質(zhì)譜分析法--定性與定量

1、北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所北京市海淀區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所國家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心國家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心2011年年06月月23日日質(zhì)譜分析方法質(zhì)譜分析方法定性與定量定性與定量 The birth of VenusLC and MS: A Match Made in HeavenJames Jorgenson，University of North Carolina59th， ASMS，June 5，Denver，USA The Arnolfini Wedding阿爾諾菲尼的婚禮 揚.凡.艾克 1434 主要內(nèi)容主要內(nèi)容一、質(zhì)譜基礎及相關術語一、質(zhì)譜基礎及相關術語二、定性（確證）方

2、法二、定性（確證）方法三、定量方法三、定量方法 真空系統(tǒng)真空系統(tǒng)進樣系統(tǒng)進樣系統(tǒng)檢測器檢測器數(shù)據(jù)系統(tǒng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)質(zhì)量分析器質(zhì)量分析器離子源離子源大氣壓大氣壓質(zhì)譜儀的基本結構質(zhì)譜儀的基本結構GCLCICCEEI、CIESIAPCI、APPIMALDIDART-四級桿四級桿離子阱離子阱飛行時間飛行時間磁質(zhì)譜磁質(zhì)譜FT-ICR一、質(zhì)譜基礎及相關術語一、質(zhì)譜基礎及相關術語 各種離子化方法的使用范圍各種離子化方法的使用范圍 選擇的依據(jù)選擇的依據(jù)揮發(fā)性揮發(fā)性 熱穩(wěn)定性熱穩(wěn)定性 極性極性 Analyte PolarityESI or MALDIAPCI/APPIGC/MS 質(zhì)量范圍質(zhì)量范圍質(zhì)譜儀所能測定的離子質(zhì)

3、荷比的范圍質(zhì)譜儀所能測定的離子質(zhì)荷比的范圍不同儀器不同儀器不同應用不同應用質(zhì)譜儀主要性能指標質(zhì)譜儀主要性能指標 掃描速度掃描速度 分辨率分辨率色譜峰的數(shù)據(jù)點數(shù)目和峰寬、掃描時間有關色譜峰的數(shù)據(jù)點數(shù)目和峰寬、掃描時間有關 質(zhì)譜儀主要性能指標質(zhì)譜儀主要性能指標0.0020.0040.0060.0080.00100.003.904.004.104.204.304.404.500.0020.0040.0060.0080.00100.003.904.004.104.204.304.404.500.0020.0040.0060.0080.00100.003.904.004.104.204.304.404.

4、50 質(zhì)譜儀主要性能指標質(zhì)譜儀主要性能指標 磁質(zhì)譜的分辨率定義最為嚴格：對兩個相等強度磁質(zhì)譜的分辨率定義最為嚴格：對兩個相等強度的相鄰峰，當兩峰間的峰谷不大于其峰高的相鄰峰，當兩峰間的峰谷不大于其峰高10%時，則時，則認為兩峰已經(jīng)分開，其分辨率：認為兩峰已經(jīng)分開，其分辨率： mmmmmR1121磁質(zhì)譜中，磁質(zhì)譜中，R不隨不隨m/z變化，在測定小分子時有優(yōu)勢變化，在測定小分子時有優(yōu)勢eg. R=5000，500與與500.1 5000與與5001 分辨率分辨率 有機質(zhì)譜僅要求有機質(zhì)譜僅要求50峰谷峰谷剛剛分開就算分開（這時剛剛分開就算分開（這時稱為有機質(zhì)譜的單位質(zhì)量稱為有機質(zhì)譜的單位質(zhì)量分辨）分

5、辨） 簡化為用單峰法表示，即簡化為用單峰法表示，即測定一個峰半峰高處的全測定一個峰半峰高處的全峰寬峰寬Full width half Maximum（簡寫為（簡寫為FWHM） 分分 辨辨 率率eg. FWHM=0.25m/z=100，R=400m/z=1000，R=4000 分分 辨辨 率率25009949.270061.289949.27MMR例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達到例如：要區(qū)分以下離子，分辨率要達到 CO+27.9949 N2+28.0061 ArCl+ 74.9312 As+74.921678009216.749312.749216.74MMR atto摩爾級的靈敏度；摩爾級的

