肝纖維化的檢測(cè)

1、Contents 化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介 肝纖維化綜述肝纖維化綜述 肝纖維化的檢測(cè)方法肝纖維化的檢測(cè)方法 血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值 其他血清學(xué)檢測(cè)指標(biāo)簡(jiǎn)介其他血清學(xué)檢測(cè)指標(biāo)簡(jiǎn)介 肝纖維化診斷現(xiàn)狀肝纖維化診斷現(xiàn)狀 肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介 化學(xué)發(fā)光免疫診斷技術(shù)是臨床診斷領(lǐng)域最有前景的化學(xué)發(fā)光免疫診斷技術(shù)是臨床診斷領(lǐng)域最有前景的技術(shù)之一。其利用魯米諾在酶促下發(fā)出的光子信號(hào)技術(shù)之一。其利用魯米諾在酶促下發(fā)出的光子信號(hào)(以以及其他發(fā)光方式及其他發(fā)光方式)，放大抗原抗體反應(yīng)，對(duì)體內(nèi)的各種，放大抗原抗體反應(yīng)，

2、對(duì)體內(nèi)的各種微量標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)各種疾病進(jìn)行早期、特異微量標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)各種疾病進(jìn)行早期、特異和定量化的診斷。和定量化的診斷。 其特點(diǎn)在于靈敏度高、測(cè)定范圍寬、快速、簡(jiǎn)便，其特點(diǎn)在于靈敏度高、測(cè)定范圍寬、快速、簡(jiǎn)便，并且在測(cè)試中不使用有害的試劑，無污染。并且在測(cè)試中不使用有害的試劑，無污染?；瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介方法中國(guó)歐美放射免疫法（RIA）1.1.興起于興起于2020世紀(jì)世紀(jì)7070年代，現(xiàn)仍普年代，現(xiàn)仍普遍使用于縣級(jí)以上醫(yī)院；遍使用于縣級(jí)以上醫(yī)院；2.2.產(chǎn)品處于衰退期；產(chǎn)品處于衰退期；3.3.廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。劑基

3、本系列化。 1.1.興起于興起于2020世紀(jì)世紀(jì)6060年代，現(xiàn)已基年代，現(xiàn)已基本退出臨床應(yīng)用；本退出臨床應(yīng)用；2.2.產(chǎn)品生命周期已終結(jié)；產(chǎn)品生命周期已終結(jié)；3.3.廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化劑基本系列化 酶聯(lián)免疫法（ELISA）1.1.興起于興起于2020世紀(jì)世紀(jì)8080年代，現(xiàn)普遍年代，現(xiàn)普遍使用于各級(jí)臨床機(jī)構(gòu)，為我國(guó)臨使用于各級(jí)臨床機(jī)構(gòu)，為我國(guó)臨床免疫診斷的基本方法；床免疫診斷的基本方法；2.2.產(chǎn)品產(chǎn)品處于成熟期；處于成熟期；3.3.廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試劑尚未系列化。劑尚未系列化。 1.1.興起于興起于2020世紀(jì)

4、世紀(jì)7070年代，現(xiàn)仍在年代，現(xiàn)仍在臨床應(yīng)用；臨床應(yīng)用；2.2.產(chǎn)品處于衰退期；產(chǎn)品處于衰退期；3.3.廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。劑基本系列化。 化學(xué)發(fā)光免疫法（CLIA） 1.1.導(dǎo)入于導(dǎo)入于2020世紀(jì)世紀(jì)9090年代，逐步進(jìn)年代，逐步進(jìn)入各大中醫(yī)院；入各大中醫(yī)院；2.2.產(chǎn)品處于快速成長(zhǎng)期；產(chǎn)品處于快速成長(zhǎng)期；3.3.正逐步實(shí)現(xiàn)正逐步實(shí)現(xiàn)試劑和儀器共同開試劑和儀器共同開發(fā)，試劑逐步系列化發(fā)，試劑逐步系列化 1.1.興起于興起于2020世紀(jì)世紀(jì)8080年代，現(xiàn)已被年代，現(xiàn)已被臨床普遍使用，成為臨床免疫診臨床普遍使用，成為臨床免疫診斷的支柱方法；斷的支

5、柱方法；2.2.產(chǎn)品處于成熟期；產(chǎn)品處于成熟期；3.3.廠商試劑與儀器共同開發(fā)，儀廠商試劑與儀器共同開發(fā)，儀器自動(dòng)化程度高，試劑系列化狀器自動(dòng)化程度高，試劑系列化狀態(tài)好。態(tài)好。 化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介1） 化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介 2）化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介3）化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介化學(xué)發(fā)光技術(shù)簡(jiǎn)介 肝纖維化（肝纖維化（hepatic fibrosis）是指肝細(xì)胞發(fā)）是指肝細(xì)胞發(fā)生壞死及炎癥刺激時(shí)，肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生壞死及炎癥刺激時(shí)，肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生的病理過程。生的病理過程。 是慢性肝病的共同病理學(xué)基礎(chǔ)，隨著各種不同是慢性肝病的共同病理學(xué)基礎(chǔ)，隨著各種不同的慢性肝臟疾病的進(jìn)展可逐漸形成肝纖維化的慢性肝

6、臟疾病的進(jìn)展可逐漸形成肝纖維化 。 輕輕肝纖維化重肝纖維化重肝硬化肝硬化 （不同之處（不同之處肝小葉結(jié)構(gòu)是否完整）肝小葉結(jié)構(gòu)是否完整） 引起肝纖維化的病因消除后引起肝纖維化的病因消除后早期肝纖維化早期肝纖維化可完全恢復(fù)，肝硬化則不易復(fù)原?？赏耆謴?fù)，肝硬化則不易復(fù)原。 肝纖維化綜述肝纖維化綜述Part1.肝纖維化的概念肝纖維化的概念 肝纖維化嚴(yán)重時(shí)可引起門脈高壓肝纖維化嚴(yán)重時(shí)可引起門脈高壓纖維化組織纖維化組織壓迫門靜脈分支，門靜脈阻力升高。壓迫門靜脈分支，門靜脈阻力升高。 從生理角度看，肝損傷時(shí)肝內(nèi)纖維結(jié)締組織增生從生理角度看，肝損傷時(shí)肝內(nèi)纖維結(jié)締組織增生是一種對(duì)損傷的正常修復(fù)反應(yīng)。是一種對(duì)損

7、傷的正常修復(fù)反應(yīng)。 肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞數(shù)量肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞數(shù)量過度增生過度增生 減少，肝功能降低減少，肝功能降低 肝臟萎縮變硬，肝硬化失代償肝臟萎縮變硬，肝硬化失代償 肝纖維化是慢性肝病最重要的病理特征，也是慢肝纖維化是慢性肝病最重要的病理特征，也是慢性肝炎、肝硬化進(jìn)一步發(fā)展、惡化的重要原因。性肝炎、肝硬化進(jìn)一步發(fā)展、惡化的重要原因。肝纖維化綜述Part2.肝纖維化的病理生理學(xué)肝纖維化的病理生理學(xué)肝纖維化綜述慢性乙型肝炎慢性乙型肝炎慢性丙型肝炎慢性丙型肝炎脂肪性肝炎（酒精或非酒精性）脂肪性肝炎（酒精或非酒精性）藥物藥物免疫性肝病免疫性肝病膽汁淤積等膽汁淤積等肝纖維化綜述Part3.肝

