醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)三ppt課件

1、 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三南華大學(xué)病原學(xué)實(shí)驗(yàn)中心南華大學(xué)病原學(xué)實(shí)驗(yàn)中心微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室1、細(xì)菌的人工培養(yǎng)講授）、細(xì)菌的人工培養(yǎng)講授）2、細(xì)菌的培養(yǎng)方法：、細(xì)菌的培養(yǎng)方法： 固體培養(yǎng)基接種法自做）；固體培養(yǎng)基接種法自做）； 半固體、液體培養(yǎng)基接種法示教）半固體、液體培養(yǎng)基接種法示教）3、葡萄球菌、鏈球菌培養(yǎng)及生化示教）、葡萄球菌、鏈球菌培養(yǎng)及生化示教）4、細(xì)菌的形態(tài)觀(guān)察、細(xì)菌的形態(tài)觀(guān)察 自閱片：甲型鏈球菌、結(jié)核桿菌自閱片：甲型鏈球菌、結(jié)核桿菌 示教片：淋球菌、肉毒桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、白喉?xiàng)U菌、示教片：淋球菌、肉毒桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、白喉?xiàng)U菌、炭疽桿菌炭疽桿

2、菌實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第四節(jié)第四節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng)細(xì)菌的人工培養(yǎng) p31p31一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基culture mediumculture medium）：）：是由人工方法配制而成的，專(zhuān)供微生物生長(zhǎng)繁殖是由人工方法配制而成的，專(zhuān)供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品。使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品。常用培養(yǎng)基的種類(lèi)常用培養(yǎng)基的種類(lèi) 按營(yíng)養(yǎng)組成和用按營(yíng)養(yǎng)組成和用途分途分厭氧培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況 據(jù)物理狀據(jù)物理狀態(tài)分態(tài)分1 1、液體培養(yǎng)基：、液體培養(yǎng)基：均勻混濁、沉淀生長(zhǎng)、表面生長(zhǎng)

3、菌膜）；均勻混濁、沉淀生長(zhǎng)、表面生長(zhǎng)菌膜）；多用于增菌多用于增菌均勻混濁均勻混濁對(duì)照對(duì)照沉淀生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)2 2、固體培養(yǎng)基：、固體培養(yǎng)基： 含含1.5%1.5%瓊脂瓊脂 用于分離培養(yǎng)用于分離培養(yǎng)菌落：?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉菌落：?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見(jiàn)眼可見(jiàn) 的細(xì)菌集團(tuán)。的細(xì)菌集團(tuán)。純培養(yǎng)：挑取一個(gè)菌落，移種到另純培養(yǎng)：挑取一個(gè)菌落，移種到另一培養(yǎng)一培養(yǎng) 基中，生長(zhǎng)出來(lái)的基中，生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)菌均為純細(xì)菌均為純 種，稱(chēng)為純培養(yǎng)。種，稱(chēng)為純培養(yǎng)。菌落特征大小、外形、顏色、氣菌落特征大小、外形、顏色、氣味、透明度、光滑或粗糙、濕潤(rùn)或味、透明度、光滑或粗糙、濕潤(rùn)或干燥、隆起或扁平、邊緣整齊與否、

4、干燥、隆起或扁平、邊緣整齊與否、是否溶血等是否溶血等有助于細(xì)菌鑒定有助于細(xì)菌鑒定菌落菌落S型）型）菌苔菌苔菌落菌落R型）型）光滑型光滑型(S型型)粗造型粗造型(R型型)粘液型粘液型(M型型) 3 3、半固體培養(yǎng)基：含、半固體培養(yǎng)基：含0.3%0.5%0.3%0.5%瓊脂瓊脂 鞭毛菌鞭毛菌混濁生長(zhǎng)沿穿刺線(xiàn)呈云霧狀混濁生長(zhǎng)沿穿刺線(xiàn)呈云霧狀/ /羽毛狀）羽毛狀） 無(wú)鞭毛菌無(wú)鞭毛菌沿穿刺線(xiàn)呈線(xiàn)狀生長(zhǎng)沿穿刺線(xiàn)呈線(xiàn)狀生長(zhǎng) 用于檢測(cè)細(xì)菌的動(dòng)力和保存菌種用于檢測(cè)細(xì)菌的動(dòng)力和保存菌種斜面劃線(xiàn)示意圖斜面劃線(xiàn)示意圖4 4、斜面培養(yǎng)基接種法、斜面培養(yǎng)基接種法運(yùn)用：短期保存菌種運(yùn)用：短期保存菌種三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途三

