中藥及其制劑的分析方法

1、中藥及其制劑的分析方法14應化zzb.01 02 05 中藥成分多且復雜，其質量受品種、產地、采收期及加工炮制、制劑的生產工藝等諸多因素的影響，使中藥質量控制成為制約中藥現代化與產業(yè)化的“瓶頸”。2010年版中國藥典(一部)不僅改變了中藥質量控制的思路，由單一成分測定發(fā)展到指紋圖譜和多指標性成分的測定;而且將薄層色譜和高效液相色譜等技術廣泛應用于中藥及其制劑的分析中. 中藥包括中藥材、中藥飲片、中藥提取物和中成藥，是我國人民幾千年來與疾病作斗爭的經驗總結，為中國人民的健康事業(yè)做出了巨大的貢獻。 中藥的資源豐富、療效獨特、毒副作用少，近年來世界各國越來越青睞和重視中藥。美國食品藥品監(jiān)督管理局(F

2、ood and DrugAdministration, FDA)已開始接受中藥復方制劑進行臨床研究，目前，我國有10個以上的中藥制劑己經申報美國FDA床試驗，其中7個在進行二期臨床，復方丹參滴丸已進入三期臨床.日本、韓國歷來重視中藥，西歐與北美各主要工業(yè)國也對中藥抱有很大興趣。 中藥指紋圖譜是借用DNA指紋圖譜的概念轉化而來的，可以用于中藥材的種屬鑒定、植物分類研究和品質研究，自國家藥品監(jiān)督管理局2000年頒布中藥注射劑指紋圖譜研究的技術要求(暫行)以來，中藥指紋圖譜的研究己發(fā)展成一種重要的中藥質量控制手段。 它是通過測定各色譜峰的峰面積或峰高的比值來確定其化學成分的相對含量，并結合聚類分析、

3、主成分分析等數理統(tǒng)計方法，計算并比較不同產地或批次樣品間的相似度，從而評價中藥及其制劑的質量。 中藥指紋圖譜的新進展目前，中藥指紋圖譜憑借其科學的理論依據，己被國際認可為中藥質量控制的有效手段，如德國采用指紋圖譜技術控制銀杏制劑的質量，FDA對植物藥的質量控制則要求必須控制指紋圖譜的檢測標準 中藥指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段，是評價中藥真實性、穩(wěn)定性和一致性的質量控制模式之一。 它不強調個體的絕對唯一性，而是強調同一中藥群體的相似性，而相似性又是通過整體性和模糊性來體現的;它是在特定的“環(huán)境”中，由若干指紋峰組成，指紋峰之間的排序、高低，相互牽制構成中藥的整體特征。 中藥指紋圖譜雖然

4、能較全面的反映中藥的化學成分，但是在眾多的指紋峰中，哪些是有效成分、如何快速經濟地同時測定多種活性成分，仍然是一道難題。 中藥經過預處理后得到的粗提液組成復雜，往往目標物質含量低，干擾大，鑒于上述原因，對分析方法的選擇就有著非常高的要求:(1)靈敏度高，能檢測出含量低的目標成分，也可以減少進樣量，節(jié)省原料，降低分析誤差;(2)精密度和穩(wěn)定性高，提高分析準確性，減少系統(tǒng)誤差，使得分析結果更加真實可靠;(3)自動化程度高，減少因人為因素造成的樣品損失或污染，節(jié)省分析時間。 近年來，發(fā)展快速、簡單、高效、綠色的分析方法已成為中藥分析領域的前沿課題。 對分析方法的要求薄層色譜法高效液相色譜法氣相色譜法

5、高效毛細管電泳超臨界流體色譜法近紅外光譜紫外一可見光譜法常用分析方法薄層色譜法 TLC分離是根據各種中藥成分在固定相(一般涂于玻璃板上)與展開劑之間分配系數的不同而實現的。 它具有簡便、經濟、展開劑靈活多樣、多個樣品可平行分析等優(yōu)點，其結果以直觀形象的可見光或熒光圖像呈現，中藥研究和分析中常常使用TLC法。優(yōu)點 缺點 可以通過優(yōu)化固l定相和展開劑，不需要進行樣品前處理就可以分析復雜基質中的某類特定成分，具有分離和鑒定的雙重功能，對沒有紫外吸收的中藥活性成分則可以采用噴灑顯色劑的方式進行鑒別 TLC的分離能力、定量方面的靈敏度、重現性等較差，而且易受環(huán)境因索的影響，穩(wěn)足性不高 大部分中藥材中的活

