第1-2章緒論、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能2018

1、生物化學生物化學Biochemistry陳杰陳杰辦公室：基礎(chǔ)學院辦公室：基礎(chǔ)學院102-104 102-104 生化教研室生化教研室電話：電話：685528 ; weixin : CHEN2388321685528 ; weixin : CHEN2388321 第一章第一章 緒緒 論論什么是生物化學？什么是生物化學？ 生命的化學（生命的化學（life chemistry），它是研），它是研究活細胞和生物體內(nèi)的各種化學分子及其化學究活細胞和生物體內(nèi)的各種化學分子及其化學反應(yīng)的一門科學。反應(yīng)的一門科學。 （視頻（視頻1）生物化學研究的方法生物化學研究的方法 主要采用化學的原理和方法，同時也用到主要

2、采用化學的原理和方法，同時也用到物理學、生理學、細胞學、免疫學等的原理和物理學、生理學、細胞學、免疫學等的原理和方法。方法。生物化學的發(fā)展簡史生物化學的發(fā)展簡史初期：初期：18世紀中葉世紀中葉20世紀初。研究了脂類、糖類及世紀初。研究了脂類、糖類及氨基酸；發(fā)現(xiàn)了核酸；酵母發(fā)酵中的氨基酸；發(fā)現(xiàn)了核酸；酵母發(fā)酵中的“可溶性催化可溶性催化劑劑”酶的概念等酶的概念等蓬勃發(fā)展階段：蓬勃發(fā)展階段：20世紀初世紀初下葉。必需氨基酸、維生下葉。必需氨基酸、維生素的發(fā)現(xiàn)；多種激素的發(fā)現(xiàn)；酶的蛋白質(zhì)本質(zhì)揭示素的發(fā)現(xiàn)；多種激素的發(fā)現(xiàn)；酶的蛋白質(zhì)本質(zhì)揭示并被結(jié)晶出來；主要物質(zhì)代謝途徑的確定等并被結(jié)晶出來；主要物質(zhì)代謝

3、途徑的確定等分子生物學時期：分子生物學時期： 20世紀下葉世紀下葉至今至今50年代，發(fā)現(xiàn)了年代，發(fā)現(xiàn)了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)雙螺旋結(jié)構(gòu) 70年代：建立了年代：建立了DNA重組技術(shù)重組技術(shù)基因工程基因工程;基因基因診斷和基因治療的發(fā)展診斷和基因治療的發(fā)展 80年代：發(fā)現(xiàn)了核酶年代：發(fā)現(xiàn)了核酶 (ribozyme)；PCR技術(shù)的技術(shù)的發(fā)明發(fā)明 90年代：人類基因組計劃年代：人類基因組計劃 (HGP)（視頻（視頻2）現(xiàn)在：后基因組時代現(xiàn)在：后基因組時代 19011901年年1212月月1010日即諾貝爾逝世日即諾貝爾逝世5 5周年時首次頒發(fā)周年時首次頒發(fā)該獎每年授予在物理學、化學、生理學或醫(yī)學、該獎每年授

4、予在物理學、化學、生理學或醫(yī)學、經(jīng)濟學、文學與和平領(lǐng)域內(nèi)經(jīng)濟學、文學與和平領(lǐng)域內(nèi)“對人類作出最大貢對人類作出最大貢獻的人獻的人” ” 1901201019012010年，生物化學和分子生物學年，生物化學和分子生物學獲獎項共計獲獎項共計5656項。項。物質(zhì)代謝部分物質(zhì)代謝部分 （1717項）項）遺傳信息傳遞遺傳信息傳遞 （1616項）項）細胞信號傳導細胞信號傳導 （4 4項）項）克雷格克雷格梅洛梅洛 安德魯安德魯法爾法爾 2006 2006年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予兩名年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予兩名美國科學家安德魯美國科學家安德魯菲爾和克雷格菲爾和克雷格梅洛，梅洛，以表彰他們發(fā)現(xiàn)了以表彰他們發(fā)現(xiàn)

5、了RNARNA干擾現(xiàn)象干擾現(xiàn)象 。馬里奧馬里奧- -卡佩奇卡佩奇 馬丁馬丁- -埃文斯埃文斯 奧利弗奧利弗- -史密斯史密斯涉及胚胎干細胞和哺乳動物涉及胚胎干細胞和哺乳動物DNADNA重組方面的一系列突破性發(fā)現(xiàn)重組方面的一系列突破性發(fā)現(xiàn) 20072007年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎獲得者年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎獲得者廣東醫(yī)科大學衰老研究所擁有的衰老動物模型廣東醫(yī)科大學衰老研究所擁有的衰老動物模型敲除了基因敲除了基因ZMPSTE24的的mice表型發(fā)生了明顯的變表型發(fā)生了明顯的變化。化。體型小體型小骨密度降低骨密度降低壽命縮短壽命縮短20092009年，美國的三位科學家因發(fā)現(xiàn)端粒和端粒酶保年，美國的三位

6、科學家因發(fā)現(xiàn)端粒和端粒酶保護染色體的機理而獲此殊榮。護染色體的機理而獲此殊榮。酒酒 ：（杜康：（杜康) 有飯不盡，委之空桑，郁結(jié)有飯不盡，委之空桑，郁結(jié)成味，成味， 久蓄氣芳久蓄氣芳 雀目：孫思邈雀目：孫思邈 用豬肝治療用豬肝治療癭?。河煤е委煱`?。河煤е委熚覈茖W家的貢獻：我國科學家的貢獻： 吳憲吳憲(1893-1959)，蛋白質(zhì)的變性學說，蛋白質(zhì)的變性學說 1965年，人工合成有生物活性的牛胰島素年，人工合成有生物活性的牛胰島素 1981年，酵母丙氨酰年，酵母丙氨酰tRNA的合成的合成 參與了人類基因組計劃，參與了人類基因組計劃，1生物化學研究的主要內(nèi)容生物化學研究的主要內(nèi)容生物分子的