8、纖維化的病因?qū)W肝纖維化的病因?qū)W過度纖維化會(huì)導(dǎo)致肝臟萎縮變硬，直到引起肝硬化過度纖維化會(huì)導(dǎo)致肝臟萎縮變硬，直到引起肝硬化或肝衰竭，進(jìn)而導(dǎo)致患者完全喪失生活能力和死亡。或肝衰竭，進(jìn)而導(dǎo)致患者完全喪失生活能力和死亡。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前我國(guó)乙肝病毒攜帶者據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前我國(guó)乙肝病毒攜帶者1.2億，慢性乙肝億，慢性乙肝患者約患者約3500萬，加上慢性丙肝、脂肪肝、血吸蟲病、萬，加上慢性丙肝、脂肪肝、血吸蟲病、免疫性肝病等，構(gòu)成了龐大的潛在的肝纖維化患者群。免疫性肝病等，構(gòu)成了龐大的潛在的肝纖維化患者群。調(diào)查顯示，肝硬化占據(jù)國(guó)際上疾病死亡病因的第六調(diào)查顯示，肝硬化占據(jù)國(guó)際上疾病死亡病因的第六位。位。早期發(fā)現(xiàn)并積極治

9、療肝纖維化，使之逆轉(zhuǎn)或延緩其早期發(fā)現(xiàn)并積極治療肝纖維化，使之逆轉(zhuǎn)或延緩其發(fā)展，對(duì)提高患者生活質(zhì)量，改善患者預(yù)后，有十分發(fā)展，對(duì)提高患者生活質(zhì)量，改善患者預(yù)后，有十分重要的作用。重要的作用。 肝纖維化綜述Part4.肝纖維化的流行病學(xué)肝纖維化的流行病學(xué) 肝纖維化是肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段，肝纖維化是肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段，各種因素導(dǎo)致的肝損傷，都可繼發(fā)肝纖維各種因素導(dǎo)致的肝損傷，都可繼發(fā)肝纖維化形成進(jìn)而發(fā)展為肝硬化?；纬蛇M(jìn)而發(fā)展為肝硬化。 早期肝纖維化可完全恢復(fù)，肝硬化則早期肝纖維化可完全恢復(fù)，肝硬化則不易復(fù)原。不易復(fù)原。 肝纖維化綜述Part5.小結(jié)小結(jié) 肝活檢肝活檢病理學(xué)檢查仍病理學(xué)檢查仍是診斷

10、肝纖維化的是診斷肝纖維化的金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)，是明確診斷、衡量炎癥活動(dòng)是明確診斷、衡量炎癥活動(dòng)度、纖維化程度以及判定藥度、纖維化程度以及判定藥物療效的重要依據(jù)。目前一物療效的重要依據(jù)。目前一般采用半定量計(jì)分系統(tǒng)。但般采用半定量計(jì)分系統(tǒng)。但是，由于肝纖維化在肝內(nèi)分是，由于肝纖維化在肝內(nèi)分布不均勻，而且肝穿刺組織布不均勻，而且肝穿刺組織僅占全肝的五萬分之一，可僅占全肝的五萬分之一，可造成診斷誤差。因此強(qiáng)調(diào)肝造成診斷誤差。因此強(qiáng)調(diào)肝活檢標(biāo)本至少活檢標(biāo)本至少15 mm，并，并包含包含6個(gè)以上匯管區(qū)。個(gè)以上匯管區(qū)。Part1.病理學(xué)檢查病理學(xué)檢查肝纖維化的檢測(cè)方法肝纖維化的檢測(cè)方法肝纖維化的檢測(cè)方法 現(xiàn)代影像

11、學(xué)手段如現(xiàn)代影像學(xué)手段如B型超聲、型超聲、CT、磁共振成像（、磁共振成像（MRI）等可以等可以發(fā)現(xiàn)肝纖維化的某些征象，如肝發(fā)現(xiàn)肝纖維化的某些征象，如肝臟輪廓、大小、及肝實(shí)質(zhì)信號(hào)強(qiáng)臟輪廓、大小、及肝實(shí)質(zhì)信號(hào)強(qiáng)弱的改變，肝臟血管內(nèi)徑及血流弱的改變，肝臟血管內(nèi)徑及血流方向、速度的改變，脾臟大小的方向、速度的改變，脾臟大小的改變等。彩色多普勒超聲檢查或改變等。彩色多普勒超聲檢查或放射性核素掃描可以測(cè)定肝臟動(dòng)放射性核素掃描可以測(cè)定肝臟動(dòng)脈和門脈的血流量及功能性門體脈和門脈的血流量及功能性門體分流情況。但是，目前這些影像分流情況。但是，目前這些影像學(xué)檢查尚學(xué)檢查尚不能對(duì)纖維化做出確診不能對(duì)纖維化做出確診和

12、鑒別診斷，更難于準(zhǔn)確判斷肝和鑒別診斷，更難于準(zhǔn)確判斷肝纖維化的嚴(yán)重程度纖維化的嚴(yán)重程度，故只能作為，故只能作為一種輔助診斷。一種輔助診斷。 Part2.影像學(xué)檢查影像學(xué)檢查肝纖維化的檢測(cè)方法細(xì)胞外基質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)及代謝及代謝產(chǎn)物產(chǎn)物ECM代謝相關(guān)代謝相關(guān)酶類及抑制劑酶類及抑制劑膠原蛋白膠原蛋白 例如：例如：PNP PIP Col Col VI非膠原糖蛋白非膠原糖蛋白 例如：例如：LN FN FNR UN TN糖胺多糖糖胺多糖 例如：例如：HA蛋白多糖蛋白多糖 膠原酶及其抑制劑膠原酶及其抑制劑 例如：例如：MMPs TIMPs脯氨酰羥化酶（脯氨酰羥化酶（PH）賴氨酰氧化酶賴氨酰氧化酶細(xì)胞

13、因子細(xì)胞因子多肽類生長(zhǎng)因子多肽類生長(zhǎng)因子 例如：例如：TGF-白細(xì)胞介素白細(xì)胞介素 例如：例如：IL-1腫瘤壞死因子腫瘤壞死因子 例如：例如：TNF-干擾素干擾素 例如：例如：IFN-Part3.血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查肝纖維化的檢測(cè)方法檢測(cè)方法檢測(cè)方法 準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性 安全性安全性 方便性方便性 診斷意義診斷意義 病理學(xué)診病理學(xué)診斷斷 準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性高高 存在一定存在一定的損傷性的損傷性和危險(xiǎn)性和危險(xiǎn)性 需要專業(yè)需要專業(yè)人員和器人員和器材，很難材，很難反復(fù)取材反復(fù)取材 診斷可靠，但診斷可靠，但不便于動(dòng)態(tài)觀察不便于動(dòng)態(tài)觀察肝纖肝纖維化的情況。維化的情況。 影像學(xué)診影像學(xué)診斷斷 輔助作輔助作用用 無危險(xiǎn)

