一輪復習課件：選修1生物技術(shù)

1、 考點考點1 1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用知識要點知識要點1.1.酵母菌的兼性厭氧生活方式酵母菌的兼性厭氧生活方式2.2.發(fā)酵需要的適宜條件發(fā)酵需要的適宜條件3.3.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源酵母菌的代謝類型酵母菌的代謝類型 酵母菌是種兼性厭氧型微生物，在有氧時進行有氧呼酵母菌是種兼性厭氧型微生物，在有氧時進行有氧呼吸，快速繁殖。吸，快速繁殖。C C6 6H H1212O O6 6 + + 6O 6O2 26CO6CO2 2 + + 6H 6H2 2O O 無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵。無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵。C C6 6H H121

2、2O O6 62C2C2 2H H5 5OHOH + + 2CO 2CO2 2 酵母菌在酵母菌在2020O OC C、缺氧、呈酸性的條件下缺氧、呈酸性的條件下能大量繁能大量繁殖（絕大多數(shù)其他微生物在該環(huán)境條件下則會受到抑殖（絕大多數(shù)其他微生物在該環(huán)境條件下則會受到抑制）制）酵母菌發(fā)酵的條件酵母菌發(fā)酵的條件 傳統(tǒng)的發(fā)酵方法傳統(tǒng)的發(fā)酵方法酵母菌的來源酵母菌的來源閱讀教材第閱讀教材第3頁頁知識要點知識要點1.1.酒變醋的原理酒變醋的原理2.2.控制發(fā)酵條件的作用控制發(fā)酵條件的作用問題思考問題思考（為什么米酒有時會變酸）（為什么米酒有時會變酸）酒變醋的原理酒變醋的原理 在醋酸菌的作用下，酒首先被氧化成

3、在醋酸菌的作用下，酒首先被氧化成乙醛，進而被氧化成乙酸。乙醛，進而被氧化成乙酸。CHCH3 3COOH COOH H H2 2O OC C2 2H H5 5OHOH + + O O2 2 醋酸菌是種好氧細菌，對氧氣的含量特別的敏感。醋酸菌是種好氧細菌，對氧氣的含量特別的敏感。醋酸菌的最適生長溫度為醋酸菌的最適生長溫度為30303535O OC C。醋酸菌的代謝類型及生活條件醋酸菌的代謝類型及生活條件 請你根據(jù)下圖（實驗流程示意圖）和提供的資料請你根據(jù)下圖（實驗流程示意圖）和提供的資料（閱讀教材（閱讀教材34中的中的“發(fā)酵裝置的設(shè)計發(fā)酵裝置的設(shè)計”），思考有關(guān)），思考有關(guān)問題，然后進行實驗設(shè)計，

4、并寫出詳細的實驗方案。問題，然后進行實驗設(shè)計，并寫出詳細的實驗方案。挑選葡萄挑選葡萄沖洗沖洗榨汁榨汁酒精發(fā)酵酒精發(fā)酵果酒果酒醋酸發(fā)酵醋酸發(fā)酵果醋果醋 在進行實驗設(shè)計時，請認真閱讀教材第在進行實驗設(shè)計時，請認真閱讀教材第4 4頁中的頁中的“操操作提示作提示”。在設(shè)計方案中一定體現(xiàn)出。在設(shè)計方案中一定體現(xiàn)出“操作提示操作提示”中的有中的有關(guān)事項及關(guān)事項及“旁欄思考旁欄思考”中的有關(guān)問題。中的有關(guān)問題。 應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。 你認為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？

5、你認為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？ 需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮。例如，榨需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮。例如，榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時只需擰松瓶蓋、汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。不要完全揭開瓶蓋等。 制葡萄酒和葡萄醋時，為什么要將溫度分別制葡萄酒和葡萄醋時，為什么要將溫度分別控制在控制在1825 1825 和和3035 ？ 2020左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適

6、生長溫度在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為為30303535，因此要將溫度控制在，因此要將溫度控制在303035 35 。 制葡萄醋時，為什么要適時通過充氣口充氣？制葡萄醋時，為什么要適時通過充氣口充氣？ 醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與，因此要適時向發(fā)酵液中充氣。與，因此要適時向發(fā)酵液中充氣。制作葡萄酒和葡萄醋制作葡萄酒和葡萄醋 1.1.對發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機、盛葡萄汁的對發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機、盛葡萄汁的器皿器皿等等實驗用具進行清洗并消毒。先用溫水反復沖洗幾次實驗用具進行清洗并消毒。先用溫水反復沖洗幾次, ,再再用體

7、積分數(shù)為用體積分數(shù)為75%75%的酒精擦拭消毒，晾干待用的酒精擦拭消毒，晾干待用。 2.2.取葡萄取葡萄500g500g，用清水，用清水沖洗葡萄沖洗葡萄1 12 2遍遍，除去污，除去污物并去除枝梗和腐爛的子粒。物并去除枝梗和腐爛的子粒。 3.3.用榨汁機榨取葡萄汁后，將其裝入發(fā)酵瓶中（裝用榨汁機榨取葡萄汁后，將其裝入發(fā)酵瓶中（裝置參見教材圖置參見教材圖1-4b1-4b），或?qū)⑵咸汛虺蓾{后，用潔凈的紗），或?qū)⑵咸汛虺蓾{后，用潔凈的紗布過濾至發(fā)酵瓶中，蓋好瓶蓋。如果沒有合適的發(fā)酵裝布過濾至發(fā)酵瓶中，蓋好瓶蓋。如果沒有合適的發(fā)酵裝置，可以用置，可以用500 mL500 mL的塑料瓶替代的塑料瓶替代，