7、結(jié)構(gòu)與功能：探討生物體的物質(zhì)生物分子的結(jié)構(gòu)與功能：探討生物體的物質(zhì)組成以及分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能。組成以及分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能。 基因信息傳遞規(guī)律及其調(diào)控：基因信息傳遞規(guī)律及其調(diào)控：DNA復制、復制、 RNA轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)翻譯等。轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)翻譯等。物質(zhì)代謝及其調(diào)節(jié)：物質(zhì)代謝的規(guī)律、能量物質(zhì)代謝及其調(diào)節(jié)：物質(zhì)代謝的規(guī)律、能量轉(zhuǎn)化及其調(diào)節(jié)控制。轉(zhuǎn)化及其調(diào)節(jié)控制。生物分子生物分子 無機小分子（無機小分子（H2O、CO2、Ca2+、Mg2+等）等） 代謝中間物（丙酮酸、檸檬酸、蘋果酸等）代謝中間物（丙酮酸、檸檬酸、蘋果酸等） 構(gòu)件分子（氨基酸、核苷酸、單糖等）構(gòu)件分子（氨基酸、核苷酸、單糖等） 生物大分

8、子（核酸、蛋白質(zhì)、聚糖等）生物大分子（核酸、蛋白質(zhì)、聚糖等） 超分子（核糖體、酶復合體、微管等）超分子（核糖體、酶復合體、微管等） 細胞器（細胞核、線粒體、高爾基體等）細胞器（細胞核、線粒體、高爾基體等） 生物化學是一門新興的邊緣學科，是醫(yī)生物化學是一門新興的邊緣學科，是醫(yī)學的主要基礎(chǔ)課之一，促進了醫(yī)學的突飛猛學的主要基礎(chǔ)課之一，促進了醫(yī)學的突飛猛進；現(xiàn)代醫(yī)學又向生物化學和分子生物學提進；現(xiàn)代醫(yī)學又向生物化學和分子生物學提出新的問題和挑戰(zhàn)。出新的問題和挑戰(zhàn)。 研究熱點：疾病相關(guān)基因克隆、基因診研究熱點：疾病相關(guān)基因克隆、基因診斷、基因治療斷、基因治療生物化學與醫(yī)學生物化學與醫(yī)學如何學好生物化學

9、如何學好生物化學1思想重視，課堂上不要玩手機思想重視，課堂上不要玩手機2預習預習-認真聽課，做筆記認真聽課，做筆記-課后復習，總結(jié)課后復習，總結(jié)33 以生化教學大綱為參考，通讀課本，在理解的基礎(chǔ)上掌握以生化教學大綱為參考，通讀課本，在理解的基礎(chǔ)上掌握4 各章內(nèi)容，并能融會貫通各章內(nèi)容，并能融會貫通5考試內(nèi)容全部出自課文考試內(nèi)容全部出自課文第二章第二章 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能Chapter 2 Structure and Function of Protein 蛋白質(zhì)的生物學重要性蛋白質(zhì)的生物學重要性l 分布廣：所有器官、組織都含有蛋白質(zhì)；分布廣：所有器官、組織都含有蛋白質(zhì)；細胞的各個

10、部分都含有蛋白質(zhì)。細胞的各個部分都含有蛋白質(zhì)。l 含量高：蛋白質(zhì)是細胞內(nèi)最豐富的有機含量高：蛋白質(zhì)是細胞內(nèi)最豐富的有機分子，占人體干重的分子，占人體干重的45，某些組織含量，某些組織含量更高，例如脾、肺及橫紋肌等高達更高，例如脾、肺及橫紋肌等高達80。 蛋白質(zhì)是生物體重要組成成分蛋白質(zhì)是生物體重要組成成分 蛋白質(zhì)的生物學重要性蛋白質(zhì)的生物學重要性 蛋白質(zhì)具有重要的生物學功能蛋白質(zhì)具有重要的生物學功能1）作為生物催化劑（酶）作為生物催化劑（酶）2）代謝調(diào)節(jié)作用）代謝調(diào)節(jié)作用3）免疫保護作用）免疫保護作用4）物質(zhì)的轉(zhuǎn)運和存儲）物質(zhì)的轉(zhuǎn)運和存儲5）運動與支持作用）運動與支持作用6）參與細胞間信息傳遞

11、）參與細胞間信息傳遞朊蛋白與瘋牛?。ㄒ曨l朊蛋白與瘋牛?。ㄒ曨l3）The Molecular Components of Protein 第第1節(jié)節(jié) 蛋白質(zhì)的分子組成蛋白質(zhì)的分子組成蛋白質(zhì)分子中主要的元素組成是：蛋白質(zhì)分子中主要的元素組成是：C、H、O、N、S等。有些蛋白質(zhì)含有少量磷或金等。有些蛋白質(zhì)含有少量磷或金屬元素鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬，個別蛋屬元素鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬，個別蛋白質(zhì)還含有碘白質(zhì)還含有碘 。 各種蛋白質(zhì)的含氮量相對穩(wěn)定，約為各種蛋白質(zhì)的含氮量相對穩(wěn)定，約為16%100克樣品中蛋白質(zhì)的含量克樣品中蛋白質(zhì)的含量 ( g % )= 每克樣品含氮克數(shù)每克樣品含氮克數(shù) 6.25100