6、靈敏度； 優(yōu)于優(yōu)于2 ppm的的MS質(zhì)量準確度質(zhì)量準確度 優(yōu)于優(yōu)于5 ppm的的MS/MS質(zhì)量準確度質(zhì)量準確度 線性動態(tài)范圍可以達到五個數(shù)量級線性動態(tài)范圍可以達到五個數(shù)量級 ； 質(zhì)量分辨率至質(zhì)量分辨率至20,000 高速數(shù)據(jù)采集能力（每秒獲得高速數(shù)據(jù)采集能力（每秒獲得10張張MS/MS譜圖），更好地兼容超快譜圖），更好地兼容超快速液相色譜速液相色譜 寬質(zhì)量范圍：寬質(zhì)量范圍：m/z范圍從范圍從2520,000 u 舉例：舉例： 質(zhì)譜峰類型質(zhì)譜峰類型 分子離子分子離子 必須是化合物譜圖中質(zhì)量最高的離子必須是化合物譜圖中質(zhì)量最高的離子 必須是奇電子離子、符合氮規(guī)則必須是奇電子離子、符合氮規(guī)則 必須能

7、通過丟失合理的中性離子，產(chǎn)生譜圖中高質(zhì)量區(qū)的重要離子必須能通過丟失合理的中性離子，產(chǎn)生譜圖中高質(zhì)量區(qū)的重要離子 準分子離子準分子離子 碎片離子碎片離子 同位素離子同位素離子 由于天然同位素的存在，因此在質(zhì)譜圖上由于天然同位素的存在，因此在質(zhì)譜圖上出現(xiàn)出現(xiàn)M+1，M+2等峰，由等峰，由這些同位素所形成的峰稱之為同位素峰這些同位素所形成的峰稱之為同位素峰一、質(zhì)譜基礎及相關術語一、質(zhì)譜基礎及相關術語 術語術語 1-Cl2-Cl 1-Br2-Br 3-Br4-Br Beynon 表表 例如：例如： M=150化合物化合物 M+1 M+2 化合物化合物 M+1 M+2C6H14NOCl 8.15 0.4

8、9 C7H11N4 9.25 0.38C6H14O4 6.86 1.0 C8H6 O3 8.36 0.95C7H2O4 7.75 1.06 C8H8NO2 9.23 0.78C7H4NO3 8.13 1.06 C8H11N2O 9.61 0.61C7H6N2O2 8.50 0.72 C8H12N3 9.98 0.45C7H8N3O 8.88 0.55 C9H10O2 9.96 0.84 二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機聯(lián)用時才能作為質(zhì)譜法只有在與色譜分離在線或脫機聯(lián)用時才能作為確證方法確證方法 在分析儀器上的進樣順序是：空白溶劑、陰性控制樣在分析儀器上

9、的進樣順序是：空白溶劑、陰性控制樣品、要確證的樣品、陽性控制樣品再進樣，最后是陰品、要確證的樣品、陽性控制樣品再進樣，最后是陰性控制樣品性控制樣品 1. 基本原則基本原則 保留時間保留時間 實驗室條件下分析物的最小可接受保留時間，實驗室條件下分析物的最小可接受保留時間， 2t0 氣相色譜（氣相色譜（GC）或液相色譜（）或液相色譜（LC）時，半峰寬應在原來峰）時，半峰寬應在原來峰寬的寬的90-110%以內(nèi)，保留時間的變化應在以內(nèi)，保留時間的變化應在5%以內(nèi)以內(nèi)二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 2. 色譜分離色譜分離 保留時間保留時間 測試部分中分析物的保留時間（或相對保留時測試部分中分析

10、物的保留時間（或相對保留時間），應在一個特定的保留時間窗口范圍內(nèi)與校正標間），應在一個特定的保留時間窗口范圍內(nèi)與校正標準的保留時間相符。保留時間窗口與該色譜系統(tǒng)的分準的保留時間相符。保留時間窗口與該色譜系統(tǒng)的分辨能力相當。分析物和內(nèi)標的保留時間之比，應與校辨能力相當。分析物和內(nèi)標的保留時間之比，應與校正溶液的相對保留時間一致，正溶液的相對保留時間一致，GC 偏差為偏差為0.5%，LC 偏差為偏差為2.5% 二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 2. 色譜分離色譜分離 GBT 16631-2008 高效液相色譜法通則：同樣條件下重復試驗高效液相色譜法通則：同樣條件下重復試驗的保留數(shù)據(jù)的分散性