8、但注入的果汁量不要，但注入的果汁量不要超過塑料瓶總體積的超過塑料瓶總體積的2/32/3。 4. 4. 將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度下發(fā)酵。將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度下發(fā)酵。 5.5.由于發(fā)酵旺盛期由于發(fā)酵旺盛期COCO2 2的產(chǎn)量非常大，因此需要及時排的產(chǎn)量非常大，因此需要及時排氣，防止發(fā)酵瓶爆裂。如果使用簡易的發(fā)酵裝置，如瓶子氣，防止發(fā)酵瓶爆裂。如果使用簡易的發(fā)酵裝置，如瓶子（最好選用塑料瓶），（最好選用塑料瓶），每天要擰松瓶蓋每天要擰松瓶蓋2 24 4次，進行排氣次，進行排氣。 6-8d6-8d以后，可以開始進行取樣檢驗工作。例如，可以以后，可以開始進行取樣檢驗工作。例如，可以檢驗酒味、酒精的含量檢

9、驗酒味、酒精的含量、進行酵母菌的鏡檢等工作。、進行酵母菌的鏡檢等工作。 7.7.當果酒制成以后，可以在發(fā)酵液中加入醋酸菌或當果酒制成以后，可以在發(fā)酵液中加入醋酸菌或醋曲，然后將裝置轉(zhuǎn)移至醋曲，然后將裝置轉(zhuǎn)移至303035 35 的條件下發(fā)酵，適的條件下發(fā)酵，適時向發(fā)酵液中充氣。如果找不到醋酸菌菌種或醋曲，可時向發(fā)酵液中充氣。如果找不到醋酸菌菌種或醋曲，可嘗試自然接種，但效果不是很好。如果嘗試自然接種，但效果不是很好。如果沒有充氣裝置沒有充氣裝置，可以將瓶蓋打開，可以將瓶蓋打開，在瓶口蓋上紗布，以減少空氣中塵土在瓶口蓋上紗布，以減少空氣中塵土等的污染。等的污染。 發(fā)酵后取樣，通過發(fā)酵后取樣，通過

10、嗅味和品嘗進行初步鑒定嗅味和品嘗進行初步鑒定。此外，還可。此外，還可用顯微鏡觀察酵母菌，并用用顯微鏡觀察酵母菌，并用重鉻酸鉀檢驗酒精的存在重鉻酸鉀檢驗酒精的存在。如果實驗。如果實驗結(jié)果不理想，請學生分析失敗原因，然后重新制作。結(jié)果不理想，請學生分析失敗原因，然后重新制作。 首先通過觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗進行初步鑒定，再首先通過觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗進行初步鑒定，再通過檢測和比較醋酸發(fā)酵前后的通過檢測和比較醋酸發(fā)酵前后的pHpH作進一步的鑒定。此外，還作進一步的鑒定。此外，還可以通過在可以通過在顯微鏡下顯微鏡下觀察發(fā)酵液中是否有醋酸菌，并統(tǒng)計其數(shù)觀察發(fā)酵液中是否有醋酸菌，并統(tǒng)計其數(shù)量作進

11、一步鑒定。量作進一步鑒定。（一）（一）果酒的制作是否成功果酒的制作是否成功（二）（二）果醋的制作是否成功果醋的制作是否成功用重鉻酸鉀檢測酒精的產(chǎn)生用重鉻酸鉀檢測酒精的產(chǎn)生 原理原理：在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)：在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色?；揖G色。 操作：操作：試管試管發(fā)酵液（發(fā)酵液（2mL2mL）3 3滴滴H H2 2SOSO4 4（3mol/L3mol/L）3 3滴重鉻酸鉀（飽和溶液）滴重鉻酸鉀（飽和溶液）振蕩振蕩振蕩振蕩觀察觀察 為了更有說服力，檢測時可進行對照實驗為了更有說服力，檢測時可進行對照實驗 （用未經(jīng)發(fā)酵的葡萄汁取代發(fā)酵液作為對照組）（用未經(jīng)發(fā)酵的葡萄汁

12、取代發(fā)酵液作為對照組） 1. 1.為了獲得搞品質(zhì)的果酒，更好地抑制其他微為了獲得搞品質(zhì)的果酒，更好地抑制其他微生物的生長，可用人工培養(yǎng)的酵母菌。生物的生長，可用人工培養(yǎng)的酵母菌。 2. 2.制作果醋時，可直接在果酒中加入醋酸菌。制作果醋時，可直接在果酒中加入醋酸菌。 （具體內(nèi)容請閱讀教材第（具體內(nèi)容請閱讀教材第5 5頁頁“相關(guān)連接相關(guān)連接”）閱讀教材第閱讀教材第6 6頁，回答下列問題：頁，回答下列問題： 1. 1.豆腐長白毛是怎么一回事？豆腐長白毛是怎么一回事？ 豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲，此外在豆腐中還有匍匐菌絲。直立菌絲

13、，此外在豆腐中還有匍匐菌絲。 2. 2.材料中的王致和為什么要用鹽將長毛的豆腐腌起材料中的王致和為什么要用鹽將長毛的豆腐腌起來？來？ 鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。 3. 3.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？ 含水量為含水量為70%70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。的豆腐制腐乳，不易成形。 4. 4.吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮皮”。這層這層“皮皮”是怎樣形成的呢？它對人體有害嗎？它的作用是怎樣形成的呢