12、1/16%分子式：C3N6H6、 C3N3(NH2)3 三鹿奶粉事件拷問國人的良心三鹿奶粉事件拷問國人的良心一、氨基酸（一、氨基酸（amino acid, AA）存在自然界中的氨基酸有存在自然界中的氨基酸有300300余種，余種，但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有2020種，種，且均屬且均屬 L- L-氨基酸（甘氨酸除外）氨基酸（甘氨酸除外）COOHH2N C HR（一）氨基酸的分類（一）氨基酸的分類 根據(jù)R側(cè)鏈基團解離性質(zhì)的不同，可將氨基酸分為五類： 1. 非極性氨基酸非極性氨基酸2. 不帶電荷的極性氨基酸不帶電荷的極性氨基酸3. 芳香族氨基酸芳香族氨基酸4. 帶正電荷

13、的堿性氨基酸帶正電荷的堿性氨基酸5. 帶負電荷的酸性氨基酸帶負電荷的酸性氨基酸幾種特殊氨基酸幾種特殊氨基酸l 脯氨酸脯氨酸l（亞氨基酸）（亞氨基酸）CH2CHCOO-NH2+CH2CH2CH2CHCOO-NH2+CH2CH2l 半胱氨酸半胱氨酸 -OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3胱氨酸胱氨酸-HH-OOC-CH-CH2-SH+NH3-OOC-CH-CH2-SH+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3+二硫鍵二硫鍵（二）氨基酸的理化性質(zhì)（二）氨基酸的理化性

14、質(zhì)1兩性解離及等電點兩性解離及等電點氨基酸分子是一種兩性電解質(zhì)氨基酸分子是一種兩性電解質(zhì)通過改變?nèi)芤旱耐ㄟ^改變?nèi)芤旱膒H可使氨基酸分子的解離狀可使氨基酸分子的解離狀態(tài)發(fā)生改變態(tài)發(fā)生改變 氨基酸分子帶有相等正、負電荷時，溶液的氨基酸分子帶有相等正、負電荷時，溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點（值稱為該氨基酸的等電點（isoelectric point, pI）。）。 +H+OH-pH=pI兼性離子兼性離子 CHNH2COOHR CHNH2COOHRCHNH3+COO-R CHNH3+COO-R+OH-pHpI陰離子陰離子CHNH2COO-R CHNH2COO-R+H+pHpI陽離子陽離子CH CO

15、OHRNH3+CH COOHRNH3+天然蛋白質(zhì)分子的天然蛋白質(zhì)分子的20種氨種氨基酸，以色氨酸和酪氨酸基酸，以色氨酸和酪氨酸對紫外光有較強的光吸收。對紫外光有較強的光吸收。其吸收峰在其吸收峰在280nm左右，左右，以色氨酸吸收最強。以色氨酸吸收最強?？衫么诵再|(zhì)采用紫外分可利用此性質(zhì)采用紫外分光光度法測定蛋白質(zhì)的含光光度法測定蛋白質(zhì)的含量。量。 2. 紫外吸收性質(zhì)紫外吸收性質(zhì)3. 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng) 氨基酸可與茚三酮縮合產(chǎn)生藍紫色氨基酸可與茚三酮縮合產(chǎn)生藍紫色化合物，其最大吸收峰在化合物，其最大吸收峰在570nm?？衫么诵再|(zhì)測定氨基酸的含量?？衫么诵再|(zhì)測定氨基酸的含量。Pro與茚三酮直

16、接生成亮黃色物質(zhì)與茚三酮直接生成亮黃色物質(zhì)(440nm)二、肽二、肽 (peptide) （一）肽鍵（一）肽鍵(peptide bond)與肽鏈與肽鏈 蛋白質(zhì)是由若干氨基酸的氨基與羧蛋白質(zhì)是由若干氨基酸的氨基與羧基經(jīng)脫水縮合而連接起來形成的長鏈化基經(jīng)脫水縮合而連接起來形成的長鏈化合物。一個氨基酸分子的合物。一個氨基酸分子的-羧基與另一羧基與另一個氨基酸分子的個氨基酸分子的-氨基在適當?shù)臈l件下氨基在適當?shù)臈l件下經(jīng)脫水縮合即生成肽。經(jīng)脫水縮合即生成肽。甘氨酰甘氨酸甘氨酰甘氨酸肽鍵肽鍵的形成肽鍵的形成+O OO O-HOHNH2-CH-CHOH甘甘氨氨酸酸NH2-CH-CHOH甘甘氨氨酸酸NH2-C

17、H-C-N-CH-COOHHHHONH2-CH-C-N-CH-COOHHHHONH-CH-CHOHH甘甘氨氨酸酸* * 肽是由氨基酸通過肽鍵縮合而形成的化合物。肽是由氨基酸通過肽鍵縮合而形成的化合物。* * 兩分子氨基酸縮合形成二肽，三分子氨基酸縮兩分子氨基酸縮合形成二肽，三分子氨基酸縮合則形成三肽合則形成三肽* * 肽鏈中的氨基酸分子因為脫水縮合而基團不全，肽鏈中的氨基酸分子因為脫水縮合而基團不全，被稱為氨基酸殘基被稱為氨基酸殘基(residue)(residue)。* * 由十個以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為寡肽由十個以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為寡肽(oligopeptide)(oligopep

