細(xì)胞骨架的光鏡觀察—微絲的觀察_第1頁
細(xì)胞骨架的光鏡觀察—微絲的觀察_第2頁
細(xì)胞骨架的光鏡觀察—微絲的觀察_第3頁
細(xì)胞骨架的光鏡觀察—微絲的觀察_第4頁
細(xì)胞骨架的光鏡觀察—微絲的觀察_第5頁
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細(xì)胞骨架的光鏡觀察實驗?zāi)康?實驗原理 實驗方法 作業(yè) 返回大綱1實驗?zāi)康恼莆诊@示細(xì)胞骨架的染色方法。光鏡觀察細(xì)胞骨架纖維。 返回2實驗原理在真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,普遍存在著一個由幾種纖維狀結(jié)構(gòu)組成的網(wǎng)架,它由微管,微絲,中間纖維和微梁構(gòu)成。細(xì)胞骨架決定著細(xì)胞形狀的保持和改變,同時也是胞質(zhì)中許多物質(zhì)和顆粒運輸以及細(xì)胞各種運動的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),甚至還被認(rèn)為在能量轉(zhuǎn)化和信息傳遞方面也有作用。.如果用非離子去垢劑TritonX-100處理細(xì)胞,可將質(zhì)膜結(jié)構(gòu)與細(xì)胞內(nèi)許多蛋白質(zhì)溶解,但細(xì)胞骨架蛋白卻不被溶解破壞。因此,細(xì)胞先經(jīng)TritonX-100處理后,再用考馬斯亮藍(lán)G250染色,其胞質(zhì)背景著色弱,而細(xì)胞骨架著色清晰,從而提高分辨率。 返回3實驗方法撕取洋蔥鱗莖內(nèi)的表皮細(xì)胞(約1cm大小若干片)置于裝有pH6.8磷酸緩沖液的50ml燒杯中,使其下沉。吸去磷酸緩沖液,用1% TritonX-100處理20-30min。吸去TritonX-100,用M-緩沖液洗三次,每次8min。3%戊二醛固定20min。PH6.8磷酸緩沖液洗三次.每次8min。0.2%考馬斯亮藍(lán)G250染色20-30min。用蒸餾水洗1-2次,細(xì)胞置于載玻片上,加蓋玻片,于普通光學(xué)顯微鏡下觀察。 返

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