臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)習(xí)指導(dǎo)和習(xí)題集

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)離心機(jī)1.離心機(jī)工作原理: 離心是利用旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的差異進(jìn)行分離。懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下，由于巨大的離心力作用，使懸浮的微小顆粒（細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降，從而使溶液得以分離，顆粒的沉降速度取決于離心機(jī)的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度。2.相對(duì)離心力和沉降速度:相對(duì)離心力：是指在離心場(chǎng)中，作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù)，單位是重力加速度“g”。沉降速度：在強(qiáng)大離心力作用下，單位時(shí)間內(nèi)物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的距離。3常用的離心方法(

2、1)差速離心法(又稱分步離心法)在同一離心條件下，采用不同的離心速度和離心時(shí)間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法。差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。差速離心法的優(yōu)點(diǎn)是：操作簡(jiǎn)單，離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開(kāi)，并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子；分離時(shí)間短、重復(fù)性高；樣品處理量大。缺點(diǎn)是：分辨率有限、分離效果差，不能一次得到純顆粒；壁效應(yīng)嚴(yán)重等。(2)密度梯度離心法(又稱區(qū)帶離心法)分為速率區(qū)帶離心法和等密度區(qū)帶離心法。優(yōu)點(diǎn)：具有很好的分辨率，分離效果好，可一次獲得較純顆粒；適用范圍廣并可防止已形成區(qū)帶由于對(duì)流而引起混合。缺點(diǎn)是：離心時(shí)間較長(zhǎng)；需要制備梯度液；操作嚴(yán)格，不宜掌握。離

3、心機(jī)的分類與結(jié)構(gòu)（1）低速離心機(jī)10000r以內(nèi)，RCF15000g以內(nèi)，它主要用作血漿、血清的分離及腦脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分離；高速離心機(jī)20000-25000r以內(nèi)，RCF89000g以內(nèi)，它主要用于臨床實(shí)驗(yàn)室分子生物學(xué)中的DNA、RNA的分離和基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室對(duì)各種生物細(xì)胞、無(wú)機(jī)物溶液、懸浮液及膠體溶液的分離、濃縮、提純樣品等；超速離心機(jī)50000-80000r以內(nèi)，RCFg以內(nèi)：制備型超速離心機(jī)主要用于生物大分子、細(xì)胞器和病毒等的分離純化，能使亞細(xì)胞器分級(jí)分離，并可用于測(cè)定蛋白質(zhì)及核酸的分子量；（2）離心機(jī)的結(jié)構(gòu):離心機(jī)的結(jié)構(gòu)由轉(zhuǎn)動(dòng)裝置、速度控制系統(tǒng)、定時(shí)器、離心套管、溫度控制系統(tǒng)

4、、真空系統(tǒng)等，高速和超速離心機(jī)一定有制冷系統(tǒng)。（3）離心機(jī)的主要技術(shù)參數(shù)及性能指標(biāo)：主要參數(shù)包括：最大轉(zhuǎn)速；最大離心力；最大容量等。離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的常用標(biāo)記及轉(zhuǎn)頭參數(shù)。轉(zhuǎn)頭參數(shù)有，Rmax、Rmin、RCFmax、RCFmin、RPMmax、等。鞏固與練習(xí)一、選擇題1、應(yīng)用離心沉降進(jìn)行物質(zhì)的分析和分離的技術(shù)稱為（C）A、向心現(xiàn)象B、離心現(xiàn)象C、離心技術(shù)D、向心技術(shù)2、在強(qiáng)大離心力作用下，單位時(shí)間內(nèi)物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的距離稱為（C）A、沉降運(yùn)動(dòng)B、重力沉降C、沉降速度D、離心技術(shù)3、下列屬于低速離心機(jī)部件的是（C）A、真空系統(tǒng)B、冷凝器C、離心轉(zhuǎn)盤D、水冷卻系統(tǒng)4、單位離心力場(chǎng)下的沉降速度是指（C）A、向心速