18、tide)，由更多的氨基酸相連形成的肽稱，由更多的氨基酸相連形成的肽稱多肽多肽(polypeptide)(polypeptide)。多肽鏈的形成及其方向性多肽鏈的形成及其方向性 肽單元肽單元參與肽鍵的參與肽鍵的6個原子個原子C1、C、O、N、H、C2位于同一位于同一平面，平面，C1和和C2在平面上在平面上所處的位置為所處的位置為反式反式(trans)構(gòu)型，構(gòu)型，此同一平面上此同一平面上的的6個原子構(gòu)成個原子構(gòu)成了肽單元了肽單元 (peptide unit) 。（二）生物活性肽（二）生物活性肽生物體內(nèi)具有一定生物學活性的肽類物質(zhì)生物體內(nèi)具有一定生物學活性的肽類物質(zhì)稱生物活性肽。稱生物活性肽。重要

19、的生物活性肽有谷胱甘肽、神經(jīng)肽、重要的生物活性肽有谷胱甘肽、神經(jīng)肽、肽類激素、抗生素肽等。肽類激素、抗生素肽等。1. 谷胱甘肽（谷胱甘肽（glutathione, GSH） 是一種稱為是一種稱為-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸谷氨酰半胱氨酰甘氨酸的三肽化合物。的三肽化合物。還原型與氧化型谷胱甘肽的相互轉(zhuǎn)變還原型與氧化型谷胱甘肽的相互轉(zhuǎn)變Glu-Cys-Gly | S | S |Glu-Cys-Gly-2H+2H谷胱甘肽分子中的巰基可氧化或還原，故有谷胱甘肽分子中的巰基可氧化或還原，故有還原型（還原型（GSH）與氧化型（）與氧化型（GSSG）兩種存）兩種存在形式。在形式。2 Glu-Cys-Gly | S

20、H解毒作用：與毒物或藥物結(jié)合，消除其毒性作解毒作用：與毒物或藥物結(jié)合，消除其毒性作用用.參與氧化還原反應(yīng)：作為重要的還原劑，參與參與氧化還原反應(yīng)：作為重要的還原劑，參與體內(nèi)多種氧化還原反應(yīng)體內(nèi)多種氧化還原反應(yīng).保護巰基酶的活性：使巰基酶的活性基團保護巰基酶的活性：使巰基酶的活性基團-SH維持還原狀態(tài)維持還原狀態(tài).維持紅細胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定：消除氧化劑對紅細維持紅細胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定：消除氧化劑對紅細胞膜結(jié)構(gòu)的破壞作用胞膜結(jié)構(gòu)的破壞作用.谷胱甘肽的生理功用谷胱甘肽的生理功用本品用于慢性肝臟疾病的輔助治療。包括病毒性、藥物毒性、本品用于慢性肝臟疾病的輔助治療。包括病毒性、藥物毒性、酒精毒性引起的肝臟損害酒

21、精毒性引起的肝臟損害 種類較多，生理功能各異。種類較多，生理功能各異。多肽類激素：主要見于下丘腦及垂體分泌的激素，多肽類激素：主要見于下丘腦及垂體分泌的激素，如催產(chǎn)素（如催產(chǎn)素（9肽）、加壓素（肽）、加壓素（9肽）、促腎上腺皮質(zhì)肽）、促腎上腺皮質(zhì)激素（激素（39肽）、促甲狀腺素釋放激素（肽）、促甲狀腺素釋放激素（3肽）。肽）。 神經(jīng)肽：主要與神經(jīng)信號轉(zhuǎn)導作用相關(guān)，包括腦啡神經(jīng)肽：主要與神經(jīng)信號轉(zhuǎn)導作用相關(guān)，包括腦啡肽（肽（5肽）、肽）、-內(nèi)啡肽（內(nèi)啡肽（31肽）、強啡肽（肽）、強啡肽（17肽）肽）等。等?？股仉模憾虠U菌肽抗生素肽：短桿菌肽A、短桿菌素、短桿菌素S、抗菌肽等、抗菌肽等2. 多肽

22、類激素及神經(jīng)肽多肽類激素及神經(jīng)肽The Molecular Structure of Protein 第第2節(jié)節(jié) 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu)(primary structure)二級結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu)(secondary structure)三級結(jié)構(gòu)三級結(jié)構(gòu)(tertiary structure)四級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu)(quaternary structure)高級高級結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)包括蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)包括:52高級結(jié)構(gòu)高級結(jié)構(gòu) 或或 空間結(jié)構(gòu)空間結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu) 二級結(jié)構(gòu)二級結(jié)構(gòu)三級結(jié)構(gòu)三級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu)四級結(jié)構(gòu)定義定義指多肽鏈中氨基酸的數(shù)目及排列順序。指多肽鏈中氨基酸

23、的數(shù)目及排列順序。一、蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)一、蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)主要的化學鍵主要的化學鍵 肽鍵，有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。肽鍵，有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。 一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學功能的基礎(chǔ)。功能的基礎(chǔ)。EMBL(European Molecular Biology Laboratory Data Library） GenBank (Genetic Sequence Databank) PIR(Protein Identification Resource Sequence Database ) 互聯(lián)網(wǎng)上重要的蛋白數(shù)據(jù)庫：互聯(lián)網(wǎng)上重要的蛋白數(shù)據(jù)庫：二、蛋白

