第四章藥物含量測(cè)定方法驗(yàn)證2

1、 第四章第四章 藥物含量測(cè)定方法驗(yàn)證藥物含量測(cè)定方法驗(yàn)證 基本要求基本要求 一、掌握一、掌握 測(cè)定藥物含量的容量、光譜和色譜測(cè)定藥物含量的容量、光譜和色譜分析法，滴定度與含量計(jì)算，色譜分析法，滴定度與含量計(jì)算，色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的內(nèi)容、要求及相系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的內(nèi)容、要求及相關(guān)計(jì)算。藥物分析方法驗(yàn)證與內(nèi)容。關(guān)計(jì)算。藥物分析方法驗(yàn)證與內(nèi)容。 二、熟悉二、熟悉 定量分析樣品的前處理方法。定量分析樣品的前處理方法。 第二節(jié)第二節(jié) 定量分析樣品的前處理方法定量分析樣品的前處理方法 一、概述一、概述 1.1.為什么要對(duì)定量分析的樣品進(jìn)行前處理？為什么要對(duì)定量分析的樣品進(jìn)行前處理？ 含鹵素、氮、硫、磷等有機(jī)

2、藥物含鹵素、氮、硫、磷等有機(jī)藥物 R-X （F，Cl, Br, I，N ） 金屬有機(jī)藥物金屬有機(jī)藥物 R-O-Me（有機(jī)酸或酚的有機(jī)酸或酚的 含金屬有機(jī)藥物含金屬有機(jī)藥物 金屬鹽；結(jié)合不牢固）金屬鹽；結(jié)合不牢固） 有機(jī)金屬藥物有機(jī)金屬藥物 R-Me （結(jié)合牢固）結(jié)合牢固） 2. 常用的處理方法常用的處理方法 不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 藥物分析中常用的分析方法藥物分析中常用的分析方法 經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法（一）直接測(cè)定法（一）直接測(cè)定法 例如：富馬酸亞鐵例如：富馬酸亞鐵 溶于熱稀礦酸，采用鈰量法溶于熱稀礦酸，采用鈰量法 ，鄰二氮菲作指示劑，鄰二氮菲作指示劑

3、 CHCHCCOO0Fe二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法（二）經(jīng)水解后測(cè)定法（二）經(jīng)水解后測(cè)定法 1. 直接回流后測(cè)定法直接回流后測(cè)定法 例如：三氯叔丁醇的含量測(cè)定例如：三氯叔丁醇的含量測(cè)定 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH (CH3)2CO +3NaCl + HCOONa +2H2O NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN + NH4NO3 2. 用硫酸水解后測(cè)定法用硫酸水解后測(cè)定法 例如：硬脂酸鎂的含量測(cè)定例如：硬脂酸鎂的含量測(cè)定 Mg(C17H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2C17H

4、35COOH H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O 二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法（三（三）經(jīng)氧化還原后測(cè)定法經(jīng)氧化還原后測(cè)定法1、碘他拉酸的含量測(cè)定、碘他拉酸的含量測(cè)定 2. 碘番酸、膽影酸、膽影葡胺注射液、泛影酸、泛影碘番酸、膽影酸、膽影葡胺注射液、泛影酸、泛影酸酸 納及泛影葡胺注射液的含量測(cè)定納及泛影葡胺注射液的含量測(cè)定 Zn還原，后銀量還原，后銀量法法 COOHIIINHCOCH3CH3CONHCOOHH2NNH2+ 11NaOH + 3Zn+ 3NaI + 2CH3COONa + 3NaZnO2 + 3H2O NaI + AgNO3 AgI +

5、 NaNO3 二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 3. 利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測(cè)定含量利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測(cè)定含量 （1）含銻藥物）含銻藥物 例如：葡萄糖酸銻的含量測(cè)定例如：葡萄糖酸銻的含量測(cè)定 Sb5+ + 2KI Sb3+ + 2K+ + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 （2）含鐵藥物含鐵藥物 2Fe3+ + 2KI 2Fe2+ + 2K+ + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6H+二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 濕法破壞濕法破壞 藥物分析中常用的有機(jī)破壞的方法有藥