11、，的保留數(shù)據(jù)的分散性，RSD3% JJG705-2002 液相色譜儀檢定規(guī)程：定性測量重復性（液相色譜儀檢定規(guī)程：定性測量重復性（6次測次測量）量）RSD1.5% JJF（閩）（閩）10322010 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準規(guī)范：定性質(zhì)譜聯(lián)用儀校準規(guī)范：定性重復性重復性 RSD2% JY/T 0211996 分析型氣相色譜方法通則：整機重復性分析型氣相色譜方法通則：整機重復性 保留保留時間時間RSD5二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 關于保留時間的討論關于保留時間的討論 GB/T 22260-2008 飼料中甲基睪丸酮的測定飼料中甲基睪丸酮的測定 高效液高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法相

12、色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 試樣保留時間與標準品的相對偏差不大于試樣保留時間與標準品的相對偏差不大于15% GB/T 22147-2008 飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測定鹽酸克侖特羅的測定 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法 樣品與標準品保留時間的相對偏差不大于樣品與標準品保留時間的相對偏差不大于0.5%二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 關于保留時間的討論關于保留時間的討論 全掃描全掃描 scan 選擇離子監(jiān)測選擇離子監(jiān)測 SIM MS-MSn技術，如多反應監(jiān)測技術，如多反應監(jiān)測 MRM二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 3. 質(zhì)譜檢測質(zhì)譜檢測

13、全掃描全掃描 scan 用記錄全掃描質(zhì)譜圖進行質(zhì)譜測定時，在標準品參用記錄全掃描質(zhì)譜圖進行質(zhì)譜測定時，在標準品參考圖譜中所有相對豐度考圖譜中所有相對豐度10%（分子離子、分子離子的特（分子離子、分子離子的特征加成物、特征碎片離子、同位素離子等）的特征離子征加成物、特征碎片離子、同位素離子等）的特征離子都必須檢測都必須檢測 選擇離子監(jiān)測選擇離子監(jiān)測 SIM 用碎片離子色譜圖進行質(zhì)譜測定時，分子離子最好用碎片離子色譜圖進行質(zhì)譜測定時，分子離子最好是一個選擇的檢測離子。選擇的檢測離子并不一定要源是一個選擇的檢測離子。選擇的檢測離子并不一定要源于分子的同一部分。每個檢測離子的信噪比應于分子的同一部分。

14、每個檢測離子的信噪比應31二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 3. 質(zhì)譜檢測質(zhì)譜檢測 相對豐度（相對豐度（%基峰）基峰）EI-GC-MS（相對）（相對）CI-GC-MS、GC-MSn、LC-MS、LC-MSn（相對）（相對） 50%10%20% 20% to 50%15%25% 10% to 20%20%30% 10%50%50%相對離子豐度最大容許偏差相對離子豐度最大容許偏差二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 2002/657/EC規(guī)定：規(guī)定： 要確證指令要確證指令 96/23/EC 附錄附錄I-A 組所列的物質(zhì)，最少需要組所列的物質(zhì)，最

15、少需要4 個識別個識別點點，包括具有促合成作用和其他未允許的化合物，如二苯乙烯類，包括具有促合成作用和其他未允許的化合物，如二苯乙烯類化合物及其衍生物、鹽、酯等、抗甲狀腺劑、甾醇、化合物及其衍生物、鹽、酯等、抗甲狀腺劑、甾醇、 二羥基苯甲二羥基苯甲酸內(nèi)酯如玉米赤霉醇、酸內(nèi)酯如玉米赤霉醇、-受體激動劑等受體激動劑等 要確證指令要確證指令 96/23/EC附錄附錄I-B 組所列的物質(zhì)，最少需要組所列的物質(zhì)，最少需要3 個識別個識別點點，包括獸藥和污染物，獸藥如抗菌藥、驅蟲藥、抗球蟲藥、氨，包括獸藥和污染物，獸藥如抗菌藥、驅蟲藥、抗球蟲藥、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、鎮(zhèn)靜藥、非甾體抗炎藥等；其他環(huán)基

