第二章血液一般檢驗第三節(jié)血小板計數(shù)

1、 第二章第二章 血細(xì)胞手工檢驗血細(xì)胞手工檢驗 第四節(jié)血小板檢驗第四節(jié)血小板檢驗 福建醫(yī)科大學(xué)福建醫(yī)科大學(xué) 醫(yī)學(xué)檢驗系醫(yī)學(xué)檢驗系 第三節(jié)第三節(jié) 血小板檢查血小板檢查 概述概述 血小板（血小板（platelet）是由骨髓中成熟的巨核）是由骨髓中成熟的巨核細(xì)胞的胞質(zhì)分割而生成。其生成受細(xì)胞的胞質(zhì)分割而生成。其生成受血小板生成素血小板生成素（thrombopoietin，TPO）的調(diào)節(jié)。）的調(diào)節(jié)。 血小板具有血小板具有維持血管內(nèi)皮完整性的功能、聚維持血管內(nèi)皮完整性的功能、聚集、釋放、促凝和血塊收縮功能。集、釋放、促凝和血塊收縮功能。一、血小板計數(shù)一、血小板計數(shù) 血小板計數(shù)血小板計數(shù)（platelet

2、count, PLT）是測）是測定全血中血小板的濃度，定全血中血小板的濃度，是止血凝血檢是止血凝血檢查最常見的試驗之一。查最常見的試驗之一。血小板計數(shù)的適應(yīng)證為：血小板計數(shù)的適應(yīng)證為：不明原因的出血。不明原因的出血。排除出血性疾病。排除出血性疾病?；熀头暖煵∪说谋O(jiān)測?；熀头暖煵∪说谋O(jiān)測。疑為骨髓造血系統(tǒng)疾病。疑為骨髓造血系統(tǒng)疾病。疑為血小板疑為血小板生成減少生成減少、血小板、血小板破壞增加破壞增加、血小板、血小板消耗消耗過多過多或或反應(yīng)性血小板增多。反應(yīng)性血小板增多。血小板計數(shù)檢測原理血小板計數(shù)檢測原理 1血細(xì)胞分析儀計數(shù)法血細(xì)胞分析儀計數(shù)法 ： 簡便、快速、重復(fù)性好，準(zhǔn)確性高；可同時測簡

3、便、快速、重復(fù)性好，準(zhǔn)確性高；可同時測定血小板、定血小板、MPV及及PDW等多個指標(biāo)已廣泛用于臨等多個指標(biāo)已廣泛用于臨床。床。 但不能完全排除非血小板有形成分的干擾。但不能完全排除非血小板有形成分的干擾。 其異常結(jié)果仍需其異常結(jié)果仍需鏡檢復(fù)核鏡檢復(fù)核。方法學(xué)評價方法學(xué)評價 2.普通光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)法：普通光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)法： 原理原理 血液血液(20l)經(jīng)稀釋液經(jīng)稀釋液(0.38ml)稀釋和破壞紅細(xì)稀釋和破壞紅細(xì)胞后，充入血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi)，在顯微鏡下計數(shù)一胞后，充入血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi)，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)定范圍內(nèi)(中央大方格內(nèi)的中央及四角共中央大方格內(nèi)的中央及四角共5個中方個中方格格)的血小

4、板數(shù)量，經(jīng)換算求出每升血液中的血小的血小板數(shù)量，經(jīng)換算求出每升血液中的血小板數(shù)量。板數(shù)量。 參考值：（參考值：（100300）109/L 2.普通光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)法：普通光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)法： 優(yōu)質(zhì)的優(yōu)質(zhì)的稀釋液應(yīng)同時是：稀釋液應(yīng)同時是： 1）有效地阻止凝血；）有效地阻止凝血； 2）很快地固定血小板，防止血小板聚集和變）很快地固定血小板，防止血小板聚集和變形；形； 3）溶血稀釋液要求紅細(xì)胞破壞完全；）溶血稀釋液要求紅細(xì)胞破壞完全； 4）組成簡單、容易保存、不長細(xì)菌。）組成簡單、容易保存、不長細(xì)菌。 2.普通光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)法：普通光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)法： 稀釋液稀釋液草酸銨草酸銨 ：對紅細(xì)胞