6、物分析中常用的有機(jī)破壞的方法有 HNOHNO3 3-HClO-HClO4 4法法 干法破壞干法破壞( (一一) )濕法破壞濕法破壞 HNOHNO3 3-H-H2 2SOSO4 4法法 H H2 2SOSO4 4- -硫酸鹽法（凱氏定氮法）硫酸鹽法（凱氏定氮法） HNOHNO3 3- H- H2 2SOSO4 4-HClO-HClO4 4法；法； H H2 2SOSO4 4-H-H2 2O O2 2； H H2 2SOSO4 4-KMnO-KMnO4 4( (二二) )干法破壞干法破壞 加加NaNa2 2COCO3 3或或MgOMgO以助灰化；溫度控制在以助灰化；溫度控制在420420分為：高溫

7、熾濁法分為：高溫?zé)霛岱ê秃脱跗咳紵ㄑ跗咳紵?三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法含氮有機(jī)藥物含氮有機(jī)藥物凱氏定氮法n在在催化劑催化劑作用下，用作用下，用硫酸硫酸破壞有機(jī)物，使破壞有機(jī)物，使含氮物轉(zhuǎn)化成含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨硫酸銨。加入。加入強(qiáng)堿強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾進(jìn)行蒸餾使使氨氨逸出，用逸出，用硼酸硼酸吸收后，再用吸收后，再用酸酸滴定，滴定，測(cè)出氮含量。測(cè)出氮含量。 n消化、蒸餾、吸收、滴定消化、蒸餾、吸收、滴定 2.2.反應(yīng)過(guò)程反應(yīng)過(guò)程1. 1. 有機(jī)物中的氮在強(qiáng)熱和有機(jī)物中的氮在強(qiáng)熱和 濃濃H2SO4 作用下，消化生成無(wú)機(jī)氮作用下，消化生成無(wú)機(jī)氮 NH2 CHCOOH+2 H2SO4=

8、 SO2 + H2O + 2CO2 + NH3 2NH3+H2SO4= (NH4)2SO42.在凱氏定氮器中與堿作用，通過(guò)蒸餾釋放出在凱氏定氮器中與堿作用，通過(guò)蒸餾釋放出NH3(NH4)2SO4 + 2NaOH = Na2SO4 + 2NH4OH 4.4.用已知濃度的用已知濃度的HCIHCI標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)HCIHCI消耗的量計(jì)算出氮的消耗的量計(jì)算出氮的 含量。含量。NH4H2BO3 + HCl =H3BO3 + NH4Cl3. NH3收集于收集于 H H3 3BOBO3 3 溶液中。溶液中。NH3+H3BO3=NH4H2BO33.3.反應(yīng)裝置反應(yīng)裝置4.反應(yīng)試劑反應(yīng)試劑1

9、、消化液：硫酸、消化液：硫酸2、催化劑：硫酸銅、硫酸鉀、催化劑：硫酸銅、硫酸鉀3、堿溶液：、堿溶液：40%氫氧化鈉氫氧化鈉4、吸收液：、吸收液：2%硼酸硼酸5、混合指示劑：（、混合指示劑：（1：1）乙醇溶液）乙醇溶液 0.1%甲基紅：甲基紅：0.1%溴甲酚綠溴甲酚綠6、標(biāo)準(zhǔn)滴定液：、標(biāo)準(zhǔn)滴定液：0.2M HCL 5.各種試劑的作用各種試劑的作用n硫酸：硫酸： 1. 脫水。使有機(jī)物炭化，生成脫水。使有機(jī)物炭化，生成C 2. 氧化。氧化。 H2SO4將將C、 H氧化為氧化為CO2和和H2O蒸汽逸出蒸汽逸出，本身還原為，本身還原為SO2，而藥物則分解成無(wú)機(jī)氮，并與硫，而藥物則分解成無(wú)機(jī)氮，并與硫酸結(jié)