14、性無危險(xiǎn)性 方便方便 只能在只能在肝纖維化晚期才能出現(xiàn)異常肝纖維化晚期才能出現(xiàn)異常圖像，因此圖像，因此不可能作為早期診斷不可能作為早期診斷。檢查可以發(fā)現(xiàn)肝纖維化的某些征象，檢查可以發(fā)現(xiàn)肝纖維化的某些征象，但不能對(duì)纖維化做出確診，更難于但不能對(duì)纖維化做出確診，更難于準(zhǔn)確判斷肝纖維化的嚴(yán)重程度。準(zhǔn)確判斷肝纖維化的嚴(yán)重程度。 血清學(xué)診血清學(xué)診斷斷 準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性較高較高 無危險(xiǎn)性無危險(xiǎn)性 取材方便、取材方便、容易復(fù)查容易復(fù)查 可以對(duì)肝組織纖維化可以對(duì)肝組織纖維化不同階段不同階段做出做出相對(duì)準(zhǔn)確的診斷。了解肝臟纖維化相對(duì)準(zhǔn)確的診斷。了解肝臟纖維化的發(fā)展變化情況，也可的發(fā)展變化情況，也可監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)抗纖維抗纖

15、維化的治療的化的治療的臨床效果臨床效果。 Part4.不同方法的對(duì)比不同方法的對(duì)比肝纖維化的檢測(cè)方法 透明質(zhì)酸（透明質(zhì)酸（hyaluronic acid，HA）主要由纖）主要由纖維母細(xì)胞細(xì)胞合成，通過淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血循環(huán)，并維母細(xì)胞細(xì)胞合成，通過淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血循環(huán)，并由肝臟快速清除。肝內(nèi)皮細(xì)胞是由肝臟快速清除。肝內(nèi)皮細(xì)胞是HA攝取、降解的場(chǎng)攝取、降解的場(chǎng)所。由于體內(nèi)存在有效的所。由于體內(nèi)存在有效的HA清除機(jī)制，正常人血清清除機(jī)制，正常人血清中僅有低水平的中僅有低水平的HA。多種原因?qū)е碌母尾】墒寡?。多種原因?qū)е碌母尾】墒寡錒A水平上升，主要與肝臟清除功能下降、肝臟內(nèi)成水平上升，主要與肝臟清除

16、功能下降、肝臟內(nèi)成纖維細(xì)胞（肝星狀細(xì)胞）合成增加有關(guān)。在肝纖維纖維細(xì)胞（肝星狀細(xì)胞）合成增加有關(guān)。在肝纖維化時(shí)，肝星狀細(xì)胞合成化時(shí)，肝星狀細(xì)胞合成HA水平大大升高，且內(nèi)皮細(xì)水平大大升高，且內(nèi)皮細(xì)胞清除胞清除HA能力亦有下降，雙重原因?qū)е赂卫w維化中能力亦有下降，雙重原因?qū)е赂卫w維化中HA水平上升。水平上升。血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值Part1.透明質(zhì)酸透明質(zhì)酸 HA又稱又稱“小肝穿小肝穿”，測(cè)定具有以下作用：，測(cè)定具有以下作用：1.反反映肝臟纖維化形成；映肝臟纖維化形成；2.反映肝臟纖維化程度；反映肝臟纖維化程度；3.反反映肝細(xì)胞功能；映肝細(xì)胞功能；4.反映

17、肝臟炎癥性病變；反映肝臟炎癥性病變；5.無論是無論是無癥狀性病毒感染或嚴(yán)重病毒感染、酒精性肝病、無癥狀性病毒感染或嚴(yán)重病毒感染、酒精性肝病、膽汁性肝硬化，膽汁性肝硬化，HA均是有效指標(biāo)，可用于藥物療效均是有效指標(biāo)，可用于藥物療效觀察及病情的動(dòng)態(tài)觀察。觀察及病情的動(dòng)態(tài)觀察。 就目前臨床研究而言：就目前臨床研究而言：HA是目前眾多纖維化是目前眾多纖維化生化指標(biāo)中最為敏感和特異的指標(biāo)（生化指標(biāo)中最為敏感和特異的指標(biāo)（80%以上）以上） 。在慢性肝病肝纖維化組織學(xué)在慢性肝病肝纖維化組織學(xué)-血清對(duì)照研究中發(fā)現(xiàn)，血清對(duì)照研究中發(fā)現(xiàn)，HA是是4項(xiàng)細(xì)胞外間質(zhì)成分中最為敏感和特異的指標(biāo)，項(xiàng)細(xì)胞外間質(zhì)成分中最為敏

18、感和特異的指標(biāo)，HA的診斷準(zhǔn)確性為的診斷準(zhǔn)確性為82.9%，特異性為，特異性為93%，敏感性，敏感性為為56%。血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值Part2.層粘連蛋白層粘連蛋白 層粘蛋白（層粘蛋白（laminin，LN）是基底膜成分中的）是基底膜成分中的主要大分子糖蛋白，在肝臟內(nèi)與主要大分子糖蛋白，在肝臟內(nèi)與型膠原共同分布，型膠原共同分布，大量沉積則引起肝竇毛細(xì)血管化，直接影響肝竇血大量沉積則引起肝竇毛細(xì)血管化，直接影響肝竇血流阻力。流阻力。 LN有十幾個(gè)亞型，有報(bào)道顯示肝纖維化過程中有十幾個(gè)亞型，

19、有報(bào)道顯示肝纖維化過程中肝臟內(nèi)大量合成肝臟內(nèi)大量合成1和和1鏈，有人研究老鼠肝纖維化鏈，有人研究老鼠肝纖維化時(shí)說大量合成的是時(shí)說大量合成的是2型而非型而非1型。但到目前，在肝纖型。但到目前，在肝纖維化過程中研究最多的是維化過程中研究最多的是1型。型。 血清血清LN的測(cè)定通常是測(cè)定其的測(cè)定通常是測(cè)定其LN-P1片斷。片斷。 LN-P1主要反映的是肝纖維化形成中的纖維化活性，其主要反映的是肝纖維化形成中的纖維化活性，其血清值被認(rèn)為是反映基底膜更新率的指標(biāo)，可提示血清值被認(rèn)為是反映基底膜更新率的指標(biāo)，可提示肝竇的毛細(xì)血管化和匯管區(qū)纖維化。肝竇的毛細(xì)血管化和匯管區(qū)纖維化。 LN在肝纖維化中的診斷價(jià)值：