14、？它對人體有害嗎？它的作用是什么？是什么？ “皮皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲（匍匐是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲（匍匐菌絲），它能形成腐乳的菌絲），它能形成腐乳的“體體”，使腐乳成形。，使腐乳成形。“皮皮”對對人體無害。人體無害。 腐乳的制作過程中有多種微生物參與了腐乳的制作過程中有多種微生物參與了發(fā)酵（如青霉、曲霉、毛霉、酵母等），其發(fā)酵（如青霉、曲霉、毛霉、酵母等），其中起主要作用的是毛霉。中起主要作用的是毛霉。 他們能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成他們能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成多肽和多肽和氨基酸氨基酸，將脂肪分解成，將脂肪分解成甘油和脂肪酸甘油和脂肪酸。 請你根據(jù)下圖（實驗流程示意圖

15、）和提供的請你根據(jù)下圖（實驗流程示意圖）和提供的三個資料，結(jié)合教材第三個資料，結(jié)合教材第8頁中的頁中的“操作提示操作提示”進行進行實驗設(shè)計，并寫出詳細的實驗方案。實驗設(shè)計，并寫出詳細的實驗方案。讓豆腐上長出毛霉讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹽腌制加鹵湯裝瓶加鹵湯裝瓶密封腌制密封腌制1.鹽的用量：鹽的用量：（三）（三） 不同條件對腐乳風味和質(zhì)量的影響不同條件對腐乳風味和質(zhì)量的影響 鹽可抑制其他雜菌的生長，但鹽過多，太咸，鹽可抑制其他雜菌的生長，但鹽過多，太咸，也會影響腐乳的品質(zhì)。也會影響腐乳的品質(zhì)。2.酒的用量：酒的用量： 酒的含量應(yīng)控制在酒的含量應(yīng)控制在1212左右，酒的含量過左右，酒的含量過高會

16、使腐乳成熟的時間延長，含量過少不足以抑制微高會使腐乳成熟的時間延長，含量過少不足以抑制微生物生長，可能導致豆腐腐敗。生物生長，可能導致豆腐腐敗。3.發(fā)酵的溫度：發(fā)酵的溫度： 溫度應(yīng)控制在溫度應(yīng)控制在2020O OC C左右，溫度過高，其左右，溫度過高，其他微生物生長，可能導致豆腐腐敗，過低，腐乳成熟他微生物生長，可能導致豆腐腐敗，過低，腐乳成熟時間延長。時間延長。4.發(fā)酵的時間：發(fā)酵的時間： 時間過長過短都會影響腐乳的品質(zhì)。時間過長過短都會影響腐乳的品質(zhì)。制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 乳酸菌（種類很多，常見有乳酸鏈球菌乳酸菌（種類很多，常見有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌）是種厭

17、氧細菌，在無氧的條件和乳酸桿菌）是種厭氧細菌，在無氧的條件下，將葡萄糖分解成乳酸。下，將葡萄糖分解成乳酸。 亞硝酸鹽分布廣泛，在食品加工業(yè)中常用作食品添亞硝酸鹽分布廣泛，在食品加工業(yè)中常用作食品添加劑。加劑。 膳食中少量的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但膳食中少量的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但攝入總量達到攝入總量達到0.30.30.5g0.5g時會引起中毒；當攝入總量達到時會引起中毒；當攝入總量達到3g3g時會引起死亡。時會引起死亡。 通常情況下，人體內(nèi)的亞硝酸鹽將隨尿液排除出體通常情況下，人體內(nèi)的亞硝酸鹽將隨尿液排除出體外。在特定的條件下（適宜的外。在特定的條件下（適宜的pHpH、溫度和

18、一定的微生物作、溫度和一定的微生物作用）將轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢?，從而具有致癌、致畸變和致突變作用）將轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯醢罚瑥亩哂兄掳?、致畸變和致突變作用。用?請你根據(jù)下圖（實驗流程示意圖）和提供的二個資料，結(jié)合請你根據(jù)下圖（實驗流程示意圖）和提供的二個資料，結(jié)合教材第教材第10101212頁中的頁中的“操作提示操作提示”進行實驗設(shè)計，并寫出詳細的實進行實驗設(shè)計，并寫出詳細的實驗方案。驗方案。原料原料加工加工修整、洗滌、晾曬、切修整、洗滌、晾曬、切分成條狀或片狀分成條狀或片狀加鹽加鹽鹽水冷卻鹽水冷卻泡菜鹽水泡菜鹽水加調(diào)味加調(diào)味料裝壇料裝壇發(fā)酵發(fā)酵成品成品測定亞硝酸測定亞硝酸鹽含量鹽含量 見教材第見教材第10

19、10頁頁“泡菜壇的選擇泡菜壇的選擇” 問題問題：不合格的泡菜壇為什么會引起蔬菜的：不合格的泡菜壇為什么會引起蔬菜的 腐爛？腐爛？ 泡菜壇漏氣，會使需氧型微生物大量繁殖，引泡菜壇漏氣，會使需氧型微生物大量繁殖，引起蔬菜腐爛。起蔬菜腐爛。 見教材第見教材第1111頁頁“腌制的條件腌制的條件” 問題問題：為什么溫度過高、食鹽用量不足、腌：為什么溫度過高、食鹽用量不足、腌 制時間過短，容易造成細菌大量繁殖？制時間過短，容易造成細菌大量繁殖？ 溫度過高、食鹽用量不足，有利于其他細菌繁殖；溫度過高、食鹽用量不足，有利于其他細菌繁殖；腌制一定的時間以后，乳酸菌產(chǎn)生了大量的乳酸，從腌制一定的時間以后，乳酸菌產(chǎn)