5、、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途u在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用u 1. 1.感染性疾病的病原學(xué)診斷：明確病因，指導(dǎo)感染性疾病的病原學(xué)診斷：明確病因，指導(dǎo)用藥用藥u 2. 2.細(xì)菌學(xué)的研究：細(xì)菌遺傳、變異、耐藥性細(xì)菌學(xué)的研究：細(xì)菌遺傳、變異、耐藥性u(píng) 3. 3.生物制品的制備：疫苗、類(lèi)毒素、抗毒素生物制品的制備：疫苗、類(lèi)毒素、抗毒素u在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 （抗生素、維生素、酶制劑（抗生素、維生素、酶制劑等）等） u在基因工程中的應(yīng)用（在基因工程中的應(yīng)用（ 基因工程菌基因工程菌乙肝疫苗）乙肝疫苗）進(jìn)入實(shí)驗(yàn)內(nèi)容講授進(jìn)入實(shí)驗(yàn)內(nèi)容講授1 1、固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基( (平板平板) )接種法接種法

6、分區(qū)劃線(xiàn)法分區(qū)劃線(xiàn)法連續(xù)劃線(xiàn)法連續(xù)劃線(xiàn)法第一區(qū)劃線(xiàn)第一區(qū)劃線(xiàn)滅菌接種環(huán)滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線(xiàn)第二區(qū)劃線(xiàn)滅菌接種環(huán)滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線(xiàn)第三區(qū)劃線(xiàn)滅菌接種環(huán)滅菌接種環(huán)滅菌接種環(huán)，取菌準(zhǔn)備滅菌接種環(huán)，取菌準(zhǔn)備分區(qū)劃線(xiàn)法分區(qū)劃線(xiàn)法原劃線(xiàn)原劃線(xiàn)標(biāo)本：混合菌液標(biāo)本：混合菌液分組：分組：1人一個(gè)固體平板人一個(gè)固體平板連續(xù)劃線(xiàn)法連續(xù)劃線(xiàn)法菌落示意圖菌落示意圖細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象 菌菌 落落 菌落特征：大小、外形、顏色、氣味、透明度、菌落特征：大小、外形、顏色、氣味、透明度、表面光滑或粗糙、濕潤(rùn)或干燥、邊緣整齊與否、溶表面

7、光滑或粗糙、濕潤(rùn)或干燥、邊緣整齊與否、溶血性等。血性等。 菌落類(lèi)型：菌落類(lèi)型： S S型、型、 R R型、型、 MM型菌落。型菌落。 菌菌 苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。菌落菌落S型）型）菌苔菌苔菌落菌落R型）型）光滑型光滑型(S型型)粗造型粗造型(R型型)粘液型粘液型(M型型)本卷須知本卷須知1、無(wú)菌操作、無(wú)菌操作2、密而不重疊、密而不重疊3、勿劃破瓊脂、勿劃破瓊脂4、做好標(biāo)記，第二天觀(guān)察結(jié)果、做好標(biāo)記，第二天觀(guān)察結(jié)果2、葡萄球菌培養(yǎng)示教）、葡萄球菌培養(yǎng)示教）營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好 菌菌 落：落：

8、 S S型菌落，型菌落，金黃色、表皮、腐金黃色、表皮、腐生葡萄球菌各自形生葡萄球菌各自形成金黃色、白色、成金黃色、白色、檸檬色檸檬色- -脂溶性色素脂溶性色素血平板：血平板： 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌形成的形成的-溶血環(huán)溶血環(huán)金黃色色素金黃色色素白色色素白色色素3 3、鏈球菌培養(yǎng)示教）、鏈球菌培養(yǎng)示教） 血平板上的菌落：血平板上的菌落： 甲型溶血性鏈球菌形甲型溶血性鏈球菌形成草綠色溶血現(xiàn)象，乙型溶血性鏈球菌形成草綠色溶血現(xiàn)象，乙型溶血性鏈球菌形成透明的完全溶血現(xiàn)象，丙型鏈球菌無(wú)溶成透明的完全溶血現(xiàn)象，丙型鏈球菌無(wú)溶血現(xiàn)象。血現(xiàn)象。甲鏈甲鏈溶血溶血草綠色溶血草綠色溶血乙鏈乙鏈溶血溶血丙鏈丙鏈