10、合成硫酸銨，留在酸性溶液中酸結(jié)合成硫酸銨，留在酸性溶液中 n硫酸銅：硫酸銅：n1.催化劑催化劑 加速反應(yīng)加速反應(yīng) 硫酸銅，硫酸銅，氧化汞氧化汞或或硒硒粉作為催化劑以及加入少粉作為催化劑以及加入少 量量過(guò)氧化氫過(guò)氧化氫作為氧化劑，作為氧化劑，次氯酸鉀次氯酸鉀防止污染。通防止污染。通常使用常使用硫酸銅硫酸銅。n2.堿性反應(yīng)指示劑堿性反應(yīng)指示劑 有機(jī)物全部消化后，出現(xiàn)硫酸銅的蘭綠色，可以有機(jī)物全部消化后，出現(xiàn)硫酸銅的蘭綠色，可以作為指示劑。作為指示劑。 40%氫氧化鈉氫氧化鈉 堿性條件下，使硫酸銨釋放出氨氣。堿性條件下，使硫酸銨釋放出氨氣。n加入氫氧化鈉溶液要過(guò)量；加入氫氧化鈉溶液要過(guò)量；1.要防止

11、樣液中氨氣逸出。要防止樣液中氨氣逸出。 硼酸硼酸H3BO3：n半微量或微量定氮通常用半微量或微量定氮通常用硼酸硼酸溶液吸收氨的作用溶液吸收氨的作用。硼酸呈微弱酸性，用酸滴定不影響指示劑變色。硼酸呈微弱酸性，用酸滴定不影響指示劑變色反應(yīng)。反應(yīng)。 鹽酸：鹽酸： HCl 滴定液滴定液 6.注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)n取樣量：取樣量： 常量法：相當(dāng)于含氮量常量法：相當(dāng)于含氮量25 30mg 半微量法：半微量法：相當(dāng)于含氮量相當(dāng)于含氮量1.0 2.0mg2. 蒸餾加濃堿NaOH，加的量為H2SO4量的4倍常量分析：80ml NaOH，25ml的2%硼酸，半微量分析：例如10ml樣品，10ml NaOH， 10ml

12、2%硼酸3. 硼酸保持過(guò)量。4.標(biāo)準(zhǔn)酸濃度：一般常量用0.1mol/L 半微量用0.05mol/L 微量用0.01mol/L氧燃瓶燃燒法氧燃瓶燃燒法(oxygen flask combustion method)1.原理原理將含有將含有待測(cè)元素待測(cè)元素的的有機(jī)藥物有機(jī)藥物放入充滿(mǎn)放入充滿(mǎn)氧氣氧氣的的密閉密閉燃燃燒瓶中進(jìn)行燃燒，使有機(jī)結(jié)構(gòu)部分徹底分解為二氧燒瓶中進(jìn)行燃燒，使有機(jī)結(jié)構(gòu)部分徹底分解為二氧化碳和水，而化碳和水，而待測(cè)元素待測(cè)元素根據(jù)電負(fù)性的不同根據(jù)電負(fù)性的不同轉(zhuǎn)化為不轉(zhuǎn)化為不同價(jià)態(tài)的氧化物（或無(wú)氧酸）同價(jià)態(tài)的氧化物（或無(wú)氧酸），被，被吸收吸收于適當(dāng)?shù)奈谶m當(dāng)?shù)奈找褐?，然后根?jù)欲測(cè)物質(zhì)

13、的性質(zhì)，采用適宜的分收液中，然后根據(jù)欲測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)，采用適宜的分析方法進(jìn)行檢查或定量測(cè)定。析方法進(jìn)行檢查或定量測(cè)定。NaClHClOClCNaOH2 溶液點(diǎn)燃適用范圍適用范圍：含鹵素、硫、氮、硒等有機(jī)藥物的分析。含鹵素、硫、氮、硒等有機(jī)藥物的分析。特點(diǎn)特點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速、破壞完全，尤其適用于：簡(jiǎn)便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析。微量樣品的分析。2.2.氧燃瓶燃燒法的適用范圍及特點(diǎn)氧燃瓶燃燒法的適用范圍及特點(diǎn) 3.儀器裝置儀器裝置 燃燒瓶為燃燒瓶為500、1000或或2000ml 無(wú)色、磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃無(wú)色、磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃 錐型瓶錐型瓶 瓶塞瓶塞空心空心 底部熔封鉑絲一根，下