5、度B、離心速度C、沉降系數(shù)D、上浮速度5、沉降系數(shù)與樣品顆粒的質(zhì)量或密度的關(guān)系，下列敘述中正確的是（A）A、質(zhì)量和密度越大，沉降系數(shù)越大B、質(zhì)量越小，沉降系數(shù)越大C、質(zhì)量或密度與沉降系數(shù)無(wú)關(guān)D、密度越大，沉降系數(shù)越小6、差速離心法和速率區(qū)帶離心法進(jìn)行分離時(shí)，主要的根據(jù)是不同樣品組份的（C）A、密度B、重力C、沉降系數(shù)D、體積7、根據(jù)樣品組份的密度差別進(jìn)行分離純化的分離方法是（B）A、差速離心法B、密度梯度分析離心法C、速率區(qū)帶離心法D、等密度區(qū)帶離心法8、表示從轉(zhuǎn)軸中心至試管最內(nèi)緣或試管頂?shù)木嚯x的轉(zhuǎn)頭參數(shù)是（B）A、RPMmaxB、RmaxC、RminD、RCFmax9、利用不同的粒子在離心場(chǎng)

6、中沉降的差別，在同一離心條件下，通過(guò)不斷增加相對(duì)離心力，使一個(gè)非均勻混合液內(nèi)大小、形狀不同的粒子分布沉淀的離心方法是（A ）A、差速離心法B、速率區(qū)帶離心法C、等密度區(qū)帶離心法D、高速離心法10、下列轉(zhuǎn)頭標(biāo)識(shí)代表固定角轉(zhuǎn)頭的是（A ）A、FAB、VC、SWD、CF11、低速離心機(jī)可達(dá)到的最大轉(zhuǎn)速是（A ）A、10000B、8000C、6000D、1200012、高速離心機(jī)由于運(yùn)轉(zhuǎn)速度高，一般都帶有（C）A、自動(dòng)控制裝置B、平衡控制裝置C、低溫控制裝置D、室溫控制裝置二、簡(jiǎn)答題1離心機(jī)的工作原理是什么？2差速離心法的優(yōu)、缺點(diǎn)是什么？3低速離心機(jī)、高速離心機(jī)、超速離心機(jī)的應(yīng)用范圍是什么？生物安全柜

7、一選擇題1、生物安全柜根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異，分為( C )A. 1級(jí) B. 2級(jí) C. 3級(jí) D. 4級(jí)下列有關(guān)1級(jí)生物安全柜功能特點(diǎn)的敘述中，正確的是（B）用于保護(hù)操作人員合樣品的安全，而不保護(hù)環(huán)境安全用于保護(hù)操作人員和環(huán)境安全，而不保護(hù)樣品安全用于保護(hù)操作人員安全，而不保護(hù)樣品和環(huán)境安全用于保護(hù)樣品和環(huán)境安全，而不保護(hù)操作人員安全生物安全柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)的主要目的是（B）保護(hù)試驗(yàn)樣品 B. 保護(hù)工作人員C. 保護(hù)環(huán)境 D. 保護(hù)試驗(yàn)安全和環(huán)境下列有關(guān)級(jí)生物安全柜性能特點(diǎn)的敘述中，不正確的是（D）為臨床生物防護(hù)中應(yīng)用最普遍的一類生物安全柜可同時(shí)保護(hù)操作人員、處理樣品安全和環(huán)境安全進(jìn)入和

8、排出安全柜的氣體均須經(jīng)HEPA過(guò)濾器過(guò)濾空氣的流動(dòng)為單向、非循環(huán)式下列有關(guān)生物安全柜的實(shí)驗(yàn)操作中，不正確的是（D）手臂緩慢移動(dòng)，避免影響正常的氣流盡量避免江離心機(jī)、漩渦振蕩器安裝在柜內(nèi)柜內(nèi)盡量不要使用明火處理不同標(biāo)本時(shí)，因柜內(nèi)有垂直潔凈氣流，故不用擔(dān)心標(biāo)本之間相互污染二簡(jiǎn)答題1. 生物安全柜的工作原理是什么？答：生物安全柜是防止操作處理過(guò)程中某些含有危險(xiǎn)性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負(fù)壓安全裝置。其工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸，使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài)，通過(guò)垂直氣流來(lái)保護(hù)工作人員；外界空氣經(jīng)高效空氣過(guò)濾器過(guò)濾后進(jìn)入安全柜內(nèi)，以避免處理樣品被污染；柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾器過(guò)