20、生了大量的乳酸，從而抑制了其他微生物的生長，若腌制時間不夠，乳酸而抑制了其他微生物的生長，若腌制時間不夠，乳酸含量不高，則不能抑制其他微生物的繁殖。含量不高，則不能抑制其他微生物的繁殖。 1. 1.配置溶液配置溶液 （1 1）質(zhì)量濃度為）質(zhì)量濃度為4mg/mL4mg/mL的對氨基苯磺酸溶液：的對氨基苯磺酸溶液： 稱取稱取0.4g0.4g對氨基苯磺酸溶于對氨基苯磺酸溶于100mL100mL體積分數(shù)為體積分數(shù)為2020的的鹽酸溶液中，避光保存。鹽酸溶液中，避光保存。（2 2）質(zhì)量濃度為）質(zhì)量濃度為2mg/mL2mg/mL的的N N1 1萘基乙二胺鹽酸鹽溶萘基乙二胺鹽酸鹽溶液：液： 稱取稱取0.2g

21、 N0.2g N1 1萘基乙二胺鹽酸鹽溶于萘基乙二胺鹽酸鹽溶于100mL100mL的水中，的水中，避光保存。避光保存。 （3 3）質(zhì)量濃度為）質(zhì)量濃度為5ug/mL5ug/mL的亞硝酸鈉溶液：的亞硝酸鈉溶液： 稱取稱取0.1g0.1g于硅膠干燥器中干燥于硅膠干燥器中干燥2424小時的亞硝酸鈉，小時的亞硝酸鈉，用水定溶至用水定溶至500mL500mL。再取該溶液。再取該溶液5mL5mL稀釋至稀釋至200mL200mL。 （4 4）提取劑：）提取劑： 稱取稱取50g50g氯化鎘與氯化鎘與50g50g氯化鋇，溶解于氯化鋇，溶解于1000mL1000mL蒸蒸餾水中，用濃鹽酸調(diào)節(jié)餾水中，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH

22、pH至至1 1。 （5 5）質(zhì)量濃度為）質(zhì)量濃度為2.5mol/L2.5mol/L的氫氧化鈉溶液：的氫氧化鈉溶液： 稱取稱取10g10g氫氧化鈉，用水定溶至氫氧化鈉，用水定溶至100mL100mL。 將將125 g 125 g 硫酸鋁硫酸鋁AlAl2 2(SO(SO4 4)3 )3 18H18H2 2O O溶解在溶解在1000 1000 mL mL 蒸餾水中，形成氫氧化鋁膠狀物（為促進膠狀物的蒸餾水中，形成氫氧化鋁膠狀物（為促進膠狀物的形成，可適當加入氨水溶液，使形成，可適當加入氨水溶液，使pHpH為為4 4）。利用真空抽）。利用真空抽濾瓶對膠狀物進行真空抽濾，并用蒸餾水反復洗滌沉濾瓶對膠狀物

23、進行真空抽濾，并用蒸餾水反復洗滌沉淀，直至洗滌液分別用氯化鋇或硝酸銀溶液檢驗不發(fā)淀，直至洗滌液分別用氯化鋇或硝酸銀溶液檢驗不發(fā)生混濁為止。取下沉淀物，加適量蒸餾水，將膠狀物生混濁為止。取下沉淀物，加適量蒸餾水，將膠狀物沉淀調(diào)至稀漿糊狀，搗勻備用。沉淀調(diào)至稀漿糊狀，搗勻備用。 （6 6）氫氧化鋁乳液：）氫氧化鋁乳液：（氫氧化鋁膠體能吸附泡菜汁液中的雜質(zhì)，使泡菜汁透明（氫氧化鋁膠體能吸附泡菜汁液中的雜質(zhì)，使泡菜汁透明澄清，以便進行后續(xù)的顯色反應(yīng)。）澄清，以便進行后續(xù)的顯色反應(yīng)。） 2. 2.制備標準顯色液制備標準顯色液 用刻度移液管分別吸取用刻度移液管分別吸取0.20.2、0.40.4、0.60.

24、6、0.80.8、1.01.0和和1.5mL1.5mL的亞硝酸鈉溶液置于的亞硝酸鈉溶液置于50mL50mL的比色管中（相當于的比色管中（相當于1 1、2 2、3 3、4 4、5 5、和、和7.5ug7.5ug），另取一支比色管作為空白對照。），另取一支比色管作為空白對照。 在各管中分別加入在各管中分別加入2mL2mL對氨基苯磺酸溶液，搖勻后靜對氨基苯磺酸溶液，搖勻后靜置置3min3min，各加入，各加入1mL1mL的的N N1 1萘基乙二胺鹽酸鹽溶液，添萘基乙二胺鹽酸鹽溶液，添加蒸餾水至加蒸餾水至50mL50mL。 搖勻后觀察顏色搖勻后觀察顏色（亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸反應(yīng)后，（亞硝酸鹽與對氨基

25、苯磺酸反應(yīng)后，與與N N1 1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色）萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色）的梯度的梯度的變化。的變化。 3. 3.制備樣品處理液制備樣品處理液 將將3 3壇泡菜作好標記，分別作如下處理：壇泡菜作好標記，分別作如下處理： 稱取稱取0.4kg0.4kg泡菜，用榨汁機粉碎過濾，取泡菜，用榨汁機粉碎過濾，取100mL100mL濾液移濾液移至至500mL500mL容量瓶中，加容量瓶中，加200mL200mL蒸餾水，放在搖床上振蕩蒸餾水，放在搖床上振蕩1h1h，再加入再加入40mL40mL氫氧化鈉溶液，用蒸餾水定溶至氫氧化鈉溶液，用蒸餾水定溶至500mL500mL，過濾。，過濾。