9、不溶血不溶血4、常見(jiàn)致病菌的形態(tài)與染色性、常見(jiàn)致病菌的形態(tài)與染色性取材：純培養(yǎng)物取材：純培養(yǎng)物染色法：革蘭染色染色法：革蘭染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100自閱片之一自閱片之一取材：痰涂片取材：痰涂片染色法：抗酸染色染色法：抗酸染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100自閱片之二自閱片之二菌體染成紅色，菌體染成紅色，細(xì)長(zhǎng)略微彎曲桿細(xì)長(zhǎng)略微彎曲桿菌，單個(gè)或分枝菌，單個(gè)或分枝狀排列；狀排列；（非抗酸菌及細(xì)（非抗酸菌及細(xì)胞染成藍(lán)色）胞染成藍(lán)色）示教片之一示教片之一取材：泌尿道膿性分泌物取材：泌尿道膿性分泌物染色法：革蘭染色染色法：革蘭染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100中性粒細(xì)胞分葉核中性粒細(xì)胞分葉核淋

10、球菌染成紅色淋球菌染成紅色/G-，腎形或豆形，成雙腎形或豆形，成雙排列排列示教片之二示教片之二取材：純培養(yǎng)物取材：純培養(yǎng)物染色法：革蘭染色染色法：革蘭染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100G+粗短桿菌，粗短桿菌，芽胞呈橢圓形，芽胞呈橢圓形，比菌體粗，次極比菌體粗，次極端，細(xì)菌呈湯匙端，細(xì)菌呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀狀或網(wǎng)球拍狀示教片之三示教片之三取材：小鼠腹腔滲出液取材：小鼠腹腔滲出液染色法：革蘭染色染色法：革蘭染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100G+粗大桿菌，粗大桿菌，兩端幾乎平切，兩端幾乎平切，在被感染得人在被感染得人或動(dòng)物體內(nèi)形或動(dòng)物體內(nèi)形成明顯的莢膜成明顯的莢膜示教片之四示教片之四取材：純培養(yǎng)物

11、取材：純培養(yǎng)物染色法：革蘭染色染色法：革蘭染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100G+粗大桿菌，粗大桿菌，有氧條件下形有氧條件下形成橢圓形芽胞，成橢圓形芽胞，位于菌體中央位于菌體中央取材：純培養(yǎng)物取材：純培養(yǎng)物染色法：美藍(lán)染色染色法：美藍(lán)染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100取材：純培養(yǎng)物取材：純培養(yǎng)物染色法：染色法：Neisser染色染色放大倍數(shù)：放大倍數(shù)：10X100示教片之五示教片之五菌體細(xì)長(zhǎng)彎曲的桿菌，粗細(xì)不一，常一菌體細(xì)長(zhǎng)彎曲的桿菌，粗細(xì)不一，常一端或兩端膨大呈棒狀；排列不規(guī)則，呈端或兩端膨大呈棒狀；排列不規(guī)則，呈柵欄狀、柵欄狀、V字形或字形或L字形。異染顆粒字形。異染顆粒1、細(xì)菌的人工培養(yǎng)講授）、細(xì)菌的人工培養(yǎng)講授）2、細(xì)菌的培養(yǎng)方法：、細(xì)菌的培養(yǎng)方法： 固體培養(yǎng)基接種法自做）；固體培養(yǎng)基接種法自做）； 半固體、液體培養(yǎng)基接種法示教）半固體、液體培養(yǎng)基接種法示教）3、葡萄球菌、鏈球菌培養(yǎng)及生化示教）、葡萄球菌、鏈球菌培養(yǎng)及生化示教）4、細(xì)菌的形態(tài)觀(guān)察、細(xì)菌的形態(tài)觀(guān)察 自閱片：甲型鏈球菌、結(jié)核桿菌自閱片：甲型鏈球菌、結(jié)核桿菌 示教片：淋球菌、肉毒桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、白喉?xiàng)U菌、炭疽桿菌示教片：淋球菌、肉毒桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、白喉?xiàng)U菌、炭疽桿菌第第2頁(yè)：頁(yè)： 實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)：細(xì)菌平板劃線(xiàn)分離法實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)：細(xì)菌平板劃線(xiàn)分離法 （記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪一簡(jiǎn)圖并描