9、濾后再排放到大氣中，以保護(hù)環(huán)境。臨床分析化學(xué)儀器1.光譜分析技術(shù)的基礎(chǔ)理論吸收光譜是由于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收產(chǎn)生的，物質(zhì)的吸收光譜取決于物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，包括分子吸收光譜和原子吸收光譜。分子吸收光譜包括電子、振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)這三種光譜。利用被測(cè)定組分中的分子所產(chǎn)生的吸收光譜進(jìn)行測(cè)定的分析方法，即分子吸收法，包括可見(jiàn)與紫外分光光度法、紅外光譜法；利用被測(cè)定組分中的原子吸收光譜進(jìn)行測(cè)定的分析方法，即原子吸收法。原子吸收光譜通常是線狀光譜，只包括外層電子躍遷吸收的能量，所以原子吸收光譜儀器采用的是銳線光源。發(fā)射光譜是物質(zhì)的分子、原子或離子接受能量輻射躍遷到激發(fā)態(tài)，由激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時(shí)以輻射的方式釋放能量而產(chǎn)生的光

10、譜。如熒光光譜儀。2.紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)2.1紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)由光源、單色器、樣品池、檢測(cè)器和放大顯示系統(tǒng)等五部分組成。光源是提供入射光的裝置，包括熱輻射燈（鎢燈、鹵鎢燈等），氣體放電燈（氫燈、氘燈及氙燈等）多種。單色器是將來(lái)自光源的復(fù)合光分解為單色光并分離出所需波段光束的裝置，其性能直接影響射出光的純度，從而影響測(cè)定的靈敏度、選擇性及校正曲線的線性范圍。吸收池是用來(lái)盛放被測(cè)溶液的器件，同時(shí)也決定著透光液層厚度，可用玻璃、石英。檢測(cè)器是把光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)的裝置，常用的有光電管、光電倍增管、光電二極管陣列、等。信號(hào)顯示系統(tǒng)是把放大的信號(hào)以適當(dāng)?shù)姆绞?/p>

11、顯示或記錄下來(lái)的裝置。3熒光光譜儀3.1熒光發(fā)生的機(jī)理分子吸收了照射光的高能量后，處于基態(tài)最低能級(jí)的分子，到達(dá)激發(fā)態(tài)，到達(dá)激發(fā)態(tài)的各個(gè)振動(dòng)能級(jí)的分子，和周圍的分子碰撞，并把部分能量以熱能的形式傳給周圍的分子，自己降落到單激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)。然后，由此最低振動(dòng)能級(jí)向基態(tài)的各個(gè)振動(dòng)能級(jí)躍遷，同時(shí)以發(fā)光的形式釋放出其能量。簡(jiǎn)單的說(shuō)，物質(zhì)經(jīng)高能量射線激發(fā)后，所發(fā)出的比原激發(fā)光波較長(zhǎng)的可見(jiàn)光稱為熒光。3.2激發(fā)光譜和熒光光譜任何發(fā)射熒光的物質(zhì)都具有激發(fā)光譜和熒光光譜兩個(gè)特征光譜，它們是熒光分析中定性和定量的基礎(chǔ)。3.3熒光光譜儀的工作原理和主要結(jié)構(gòu)熒光分析法和紫外、原子吸收分析方法有本質(zhì)的不同。它所測(cè)

12、量的是待測(cè)物質(zhì)所發(fā)射的熒光強(qiáng)弱，而不是物質(zhì)對(duì)光譜的吸收強(qiáng)弱，屬于發(fā)射光譜分析。熒光分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)包括五個(gè)基本部分：激光光源：用來(lái)激發(fā)樣品中熒光分子產(chǎn)生熒光。常用汞燈、氙燈等單色器：用來(lái)分離出所需要的單色光。儀器中具有兩個(gè)單色器，一是激發(fā)單色器，用于選擇激發(fā)光波長(zhǎng)；二是發(fā)射單色器，用于選擇發(fā)射到檢測(cè)器上的熒光波長(zhǎng)。樣品池：放置測(cè)試樣品，用石英做成。檢測(cè)器：作用是接受光信號(hào)，并將其轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)。4原子吸收光譜儀4.1原子吸收光譜儀基本工作原理是測(cè)定氣態(tài)的自由原子對(duì)某種特定光譜的吸收。其結(jié)構(gòu)原理與普通的分光光度計(jì)是相似的，只是用銳線光源代替了連續(xù)光源，用原子化器代替吸收池?？招年帢O燈發(fā)出相應(yīng)待測(cè)元