26、取取60mL60mL濾液移至濾液移至100mL100mL容量瓶中，加入氫氧化鋁溶液，容量瓶中，加入氫氧化鋁溶液，定溶至定溶至100mL100mL，過濾（此時，過濾（此時濾濾液無色透明）。液無色透明）。 1.1.用顯微鏡觀察腌制泡菜鹽水中的乳酸菌：用顯微鏡觀察腌制泡菜鹽水中的乳酸菌： 用高倍鏡觀察，乳酸菌呈鏈球狀或桿狀，無核用高倍鏡觀察，乳酸菌呈鏈球狀或桿狀，無核 2.2.泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化的趨勢：泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化的趨勢： 泡菜中亞硝酸鹽的含量將隨腌制時間的延長泡菜中亞硝酸鹽的含量將隨腌制時間的延長而逐漸減少。而逐漸減少。 4.4.結(jié)合亞硝酸鹽含量的變化趨勢，分析泡菜的

27、結(jié)合亞硝酸鹽含量的變化趨勢，分析泡菜的腌制過程中，什么時候食用最好？為什么？腌制過程中，什么時候食用最好？為什么？ 腌制半個月以后再食用，因腌制腌制半個月以后再食用，因腌制10d10d以后亞硝以后亞硝酸鹽的含量已經(jīng)比較低了。酸鹽的含量已經(jīng)比較低了。 3.3.食品中亞硝酸鹽的含量標準：食品中亞硝酸鹽的含量標準： 泡菜中亞硝酸鹽的含量不能超過泡菜中亞硝酸鹽的含量不能超過20mg/kg20mg/kg。果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作生產(chǎn)果醋用的乳酸菌等細菌都具有的特征是（生產(chǎn)果醋用的乳酸菌等細菌都具有的特征是（ ）A都是異養(yǎng)生物都是異養(yǎng)生物 B僅在有水條件下繁殖僅在有水條件下繁殖C僅在有氧條件下生長

28、僅在有氧條件下生長 D生存溫度都超過生存溫度都超過80【解析解析】細菌的生長所必需的營養(yǎng)元素：碳源、氮源、細菌的生長所必需的營養(yǎng)元素：碳源、氮源、無機鹽、水生長因子，其中碳源、氮源、無機鹽、生無機鹽、水生長因子，其中碳源、氮源、無機鹽、生長因子因細菌種類的不同，所需的種類也不一樣，而長因子因細菌種類的不同，所需的種類也不一樣，而水是所有微生物生長共同所需要的物質(zhì)。細菌按同化水是所有微生物生長共同所需要的物質(zhì)。細菌按同化作用可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型兩種；按異化作用可分為作用可分為自養(yǎng)型和異養(yǎng)型兩種；按異化作用可分為需氧型和厭氧型。需氧型和厭氧型?！敬鸢复鸢浮緽發(fā)酵的概念發(fā)酵的概念以下不屬于發(fā)酵的是（

29、以下不屬于發(fā)酵的是（ ）A、利用需氧型青霉菌生產(chǎn)青霉素、利用需氧型青霉菌生產(chǎn)青霉素 B、缺氧時人的組織細胞產(chǎn)生乳酸、缺氧時人的組織細胞產(chǎn)生乳酸C、利用酵母菌的無氧呼吸獲得酒精、利用酵母菌的無氧呼吸獲得酒精 D、利用乳酸菌制作泡菜、利用乳酸菌制作泡菜【解析解析】解答該題首先要理解發(fā)酵的概念，發(fā)酵是指在生產(chǎn)解答該題首先要理解發(fā)酵的概念，發(fā)酵是指在生產(chǎn)實際中，人們通過微生物的培養(yǎng)，大量生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物的實際中，人們通過微生物的培養(yǎng)，大量生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物的過程。這里有過程。這里有3個要點，一是用于生產(chǎn)，二是培養(yǎng)微生物，個要點，一是用于生產(chǎn)，二是培養(yǎng)微生物，三是生產(chǎn)代謝產(chǎn)物。三是生產(chǎn)代謝產(chǎn)物?！敬鸢复鸢?/p>

30、】B發(fā)酵的過程、條件發(fā)酵的過程、條件下面對發(fā)酵過程中滅菌的理解不正確的是（下面對發(fā)酵過程中滅菌的理解不正確的是（ ）A、防止雜菌污染、防止雜菌污染 B、消滅雜菌、消滅雜菌C、培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌、培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D、滅菌必須在接種前、滅菌必須在接種前【解析解析】滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個重要環(huán)節(jié)。滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個重要環(huán)節(jié)。A說的是說的是滅菌的目的，因為發(fā)酵所用的菌種大多是單一純種，整個發(fā)滅菌的目的，因為發(fā)酵所用的菌種大多是單一純種，整個發(fā)酵過程不能混入其他微生物（雜菌），所以是正確的；酵過程不能混入其他微生物（雜菌），所以是正確的；B是是錯誤的，因為滅菌的目的是防止

31、雜菌污染，但實際操作中不錯誤的，因為滅菌的目的是防止雜菌污染，但實際操作中不可能只消滅雜菌可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物，而是消滅全部微生物。C是正確的，因為是正確的，因為與發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物與發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的。是滅菌后專門接種的。D也是正確的，滅菌必須在接種前，也是正確的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。如果接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。【答案答案】B腐乳和泡菜的制作腐乳和泡菜的制作某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不當泡菜腐爛。下某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不當泡菜腐爛。下列原因中