20、在肝纖維化中的診斷價(jià)值：與肝纖維化與肝纖維化形成的病因密切相關(guān)，形成的病因密切相關(guān)，LN水平在酒精性肝硬化明顯水平在酒精性肝硬化明顯高于病毒性肝硬化和膽汁性肝硬化，高于病毒性肝硬化和膽汁性肝硬化，LN水平可反映水平可反映酒精性肝病是否存在門脈高壓及門脈高壓程度，但酒精性肝病是否存在門脈高壓及門脈高壓程度，但在非酒精性肝硬化，在非酒精性肝硬化，LN則不能用于門脈高壓的診斷。則不能用于門脈高壓的診斷。 目前，有關(guān)目前，有關(guān)LN對(duì)診斷肝纖維化的價(jià)值仍有爭(zhēng)對(duì)診斷肝纖維化的價(jià)值仍有爭(zhēng)議，其診斷敏感性不及議，其診斷敏感性不及Col 和和PNP。血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)

21、值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值 PNP是是PC在細(xì)胞外形成原膠原前，被相關(guān)在細(xì)胞外形成原膠原前，被相關(guān)酶切下后進(jìn)入血循環(huán)的氨基端尾肽。完整的酶切下后進(jìn)入血循環(huán)的氨基端尾肽。完整的PNP主要通過竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被清主要通過竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被清除，故除，故膠原代謝活躍及肝功能損傷時(shí)，血清膠原代謝活躍及肝功能損傷時(shí)，血清PNP升高，升高，PNP被視為肝纖維化生成的血清學(xué)指標(biāo)。被視為肝纖維化生成的血清學(xué)指標(biāo)。 Part3. 型前膠原型前膠原N端肽端肽血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值 PNP的含量可以有效

22、地區(qū)別輕型與中的含量可以有效地區(qū)別輕型與中/重型慢重型慢性肝炎性肝炎，提示活動(dòng)性肝纖維化，是反映慢性肝纖維，提示活動(dòng)性肝纖維化，是反映慢性肝纖維化活動(dòng)性和程度的指標(biāo)?；顒?dòng)性和程度的指標(biāo)。長(zhǎng)期隨訪血清長(zhǎng)期隨訪血清PNP含量含量能判定慢性肝病的預(yù)后能判定慢性肝病的預(yù)后。對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化、。對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性遷延性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、自身免疫性肝慢性遷延性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、自身免疫性肝炎進(jìn)行炎進(jìn)行210年隨訪，無論藥物治療與否，原發(fā)性肝年隨訪，無論藥物治療與否，原發(fā)性肝硬化者血清硬化者血清PNP總是升高，接受肝移植后恢復(fù)正總是升高，接受肝移植后恢復(fù)正常；慢性遷延性肝炎常；慢性遷延

23、性肝炎PNP含量在正常上限；發(fā)展含量在正常上限；發(fā)展成肝硬化的慢性活動(dòng)性肝炎其血清成肝硬化的慢性活動(dòng)性肝炎其血清PNP持續(xù)升高，持續(xù)升高，轉(zhuǎn)入緩解期則血清轉(zhuǎn)入緩解期則血清PNP正常。唯自身免疫性肝炎正常。唯自身免疫性肝炎例外，血清值一直不升高。例外，血清值一直不升高。 血清血清PNP可評(píng)估慢性肝病，特別是慢性活動(dòng)可評(píng)估慢性肝病，特別是慢性活動(dòng)性肝炎纖維化過程，其臨床性肝炎纖維化過程，其臨床判斷預(yù)后價(jià)值已被公認(rèn)判斷預(yù)后價(jià)值已被公認(rèn)，但總體敏感性、特異性不高。有報(bào)道，血清但總體敏感性、特異性不高。有報(bào)道，血清PNP含量判別肝纖維化的敏感性和特異性分別是含量判別肝纖維化的敏感性和特異性分別是76%和

24、和71%。但。但PNP正?；蜉p微升高不能排除已經(jīng)存在正常或輕微升高不能排除已經(jīng)存在但正在緩慢進(jìn)展中的纖維化。但正在緩慢進(jìn)展中的纖維化。 此外，值得提出的是，在年幼的兒童，生長(zhǎng)導(dǎo)此外，值得提出的是，在年幼的兒童，生長(zhǎng)導(dǎo)致全身間質(zhì)膠原的更新可使血清致全身間質(zhì)膠原的更新可使血清PNP水平明顯升水平明顯升高，故高，故對(duì)兒童肝纖維化沒有診斷價(jià)值對(duì)兒童肝纖維化沒有診斷價(jià)值。血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值 型膠原型膠原是構(gòu)成基底膜的主要成分。肝纖維化是構(gòu)成基底膜的主要成分。肝纖維化時(shí)肝內(nèi)時(shí)肝內(nèi)型膠原合成增多并大

25、量沉積，致使肝竇毛型膠原合成增多并大量沉積，致使肝竇毛細(xì)血管化。細(xì)血管化。型前膠原由氨基端三螺旋即型前膠原由氨基端三螺旋即7S膠原、膠原、羧基端球形區(qū)即羧基端球形區(qū)即NCl及主三螺旋區(qū)組成。在血清中及主三螺旋區(qū)組成。在血清中可出現(xiàn)這三種主要的降解片斷，可出現(xiàn)這三種主要的降解片斷，3者均是反映者均是反映型膠型膠原降解的指標(biāo)，即具有相同的臨床意義，差別在于原降解的指標(biāo)，即具有相同的臨床意義，差別在于不同成分的檢測(cè)敏感度不同。由于膠原降解的增加不同成分的檢測(cè)敏感度不同。由于膠原降解的增加常伴有更多的再合成，因此，確切地說，它們常伴有更多的再合成，因此，確切地說，它們是反是反映基底膜膠原更新的指標(biāo)映基

26、底膜膠原更新的指標(biāo)。Part4. 型膠原型膠原 研究表明，研究表明，型膠原成分的檢測(cè)對(duì)判斷肝纖維型膠原成分的檢測(cè)對(duì)判斷肝纖維化和肝硬化具有較高的敏感性（化和肝硬化具有較高的敏感性（79%）和特異性）和特異性（82%）。有文獻(xiàn)報(bào)道在慢性活動(dòng)性丙肝患者中組）。有文獻(xiàn)報(bào)道在慢性活動(dòng)性丙肝患者中組合利用合利用型膠原與凝血酶原時(shí)間（型膠原與凝血酶原時(shí)間（PT)可明確地診斷可明確地診斷為肝硬化。為肝硬化。血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值血清學(xué)肝纖維化四項(xiàng)診斷的應(yīng)用價(jià)值 血清甘膽酸血清甘膽酸(Cholyglycine, CG) 是膽酸與甘氨酸結(jié)合二是膽酸與甘氨酸結(jié)合二次的結(jié)合型膽酸之一，在肝細(xì)胞內(nèi)，膽固醇經(jīng)