14、端呈螺底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網(wǎng)狀旋狀或網(wǎng)狀 4.稱(chēng)樣用材料及稱(chēng)樣稱(chēng)樣用材料及稱(chēng)樣 A. 固體樣品固體樣品 無(wú)灰濾紙無(wú)灰濾紙 B. 液體樣品液體樣品 紙袋紙袋 C. 軟膏類(lèi)樣品：將適量樣品置不含被測(cè)成分的軟膏類(lèi)樣品：將適量樣品置不含被測(cè)成分的蠟蠟油紙油紙中包裹嚴(yán)密，中包裹嚴(yán)密，外層外層再用再用無(wú)灰濾紙無(wú)灰濾紙包裹包裹5.吸收液吸收液 作用作用將樣品經(jīng)燃燒分解所將樣品經(jīng)燃燒分解所產(chǎn)生的各種價(jià)態(tài)的鹵產(chǎn)生的各種價(jià)態(tài)的鹵素、硫、氮、硒等，素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)槎康匚詹⑥D(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ囊欢ǖ谋阌跍y(cè)定的價(jià)便于測(cè)定的價(jià)態(tài)態(tài) 吸收液的選擇吸收液的選擇氟氟 水水 （HF) 氯氯 NaOH溶

15、液（溶液（HCl溶解溶解 度低度低）溴溴 H2O2-NaOH（ NaOH-硫酸肼飽和溶液硫酸肼飽和溶液碘碘 NaOH硫酸肼飽和溶液硫酸肼飽和溶液硫硫 NaOH或或H2O2 硒硒 硝酸溶液硝酸溶液6.操作方法操作方法燃燒瓶燃燒前的準(zhǔn)備：用洗液洗凈后，按各藥品項(xiàng)下的規(guī)定燃燒瓶燃燒前的準(zhǔn)備：用洗液洗凈后，按各藥品項(xiàng)下的規(guī)定 加入吸收液，將瓶口用水濕潤(rùn)，加入吸收液，將瓶口用水濕潤(rùn)，小心急速小心急速地通入地通入氧氣氧氣1min，立，立即用表面皿覆蓋瓶口。即用表面皿覆蓋瓶口。樣品的準(zhǔn)備：取樣品適量，精密稱(chēng)定后按規(guī)定方法包裹，固樣品的準(zhǔn)備：取樣品適量，精密稱(chēng)定后按規(guī)定方法包裹，固定于鉑絲下端的定于鉑絲下端的

16、網(wǎng)內(nèi)網(wǎng)內(nèi)或或螺旋處螺旋處。樣品的燃燒：樣品的燃燒：點(diǎn)燃點(diǎn)燃包有供試品的濾紙尾部，迅速包有供試品的濾紙尾部，迅速放入放入燃燒瓶燃燒瓶中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶口，俟中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶口，俟燃燒完畢燃燒完畢（應(yīng)（應(yīng)無(wú)無(wú)黑色碎黑色碎片），充分片），充分振搖振搖，使生成的煙霧，使生成的煙霧完全吸入完全吸入吸收液中，放置吸收液中，放置15min，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白空白試驗(yàn)試驗(yàn)。然后按各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測(cè)。然后按各藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法進(jìn)行鑒別、檢查或含量測(cè)定。定。 待分解樣品量待分解樣品量

17、 燃燒瓶的體積燃燒瓶的體積 35mg（微量分析）（微量分析） 150250ml 2030mg（半微量分析）（半微量分析） 300500ml 5060mg 1000ml 0.60.7g或更多或更多 2000ml或特殊結(jié)或特殊結(jié)構(gòu)的燃燒瓶構(gòu)的燃燒瓶應(yīng)用示例：碘苯酯的測(cè)定應(yīng)用示例：碘苯酯的測(cè)定ICHCH3(CH2)8-COOC2H5I2O2(I )_I2 + 2NaOH NaIO + NaI + H2O 3NaIO NaIO3 + 2NaI 3Br2 + I +3H2O IO3 + 6HBrBr2(guo) + HCOOH HBr + CO2 IO3 + 5I + 6H 3I2 + 3H2OI2 +