32、正確的是（列原因中正確的是（ ）罐口密閉缺氧，抑制了乳酸菌的生長繁殖罐口密閉缺氧，抑制了乳酸菌的生長繁殖 罐口封閉不嚴，氧氣抑制了乳酸菌的生長繁殖罐口封閉不嚴，氧氣抑制了乳酸菌的生長繁殖 罐口封閉不嚴，氧氣抑制了其他腐生菌的生長和罐口封閉不嚴，氧氣抑制了其他腐生菌的生長和繁殖繁殖 罐口封閉不嚴促進了需氧腐生菌的生長和繁殖罐口封閉不嚴促進了需氧腐生菌的生長和繁殖 A、 B、 C、 D、【答案答案】B考綱解讀考綱解讀n1. 微生物的實驗室培養(yǎng)n2. 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)n3. 分解纖維素的微生物的分離n4. 細菌的結(jié)構(gòu)和繁殖n5. 病毒的結(jié)構(gòu)和增殖n6. 微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能n7

33、. 培養(yǎng)基的配制原則n8. 培養(yǎng)基的種類 考點考點2 2 微生物的利用微生物的利用（一一）培養(yǎng)基培養(yǎng)基 人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)稱生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)稱 培養(yǎng)基培養(yǎng)基一般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮一般的培養(yǎng)基均需要碳源、氮源、無機鹽和水等源、無機鹽和水等培養(yǎng)基的基本成分培養(yǎng)基的基本成分 液體培養(yǎng)基（一般用錐形瓶盛裝）液體培養(yǎng)基（一般用錐形瓶盛裝） 固體培養(yǎng)基（一般用試管或培養(yǎng)皿盛裝），在液體固體培養(yǎng)基（一般用試管或培養(yǎng)皿盛裝），在液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上再添加瓊脂。培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上再添加瓊脂。 培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類2、

34、理解培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用（適當補充）按物理狀態(tài)不同劃分按物理狀態(tài)不同劃分固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基按化學組成不同劃分：合成培養(yǎng)基按化學組成不同劃分：合成培養(yǎng)基/天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基按用途不同劃分按用途不同劃分鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌只有尿素作為惟一氮源的培養(yǎng)基只有尿素作為惟一氮源的培養(yǎng)基 分離出分解尿素的細菌分離出分解尿素的細菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基 分離固氮菌分

35、離固氮菌只有纖維只有纖維素素作為惟一碳源的培養(yǎng)基作為惟一碳源的培養(yǎng)基 分離分解纖維素的細菌分離分解纖維素的細菌加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基 分離導入了目的基因的受體細胞分離導入了目的基因的受體細胞選擇培養(yǎng)基做一些適當?shù)难a充（二二）無菌技術(shù)無菌技術(shù) 無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法技術(shù)。所有防止雜菌污染的方法技術(shù)。 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，無菌技術(shù)就是防止雜菌污染的操作技術(shù)。無菌技術(shù)就是防止雜菌污染的操作技術(shù)。滅菌方法滅菌方法適用對象適用對象所需條件所需條

36、件滅菌時間滅菌時間灼燒滅菌灼燒滅菌接種金屬用具、試管接種金屬用具、試管口、瓶口口、瓶口在酒精燈火焰的充在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒分燃燒層灼燒直至燒紅直至燒紅干熱滅菌干熱滅菌能耐高溫并需要保持能耐高溫并需要保持干燥的玻璃器皿、金干燥的玻璃器皿、金屬用具等屬用具等干熱滅菌箱內(nèi)，干熱滅菌箱內(nèi)，160170OC中中12h高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌滅菌培養(yǎng)基、實驗器具等培養(yǎng)基、實驗器具等100kPa，121OC1530min消毒消毒 無菌技術(shù)的種類無菌技術(shù)的種類滅菌滅菌 使用較為溫和的方法（酒精、紫外線）來殺使用較為溫和的方法（酒精、紫外線）來殺死部分對人體有害的微生物。死部分對人體有害的微生物。 對實驗操

37、作的空間、操作者的衣著和手進行對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔消毒；清潔消毒； 將培養(yǎng)皿、接種用具進行滅菌；將培養(yǎng)皿、接種用具進行滅菌； 接種的過程要在酒精燈附近進行。接種的過程要在酒精燈附近進行。使用較為強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的所使用較為強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。有微生物（包括芽孢和孢子）。（一一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.1.牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方物質(zhì)物質(zhì)牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨NaClNaCl瓊脂瓊脂水水重量重量5g5g10g10g5g5g20g20g定溶至定溶至100mL100mL

38、2.2.基本過程：稱量基本過程：稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板 高壓鍋滅菌高壓鍋滅菌冷卻到冷卻到50OC左右時倒左右時倒基本過程：稱量基本過程：稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板分離分解尿素的細菌：培養(yǎng)基中加入尿素為分離分解尿素的細菌：培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源唯一氮源分離分解纖維素的微生物：培養(yǎng)基中加入纖分離分解纖維素的微生物：培養(yǎng)基中加入纖維素為唯一碳源維素為唯一碳源倒平板操作的討論倒平板操作的討論 1. 1.培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到5050O OC C時倒平板。用時倒平板。用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？ 用手觸摸錐形瓶，溫度下降到剛剛不燙手時用

39、手觸摸錐形瓶，溫度下降到剛剛不燙手時即可開始倒平板。即可開始倒平板。 2. 2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？ 通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。養(yǎng)基。 3.3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成

40、污染。養(yǎng)基，造成污染。 4.4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？為什么？ 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。（二二）純化大腸桿菌純化大腸桿菌 微生物接種方法常見的有平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物接種方法常見的有平板劃線法和稀釋涂布平板法。1.1.平板劃線法平板劃線法 通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)

41、劃線的操作，通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面（操作如教將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面（操作如教材材1818頁圖示）。頁圖示）。 在數(shù)次劃線后可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉在數(shù)次劃線后可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體稱眼可見的子細胞群體稱菌落菌落。優(yōu)點：可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離優(yōu)點：可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離缺點：不能計數(shù)缺點：不能計數(shù)一般用于分離微生物的純種一般用于分離微生物的純種 1、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼、為什么在操作的第一步以及劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需