27、過及其復(fù)雜的次的結(jié)合型膽酸之一，在肝細(xì)胞內(nèi)，膽固醇經(jīng)過及其復(fù)雜的酶促反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成初級(jí)膽汁酸。其中有膽酸酶促反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成初級(jí)膽汁酸。其中有膽酸(CA)和鵝去氧膽和鵝去氧膽酸（酸（CD-CA）。膽酸的類固醇核上有三個(gè)羥基）。膽酸的類固醇核上有三個(gè)羥基(C3、C7、C12），側(cè)鏈末端的羥基以肽鍵與甘氨酸結(jié)合，分子量為），側(cè)鏈末端的羥基以肽鍵與甘氨酸結(jié)合，分子量為462u。 CG正常代謝途徑為腸正常代謝途徑為腸肝循環(huán)，肝循環(huán)，CG由肝細(xì)胞合成，經(jīng)由肝細(xì)胞合成，經(jīng)毛細(xì)膽管、膽管排入膽囊，隨同膽汁進(jìn)入十二指腸，幫助食毛細(xì)膽管、膽管排入膽囊，隨同膽汁進(jìn)入十二指腸，幫助食物消化。物消化。95%膽酸在回腸末端重

28、吸收，經(jīng)門靜脈再回肝臟，膽酸在回腸末端重吸收，經(jīng)門靜脈再回肝臟，由肝細(xì)胞攝取再利用。在血清中主要以蛋白結(jié)合形式存在，由肝細(xì)胞攝取再利用。在血清中主要以蛋白結(jié)合形式存在，溢入體循環(huán)的總量小于溢入體循環(huán)的總量小于1 %。在正常情況下。在正常情況下,外周血中膽酸含外周血中膽酸含量甚微量甚微,正常成人無論空腹或餐后正常成人無論空腹或餐后,其血清其血清CG濃度穩(wěn)定在低水濃度穩(wěn)定在低水平。平。其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介Part1. 甘膽酸甘膽酸其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介 當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，肝細(xì)胞攝取當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，肝細(xì)胞攝取CG能力下降，致使血中能力下降，致使血中CG含量增高；膽汁郁滯時(shí)

29、，肝臟排泄膽酸發(fā)生障礙，而返流血含量增高；膽汁郁滯時(shí)，肝臟排泄膽酸發(fā)生障礙，而返流血液循環(huán)的液循環(huán)的CG含量增高，也使血含量增高，也使血CG含量增高。因此，用含量增高。因此，用RIA（radioimmunoassay放射免疫測(cè)定法）法檢測(cè)血清甘膽酸放射免疫測(cè)定法）法檢測(cè)血清甘膽酸（SCG）是評(píng)價(jià)肝細(xì)胞功能及其肝膽系物質(zhì)循環(huán)功能的敏感）是評(píng)價(jià)肝細(xì)胞功能及其肝膽系物質(zhì)循環(huán)功能的敏感指標(biāo)之一。指標(biāo)之一。 臨床意義臨床意義（1）急性肝炎急性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、原發(fā)性肝癌、肝硬化、慢性活動(dòng)性肝炎、原發(fā)性肝癌、肝硬化、慢遷肝患者血慢遷肝患者血 CG均明顯高于正常人，且均明顯高于正常人，且呈遞性增高呈遞性

30、增高。（2）膽石癥伴黃疸患者膽管、膽囊排泄功能障礙引起血）膽石癥伴黃疸患者膽管、膽囊排泄功能障礙引起血清清CG顯著升高。顯著升高。（3）肝硬化、梗阻性肝病、腸）肝硬化、梗阻性肝病、腸肝循環(huán)障礙血清肝循環(huán)障礙血清CG水水平高于正常人。平高于正常人。 Part2. 纖維連接蛋白及其受體纖維連接蛋白及其受體 纖維連接蛋白纖維連接蛋白(FN)及其受體及其受體(FNR)：FN在體內(nèi)有在體內(nèi)有2種形種形式，即細(xì)胞型和血漿型。血漿型式，即細(xì)胞型和血漿型。血漿型FN絕大部分由肝細(xì)胞合成。絕大部分由肝細(xì)胞合成。在肝臟，在肝臟，F(xiàn)N 與膠原、與膠原、LN等共同組成基底膜成分。肝纖維化等共同組成基底膜成分。肝纖維化

31、及肝硬化時(shí)，肝組織中細(xì)胞型及肝硬化時(shí)，肝組織中細(xì)胞型FN含量明顯增加，但血漿含量明顯增加，但血漿FN水水平則明顯降低，后者反映了肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)功能的減退。平則明顯降低，后者反映了肝細(xì)胞合成蛋白質(zhì)功能的減退。故故血清血清FN對(duì)肝纖維化的判斷價(jià)值尚不能肯定對(duì)肝纖維化的判斷價(jià)值尚不能肯定。運(yùn)用。運(yùn)用ELISA法法研究慢性肝病病人血清研究慢性肝病病人血清FNR(FN受體受體B亞單位亞單位)，發(fā)現(xiàn)慢性活動(dòng)，發(fā)現(xiàn)慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、酒精性肝病和肝細(xì)胞癌病人血清性肝炎、肝硬化、酒精性肝病和肝細(xì)胞癌病人血清FNR水平水平顯著升高，并與血清顯著升高，并與血清PNP水平相關(guān)；血清水平相關(guān)；血清FNR水平與組

32、織水平與組織學(xué)肝纖維化程度的相關(guān)性，比與組織學(xué)上壞死、炎癥的相關(guān)學(xué)肝纖維化程度的相關(guān)性，比與組織學(xué)上壞死、炎癥的相關(guān)性更為密切，而血清性更為密切，而血清PNP則相反。表明血清則相反。表明血清FNR在反映肝在反映肝纖維化方面優(yōu)于血清纖維化方面優(yōu)于血清PNP，認(rèn)為其是反映肝纖維化的，認(rèn)為其是反映肝纖維化的1種有種有價(jià)值的指標(biāo)價(jià)值的指標(biāo).其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介Part3.型前膠原羧基端肽和氨基端肽型前膠原羧基端肽和氨基端肽 型前膠原羧基端肽型前膠原羧基端肽(PCP)和氨基端肽和氨基端肽(PNP)： 型型膠原的生物合成過程與膠原的生物合成過程與型膠原不同的是，型膠原不同的是，型前膠原形成

33、型前膠原形成原膠原過程中，其原膠原過程中，其PCP被完全切除。因此，理論上講，被完全切除。因此，理論上講，PCP可直接反映膠原生成。然而，研究表明，血清可直接反映膠原生成。然而，研究表明，血清PCP對(duì)區(qū)別酒精性肝炎和酒精性脂肪肝的準(zhǔn)確性不如血清對(duì)區(qū)別酒精性肝炎和酒精性脂肪肝的準(zhǔn)確性不如血清PNP；血吸蟲病患者早期血清血吸蟲病患者早期血清PCP增高的幅度大于晚期，而晚期增高的幅度大于晚期，而晚期患者血清患者血清PNP仍持續(xù)增高；肝外間質(zhì)組織仍持續(xù)增高；肝外間質(zhì)組織(如骨、皮膚如骨、皮膚)富含富含型膠原，在生長(zhǎng)年齡對(duì)血清含量影響較大，故目前已較少型膠原，在生長(zhǎng)年齡對(duì)血清含量影響較大，故目前已較少采