18、 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6CH3COOH-+-（二）數(shù)據(jù)要求（二）數(shù)據(jù)要求 回收率回收率% = （測(cè)定平均值（測(cè)定平均值 空白值）空白值）/加入量加入量100% 要求制備要求制備高高、中中、低低三濃度的樣品，各測(cè)定三濃度的樣品，各測(cè)定3次次。應(yīng)。應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率，或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值報(bào)告已知加入量的回收率，或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其可信限。之差及其可信限。 第三節(jié)第三節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 一、準(zhǔn)確度一、準(zhǔn)確度 是指用該方法是指用該方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值接近的程度測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值接近的程度，用，用回收率回收率表示表示（一）含量

19、測(cè)定方法的準(zhǔn)確度（一）含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度 1. 原料藥原料藥 可用已知純度對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定；或與已建準(zhǔn)確可用已知純度對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定；或與已建準(zhǔn)確 度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。 2. 制劑制劑 要考察要考察輔料對(duì)回收率的影響輔料對(duì)回收率的影響。采用在空白輔料中加入原。采用在空白輔料中加入原 料對(duì)照品的方法作回收率試驗(yàn)，然后計(jì)算料對(duì)照品的方法作回收率試驗(yàn)，然后計(jì)算RSD。 具體做法：測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度，具體做法：測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度，n=3, 共共9個(gè)數(shù)據(jù)來(lái)評(píng)價(jià)個(gè)數(shù)據(jù)來(lái)評(píng)價(jià) 回收率的回收率的RSD2%；用用UV和和HPLC發(fā)時(shí)，一般回發(fā)時(shí)，一般

20、回 收率可達(dá)收率可達(dá)98%102%；容量法可達(dá)；容量法可達(dá)99.7%100.3% 二、精密度二、精密度 是指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次測(cè)定結(jié)果是指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次測(cè)定結(jié)果 之間的之間的接近程度接近程度。 （一）精密度表示方法（一）精密度表示方法 1. 偏差偏差(deviation , d) d = 測(cè)得值測(cè)得值-平均值平均值=Xi-X 2. 標(biāo)準(zhǔn)偏差標(biāo)準(zhǔn)偏差（standard deviation, SD或或S） S =(Xi X)2/(n-1)1/2 3. 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(relative standard deviation, RSD)也稱(chēng)變異

21、系數(shù)也稱(chēng)變異系數(shù) (coefficient of variation, CV) RSD=標(biāo)準(zhǔn)偏差標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均值平均值100%=S/X 100%（二）重復(fù)性、中間精密度及重現(xiàn)性（二）重復(fù)性、中間精密度及重現(xiàn)性 1. 重復(fù)性重復(fù)性 在相同條件下在相同條件下,由一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度由一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度. 2. 中間精密度中間精密度 在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不 同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度。同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度。 3. 重現(xiàn)性重現(xiàn)性 在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度。在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度。

22、（三）數(shù)據(jù)要求（三）數(shù)據(jù)要求 應(yīng)報(bào)告應(yīng)報(bào)告S或或SD、RSD和可信限。用統(tǒng)計(jì)學(xué)的可和可信限。用統(tǒng)計(jì)學(xué)的可信性分析信性分析(t或或f）。）。 三、專(zhuān)屬性三、專(zhuān)屬性 是指在其他成分是指在其他成分(如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等)可能存在下，可能存在下， 采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢 查、含量測(cè)定方法，均應(yīng)考察其專(zhuān)屬性。查、含量測(cè)定方法，均應(yīng)考察其專(zhuān)屬性。 （一）鑒別反應(yīng)（一）鑒別反應(yīng) 應(yīng)能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分，不含被測(cè)組分應(yīng)能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分，不含被測(cè)組分 的樣品均應(yīng)呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)