24、質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)二、蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu)，即該段肽鏈主鏈骨架原子空間結(jié)構(gòu)，即該段肽鏈主鏈骨架原子的相對空間位置，并不涉及氨基酸殘的相對空間位置，并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象基側(cè)鏈的構(gòu)象定義定義 主要的化學鍵：主要的化學鍵： 氫鍵氫鍵 蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要形式蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要形式 - -螺旋螺旋 ( ( -helix ) -helix ) - -折疊折疊 ( ( -pleated sheet )-pleated sheet ) - -轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角 ( ( -turn )-turn ) 有序非重復結(jié)構(gòu)有序非重復結(jié)構(gòu) (ordered, non

25、repetitive (ordered, nonrepetitive structures) structures) - -螺旋螺旋由肽鍵平面盤旋形由肽鍵平面盤旋形成的螺旋狀構(gòu)象成的螺旋狀構(gòu)象59a-螺旋的結(jié)螺旋的結(jié)構(gòu)特征構(gòu)特征(1)(1)以肽鍵平面為單位以肽鍵平面為單位, ,以以a-a-碳原子為轉(zhuǎn)折，碳原子為轉(zhuǎn)折，盤旋形成右手螺旋盤旋形成右手螺旋60(2) 每每3.6個氨基酸殘基個氨基酸殘基繞成一個螺圈繞成一個螺圈(3600),螺距為螺距為0.54nm,肽鍵平肽鍵平面與中心軸平行面與中心軸平行61(3)(3)主鏈原子構(gòu)成螺旋的主體主鏈原子構(gòu)成螺旋的主體, ,側(cè)鏈在其外部側(cè)鏈在其外部62(4)

26、(4)肽鍵的肽鍵的COCO和和NHNH 都形成氫鍵都形成氫鍵氫鍵的方向與中心軸氫鍵的方向與中心軸大致平行大致平行, ,是穩(wěn)定螺是穩(wěn)定螺旋的主要作用力旋的主要作用力63氨基酸殘基的側(cè)鏈對氨基酸殘基的側(cè)鏈對a-螺旋形成的影響螺旋形成的影響1 1、氨基酸殘基側(cè)鏈所帶電荷、氨基酸殘基側(cè)鏈所帶電荷2 2、氨基酸殘基側(cè)鏈的大小、氨基酸殘基側(cè)鏈的大小 3 3、脯氨酸殘基、脯氨酸殘基-終結(jié)者終結(jié)者 Ala、Glu、Leu和和Met較常見于較常見于a-螺旋螺旋Pro、Gly、Ser和和Tyr較少見較少見 - -折疊折疊平行平行 NC N C反平行反平行 NC C N - -折疊是由兩條或多條幾乎完全伸展的肽鏈折

27、疊是由兩條或多條幾乎完全伸展的肽鏈平行排列，通過鏈間的氫鍵交聯(lián)而形成的。平行排列，通過鏈間的氫鍵交聯(lián)而形成的。肽鏈的主鏈呈鋸齒狀折疊構(gòu)象。肽鏈的主鏈呈鋸齒狀折疊構(gòu)象。65 折疊結(jié)構(gòu)特點折疊結(jié)構(gòu)特點肽鍵平面呈鋸齒狀排列，相鄰肽鍵平面的夾角肽鍵平面呈鋸齒狀排列，相鄰肽鍵平面的夾角為為1100 ；側(cè)鏈基團交錯地分布在片層平面的兩側(cè)；側(cè)鏈基團交錯地分布在片層平面的兩側(cè)；肽鏈間的肽鏈間的C=O與與NH形成氫鍵，維持穩(wěn)定。形成氫鍵，維持穩(wěn)定。 -轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)第二個氨基酸最常見轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)第二個氨基酸最常見Pro, Gly,Asp,Asn,Trp肽鏈中出出肽鏈中出出180度的回折，該構(gòu)象稱為度的回折，該構(gòu)象

28、稱為轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角蛋白質(zhì)多肽鏈中還包含一些難以確定規(guī)律性蛋白質(zhì)多肽鏈中還包含一些難以確定規(guī)律性的部分肽鏈構(gòu)象，稱為有序非重復結(jié)構(gòu)。的部分肽鏈構(gòu)象，稱為有序非重復結(jié)構(gòu)。 通常是一些環(huán)或轉(zhuǎn)角，通常是一些環(huán)或轉(zhuǎn)角，具有連接其它二級結(jié)構(gòu)的作用具有連接其它二級結(jié)構(gòu)的作用 超二級結(jié)構(gòu)（模體超二級結(jié)構(gòu)（模體motif ）指在多肽鏈內(nèi)順序上相互鄰近的二級指在多肽鏈內(nèi)順序上相互鄰近的二級結(jié)構(gòu)常常在空間折疊中靠近，彼此相互作結(jié)構(gòu)常常在空間折疊中靠近，彼此相互作用，形成規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)聚集體。用，形成規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)聚集體。 ；鈣結(jié)合蛋白中結(jié)鈣結(jié)合蛋白中結(jié)合鈣離子的模體合鈣離子的模體 鋅指結(jié)構(gòu)鋅指結(jié)構(gòu) （模體（模體motif