5、破壞力強(qiáng)，血小板形態(tài)清楚。為常對紅細(xì)胞破壞力強(qiáng)，血小板形態(tài)清楚。為常規(guī)計數(shù)方法，規(guī)計數(shù)方法，草酸銨為首選稀釋液。草酸銨為首選稀釋液。復(fù)方尿素：復(fù)方尿素：尿素可溶解紅細(xì)胞、甲醛可固定血小板和防尿素可溶解紅細(xì)胞、甲醛可固定血小板和防腐，稀釋后血小板脹大易辨認(rèn)腐，稀釋后血小板脹大易辨認(rèn) 尿素容易分解，尿素容易分解，試劑容試劑容易失效。尿素不能完全破壞紅細(xì)胞易失效。尿素不能完全破壞紅細(xì)胞 。不破壞紅細(xì)胞稀釋法：不破壞紅細(xì)胞稀釋法：復(fù)方碘稀釋液。紅細(xì)胞未破壞，復(fù)方碘稀釋液。紅細(xì)胞未破壞，試劑試劑 易長菌，干擾計數(shù)，已被淘汰易長菌，干擾計數(shù)，已被淘汰 。 4.流式細(xì)胞儀法：流式細(xì)胞儀法：特異、準(zhǔn)確、但需特

6、殊儀器和特異、準(zhǔn)確、但需特殊儀器和試劑。是目前血小板計數(shù)試劑。是目前血小板計數(shù)參考方法。參考方法。3.相差顯微鏡直接計數(shù)法：相差顯微鏡直接計數(shù)法： 準(zhǔn)確性高，血小板準(zhǔn)確性高，血小板易于識別，并可于照相后核對計數(shù)結(jié)果，是手易于識別，并可于照相后核對計數(shù)結(jié)果，是手工血小板計數(shù)的參考方法。但由于所用儀器昂工血小板計數(shù)的參考方法。但由于所用儀器昂貴，臨床上較少選用。貴，臨床上較少選用。質(zhì)量保證質(zhì)量保證 檢測前檢測前采血采血抗凝劑抗凝劑儲存時間儲存時間 檢測中檢測中器器 材材充池前充池前 搖動血小板懸液搖動血小板懸液2min或或200次以上次以上充充 池池充池后充池后 靜置靜置15min 采血后采血后1

7、h內(nèi)完成計數(shù)內(nèi)完成計數(shù)計計 數(shù)數(shù) 光線光線 非血小板非血小板 病理干擾病理干擾 檢測后檢測后核準(zhǔn)血小板計數(shù)的方法：核準(zhǔn)血小板計數(shù)的方法：用同用同1份血標(biāo)本制備良好的血涂片，觀察血小板數(shù)量、份血標(biāo)本制備良好的血涂片，觀察血小板數(shù)量、形態(tài)和分布情況，進(jìn)行核對（正?？梢娦螒B(tài)和分布情況，進(jìn)行核對（正?？梢?15個個/油鏡視野、油鏡視野、無大量大型血小板；無異常增多的紅、白細(xì)胞碎片）。無大量大型血小板；無異常增多的紅、白細(xì)胞碎片）。用血小板計數(shù)的參考方法核對計數(shù)結(jié)果。用血小板計數(shù)的參考方法核對計數(shù)結(jié)果。每份標(biāo)本最好做每份標(biāo)本最好做2次計數(shù)，若次計數(shù)，若2次計數(shù)誤差小于次計數(shù)誤差小于10%，取其均值報告；

8、若計數(shù)誤差大于取其均值報告；若計數(shù)誤差大于10%，應(yīng)做第，應(yīng)做第3次計數(shù)，次計數(shù)，取取2次相近結(jié)果的均值報告。次相近結(jié)果的均值報告。生理性改變生理性改變 每天可有每天可有6%10%的變化。的變化。臨床意義臨床意義增多見于增多見于：午后、冬季、高原居民、月經(jīng)后、妊：午后、冬季、高原居民、月經(jīng)后、妊娠中晚期運(yùn)動、飽餐后靜脈血。娠中晚期運(yùn)動、飽餐后靜脈血。減少見于：減少見于：早晨、春季、平原居民、月經(jīng)前、早晨、春季、平原居民、月經(jīng)前、分娩后、休息后、毛細(xì)血管血。分娩后、休息后、毛細(xì)血管血。 病理性變化病理性變化 減少與增多減少與增多 血小板減少：血小板減少：血小板低于血小板低于100109/L時為時