23、。的樣品均應(yīng)呈現(xiàn)負(fù)反應(yīng)。 （二）含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定（二）含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定 色譜法和其他分離法，應(yīng)附代表性的圖譜，以說(shuō)明專(zhuān)屬性。色譜法和其他分離法，應(yīng)附代表性的圖譜，以說(shuō)明專(zhuān)屬性。 圖中應(yīng)注明各組分的位置，色譜法中分離度應(yīng)符合要求。在能圖中應(yīng)注明各組分的位置，色譜法中分離度應(yīng)符合要求。在能 獲得雜質(zhì)的情況下，可加到試樣中，考察對(duì)結(jié)果的干擾。在雜獲得雜質(zhì)的情況下，可加到試樣中，考察對(duì)結(jié)果的干擾。在雜 質(zhì)和降解物不能獲得的情況下，可用以驗(yàn)證方法和藥典方法進(jìn)質(zhì)和降解物不能獲得的情況下，可用以驗(yàn)證方法和藥典方法進(jìn) 行對(duì)照；也可用對(duì)試樣加速破壞的方法，比較兩種方法。行對(duì)照；也可用對(duì)試樣加速破壞的方法，比

24、較兩種方法。 四、檢測(cè)限（四、檢測(cè)限（limit of detection, LOD) 是指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的是指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低濃度或量最低濃度或量，是限度檢驗(yàn)，是限度檢驗(yàn) 指標(biāo)。它無(wú)需測(cè)定，只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可。指標(biāo)。它無(wú)需測(cè)定，只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可。 （一）（一）常用的方法常用的方法 1.1.非儀器分析目視法非儀器分析目視法 用已知濃度被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地用已知濃度被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地 檢測(cè)出的最低濃度或量。檢測(cè)出的最低濃度或量。 2. 2.儀器分析方法儀器分析方法 UVUV法：法：LODLOD = = f f.3.3S S空

25、空 = = C C樣樣/ /A A樣樣 3 3S S空空 FluFlu法：法：LODLOD = = f f.3.3S S空空 = = C C樣樣/(/(F F樣樣- -F F空空) ) 3 3S S空空 GCGC和和HPLCHPLC法：法： LODLOD = = S S/ /N N = 2 = 2或或3 3 （二）數(shù)據(jù)要求（二）數(shù)據(jù)要求 應(yīng)附測(cè)試圖，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)限結(jié)果。應(yīng)附測(cè)試圖，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)限結(jié)果。 五、定量限（五、定量限（limit of quantitation, LOQ) 是指樣品中是指樣品中被測(cè)物能被被測(cè)物能被定量測(cè)定定量測(cè)定的最低量的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)

26、具一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，要求具一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，要求 LOQLOQ. .常用信噪比法確定定量限，一般以常用信噪比法確定定量限，一般以S/N=10S/N=10時(shí)相應(yīng)的濃度進(jìn)行時(shí)相應(yīng)的濃度進(jìn)行 測(cè)定。測(cè)定。 六、線性六、線性 是指在設(shè)定的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接是指在設(shè)定的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接 呈呈正比正比關(guān)系的關(guān)系的程度程度。 UVUV法：首先制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列，濃度點(diǎn)法：首先制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列，濃度點(diǎn)n =5; A = 0.3n =5; A = 0.3.0.7.0.7 建立回歸方程建立回歸方程C = aA

27、+ b ;C = aA + b ;r r 0.9999 0.9999。 HPLC HPLC法：制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列，濃度點(diǎn)法：制備一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列，濃度點(diǎn)n =5 n =5 7; 7; 以以C C對(duì)對(duì)h h或或A A或與或與 內(nèi)標(biāo)物的峰面積之比，建立回歸方程內(nèi)標(biāo)物的峰面積之比，建立回歸方程r r 0.9999 0.9999。七、范圍七、范圍 是指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性、測(cè)試方法是指達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性、測(cè)試方法適用的高低限度或量的區(qū)間適用的高低限度或量的區(qū)間。 原料藥和制劑含量測(cè)定原料藥和制劑含量測(cè)定：范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的：范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的80%- 120%。 制劑含量均勻度檢查制劑含量

28、均勻度檢查：范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的：范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的70%- 130%。 溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定：范圍應(yīng)為限度的：范圍應(yīng)為限度的20%20%。 八、耐用性八、耐用性 是指在測(cè)定條件下有效的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的是指在測(cè)定條件下有效的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受承受 程度程度。典型的變動(dòng)因素有：被溶液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時(shí)。典型的變動(dòng)因素有：被溶液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時(shí) 間等。間等。 HPLC法變動(dòng)因素有：流動(dòng)相組成與法變動(dòng)因素有：流動(dòng)相組成與pH，色譜柱，柱溫，流速等。色譜柱，柱溫，流速等。 GC法變動(dòng)因素有：色譜柱，固定相，擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢

