臨床微生物室標(biāo)本處理及操作流程

1、InfectionControlTeam臨床標(biāo)本臨床標(biāo)本留取留取環(huán)節(jié)一環(huán)節(jié)一運送運送實驗室實驗室環(huán)節(jié)二環(huán)節(jié)二分析前分析前分析中分析中標(biāo)本合格？標(biāo)本合格？環(huán)節(jié)三環(huán)節(jié)三接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)檢測檢測門診門診病房病房診所診所合格合格環(huán)節(jié)四環(huán)節(jié)四 環(huán)節(jié)五環(huán)節(jié)五分析后分析后報告報告環(huán)節(jié)六環(huán)節(jié)六 IQ培養(yǎng)基、冰箱培養(yǎng)基、冰箱溫箱、氣體溫箱、氣體直接檢測直接檢測儀器設(shè)備、試劑儀器設(shè)備、試劑EQA標(biāo)本標(biāo)本標(biāo)本合格標(biāo)本合格判定判定SOP對每個環(huán)節(jié)進(jìn)行控制，構(gòu)成質(zhì)量保證體系對每個環(huán)節(jié)進(jìn)行控制，構(gòu)成質(zhì)量保證體系+藥敏試驗藥敏試驗如何看待如何看待CSFCSF的培養(yǎng)結(jié)果？的培養(yǎng)結(jié)果？（1 1）如如果同期送檢的血培養(yǎng)大于果同期

2、送檢的血培養(yǎng)大于3天報警，通常不是很緊急天報警，通常不是很緊急（2）假如仍不確定，）假如仍不確定， 聯(lián)系微生物室值日主管，了解革蘭聯(lián)系微生物室值日主管，了解革蘭氏染色涂片的相關(guān)情況。氏染色涂片的相關(guān)情況。（3）必須綜合生化和血液學(xué)結(jié)果必須綜合生化和血液學(xué)結(jié)果（4）如果如果CSF常規(guī)檢查報告中沒有中性粒細(xì)胞或腦脊液的其他常規(guī)檢查報告中沒有中性粒細(xì)胞或腦脊液的其他指標(biāo)正常，對報告的致病菌應(yīng)保持懷疑，可能送檢污染。指標(biāo)正常，對報告的致病菌應(yīng)保持懷疑，可能送檢污染。自然咳痰自然咳痰誘導(dǎo)痰誘導(dǎo)痰 氣管內(nèi)吸取物氣管內(nèi)吸取物支氣管肺泡灌洗液支氣管肺泡灌洗液保護(hù)性毛刷保護(hù)性毛刷支氣管灌洗液支氣管灌洗液 肺部組

3、織肺部組織帶血痰帶血痰唾液唾液oror誘導(dǎo)痰誘導(dǎo)痰 (?)(?)膿痰膿痰粘液樣痰粘液樣痰用革蘭氏染色來評估用革蘭氏染色來評估 呼吸道標(biāo)本是否合格呼吸道標(biāo)本是否合格粘液絲粘液絲細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌胞內(nèi)細(xì)菌胞內(nèi)細(xì)菌 提示感染提示感染柱狀纖毛上皮細(xì)胞柱狀纖毛上皮細(xì)胞肺泡巨噬細(xì)胞肺泡巨噬細(xì)胞滑石顆?；w粒淀粉樣小體淀粉樣小體見于遷延長時間的呼吸道疾病見于遷延長時間的呼吸道疾病彈性纖維彈性纖維庫什曼螺旋體庫什曼螺旋體呈鏈排列的革蘭陽性球菌和革蘭陰性球桿菌。缺乏鱗狀上呈鏈排列的革蘭陽性球菌和革蘭陰性球桿菌。缺乏鱗狀上皮細(xì)胞提示混合厭氧菌感染皮細(xì)胞提示混合厭氧菌感染你看見多少種形態(tài)？你看見多少種形態(tài)？呼吸

4、道標(biāo)本中未被染色的，有折射的桿菌呼吸道標(biāo)本中未被染色的，有折射的桿菌= =抗酸桿菌抗酸桿菌呈鏈排列的革蘭陽性球菌？或革蘭陽性分枝桿菌？呈鏈排列的革蘭陽性球菌？或革蘭陽性分枝桿菌？肺中的結(jié)節(jié)吸出物，不規(guī)則肺中的結(jié)節(jié)吸出物，不規(guī)則“球菌球菌”，分叉，無短鏈，鏈的末端的呈尖狀，都，分叉，無短鏈，鏈的末端的呈尖狀，都證明是分枝狀的革蘭陽性桿菌，可能是放線菌或諾卡菌（通常來自腦或肺組織證明是分枝狀的革蘭陽性桿菌，可能是放線菌或諾卡菌（通常來自腦或肺組織的標(biāo)本）的標(biāo)本）呼吸道標(biāo)本的涂片評估模呼吸道標(biāo)本的涂片評估模式式每年每年850萬例尿路感染萬例尿路感染, 90%為女為女性性1/2.5個婦女在一生中會得個