42、要灼燒接種環(huán)？燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)？ 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后仍然要灼燒

43、接種環(huán)，。劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。感染操作者。平板劃線法的討論平板劃線法的討論 2.2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？行劃線？ 以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 3.3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？是從上一次劃線的末端開始劃線？ 劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每

44、次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。而來的菌落。 2. 2.稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)。的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)。 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將分在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。散成單個細胞，從而能在

45、培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。優(yōu)點：可以計數(shù)，可以觀察菌落特征。優(yōu)點：可以計數(shù)，可以觀察菌落特征。缺點：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥缺點：吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。效果不好，容易蔓延。系列稀釋操作系列稀釋操作101102103104105106 (1) (1)將分別盛有將分別盛有9mL9mL水的試管滅菌并編號。水的試管滅菌并編號。 (2) (2)用移液管吸取用移液管吸取1mL1mL培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，培養(yǎng)的菌液，注入第二支試管中，輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。輕壓橡皮頭，吹吸三次使之充分混勻。 (3) (3)從從10101 1倍稀釋的試管中吸取倍稀釋的試管中

46、吸取1mL1mL稀釋液，注入第三支試稀釋液，注入第三支試管中，重復步驟管中，重復步驟2 2，直至到第六支試管。，直至到第六支試管。涂布平板操作涂布平板操作(1)(1)將涂布器浸在盛有將涂布器浸在盛有7070的酒精的酒精的燒杯中。的燒杯中。(2)(2)取少量菌液（不超取少量菌液（不超0.1mL0.1mL），滴加到培養(yǎng)基表），滴加到培養(yǎng)基表面。面。(3)(3)將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷將沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷卻卻8 810s10s。(4)(4)用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作討論涂布平板操作討論 涂布平板的所有操

47、作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2 2步應(yīng)如何步應(yīng)如何進行無菌操作？進行無菌操作？ 應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌無菌”。例如，酒精燈與。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。管要在酒精燈火焰周圍；等等。 將接種后和未接種（作為對照組）的培養(yǎng)基均將接種后和未接種（作為對照組）的培養(yǎng)基均放到放到37370 0C C的恒溫箱中，培養(yǎng)的恒溫箱中，培養(yǎng)121

48、224h24h后進行觀察并后進行觀察并記錄結(jié)果。記錄結(jié)果。 1.1.未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？如果有菌未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？如果有菌落生長，說明了什么？落生長，說明了什么？ 未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 12 d2 d后無菌落生長，后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。 2.2.在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上，能否觀察到獨立的在接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上，能否觀察到獨立的菌落？它們的大小、形狀、顏色相似？菌落？它們的大小、形狀、顏色相似？ 如果接種成功的話，在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、如果接

49、種成功的話，在培養(yǎng)基的表面可觀察到大小、形狀、顏色相似的菌落。形狀、顏色相似的菌落。 3.3.培養(yǎng)培養(yǎng)12h12h和和24h24h后，觀察到的實驗結(jié)果相同嗎？如后，觀察到的實驗結(jié)果相同嗎？如果不同，請分析產(chǎn)生差異的原因？果不同，請分析產(chǎn)生差異的原因？ 培養(yǎng)培養(yǎng)12 h12 h與與24 h24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同。隨著時間的延長、菌落的不斷生長，使菌落不斷增大。同。隨著時間的延長、菌落的不斷生長，使菌落不斷增大。 4.4.如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落，請分析如果在培養(yǎng)基上觀察到不同形態(tài)的菌落，請分析其可能的原因。其可能的原因。 無菌操作未達

50、到要求：可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底；可無菌操作未達到要求：可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底；可能是接種時發(fā)生了污染；也可能是在培養(yǎng)的過程中受到了能是接種時發(fā)生了污染；也可能是在培養(yǎng)的過程中受到了污染。污染。 1.1.試管低溫臨時保存試管低溫臨時保存 將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成菌落將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成菌落后，置于后，置于4 4OC C的冰箱中保存（每隔的冰箱中保存（每隔3 36 6個月要重新接種培個月要重新接種培養(yǎng)后再保存）。養(yǎng)后再保存）。 2.2.甘油管長期保存甘油管長期保存 在在3mL3mL的甘油瓶中加入的甘油瓶中加入1mL1mL的甘油，高壓滅菌。將的甘油，高壓滅菌。

51、將1mL1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，充分混合后，置于培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，充分混合后，置于2020OC C的的冷凍箱中保存。冷凍箱中保存。（一一） 篩篩 選選 菌菌 株株原理原理 人為提供有利于目的菌株的條件（包括營養(yǎng)、溫度、人為提供有利于目的菌株的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pHpH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。等），同時抑制或阻止其他微生物生長。 在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)基?；?。 1.1.在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的

52、生長提供碳源和在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是是什么物質(zhì)？氮源的分別是是什么物質(zhì)？ 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。碳源是葡萄糖，氮源是尿素。 2.2.分析該配方的培養(yǎng)基對微生物是否具有篩選作用？分析該配方的培養(yǎng)基對微生物是否具有篩選作用？如果有，又是如何進行篩選的？如果有，又是如何進行篩選的？能分解尿素的細菌的篩選能分解尿素的細菌的篩選 閱讀教材閱讀教材2222頁第一大段相關(guān)內(nèi)容，并思考回答下列頁第一大段相關(guān)內(nèi)容，并思考回答下列問題：問題： 有篩選作用，它的氮源只含有尿素，只有能合成分有篩選作用，它的氮源只含有尿素，只有能合成分解尿素的脲酶的細菌才能生長。解尿素的脲酶的細菌才