29、法變動(dòng)因素有：色譜柱，固定相，擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢 測(cè)器溫度等。測(cè)器溫度等。 分析方法效能指標(biāo)的具體應(yīng)用分析方法效能指標(biāo)的具體應(yīng)用： 1. 用于鑒別試驗(yàn)的方法：只要求專(zhuān)屬性、耐用性，其余不要求。用于鑒別試驗(yàn)的方法：只要求專(zhuān)屬性、耐用性，其余不要求。 2. 用于原料藥中雜質(zhì)測(cè)定和制劑中降解產(chǎn)物測(cè)定的方法：用于原料藥中雜質(zhì)測(cè)定和制劑中降解產(chǎn)物測(cè)定的方法： 用于定量：除了檢測(cè)限不要求外，其余七項(xiàng)指標(biāo)均要求。用于定量：除了檢測(cè)限不要求外，其余七項(xiàng)指標(biāo)均要求。 限度檢查：除檢測(cè)限、專(zhuān)屬性、耐用性要求外，其余不要求。限度檢查：除檢測(cè)限、專(zhuān)屬性、耐用性要求外，其余不要求。 3. 原料、制劑及溶出度測(cè)定：不

30、要求檢測(cè)和定量限，其余均要求。原料、制劑及溶出度測(cè)定：不要求檢測(cè)和定量限，其余均要求。練習(xí)與思考練習(xí)與思考 A A型題型題 1 1 藥品的鑒別是證明藥品的鑒別是證明 A A未知藥物的真?zhèn)挝粗幬锏恼鎮(zhèn)?B B已知藥物的真?zhèn)我阎幬锏恼鎮(zhèn)?C C已知藥物的療效已知藥物的療效 D D藥物的純度藥物的純度 E E藥物的穩(wěn)定性藥物的穩(wěn)定性2 2相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差表示的應(yīng)是相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差表示的應(yīng)是A A準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 B B回收率回收率 C C精密度精密度 D D純凈度純凈度 E E限度限度3 3用移液管量取的用移液管量取的2525mlml溶液，應(yīng)記成溶液，應(yīng)記成A A25ml B25ml B25.0ml C25.0

31、ml C25.00ml 25.00ml D D25.000ml E25.000ml E25251ml1ml4 4以下三個(gè)數(shù)字以下三個(gè)數(shù)字0.53620.5362、0.00140.0014、0.250.25之和之和應(yīng)為應(yīng)為A A0.79 B0.79 B0.788 C0.788 C0.787 0.787 D D0.7876 E0.7876 E0.80.85 5表示兩變量指標(biāo)表示兩變量指標(biāo)A A與與C C之間線性相關(guān)程度常用之間線性相關(guān)程度常用A A相關(guān)規(guī)律相關(guān)規(guī)律 B B比例常數(shù)比例常數(shù) C C相關(guān)常數(shù)相關(guān)常數(shù) D D相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù) E E精密度精密度6 6減小偶然誤差的方法是減小偶然誤差的方法

32、是A A做空白試驗(yàn)做空白試驗(yàn) B B做對(duì)照實(shí)驗(yàn)做對(duì)照實(shí)驗(yàn) C C做回收試驗(yàn)做回收試驗(yàn) D D增加平行測(cè)定次數(shù)增加平行測(cè)定次數(shù) E E選用多種測(cè)定方法選用多種測(cè)定方法 B B型題型題 1 14 4A A1.23 B1.23 B1.22 C1.22 C2.54 2.54 D D2.53 E2.53 E2.512.511 11.22521.22522 22.53512.53513 32.53482.53484 42.50682.5068ACDE 5 58 8A A空白試驗(yàn)空白試驗(yàn) B B對(duì)照試驗(yàn)對(duì)照試驗(yàn) C C回收試驗(yàn)回收試驗(yàn) D D鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn) E E檢測(cè)試驗(yàn)檢測(cè)試驗(yàn)5 5以同量的溶劑替代供試品同法進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)以同量的溶劑替代供試品同法進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)6 6在供試液中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)物或已知量的被測(cè)在供試