34、用。血清采用。血清PNP檢測(cè)的意義和價(jià)值與檢測(cè)的意義和價(jià)值與PCP相似。相似。其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介其他血清學(xué)指標(biāo)簡(jiǎn)介 肝纖維化的診斷依賴于肝活檢病理診斷，這種創(chuàng)傷性檢查具肝纖維化的診斷依賴于肝活檢病理診斷，這種創(chuàng)傷性檢查具有許多明顯不足，如具有創(chuàng)傷性、難以反復(fù)活檢、有一定的并發(fā)有許多明顯不足，如具有創(chuàng)傷性、難以反復(fù)活檢、有一定的并發(fā)癥（癥（1/3的患者有疼痛；的患者有疼痛；0.3的患者出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥，包括出血，的患者出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥，包括出血，氣胸，結(jié)腸和膽囊穿孔等；還有氣胸，結(jié)腸和膽囊穿孔等；還有0.03的死亡率）、病變?cè)诟闻K的死亡率）、病變?cè)诟闻K內(nèi)不均勻、存在觀察者自身和觀察者之間的差異（半定

35、量分期系內(nèi)不均勻、存在觀察者自身和觀察者之間的差異（半定量分期系統(tǒng)可誤差統(tǒng)可誤差1-2期）、標(biāo)本長(zhǎng)度不夠（長(zhǎng)度期）、標(biāo)本長(zhǎng)度不夠（長(zhǎng)度20mm和和10個(gè)匯管區(qū)）個(gè)匯管區(qū)）等易出現(xiàn)低估以及標(biāo)本破碎及肝包膜下纖維化可造成假象。因此等易出現(xiàn)低估以及標(biāo)本破碎及肝包膜下纖維化可造成假象。因此臨床上迫切需要尋找簡(jiǎn)單、易推廣的非創(chuàng)傷性診斷方法來診斷和臨床上迫切需要尋找簡(jiǎn)單、易推廣的非創(chuàng)傷性診斷方法來診斷和評(píng)估肝纖維化。多年來，人們一直在試圖尋找無創(chuàng)的血清學(xué)指標(biāo)評(píng)估肝纖維化。多年來，人們一直在試圖尋找無創(chuàng)的血清學(xué)指標(biāo)來評(píng)估慢性肝病的肝纖維化，包括常規(guī)生化、纖維化、細(xì)胞因子、來評(píng)估慢性肝病的肝纖維化，包括常規(guī)生

36、化、纖維化、細(xì)胞因子、免疫功能等，免疫功能等，但迄今為止，還沒有任何單項(xiàng)指標(biāo)能足夠敏感、準(zhǔn)但迄今為止，還沒有任何單項(xiàng)指標(biāo)能足夠敏感、準(zhǔn)確地反應(yīng)肝纖維化程度確地反應(yīng)肝纖維化程度。近十多年來，國(guó)外建立了多個(gè)以綜合多。近十多年來，國(guó)外建立了多個(gè)以綜合多項(xiàng)臨床、生化指標(biāo)及影像學(xué)為基礎(chǔ)的肝纖維化非創(chuàng)傷性診斷預(yù)測(cè)項(xiàng)臨床、生化指標(biāo)及影像學(xué)為基礎(chǔ)的肝纖維化非創(chuàng)傷性診斷預(yù)測(cè)模型。模型。 現(xiàn)在公認(rèn)的是這四項(xiàng)：現(xiàn)在公認(rèn)的是這四項(xiàng)：HA、LN、PNP、 C 。診斷肝纖。診斷肝纖的靈敏度為的靈敏度為60-70%，特異性為，特異性為90%以上。以上。肝纖維化診斷現(xiàn)狀肝纖維化診斷現(xiàn)狀肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題

37、問題一：?jiǎn)栴}一：肝纖維化血清學(xué)檢測(cè)有什么臨床意義？肝纖維化血清學(xué)檢測(cè)有什么臨床意義？ 解釋：解釋：肝纖維化檢測(cè)的方法常規(guī)的有三種，即病理學(xué)檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)的方法常規(guī)的有三種，即病理學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)。目前，病理學(xué)檢測(cè)依然是肝纖維影像學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)。目前，病理學(xué)檢測(cè)依然是肝纖維化檢測(cè)的化檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)”，而影像學(xué)和血清學(xué)作為輔助診斷的項(xiàng)，而影像學(xué)和血清學(xué)作為輔助診斷的項(xiàng)目。雖然病理學(xué)檢測(cè)的認(rèn)可度最高，但是因?yàn)榫哂袆?chuàng)傷性，目。雖然病理學(xué)檢測(cè)的認(rèn)可度最高，但是因?yàn)榫哂袆?chuàng)傷性，并且技術(shù)難度和風(fēng)險(xiǎn)度都很高而致使其應(yīng)用受到限制，特別并且技術(shù)難度和風(fēng)險(xiǎn)度都很高而致使其應(yīng)用受到限制，特

38、別是不能夠監(jiān)測(cè)患者的病情。影像學(xué)的發(fā)展對(duì)肝纖維化的診治是不能夠監(jiān)測(cè)患者的病情。影像學(xué)的發(fā)展對(duì)肝纖維化的診治非常地有意義，但是目前市場(chǎng)上產(chǎn)品的分辨率普遍偏低，這非常地有意義，但是目前市場(chǎng)上產(chǎn)品的分辨率普遍偏低，這對(duì)早期肝纖維化的發(fā)現(xiàn)和診治失去價(jià)值，從而使病人失去肝對(duì)早期肝纖維化的發(fā)現(xiàn)和診治失去價(jià)值，從而使病人失去肝纖維化治療的寶貴時(shí)間。血清學(xué)檢測(cè)則是對(duì)病理學(xué)檢測(cè)和影纖維化治療的寶貴時(shí)間。血清學(xué)檢測(cè)則是對(duì)病理學(xué)檢測(cè)和影像學(xué)檢測(cè)最有效的補(bǔ)充，不僅可以監(jiān)測(cè)病人病情，而且對(duì)早像學(xué)檢測(cè)最有效的補(bǔ)充，不僅可以監(jiān)測(cè)病人病情，而且對(duì)早期肝纖維化的發(fā)現(xiàn)和治療非常有價(jià)值。期肝纖維化的發(fā)現(xiàn)和治療非常有價(jià)值。肝纖四項(xiàng)檢