16、甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、鎮(zhèn)靜藥、非甾體抗炎藥等；其他環(huán)境污染物如有機氯、有機磷、真菌毒素、染料等境污染物如有機氯、有機磷、真菌毒素、染料等 MS技術技術每種離子的識別點數(shù)每種離子的識別點數(shù)低分辨質(zhì)譜（低分辨質(zhì)譜（LR）1.0LR-MSn母離子母離子1.0LR-MSn子離子子離子1.5高分辨質(zhì)譜（高分辨質(zhì)譜（HR）2.0HR-MSn母離子母離子2.0HR-MSn子離子子離子2.5質(zhì)量碎片類型和識別點的關系質(zhì)量碎片類型和識別點的關系 每個離子計算一次每個離子計算一次 EI-GC-MS、CI-GC-MS作為不同的技術計算作為不同的技術計算 用不同反應得到的衍生物，可增加識別點數(shù)用不同反應得到的衍生物

17、，可增加識別點數(shù) 包括二級離子和多級離子包括二級離子和多級離子 可最多結合三種不同的技術確定最小識別點數(shù)可最多結合三種不同的技術確定最小識別點數(shù)二、定性（確證）方法二、定性（確證）方法 m/z + 202122m/z- 17979.9ESI-ESI+甜蜜素甜蜜素SN/T 1948-2007 進出口食品中環(huán)己基氨進出口食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的檢測方法基磺酸鈉的檢測方法 應研究樣品基質(zhì)和檢測器應研究樣品基質(zhì)和檢測器性能引起的圖譜改變性能引起的圖譜改變 OHHNOHHN化合物保留時間（min）定性離子對定量離子對Fragmentor（V）CE（V）麻黃堿6.9166/148166/148801016

18、6/13320偽麻黃堿8.0166/148166/1488010166/13320 外標法外標法 內(nèi)標法內(nèi)標法 標準加入法標準加入法 基質(zhì)效應基質(zhì)效應三、定量方法三、定量方法 三、定量方法三、定量方法 1. 外標法外標法 單點校正法單點校正法 外標標準曲線法外標標準曲線法 三、定量方法三、定量方法 單點校正法實際上是利用原點作為標準曲線上的另單點校正法實際上是利用原點作為標準曲線上的另一個點，當方法存在系統(tǒng)誤差時（即標準工作曲線不一個點，當方法存在系統(tǒng)誤差時（即標準工作曲線不通過原點），單點校正法的誤差較大通過原點），單點校正法的誤差較大 單點校正法單點校正法 三、定量方法三、定量方法以純?nèi)軇?/p>

19、配制標準工作溶液以純?nèi)軇┡渲茦藴使ぷ魅芤?GB/T 21317-2007 動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測方法方法 “根據(jù)樣液中被測四環(huán)素類獸藥殘留的含量情況，選定根據(jù)樣液中被測四環(huán)素類獸藥殘留的含量情況，選定峰高相近的標準工作溶液峰高相近的標準工作溶液”，“對標準工作溶液和樣液等體對標準工作溶液和樣液等體積參插進樣測定積參插進樣測定” GB/T 22147-2008 飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖飼料中沙丁胺醇、萊克多巴胺和鹽酸克侖特羅的測定特羅的測定 “采用采用M+1的準分子離子的色譜峰面積做單點校正定量的準分子離子的色譜峰面積做單點校正定量”

20、單點校正法單點校正法 三、定量方法三、定量方法以空白樣品提取液配制標準工作溶液以空白樣品提取液配制標準工作溶液 GB/T 21320-2007 動物源食品中阿維菌素類藥物殘留量動物源食品中阿維菌素類藥物殘留量的測定的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 “分別取適量試樣溶液和相近濃度的基質(zhì)添加標準工作分別取適量試樣溶液和相近濃度的基質(zhì)添加標準工作溶液，做單點校正溶液，做單點校正”，“對標準工作液和樣品溶液等對標準工作液和樣品溶液等體積參插進樣進行測定體積參插進樣進行測定”單點校正法單點校正法 三、定量方法三、定量方法 以純?nèi)軇┡渲茦藴使ぷ魅芤阂约內(nèi)軇┡渲茦藴使ぷ魅芤?GB/T 2226