6、性成分為高沸點、熱不穩(wěn)定性物質，如生物堿類、皂苷類、黃酮類等，甚至為生物大分子，如多肽、多糖等，而HPLC可用于高分子、極性、離子和熱不穩(wěn)定性化合物的分離分析，因此，在中藥分離分析中，H PLC比GC的應用范圍更加廣泛。另一方而，由于HPLC較TLC分離效率高，檢測靈敏度高，分離速度快，檢測手段多，不僅可提供色譜峰特征信息，還包含有化學成分的含量信息，另外儀器的普及率高，可用于中藥材的鑒別、中藥質量的控制及評價等，因此HPLC己成為中藥指紋圖譜和多指標成分同時測定中最常用的分析方法高效液相色譜法反相高效液相色譜法 正相色譜法 RP-HPLC主要針對中藥中的中等極性或弱極性成分的分離分析。該方法

7、采用非極性、弱極性或中等極性的鍵合相為固定相，以水和與水混溶的有機溶劑為流動相，主要依賴固定相與溶質之間的疏水作用，從而完成弱極性或非極性化合物的有效分離 正相色譜法是目前用于分析中藥極性成分的常用方法，但是NP-LC的流動相組成較為復雜，與質譜檢測器不兼容，而且都是有機溶劑，水溶性溶質的溶解性能較差。氣相色譜法 GC具有高效、分析速度快、高靈敏度、高選擇性及進樣量小等優(yōu)點，主要用于含揮發(fā)性成分較多的中藥及其制劑的質量鑒定和質量控制。 高效毛細管電泳 高效毛細管電泳(High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE)的驅動力為高壓電場，分離通道為

8、毛細管，它的分離是依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現的。優(yōu)點 缺點 具有分離速度快、分離模式多、分析對象廣、樣品與試劑消耗量少、抗污染能力強、毛細管柱的費用低等優(yōu)點，在中藥活性成分的分離、定性、定量和鑒別等方面應用較為廣泛， 重現性較差、線性范圍窄和靈敏度較低等缺點限制了它的應用。超臨界流體色譜法 超臨界流體色譜法(Supercritical Fluid Chromatography, SFC)分離是以超臨界流體(常用的是二氧化碳)做流動相，依靠其特殊流動相的溶劑化作用來進行分離、分析的過程，超臨界流體對分析物的溶解能力相當于有機溶劑，但比有機溶劑的擴散速度快、黏度低. 優(yōu)點 S

9、FC是HPLC和GC的重要補充技術，它既可分析GC不適應的不易揮發(fā)、高沸點、熱不穩(wěn)定的樣品，又可以分析不能用HPLC分離的無紫外吸收的物質。與傳統(tǒng)的HPLC相比，SFC分析速度更快，效率更高，具有高效快速、綠色環(huán)保的優(yōu)點近紅外光譜 近幾年來，NIR分析法由于其分析速度快、樣品預處理簡單、環(huán)保、多組分同時測定以及易于實現在線檢測等特點，較為廣泛地應用于快速識別形態(tài)相近的中藥材的真?zhèn)?、中藥材的產地鑒別、種類分析和質量控制等。紫外一可見光譜法 由于紫外一可見吸收光譜(Ultraviolet-Visible Absorption Spectromtry,UV-VIS)具有加和性，而不同的中藥材所含的化學成分不同，且其UV-VIS光譜具有各自的特異性，主要用于中藥材的快速鑒別。展望 中藥指紋圖譜是綜合的、可量化的鑒別手段，它是當前符合中藥特色的、評價中藥真實性、一致性、穩(wěn)定性的可行模式。當前，