39、測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題問題二：?jiǎn)栴}二：肝纖維化檢測(cè)的血清學(xué)指標(biāo)非常多，為什么國(guó)內(nèi)多肝纖維化檢測(cè)的血清學(xué)指標(biāo)非常多，為什么國(guó)內(nèi)多采用透明質(zhì)酸、層粘連蛋白、采用透明質(zhì)酸、層粘連蛋白、型前膠原型前膠原N端肽和端肽和型膠原型膠原聯(lián)合檢測(cè)來診斷肝纖維化？聯(lián)合檢測(cè)來診斷肝纖維化？ 解釋：解釋：盡管肝纖維化發(fā)生時(shí)，許多血清學(xué)指標(biāo)可能都會(huì)升高，盡管肝纖維化發(fā)生時(shí)，許多血清學(xué)指標(biāo)可能都會(huì)升高，但是目前在血清學(xué)檢測(cè)肝纖維化領(lǐng)域，還沒有任何單項(xiàng)指標(biāo)但是目前在血清學(xué)檢測(cè)肝纖維化領(lǐng)域，還沒有任何單項(xiàng)指標(biāo)具有較高的敏感度和特異性，單項(xiàng)檢測(cè)的意義也需要結(jié)合患具有較高的敏感度和特異性，單項(xiàng)檢測(cè)的意義也需要結(jié)合患者自身

40、的其他情況綜合分析。所以現(xiàn)在研究者都在尋求最佳者自身的其他情況綜合分析。所以現(xiàn)在研究者都在尋求最佳的檢測(cè)指標(biāo)組合模式以提高檢測(cè)的敏感度和特異性。但是由的檢測(cè)指標(biāo)組合模式以提高檢測(cè)的敏感度和特異性。但是由于肝纖維化的病因很多，學(xué)術(shù)方面還沒有找到適合所有肝纖于肝纖維化的病因很多，學(xué)術(shù)方面還沒有找到適合所有肝纖維化病因的血清學(xué)指標(biāo)組合方案。肝纖維化四項(xiàng)產(chǎn)品是針對(duì)維化病因的血清學(xué)指標(biāo)組合方案。肝纖維化四項(xiàng)產(chǎn)品是針對(duì) 國(guó)內(nèi)患者人群的現(xiàn)狀開發(fā)出的具有相對(duì)較高臨床敏感度和臨國(guó)內(nèi)患者人群的現(xiàn)狀開發(fā)出的具有相對(duì)較高臨床敏感度和臨床特異性的產(chǎn)品。床特異性的產(chǎn)品。問題三：?jiǎn)栴}三：肝纖維化四項(xiàng)檢測(cè)的應(yīng)用范圍有哪些？肝

41、纖維化四項(xiàng)檢測(cè)的應(yīng)用范圍有哪些？ 解釋：解釋： 主要適用于：主要適用于： 1）門診上肝病病人的常規(guī)檢查，如慢性乙肝患者、脂肪）門診上肝病病人的常規(guī)檢查，如慢性乙肝患者、脂肪肝患者（包含酒精肝患者）、慢性丙肝患者等等；肝患者（包含酒精肝患者）、慢性丙肝患者等等； 2）臨床上對(duì)病人病情的監(jiān)測(cè)及對(duì)病人治療效果的觀察。）臨床上對(duì)病人病情的監(jiān)測(cè)及對(duì)病人治療效果的觀察。 3）抗纖維化藥物的臨床研究。例如森隆藥業(yè)的藥品安絡(luò)）抗纖維化藥物的臨床研究。例如森隆藥業(yè)的藥品安絡(luò)化纖宣傳資料上就推薦使用化纖宣傳資料上就推薦使用 “小肝穿小肝穿”的的HA判斷肝纖維化判斷肝纖維化的程度和觀察藥物的療效。的程度和觀察藥物的

42、療效。肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題問題四：?jiǎn)栴}四：為什么肝纖維化四項(xiàng)有些項(xiàng)目測(cè)定值非常高，而其他幾項(xiàng)指為什么肝纖維化四項(xiàng)有些項(xiàng)目測(cè)定值非常高，而其他幾項(xiàng)指標(biāo)正常？標(biāo)正常？ 解釋：解釋：肝纖維化四項(xiàng)檢測(cè)在國(guó)內(nèi)由來已久，雖然是國(guó)內(nèi)公認(rèn)的檢測(cè)肝纖維化四項(xiàng)檢測(cè)在國(guó)內(nèi)由來已久，雖然是國(guó)內(nèi)公認(rèn)的檢測(cè)肝纖維化比較敏感和特異的血清學(xué)指標(biāo)，但是單個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)肝纖維化肝纖維化比較敏感和特異的血清學(xué)指標(biāo)，但是單個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)肝纖維化的敏感度和特異性卻有很大差異。主要有兩個(gè)原因：的敏感度和特異性卻有很大差異。主要有兩個(gè)原因：1）肝纖維化的）肝纖維化的病因不同導(dǎo)致的差異；病因不同導(dǎo)致的差異；2）肝纖維化發(fā)展為不同

43、時(shí)期導(dǎo)致的差異。目）肝纖維化發(fā)展為不同時(shí)期導(dǎo)致的差異。目前對(duì)于這個(gè)問題學(xué)術(shù)還沒有非常詳盡的解釋，對(duì)于第二種原因我們通前對(duì)于這個(gè)問題學(xué)術(shù)還沒有非常詳盡的解釋，對(duì)于第二種原因我們通過一些臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)四項(xiàng)指標(biāo)都高的多是肝硬化、重肝和肝癌病人；過一些臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)四項(xiàng)指標(biāo)都高的多是肝硬化、重肝和肝癌病人；在肝纖維化早期透明質(zhì)酸和在肝纖維化早期透明質(zhì)酸和型前膠原型前膠原N端肽的敏感度更高；肝纖維端肽的敏感度更高；肝纖維化發(fā)展為肝硬化前的中晚期時(shí)層粘連蛋白和化發(fā)展為肝硬化前的中晚期時(shí)層粘連蛋白和型膠原快速升高；而處型膠原快速升高；而處于治療階段的病人隨著病情的好轉(zhuǎn)某些指標(biāo)會(huì)轉(zhuǎn)為正常，尤其是透明于治療階段的病

44、人隨著病情的好轉(zhuǎn)某些指標(biāo)會(huì)轉(zhuǎn)為正常，尤其是透明質(zhì)酸和質(zhì)酸和型前膠原型前膠原N端肽，它們對(duì)于肝纖維化病情的監(jiān)測(cè)效果更佳。端肽，它們對(duì)于肝纖維化病情的監(jiān)測(cè)效果更佳。需要提起需要提起注意注意的是：四項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)肝纖維化沒有固定的模式，因病因、的是：四項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)肝纖維化沒有固定的模式，因病因、因病情、因病人會(huì)有差異，需要結(jié)合單個(gè)項(xiàng)目的臨床意義和病人的其因病情、因病人會(huì)有差異，需要結(jié)合單個(gè)項(xiàng)目的臨床意義和病人的其他檢測(cè)指標(biāo)及相關(guān)癥狀分析病人病情，只通過結(jié)果的陰陽(yáng)性判定肝纖他檢測(cè)指標(biāo)及相關(guān)癥狀分析病人病情，只通過結(jié)果的陰陽(yáng)性判定肝纖維化是不科學(xué)的。維化是不科學(xué)的。肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題問題