53、能生長。（二二） 統(tǒng)計菌落數(shù)目統(tǒng)計菌落數(shù)目原理原理 運用運用稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)。來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)。 統(tǒng)計菌落數(shù)目的理論依據(jù)是：當樣品的稀釋度足夠高統(tǒng)計菌落數(shù)目的理論依據(jù)是：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。因此，恰當?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計菌落數(shù)目的一個活菌。因此，恰當?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵。為了保證結(jié)果準確，通常將幾個稀釋度下的菌液都關(guān)鍵。為了保證結(jié)果準確，通常將幾個稀釋度下的菌液都涂布在平板上，培養(yǎng)后再選擇菌落數(shù)在涂布在平板上，培養(yǎng)后再選擇菌落數(shù)在30

54、30 300300的平板的平板進進行計數(shù)。行計數(shù)。分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離（一一）纖維素與纖維素酶纖維素與纖維素酶：一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，廣泛地存在于植物的根、莖、葉等器官中。廣泛地存在于植物的根、莖、葉等器官中。：由微生物分泌的一種復合酶，包括由微生物分泌的一種復合酶，包括酶酶、酶和葡萄糖苷酶，由于它們的協(xié)同作用，最終將纖維素分酶和葡萄糖苷酶，由于它們的協(xié)同作用，最終將纖維素分解成葡萄糖。解成葡萄糖。纖維素纖維素酶酶酶酶纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖苷苷 酶酶葡萄糖葡萄糖取二支取二支20mL20mL的試管的試管實

55、驗：實驗：纖維素酶分解纖維素的實驗纖維素酶分解纖維素的實驗各加入一張濾紙條各加入一張濾紙條各加入各加入10mL0.1mol/L10mL0.1mol/L的醋酸的醋酸 醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液甲甲 乙乙在甲試管中加入在甲試管中加入1mL1mL蒸餾水，蒸餾水，乙試管加入乙試管加入1mL1mL纖維素酶纖維素酶將試管放在將試管放在140r/min140r/min的搖床上振蕩的搖床上振蕩1h1h結(jié)果：乙試管的濾紙條消失結(jié)果：乙試管的濾紙條消失 討論討論：乙試管的濾紙條為什么會消失？甲試管的作用是乙試管的濾紙條為什么會消失？甲試管的作用是什么？什么？ 剛果紅能與纖維素形成剛果紅能與纖維素形成紅色復紅色復合物

56、，而不與合物，而不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。（二二）纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選 用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物時，如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時，時，如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時，可說明該菌落是纖維素分解菌，因為它已將被剛可說明該菌落是纖維素分解菌，因為它已將被剛 果紅果紅 染成紅色的纖維素分解了。染成紅色的纖維素分解了。 請你根據(jù)實驗流程圖和提供的三個資料以及請你根據(jù)實驗流程圖和提供的三個資料以及“操作操作提示提示”，在思考有關(guān)問題的基礎(chǔ)上，設(shè)計出一個詳細的，在思考有

57、關(guān)問題的基礎(chǔ)上，設(shè)計出一個詳細的實驗方案。實驗方案。土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋 將樣品涂布在鑒別纖將樣品涂布在鑒別纖 維素分解菌的培養(yǎng)基上維素分解菌的培養(yǎng)基上 篩選產(chǎn)生透篩選產(chǎn)生透 明圈的菌落明圈的菌落n1、微生物的實驗室培養(yǎng)n2、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)n3、分解纖維素的微生物的分離DNA重組技術(shù)重組技術(shù)下列不屬于微生物的是 ( ) A藍藻和蘑菇 B葫蘆蘚和鐵線蕨 C噬菌體和黃曲霉 D放線菌和變形蟲【解析】病毒、原核生物(例如細菌、放線菌、支原體、藍藻)、真核類的藻類和真菌及原生動物都是微生物。而一般多細胞的植物與動物不屬于微生物，如葫蘆蘚是苔蘚植物，鐵線蕨是蕨

58、類植物，都屬于多細胞高等植物?！敬鸢浮緽微生物營養(yǎng)物質(zhì)微生物營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是（ ）A是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源 B凡碳源都提供能量C除水以外的無機物只提供無機鹽 D無機氮源也能提供能量【解析】不同的微生物，所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對微生物的具體情況具體分析。對于A、B選項，它的表述是不完整的。有的碳源只能是碳源，如CO2；有的碳源可同時是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同時是能源，如葡萄糖；有的碳源同時是氮源，還是能源，如蛋白胨。對于C選項，除水以外的無機物種類繁多，功能也多樣。如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHCO3可作自養(yǎng)型微生物的碳源和無機鹽；而Na

59、Cl則只能提供無機鹽。對于D選項，無機氮源提供能量的情況還是存在的，如NH3可為硝化細菌提供能量和氮源。【答案】D微生物與病毒的關(guān)系微生物與病毒的關(guān)系關(guān)于病毒增殖的敘述中，正確的是（ ）A病毒侵入宿主細胞后，合成一種蛋白質(zhì) B病毒的繁殖只在宿主的活細胞中進行C病毒的繁殖以核衣殼為單位 D在普通的培養(yǎng)基上能培養(yǎng)病毒【解析】解答此題需從以下幾方面入手分析：首先，病毒是營寄生方式生活，必須生活在活的細胞內(nèi)，不能獨立生活，所以在普通的培養(yǎng)基上不能生活。第二，繁殖時，病毒的核酸進入宿主細胞，利用宿生的成分合成子代個體，除了核衣殼，還應(yīng)包括該病毒的其他結(jié)構(gòu)。合成的蛋白質(zhì)不只是一種，應(yīng)該是多種，包括多種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)及物質(zhì)合成