜脈注射帕拉米韋；現(xiàn)有研究表明對(duì)于奧司他韋耐藥的毒株，拉尼那米韋依然有效，同時(shí)拉尼那米韋一天只需服用一次，使得患者依從性更好36。目前，從人、豬、禽類中分離的NAI耐藥病毒株，包括了除N4亞型之外所有甲型流感病毒亞型以及乙型流感病毒。在流行的高致病性N1亞型（如H1N1H

20、5N1等）中,奧司他韋耐受問題最普遍，H274Y突變是導(dǎo)致其耐受的主要原因37。常見的N2亞型（主要為H3N2耐藥突變?yōu)镋119VR292K突變，但是H274Y突變并不能導(dǎo)致N2亞型對(duì)奧司他韋的耐藥37,38。乙型流感病毒對(duì)扎那米韋的耐藥與R152K突變有關(guān)39,對(duì)奧司他韋的耐藥與R317K突變相關(guān)40。圖6列出了奧司他韋與NA催化區(qū)（以N8為例）結(jié)合模式，我們將結(jié)合區(qū)分為4個(gè)亞位點(diǎn)。2002年，Hanessian41將奧司他韋母環(huán)5位氨基用乙烯基取代，成功得到了化合物H（Ki=45nM,本節(jié)所有討論的NAI結(jié)構(gòu)見圖8）,探討了NA催化區(qū)2號(hào)亞位點(diǎn)發(fā)生疏水相互作用而非電荷相互作用的可能性。20

21、12年，Bhatt42繼續(xù)對(duì)該位點(diǎn)改造，通過羥基、甲氧基、乙氧基、烯丙基取代的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)還是羥基取代（化合物I）的活性最高（IC50=0.32由）。通過Hanessian和Bhatt的工作，我們發(fā)現(xiàn)NA催化區(qū)2號(hào)亞位點(diǎn)的氫鍵相互作用對(duì)于NAI的活性非常重要。subsite4GIu2/圖6奧司他韋與N8催化區(qū)結(jié)合模式圖在系統(tǒng)分類中，甲型流感病毒NA可分為兩大類，I類（Group1）包括N1、N4>N5N8四種亞型，II類（Group2）包括N2、N&N6N7,N9五種亞型。2006年，隨著Russell43等對(duì)N1、N4N8的結(jié)構(gòu)解析，人們發(fā)現(xiàn)：I類NA催化區(qū)2號(hào)亞位點(diǎn)附近連接著開

22、放的“150腔”；然而，II類NA中“150-LOOP處于封閉構(gòu)象，使得II類NA活性結(jié)合區(qū)旁邊不存在該“150腔”，如圖7所示?！?50腔”的發(fā)現(xiàn)為設(shè)計(jì)選擇性的I類NA抑制劑、解決病毒耐藥問題提供了新思路。Pinto課題組44以?shī)W司他韋為先導(dǎo)化合物，用帶羥基側(cè)鏈的三氮唾替換奧司他韋骨架5位上的氨基，得到了以化合物J為代表的I類選擇性的NAI(Ki=1.5x10-94.6x10-10M)o2013年，Kerry45通過化合物的共晶體結(jié)構(gòu)，驗(yàn)證了化合物J同時(shí)占據(jù)NA催化區(qū)和“150腔”，是一種雙位點(diǎn)抑制劑。2014年，在對(duì)奧司他韋母環(huán)5位氨基進(jìn)行異硫月尿取代時(shí)，Pinto課題組意外得到了螺環(huán)化合

23、物K(如圖8),其對(duì)HK1流感病毒的有效濃度為10-610-7MN8與化合物K的共結(jié)品結(jié)構(gòu)表明，化合物上螺環(huán)在催化區(qū)偏向150-LOOP有禾J于“150腔”的形成，這為開發(fā)雙位點(diǎn)抑制劑提供了一種思路閥。圖7MA.奧司他韋與N1結(jié)合模式；B.奧司他韋與N9結(jié)合模式為了克服不利的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)引發(fā)的耐藥問題，Schade47也對(duì)奧司他韋母環(huán)5位氨基的取代進(jìn)行了探討。利用生物電子等排體和前藥的設(shè)計(jì)原理，成功得到了藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)和口服生物利用度比較理想，同時(shí)對(duì)奧司他韋耐藥的H1N1突變株有效的化合物L(fēng),其活化代謝物抗H1N1的IC50=14.5nM。除了對(duì)奧司他韋母環(huán)5位氨基的結(jié)構(gòu)改造，Cheng48用磷酸基

24、和磷酸酯將母環(huán)1位上竣基替換，成功得到了化合物M其能夠在納摩水平甚至皮摩水平抑制多種流感病毒復(fù)制，包括H274Y耐藥毒株。開發(fā)抗流感病毒不可逆抑制劑也是解決當(dāng)前耐藥問題的一種思路。2013年，Kim49通過對(duì)神經(jīng)氨酸酶催化過渡態(tài)的研究，設(shè)計(jì)合成了以化合物N為代表的一系列a,B-二氟取代的化合物。這些化合物能夠與神經(jīng)氨酸酶催化區(qū)Tyr406形成短暫的共價(jià)中間體，廣譜強(qiáng)效抑制流感病毒，包括扎那米韋和奧司他韋耐藥毒株。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，藥效與上市藥物相當(dāng)或者優(yōu)于上市藥物。ZanafniwLF圖8上市及最新報(bào)道的NAIDANAseltamivirPeramivirLaninamiwirNHAcR=OH；O

25、McOEt:OCH2CHCH2總的來(lái)說，對(duì)于NAI日益嚴(yán)重的耐藥問題，人們將大量關(guān)注集中于奧司他韋母核5位上的氨基的改構(gòu)，母核1位竣基改構(gòu)及不可逆抑制劑設(shè)計(jì)也有零星的探討；NA催化區(qū)2號(hào)亞位點(diǎn)旁邊“150腔”的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)解析，也為人們解決NAI的耐藥問題提供了新思路。參考文獻(xiàn)1 ChanturiyaA.N.,BasanezG.,SchubertU.,etal.PB1-F2,aninfluenzaAvirus-encodedproapoptoticmitochondrialprotein,createsvariablysizedporesinplanarlipidmembranesJ.JViro

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