45、五：?jiǎn)栴}五：?jiǎn)柺裁磳诱尺B蛋白和問什么層粘連蛋白和型膠原采用夾心兩步法？型膠原采用夾心兩步法？ 解釋：解釋：LN系生物大分子，不僅存在二十種左右的亞型，而且在血清系生物大分子，不僅存在二十種左右的亞型，而且在血清內(nèi)被降解至少內(nèi)被降解至少7個(gè)片段以上，理論上無法對(duì)其進(jìn)行最準(zhǔn)確的定量。由個(gè)片段以上，理論上無法對(duì)其進(jìn)行最準(zhǔn)確的定量。由于這個(gè)原因，競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定時(shí)，由于抗原降解時(shí)片段增多，而抗原位阻于這個(gè)原因，競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定時(shí)，由于抗原降解時(shí)片段增多，而抗原位阻減小，從而導(dǎo)致結(jié)果大大偏高（如放免類試劑），夾心一步法測(cè)定結(jié)減小，從而導(dǎo)致結(jié)果大大偏高（如放免類試劑），夾心一步法測(cè)定結(jié)果則由于片段干擾標(biāo)記抗體結(jié)合在固

46、相上而導(dǎo)致不同程度地偏低，可果則由于片段干擾標(biāo)記抗體結(jié)合在固相上而導(dǎo)致不同程度地偏低，可以說相關(guān)性很差，我們?cè)谘邪l(fā)過程中發(fā)現(xiàn)某些重癥肝硬化患者一步法以說相關(guān)性很差，我們?cè)谘邪l(fā)過程中發(fā)現(xiàn)某些重癥肝硬化患者一步法測(cè)定結(jié)果整體偏低證實(shí)這個(gè)現(xiàn)象，這樣的結(jié)果肯定無法應(yīng)用于病情監(jiān)測(cè)定結(jié)果整體偏低證實(shí)這個(gè)現(xiàn)象，這樣的結(jié)果肯定無法應(yīng)用于病情監(jiān)測(cè)。而我們最終確定的兩步法模式，則最大程度克服了這個(gè)問題，使測(cè)。而我們最終確定的兩步法模式，則最大程度克服了這個(gè)問題，使測(cè)定結(jié)果和病人病情有很高的相關(guān)性，從而可以應(yīng)用于病情的監(jiān)測(cè)。測(cè)定結(jié)果和病人病情有很高的相關(guān)性，從而可以應(yīng)用于病情的監(jiān)測(cè)。 在最初研究在最初研究C項(xiàng)目時(shí)，

47、曾發(fā)現(xiàn)血清稀釋一倍后，發(fā)光值成更大項(xiàng)目時(shí)，曾發(fā)現(xiàn)血清稀釋一倍后，發(fā)光值成更大比例地降低，通過查閱文獻(xiàn)，推測(cè)血清內(nèi)應(yīng)存在大量的單體形式或降比例地降低，通過查閱文獻(xiàn)，推測(cè)血清內(nèi)應(yīng)存在大量的單體形式或降解形式，因?yàn)橹挥羞@樣，才會(huì)造成測(cè)定結(jié)果受到極大的干擾。所以，解形式，因?yàn)橹挥羞@樣，才會(huì)造成測(cè)定結(jié)果受到極大的干擾。所以，采用競(jìng)爭(zhēng)法和夾心一步法測(cè)定采用競(jìng)爭(zhēng)法和夾心一步法測(cè)定C，結(jié)果一定不準(zhǔn)確。我們采用兩步，結(jié)果一定不準(zhǔn)確。我們采用兩步法操作，斜率在法操作，斜率在1左右，最大程度消除了單體及降解片段的干擾，結(jié)左右，最大程度消除了單體及降解片段的干擾，結(jié)果更可信，對(duì)于患者的病情監(jiān)測(cè)更有意義。果更可信，對(duì)于

48、患者的病情監(jiān)測(cè)更有意義。肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題問題六：?jiǎn)栴}六：肝纖維化四項(xiàng)操作時(shí)要特別注意的問題有哪些？會(huì)導(dǎo)肝纖維化四項(xiàng)操作時(shí)要特別注意的問題有哪些？會(huì)導(dǎo)致什么后果？致什么后果？ 解釋：解釋：操作時(shí)需要特別注意的問題有：操作時(shí)需要特別注意的問題有：1）所有項(xiàng)目盡量減小加樣誤差，建議采用貼壁的加樣方法，）所有項(xiàng)目盡量減小加樣誤差，建議采用貼壁的加樣方法，為了防止為了防止HA和和PNP產(chǎn)品加樣時(shí)污染，可采用加標(biāo)本時(shí)貼微產(chǎn)品加樣時(shí)污染，可采用加標(biāo)本時(shí)貼微孔下壁，加孔下壁，加HA結(jié)合蛋白溶液或結(jié)合蛋白溶液或PNP抗體溶液時(shí)貼微孔上壁抗體溶液時(shí)貼微孔上壁的方法，或者加完標(biāo)本時(shí)把板子水平

49、轉(zhuǎn)動(dòng)的方法，或者加完標(biāo)本時(shí)把板子水平轉(zhuǎn)動(dòng)180度再加度再加HA結(jié)合蛋結(jié)合蛋白溶液或白溶液或PNP抗體溶液。當(dāng)加樣不準(zhǔn)時(shí)會(huì)導(dǎo)致誤差加大，污抗體溶液。當(dāng)加樣不準(zhǔn)時(shí)會(huì)導(dǎo)致誤差加大，污染則導(dǎo)致測(cè)定錯(cuò)誤。染則導(dǎo)致測(cè)定錯(cuò)誤。2）溫育時(shí)使用水浴最佳，也可采用在水浴鍋內(nèi)放入試管架或）溫育時(shí)使用水浴最佳，也可采用在水浴鍋內(nèi)放入試管架或醫(yī)用托盤，上面鋪上濕紗布，反應(yīng)時(shí)將板子放在紗布上的做法，醫(yī)用托盤，上面鋪上濕紗布，反應(yīng)時(shí)將板子放在紗布上的做法，還可以采用在溫箱中放入鋪有濕紗布的醫(yī)用托盤的做法。以上還可以采用在溫箱中放入鋪有濕紗布的醫(yī)用托盤的做法。以上建議的溫育方法主要是為了消除邊緣效應(yīng)，提高測(cè)定的準(zhǔn)確性，建議的溫育方法主要是為了消除邊緣效應(yīng)，提高測(cè)定的準(zhǔn)確性，使可重復(fù)性增強(qiáng)。如果直接把微孔板放在鐵架子上，會(huì)使邊緣使可重復(fù)性增強(qiáng)。如果直接把微孔板放在鐵架子上，會(huì)使邊緣微孔受熱過快，發(fā)光值偏高，從而導(dǎo)致操作誤差加大。微孔受熱過快，發(fā)光值偏高，從而導(dǎo)致操作誤差加大。肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題肝纖四項(xiàng)檢測(cè)常見問題問題七：?jiǎn)栴}七：通常膠原類蛋白免疫原性差