29、 ）蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)疏水鍵、離子鍵、氫鍵和疏水鍵、離子鍵、氫鍵和 Van der Waals力等。力等。 主要的化學鍵主要的化學鍵整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。排布位置。 定義定義 肌紅蛋白肌紅蛋白 (Mb) N 端端 C端端 結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)域(domain) 大分子蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)?？煞指畛纱蠓肿拥鞍踪|(zhì)的三級結(jié)構(gòu)?？煞指畛梢粋€或數(shù)個球狀或纖維狀的區(qū)域，折疊得一個或數(shù)個球狀或纖維狀的區(qū)域，折疊得較為緊密，各行使其功能，稱為結(jié)構(gòu)域。較為緊密，各行使其功能，稱為結(jié)構(gòu)域。C

30、D4分子分子4個相似結(jié)構(gòu)域個相似結(jié)構(gòu)域 分子伴侶也可與錯誤聚集的肽段結(jié)合，分子伴侶也可與錯誤聚集的肽段結(jié)合，使之解聚后，再誘導其正確折疊。使之解聚后，再誘導其正確折疊。分子伴侶在蛋白質(zhì)分子折疊過程中二硫鍵分子伴侶在蛋白質(zhì)分子折疊過程中二硫鍵的正確形成起了重要的作用。的正確形成起了重要的作用。氫鍵氫鍵負電性很強的原子（如氧或氮）負電性很強的原子（如氧或氮）和與氧或氮共價結(jié)合的氫原子相和與氧或氮共價結(jié)合的氫原子相互吸引，這種作用力稱為氫鍵?；ノ@種作用力稱為氫鍵。疏水相互作用疏水相互作用由非極性由非極性基團受到基團受到水分子排水分子排斥相互聚斥相互聚集在一起集在一起的作用力的作用力疏水作用示意

31、圖疏水作用示意圖離子鍵離子鍵由異性電荷間的靜電吸引形成的鍵。由異性電荷間的靜電吸引形成的鍵。 范德華力范德華力 這是一種普遍存在的作用力，是一個原子的原子核吸這是一種普遍存在的作用力，是一個原子的原子核吸引另一個原子外圍電子所產(chǎn)生的作用力。它是一種比引另一個原子外圍電子所產(chǎn)生的作用力。它是一種比較弱的、非特異性的作用力較弱的、非特異性的作用力 蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)有些蛋白質(zhì)分子含有二條或多條多肽鏈，每一條有些蛋白質(zhì)分子含有二條或多條多肽鏈，每一條多肽鏈都有完整的三級結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的亞基多肽鏈都有完整的三級結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的亞基 (subunit)(subunit)。蛋白質(zhì)分子中各

32、亞基的空間排布及亞基接觸部位蛋白質(zhì)分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用，稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。的布局和相互作用，稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。亞基之間的結(jié)合力主要是疏水作用，其次是氫鍵亞基之間的結(jié)合力主要是疏水作用，其次是氫鍵和離子鍵。和離子鍵。血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu)血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu) * 根據(jù)蛋白質(zhì)組成成分根據(jù)蛋白質(zhì)組成成分 結(jié)合蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì) = 蛋白質(zhì)部分蛋白質(zhì)部分 + 非蛋白質(zhì)部分非蛋白質(zhì)部分單純蛋白質(zhì)單純蛋白質(zhì)* 根據(jù)蛋白質(zhì)形狀根據(jù)蛋白質(zhì)形狀 纖維狀蛋白質(zhì)纖維狀蛋白質(zhì)球狀蛋白質(zhì)球狀蛋白質(zhì)* 根據(jù)蛋白質(zhì)功能根據(jù)蛋白質(zhì)功能 酶蛋白、調(diào)節(jié)蛋白、酶蛋白、調(diào)節(jié)蛋白、運輸?shù)鞍?、結(jié)構(gòu)蛋白運輸

33、蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白蛋白質(zhì)組學蛋白質(zhì)組學（一）蛋白質(zhì)組學基本概念（一）蛋白質(zhì)組學基本概念蛋白質(zhì)組是指一種細胞或一蛋白質(zhì)組是指一種細胞或一種生物所表達的全部蛋白質(zhì)，種生物所表達的全部蛋白質(zhì)，即即“一種基因組所表達的全套一種基因組所表達的全套蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)”。 （二）蛋白質(zhì)組學研究技術(shù)平臺（二）蛋白質(zhì)組學研究技術(shù)平臺 蛋白質(zhì)組學是高通量，高效率的研究蛋白質(zhì)組學是高通量，高效率的研究: :雙向電泳分離樣品蛋白質(zhì)雙向電泳分離樣品蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)點的定位、切取蛋白質(zhì)點的定位、切取 蛋白質(zhì)點的質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)點的質(zhì)譜分析 （三）蛋白質(zhì)組學研究的科學意義（三）蛋白質(zhì)組學研究的科學意義The Relation of St

34、ructure and Function of Protein第第3 3節(jié)節(jié) 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)構(gòu)象的基礎(chǔ)一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)構(gòu)象的基礎(chǔ) 蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 牛核糖核酸酶的牛核糖核酸酶的一級結(jié)構(gòu)一級結(jié)構(gòu)二二硫硫鍵鍵 天然狀態(tài)，天然狀態(tài)，有催化活性有催化活性 尿素、尿素、 -巰基乙醇巰基乙醇 去除尿素、去除尿素、-巰基乙醇巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性非折疊狀態(tài)，無活性分子伴侶分子伴侶一級結(jié)構(gòu)相似的蛋白質(zhì)具有相似的高級結(jié)構(gòu)與一級結(jié)構(gòu)相似的蛋白質(zhì)具有相似的高級結(jié)構(gòu)與功能功能胰島素胰島素氨基酸殘基序號氨基酸殘基序號A5A6A10B