5、婦女在一生中會得UTI下行性感染：血流下行性感染：血流腎臟腎臟膀胱膀胱（金黃色葡萄球菌，酵母菌，結(jié)（金黃色葡萄球菌，酵母菌，結(jié)核分枝桿菌）核分枝桿菌）上行性感染：尿道上行性感染：尿道膀胱膀胱腎盂腎盂 血流血流用于尿液培養(yǎng)的標(biāo)本用于尿液培養(yǎng)的標(biāo)本 腎活檢或腎抽吸物（外科）腎活檢或腎抽吸物（外科） 恥骨上膀胱抽吸物恥骨上膀胱抽吸物（孕婦，嬰兒，全膀胱）（孕婦，嬰兒，全膀胱） 微導(dǎo)管尿（內(nèi)部導(dǎo)管和外部導(dǎo)管）微導(dǎo)管尿（內(nèi)部導(dǎo)管和外部導(dǎo)管）- -老年人老年人 中段尿，清潔留取中段尿，清潔留取急診成年人急診成年人 留置導(dǎo)尿管中采集的標(biāo)本（經(jīng)常被三種以上細(xì)菌污染）留置導(dǎo)尿管中采集的標(biāo)本（經(jīng)常被三種以上細(xì)菌污

6、染）尿液運輸方法尿液運輸方法如不能及時送檢，需冷藏。如不能及時送檢，需冷藏。4 4小時延遲送檢，須廢棄標(biāo)本小時延遲送檢，須廢棄標(biāo)本。 過夜培養(yǎng)過夜培養(yǎng)否否自然排尿自然排尿是是繼續(xù)培養(yǎng)；繼續(xù)培養(yǎng)；隨后觀察；發(fā)送初步的培養(yǎng)陰性報告隨后觀察；發(fā)送初步的培養(yǎng)陰性報告24小時后仍不生長則發(fā)出小時后仍不生長則發(fā)出最終的生長陰性報告最終的生長陰性報告 105 CFU/ml1 organism一種以上細(xì)菌生長一種以上細(xì)菌生長多種腸道細(xì)菌或混雜的皮膚菌叢；重新采集清潔標(biāo)本多種腸道細(xì)菌或混雜的皮膚菌叢；重新采集清潔標(biāo)本純培養(yǎng)的機(jī)會致病菌純培養(yǎng)的機(jī)會致病菌（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的注釋）（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的注

7、釋）ID & Suscept.鑒定鑒定&藥敏藥敏 105 CFU/ml)1-2種機(jī)會致病菌種機(jī)會致病菌（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的注釋）（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的注釋）進(jìn)行鑒定和藥敏，若數(shù)量進(jìn)行鑒定和藥敏，若數(shù)量 104 CFU/ml一種以上細(xì)菌生長一種以上細(xì)菌生長多種腸道細(xì)菌或混雜的皮膚菌叢；重新采集清多種腸道細(xì)菌或混雜的皮膚菌叢；重新采集清潔標(biāo)本潔標(biāo)本 純培養(yǎng)的機(jī)會致病菌純培養(yǎng)的機(jī)會致病菌（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的注釋）（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的注釋）鑒定鑒定& &藥敏藥敏 104 CFU/ml1-21-2種機(jī)會致病菌（查閱凝固酶陰性葡萄球菌的以上相同注釋種機(jī)會致病菌（查閱凝固酶陰性葡萄球菌

8、的以上相同注釋進(jìn)行鑒定和藥敏，若數(shù)量進(jìn)行鑒定和藥敏，若數(shù)量 10 104 4CFU/mlCFU/ml，仍然對可能的致病菌進(jìn)行操作仍然對可能的致病菌進(jìn)行操作檢出檢出三種或以上的機(jī)會致病菌包括酵母菌三種或以上的機(jī)會致病菌包括酵母菌（病人的首份尿標(biāo)本顯示如此的培養(yǎng)結(jié)果（病人的首份尿標(biāo)本顯示如此的培養(yǎng)結(jié)果，若重復(fù)的尿標(biāo)本仍然培養(yǎng)出相同的細(xì)菌，若重復(fù)的尿標(biāo)本仍然培養(yǎng)出相同的細(xì)菌，則需要對菌株進(jìn)行操作），則需要對菌株進(jìn)行操作）多種腸道細(xì)菌或混雜的皮膚菌叢；多種腸道細(xì)菌或混雜的皮膚菌叢；重新采集清潔標(biāo)本重新采集清潔標(biāo)本. .若為腐生葡萄球菌，若為腐生葡萄球菌，則處理與其他致病菌相同；則處理與其他致病菌相同；

9、其他的凝固酶陰性葡萄球菌則視為污其他的凝固酶陰性葡萄球菌則視為污染染評價尿培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)評價尿培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)宮頸或?qū)m頸內(nèi)部：淋病奈瑟菌，沙眼衣宮頸或?qū)m頸內(nèi)部：淋病奈瑟菌，沙眼衣原體，人乳頭瘤病毒原體，人乳頭瘤病毒陰道高位拭子：酵母菌，陰道毛滴陰道高位拭子：酵母菌，陰道毛滴蟲，細(xì)菌性陰道感染蟲，細(xì)菌性陰道感染肛門或直腸拭子：淋病奈瑟菌，肛門或直腸拭子：淋病奈瑟菌，B B群鏈球群鏈球菌（菌（+ +陰道拭子）陰道拭子）Adriaanse et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective

10、 study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531538在孕期在孕期3537周時的普查培養(yǎng)周時的普查培養(yǎng)陰道和直腸拭子陰道和直腸拭子肉湯過夜增菌肉湯過夜增菌接種于血平板上接種于血平板上再孵育過夜和鑒定可疑菌落再孵育過夜和鑒定可疑菌落任何有任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好預(yù)菌尿的患者需要在分娩期做好預(yù)防防分娩時快速檢測敏感性不夠分娩時快速檢測敏感性不夠禁止冷藏禁止冷藏組織和抽吸物涂片檢查組織和抽吸物涂片檢查使用透射光觀察使用透射光觀察 ： Staphylococcus spp. 葡萄球菌屬葡萄球菌屬 linezolid利奈唑烷利奈唑烷 oxacillin苯