21、0-2008 飼料中甲基睪丸酮的測定飼料中甲基睪丸酮的測定 高效液相高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 22955-2008 河豚魚、鰻魚和烤鰻中苯并咪唑類河豚魚、鰻魚和烤鰻中苯并咪唑類藥物殘留量的測定藥物殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 21324-2007 食用動物肌肉和肝臟中苯并咪唑類食用動物肌肉和肝臟中苯并咪唑類藥物殘留量檢測方法藥物殘留量檢測方法外標標準曲線法外標標準曲線法 三、定量方法三、定量方法以空白樣品提取液配制標準工作溶液以空白樣品提取液配制標準工作溶液 GB/T 23409-2009 蜂王漿中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強力霉素蜂王漿中

22、土霉素、四環(huán)素、金霉素、強力霉素殘留量的測定殘留量的測定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23408-2009 蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測定蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留量測定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 22986-2008 牛奶和奶粉中氫化潑尼松殘留量的測定牛奶和奶粉中氫化潑尼松殘留量的測定 液相色液相色譜譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 22978-2008 牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測定牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法外標標準曲線法外標標準曲線法 三、定量方法三、定量方法 空白樣品加入系列濃度的標準工作

23、液，提取后得到系列空白樣品加入系列濃度的標準工作液，提取后得到系列基質(zhì)標準工作液基質(zhì)標準工作液 GB/T 21312-2007 動物源性食品中動物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測種喹諾酮藥物殘留檢測方法方法 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 22969-2008 奶粉和牛奶中鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡那奶粉和牛奶中鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡那霉素殘留量的測定霉素殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測定水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜串聯(lián)質(zhì)譜法法 GB/T 21313-2007 動物源性食品中動物源性食品

24、中-受體激動劑殘留檢測方法受體激動劑殘留檢測方法 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法外標標準曲線法外標標準曲線法 a: 以純?nèi)軇┡渲茦藴嗜芤?，測定的峰面積以純?nèi)軇┡渲茦藴嗜芤?，測定的峰面積Aab: 以空白樣品的提取液配制標準溶液，測定的峰面積以空白樣品的提取液配制標準溶液，測定的峰面積Abc: 在空白樣品加入標準溶液，提取后得到基質(zhì)標準溶液，測在空白樣品加入標準溶液，提取后得到基質(zhì)標準溶液，測定的峰面積定的峰面積Ac絕對回收率絕對回收率 Ac/Aa，包含提取效率和基質(zhì)效應，包含提取效率和基質(zhì)效應提取回收率提取回收率 Ac/Ab，不包含基質(zhì)效應，不包含基質(zhì)效應絕對回收率絕對回收率 = 提取

25、回收率提取回收率*絕對基質(zhì)效應絕對基質(zhì)效應GB/T 27404-2008 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測食品理化檢測“如果檢測結果用回收率進行校準，應在原始記錄的結果中如果檢測結果用回收率進行校準，應在原始記錄的結果中明確說明并描述校準公式明確說明并描述校準公式”三、定量方法三、定量方法 三、定量方法三、定量方法 2. 內(nèi)標法內(nèi)標法 單點校正法單點校正法 內(nèi)標標準曲線法內(nèi)標標準曲線法 三、定量方法三、定量方法 2. 內(nèi)標法內(nèi)標法內(nèi)標物要滿足以下要求：內(nèi)標物要滿足以下要求： （a）試樣中不含有該物質(zhì)；試樣中不含有該物質(zhì)；（b）與被測組分性質(zhì)比較接近；與被測組分性質(zhì)比較接近；（

26、c）不與試樣發(fā)生化學反應；不與試樣發(fā)生化學反應；（d）出峰位置應位于被測組分附近。出峰位置應位于被測組分附近。 內(nèi)標法計算式內(nèi)標法計算式 準確稱取一定量的試樣準確稱取一定量的試樣m，加入一定量內(nèi)標物加入一定量內(nèi)標物ms，試樣中待測物的含量試樣中待測物的含量wi為：為：ssssssAfAfmm;AfAfmmiiiiii 100100100sssssiis AfAfmmmAfAfmmmwiiii 內(nèi)標法特點內(nèi)標法特點(a) 內(nèi)標法的準確性較高，操作條件和進樣量的稍許變動對內(nèi)標法的準確性較高，操作條件和進樣量的稍許變動對定量結果的影響不大定量結果的影響不大(b) 內(nèi)標物和被測組分處在同一基體中，因此