35、30人人ThrSerIleThr豬豬ThrSerIleAla狗狗ThrSerIleAla兔兔ThrGlyIleSer牛牛AlaGlyValAla羊羊AlaSerValAla馬馬ThrSerIleAla 分子病分子病例：鐮刀形紅細胞貧血例：鐮刀形紅細胞貧血 (DNA:CTCCAC) (DNA:CTCCAC)N-val his leu thr pro glu glu C(146) HbS 肽鏈肽鏈HbA 肽鏈肽鏈N-val his leu thr pro val glu C(146) 這種由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導這種由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導致的疾病，稱為致的疾病，稱為“分子病分子病”。 蛋白質(zhì)空間

36、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 蛋白質(zhì)的功能依賴于特定的空間結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的功能依賴于特定的空間結(jié)構(gòu)RNase構(gòu)象改變失活構(gòu)象改變失活酶原激活酶原激活信號肽的切除信號肽的切除 肌紅蛋白與血紅蛋白的結(jié)構(gòu)肌紅蛋白與血紅蛋白的結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 Hb與與Mb一樣能可逆地與一樣能可逆地與O2結(jié)合，結(jié)合， Hb與與O2結(jié)合后稱為氧合結(jié)合后稱為氧合Hb。氧合。氧合Hb占占總總Hb的百分數(shù)（稱百分飽和度）隨的百分數(shù)（稱百分飽和度）隨O2濃濃度變化而改變。度變化而改變。肌紅蛋白肌紅蛋白(Mb)和血紅蛋白和血紅蛋白(Hb)的氧解離曲線的氧解離曲線一個寡聚體蛋白質(zhì)的

37、一個亞基與其配體結(jié)合一個寡聚體蛋白質(zhì)的一個亞基與其配體結(jié)合后，能影響此寡聚體中另一個亞基與配體結(jié)合能后，能影響此寡聚體中另一個亞基與配體結(jié)合能力的現(xiàn)象，稱為協(xié)同效應(yīng)。力的現(xiàn)象，稱為協(xié)同效應(yīng)。 如果是促進作用則稱為正協(xié)同效應(yīng)如果是促進作用則稱為正協(xié)同效應(yīng) (positive cooperativity)如果是抑制作用則稱為負協(xié)同效應(yīng)如果是抑制作用則稱為負協(xié)同效應(yīng) (negative cooperativity)蛋白質(zhì)分子與它的配體結(jié)合后構(gòu)蛋白質(zhì)分子與它的配體結(jié)合后構(gòu)象發(fā)生變化，空間結(jié)構(gòu)的改變伴隨象發(fā)生變化，空間結(jié)構(gòu)的改變伴隨其功能的變化，稱為變構(gòu)效應(yīng)。其功能的變化，稱為變構(gòu)效應(yīng)。O2血紅素與氧結(jié)

38、血紅素與氧結(jié)合后，鐵原子半徑合后，鐵原子半徑變小，就能進入卟變小，就能進入卟啉環(huán)的小孔中，繼啉環(huán)的小孔中，繼而引起肽鏈位置的而引起肽鏈位置的變動。變動。 蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病 蛋白質(zhì)構(gòu)象疾?。喝舻鞍踪|(zhì)的折疊發(fā)蛋白質(zhì)構(gòu)象疾病：若蛋白質(zhì)的折疊發(fā)生錯誤，盡管其一級結(jié)構(gòu)不變，但蛋白生錯誤，盡管其一級結(jié)構(gòu)不變，但蛋白質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變，仍可影響其功能，質(zhì)的構(gòu)象發(fā)生改變，仍可影響其功能，嚴重時可導致疾病發(fā)生。嚴重時可導致疾病發(fā)生。PrPc-螺旋螺旋PrPsc-折疊折疊正常正常朊病毒病朊病毒病 朊病毒蛋白朊病毒蛋白(prion protein, PrP)(prion protein, Pr

39、P)構(gòu)象改變引構(gòu)象改變引起的一組人和動物神經(jīng)退行性病變。起的一組人和動物神經(jīng)退行性病變。 正常的正常的PrPPrP富含富含-螺旋，稱為螺旋，稱為PrPcPrPc。 PrPc PrPc在某種未知蛋白質(zhì)的作用下可轉(zhuǎn)變成全為在某種未知蛋白質(zhì)的作用下可轉(zhuǎn)變成全為-折疊的折疊的PrPscPrPsc，從而致病。，從而致病。朊病毒病: 朊病毒（prion）致疾病的機理：有些蛋白質(zhì)錯誤折疊后致疾病的機理：有些蛋白質(zhì)錯誤折疊后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉樣相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉樣纖維沉淀，產(chǎn)生毒性而致病，表現(xiàn)為蛋白纖維沉淀，產(chǎn)生毒性而致病，表現(xiàn)為蛋白質(zhì)淀粉樣纖維沉淀的病理改變。質(zhì)淀粉樣纖維沉淀

40、的病理改變。這類疾病包括：人紋狀體脊髓變性病、這類疾病包括：人紋狀體脊髓變性病、瘋牛病、老年癡呆癥、亨停頓舞蹈病等。瘋牛病、老年癡呆癥、亨停頓舞蹈病等。 蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病蛋白質(zhì)構(gòu)象改變與疾病 第四節(jié)第四節(jié)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)與分離純化蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)與分離純化The Physical and Chemical Characters and Separation and Purification of Protein 蛋白質(zhì)的兩性電離和等電點蛋白質(zhì)的兩性電離和等電點 理理 化化 性性 質(zhì)質(zhì) 蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外，蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外，氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團，在一