9、為血小板減少血小板減少（thrombocytopenia），為臨床上），為臨床上出血主要原因之一出血主要原因之一。當(dāng)血小板當(dāng)血小板低于（低于（2050）109/L時，可引起創(chuàng)傷出血時，可引起創(chuàng)傷出血或手術(shù)后出血；或手術(shù)后出血；血小板低于血小板低于20109/L時有較嚴(yán)重出血。時有較嚴(yán)重出血。輸注血小板的指征：輸注血小板的指征：血小板血小板低于低于20109/L，有，有出血難止癥狀。出血難止癥狀。病理性血小板減少的原因及意義病理性血小板減少的原因及意義 血小板增多：血小板增多：血小板超過血小板超過400109/L時為時為血小板血小板增多增多（thrombocytosis），血小板大于），血小板大

10、于1000109/L常有常有血栓形成的危險血栓形成的危險。在原因未明。在原因未明的血小板增多的病人中，約有的血小板增多的病人中，約有50%為惡性疾病。為惡性疾病。 病理性血小板增多的原因及意義病理性血小板增多的原因及意義 二、血小板形態(tài)檢查二、血小板形態(tài)檢查 （一）正常血小板形態(tài)（一）正常血小板形態(tài) 正常靜息狀態(tài)下，血小板為雙面微凸的圓盤形，正常靜息狀態(tài)下，血小板為雙面微凸的圓盤形，直直徑為徑為1.53m、平均體積為、平均體積為7.2fl的非細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分。的非細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分。 染色后鏡下可呈散在或成簇分布，圓形、橢圓或不規(guī)染色后鏡下可呈散在或成簇分布，圓形、橢圓或不規(guī)則。則。胞質(zhì)呈淡藍(lán)色或淡紅胞

11、質(zhì)呈淡藍(lán)色或淡紅，內(nèi)含較多的細(xì)小，內(nèi)含較多的細(xì)小紫紅色顆粒。紫紅色顆粒。血涂片上，為紅細(xì)胞數(shù)的血涂片上，為紅細(xì)胞數(shù)的1/301/20，通常每個通常每個油鏡油鏡視視野可見野可見725個，個，分散或分散或35成群分布。成群分布。 參考值：參考值： （100300）109/L （二）異常血小板形態(tài)（二）異常血小板形態(tài) 1.大小異常大小異常 1）大血小板：）大血小板：直徑直徑7m、常為、常為720m。見于。見于巨大巨大血小板綜合征、血小板無力癥、血小板綜合征、血小板無力癥、ITP、MDS等。等。2）小血小板：）小血小板：直徑直徑1.5m。假冒于缺鐵貧、再障。假冒于缺鐵貧、再障。2.形態(tài)異常：形態(tài)異常：超過超過10%才有臨床意義。才有臨床意義。1）血小板顆粒減少）血小板顆粒減少2）血小板衛(wèi)星現(xiàn)象血小板衛(wèi)星現(xiàn)象3）血小板）血小板“黏附黏附”紅細(xì)胞紅細(xì)胞 3.聚集性和分布異常聚集性和分布異常 正常抗凝血外周血涂片可見正?？鼓庵苎科梢?5個聚集成簇或成團(tuán)，個聚集成簇或成團(tuán)，聚集與散在血小板比為聚集與散在血小板比為20：11）血小板聚集：）血小板聚集：多為血小板增多，大片聚集。多為血小板增多，大片聚集。 見于：特發(fā)性血小板增多癥、慢粒。見于：特發(fā)性血小板增多癥、慢粒。2）血小板）血小板成團(tuán)或聚集減少：多為血小板減少。成團(tuán)或聚集減少：多為血小板減少。