27、可以消除基體內(nèi)標物和被測組分處在同一基體中，因此可以消除基體帶來的干擾帶來的干擾 (c) 若將內(nèi)標法中的試樣取樣量和內(nèi)標物加入量固定，則：若將內(nèi)標法中的試樣取樣量和內(nèi)標物加入量固定，則：常數(shù)sAAwii內(nèi)標標準曲線法內(nèi)標標準曲線法 內(nèi)標標準曲線定量方法內(nèi)標標準曲線定量方法 配制系列標準溶液，分別加入等量的內(nèi)標物配制系列標準溶液，分別加入等量的內(nèi)標物, ,混合后進行色譜混合后進行色譜分析。以待測組分的濃度為橫坐標，待測組分與內(nèi)標物峰面積分析。以待測組分的濃度為橫坐標，待測組分與內(nèi)標物峰面積（或峰高）的比率為縱坐標建立標準曲線（或線性方程）（或峰高）的比率為縱坐標建立標準曲線（或線性方程） 在分析

28、未知樣品時，分別加入與繪制標準曲線時等量的內(nèi)標在分析未知樣品時，分別加入與繪制標準曲線時等量的內(nèi)標物，用樣品與內(nèi)標物峰面積（或峰高）的比值，在標準曲線上查物，用樣品與內(nèi)標物峰面積（或峰高）的比值，在標準曲線上查出被測組分的濃度或用線形方程計算出被測組分的濃度或用線形方程計算 三、定量方法三、定量方法內(nèi)標標準曲線法內(nèi)標標準曲線法以純?nèi)軇┡渲葡盗袠藴使ぷ魅芤阂约內(nèi)軇┡渲葡盗袠藴使ぷ魅芤?GB/T 23406-2009 腸衣中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留腸衣中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測定量的測定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23407-2009 蜂王漿中硝基咪唑類藥物

29、及其代謝物殘蜂王漿中硝基咪唑類藥物及其代謝物殘留量的測定留量的測定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23411-2009 蜂王漿中蜂王漿中17種喹諾酮類藥物殘留量的測定種喹諾酮類藥物殘留量的測定 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 GB/T 23412-2009 蜂蜜中蜂蜜中19種喹諾酮類藥物殘留量的測定方種喹諾酮類藥物殘留量的測定方法法 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法質(zhì)譜法 三、定量方法三、定量方法 內(nèi)標標準曲線法內(nèi)標標準曲線法以空白樣品的提取液配制系列標準工作溶液以空白樣品的提取液配制系列標準工作溶液 GB/T 22992-2008 牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉

30、米赤霉酮、牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、雙烯雌酚殘留量的測定己烯雌酚、己烷雌酚、雙烯雌酚殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串串聯(lián)質(zhì)譜法聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 22959-2008 河豚魚、鰻魚和烤鰻中氯霉素、甲砜霉河豚魚、鰻魚和烤鰻中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定素和氟苯尼考殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 20756-2006 可食動物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、可食動物肌肉、肝臟和水產(chǎn)品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定甲砜霉素和氟苯尼考殘留量的測定 液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 三、定量方法三、定量方法內(nèi)標標準曲線

31、法內(nèi)標標準曲線法 空白樣品加入系列濃度的標準工作液，提取后得到空白樣品加入系列濃度的標準工作液，提取后得到基質(zhì)標準工作液基質(zhì)標準工作液 GB/T 21311-2007 動物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留動物源性食品中硝基呋喃類藥物代謝物殘留量檢測方法量檢測方法 高效液相色譜高效液相色譜 串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 GB/T 21310-2007 動物源性食品中甲狀腺拮抗劑殘留量檢測方動物源性食品中甲狀腺拮抗劑殘留量檢測方法法 高效液相色譜高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法 沙丁胺醇沙丁胺醇-D36.10克倫特羅克倫特羅-D915.6沙丁胺醇沙丁胺醇6.16塞曼特羅塞曼特羅7.01特布他林特布他林