41、定的溶液氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團，在一定的溶液pH條條件下都可解離成帶負電荷或正電荷的基團。件下都可解離成帶負電荷或正電荷的基團。 蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) 蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量介于蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量介于1 1萬至萬至100100萬，其分子的直徑可達萬，其分子的直徑可達1 1100nm100nm，為，為膠粒范圍之內(nèi)。膠粒范圍之內(nèi)。 * * 蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素顆粒表面電荷顆粒表面電荷水化膜水化膜+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負電荷的蛋白質(zhì)帶負電荷的蛋白質(zhì)在等電點的蛋白質(zhì)在等電點的蛋白質(zhì)水化膜水化膜+帶正電荷的蛋白質(zhì)帶正電荷的蛋白質(zhì)帶負

42、電荷的蛋白質(zhì)帶負電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸酸堿堿酸酸堿堿酸酸堿堿脫水作用脫水作用脫水作用脫水作用脫水作用脫水作用溶液中蛋白質(zhì)的聚沉溶液中蛋白質(zhì)的聚沉 蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固蛋白質(zhì)的變性、沉淀和凝固 在某些物理和化學因素作用下，其特定的在某些物理和化學因素作用下，其特定的空間構(gòu)象被破壞，也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無空間構(gòu)象被破壞，也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu)，從而導致其理化性質(zhì)改變和生序的空間結(jié)構(gòu)，從而導致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。物活性的喪失。 蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的變性(denaturation) 變性的本質(zhì)變性的本質(zhì) 破壞非共價鍵和二硫鍵，不改變蛋白破壞非

43、共價鍵和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。 蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的變性(denaturation) 造成變性的因素造成變性的因素 加熱、紫外線照射、超聲波、劇烈振加熱、紫外線照射、超聲波、劇烈振蕩；強酸、強堿、有機溶劑、重金屬鹽等蕩；強酸、強堿、有機溶劑、重金屬鹽等 。 臨床醫(yī)學上，變性因素常被應(yīng)用來消臨床醫(yī)學上，變性因素常被應(yīng)用來消毒及滅菌。毒及滅菌。 此外此外, , 防止蛋白質(zhì)變性也是有效保防止蛋白質(zhì)變性也是有效保存蛋白質(zhì)制劑（如疫苗等）的必要條存蛋白質(zhì)制劑（如疫苗等）的必要條件。件。 蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的變性(denaturation)若蛋白質(zhì)變性程度較輕，去除變性若蛋白質(zhì)變性

44、程度較輕，去除變性因素后，蛋白質(zhì)仍可恢復或部分恢復其因素后，蛋白質(zhì)仍可恢復或部分恢復其原有的構(gòu)象和功能，稱為復性。原有的構(gòu)象和功能，稱為復性。 蛋白質(zhì)的復性蛋白質(zhì)的復性(renaturation) 天然狀態(tài)，天然狀態(tài)，有催化活性有催化活性 尿素、尿素、 -巰基乙醇巰基乙醇 去除尿素、去除尿素、-巰基乙醇巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無活性非折疊狀態(tài)，無活性在一定條件下，蛋白質(zhì)從溶液中析出在一定條件下，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象稱為沉淀。的現(xiàn)象稱為沉淀。破壞水化膜、中和電荷破壞水化膜、中和電荷 蛋白質(zhì)沉淀蛋白質(zhì)沉淀蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅固蛋白質(zhì)變性后的絮狀物加熱可變成比較堅固的凝塊，此凝塊不易

45、再溶于強酸和強堿中。的凝塊，此凝塊不易再溶于強酸和強堿中。蛋清煮熟、豆?jié){成豆腐蛋清煮熟、豆?jié){成豆腐 蛋白質(zhì)的凝固作用蛋白質(zhì)的凝固作用(coagulation) 常常是相繼發(fā)生的常常是相繼發(fā)生的變性的蛋白質(zhì)不一定沉淀，沉淀的蛋白質(zhì)不變性的蛋白質(zhì)不一定沉淀，沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性，但變性蛋白質(zhì)容易沉淀，凝固的蛋白一定變性，但變性蛋白質(zhì)容易沉淀，凝固的蛋白質(zhì)均已變性，而且不再溶解。質(zhì)均已變性，而且不再溶解。 變性、沉淀和凝固的關(guān)系變性、沉淀和凝固的關(guān)系 蛋白質(zhì)的紫外吸收蛋白質(zhì)的紫外吸收由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸由于蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸，因此在和色氨酸，因此在280nm波

46、長處有特征性吸收波長處有特征性吸收峰。蛋白質(zhì)的峰。蛋白質(zhì)的A280與其濃度呈正比關(guān)系，因此與其濃度呈正比關(guān)系，因此可作蛋白質(zhì)定量測定?？勺鞯鞍踪|(zhì)定量測定。 蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)(biuret reaction) 蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色，此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)，雙縮脲反應(yīng)可用來檢應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)，雙縮脲反應(yīng)可用來檢測蛋白質(zhì)水解程度。測蛋白質(zhì)水解程度。 酚試劑的呈色反應(yīng)酚試劑的呈色反應(yīng) Lowry法測蛋白含量法測蛋白含量蛋白質(zhì)的分離和純化蛋白質(zhì)的分離和純化 鹽析鹽析(salt precipitation)(salt precipitation) 是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)表面電荷被加入蛋白質(zhì)