32、6.24塞布特羅塞布特羅11.07萊克多巴胺萊克多巴胺14.65克倫特羅克倫特羅15.66溴代克倫特羅溴代克倫特羅16.52溴布特羅溴布特羅17.47苯氧丙酚胺苯氧丙酚胺18.72馬布特羅馬布特羅18.77馬賁特羅馬賁特羅23.11內(nèi)標的選擇內(nèi)標的選擇 GB/T 22286-2008保留時間保留時間 minSN/T 1924-2007 三、定量方法三、定量方法3. 標準加入法標準加入法先測定出未知樣品的大概值，然后根先測定出未知樣品的大概值，然后根據(jù)這個測定值去設定標準加入法據(jù)這個測定值去設定標準加入法標準加入法中第一點加入標準溶液為標準加入法中第一點加入標準溶液為“0”，第二點加入的量約與待

33、測組分，第二點加入的量約與待測組分的含量大致相等，共的含量大致相等，共35個點，以加入個點，以加入的標準溶液的濃度為橫坐標，峰面積的標準溶液的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制工作曲線為縱坐標繪制工作曲線工作曲線在橫坐標延長線上的交點到工作曲線在橫坐標延長線上的交點到坐標原點的距離即為樣品中待測組分坐標原點的距離即為樣品中待測組分的濃度的濃度 三、定量方法三、定量方法3. 標準加入法標準加入法 標準加入法可以看作是內(nèi)標法和外標法的結合標準加入法可以看作是內(nèi)標法和外標法的結合 由于待測組分以及加入的標準溶液處在相同的樣品由于待測組分以及加入的標準溶液處在相同的樣品基體中，因此，這種方法可以消除基質(zhì)

34、干擾基體中，因此，這種方法可以消除基質(zhì)干擾 但是，由于對每一個樣品都要配制三個以上的、含但是，由于對每一個樣品都要配制三個以上的、含樣品溶液和標準溶液的混合溶液，因此，這種方法樣品溶液和標準溶液的混合溶液，因此，這種方法不適于大批樣品的分析不適于大批樣品的分析 前提前提 具有線性關系，并且標準曲線通過坐標原點具有線性關系，并且標準曲線通過坐標原點 盡可能減小系統(tǒng)誤差盡可能減小系統(tǒng)誤差 試樣的基質(zhì)效應不得隨被測組分含量對干擾組分含量試樣的基質(zhì)效應不得隨被測組分含量對干擾組分含量比值改變而改變比值改變而改變 必須扣除背景和空白值必須扣除背景和空白值3. 標準加入法標準加入法三、定量方法三、定量方法

35、 三、定量方法三、定量方法概念概念產(chǎn)生機制產(chǎn)生機制來源來源如何評價如何評價如何消除如何消除4. 基質(zhì)效應基質(zhì)效應 三、定量方法三、定量方法 基質(zhì)效應是指在樣品測試過程中，由于待測物以外的其基質(zhì)效應是指在樣品測試過程中，由于待測物以外的其他物質(zhì)的存在，直接或間接影響待測物響應的現(xiàn)象他物質(zhì)的存在，直接或間接影響待測物響應的現(xiàn)象 由于質(zhì)譜檢測的高選擇性，基質(zhì)效應的影響在色譜圖上由于質(zhì)譜檢測的高選擇性，基質(zhì)效應的影響在色譜圖上往往觀察不到，即空白基質(zhì)色譜圖表現(xiàn)為一條直線，但往往觀察不到，即空白基質(zhì)色譜圖表現(xiàn)為一條直線，但這些共流出組分會改變待測物的離子化效率，引起對待這些共流出組分會改變待測物的離子化效率，引起對待測物檢測信號的抑制或提高測物檢測信號的抑制或提高4. 基質(zhì)效應基質(zhì)效應 三、定量方法三、定量方法 待測物與基質(zhì)成待測物與基質(zhì)成分的電荷競爭分的電荷競爭 形成氣態(tài)離子的形成氣態(tài)離子的競爭競爭 改變表面張力，改變表面張力，形成大液滴，不形成大液滴