13、素特征波長(zhǎng)的射線，它穿過(guò)火焰，把試樣的溶液以細(xì)粒子流的形式噴射到火焰上，部分射線被吸收。這一部分正比于試樣的濃度，測(cè)量吸收量將其與標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對(duì)比，從而確定濃度。4.2原子吸收光譜儀基本結(jié)構(gòu)由光源、原子化器、分光系統(tǒng)及檢測(cè)系統(tǒng)四個(gè)主要部件組成。光源的作用是發(fā)射被測(cè)元素的特征共振輻射。應(yīng)用較多的有空心陰極燈。原子化器作用是提供能量將液態(tài)試樣中的待測(cè)元素干燥蒸發(fā)使之轉(zhuǎn)變成原子態(tài)的蒸氣。常用的有火焰原子化器和石墨爐原子化器兩種。分光系統(tǒng)作用是將所需要的共振吸收線分離出來(lái)。分光系統(tǒng)的關(guān)鍵部件是色散元件，可以是棱鏡或衍射光柵。檢測(cè)系統(tǒng)是將接收到的光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)，然后再經(jīng)同步檢波放大器放大，同時(shí)把接收

14、到的非被測(cè)信號(hào)濾掉。練習(xí)與鞏固一、選擇題1紫外-可見(jiàn)分光光度法是基于被測(cè)物質(zhì)對(duì)（D）A光的發(fā)射 B 光的衍射 C 光的散射 D 光的吸收2.輻射能作用于粒子（原子、分子或離子）后,粒子選擇性地吸收某些頻率的輻射能,并從低能態(tài)（基態(tài)）躍遷至高能態(tài)（激發(fā)態(tài)）,這種現(xiàn)象稱為（C）A.折射B.發(fā)射C.吸收D.散射3.棱鏡或光柵可作為（B）A.濾光元件B.聚焦元件C.分光元件D感光元件4.原子吸收分光光度計(jì)的主要部件有光源、單色器、檢測(cè)器和（C）A.電感耦合等離子體B.空心陰極燈C.原子化器D.輻射源5下述中不是石墨爐原子化器特點(diǎn)的是（C）A電極插入樣品觸點(diǎn)時(shí)好時(shí)壞B重復(fù)性差C原子化效率較低D設(shè)備復(fù)雜下

15、述屬于發(fā)射光譜的是（D）A紫外吸收光譜B原子吸收光譜C紅外光譜D熒光光譜7在原子吸收分析法中,被測(cè)定元素的靈敏度、準(zhǔn)確度在很大程度上取決（C）A空心陰極燈B火焰C原子化系統(tǒng)D分光系統(tǒng)8分光光度計(jì)出現(xiàn)不能調(diào)零故障時(shí)，可能的原因包括（A）A光門不能完全關(guān)閉B比色器架沒(méi)落位C光能量不夠D光源損壞二、簡(jiǎn)答題1簡(jiǎn)述光吸收定律的物理意義及使用范圍。2紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)及各部分功能是什么？3簡(jiǎn)述原子吸收光譜儀的主要結(jié)構(gòu)、性能及特點(diǎn)。4簡(jiǎn)述熒光光譜儀的主要結(jié)構(gòu)及特點(diǎn)。自動(dòng)生化分析相關(guān)儀器1自動(dòng)生化分析儀根據(jù)儀器反應(yīng)裝置結(jié)構(gòu)不同，可分為連續(xù)流動(dòng)式、離心式、分立式和干化學(xué)式；根據(jù)自動(dòng)化程度不同，可分為

16、全自動(dòng)化和半自動(dòng)化。分立式自動(dòng)生化分析儀是目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用最多的一類自動(dòng)生化分析儀，工作原理與手工操作相似，按手工操作的方式編排程序，用加樣探針將樣品加入各自的反應(yīng)杯中，試劑探針按一定時(shí)間自動(dòng)定量加入試劑，經(jīng)攪拌器充分混勻后，在一定條件下反應(yīng)。反應(yīng)杯同時(shí)作為比色杯進(jìn)行比色測(cè)定。各環(huán)節(jié)用傳送帶連接，按順序依次操作，故稱為“順序式”分析。2.自動(dòng)生化分析儀的重要的結(jié)構(gòu)單元樣品處理系統(tǒng)（1）樣品架：有圓盤狀和傳送條帶狀等類型，用以放置樣品杯或原始樣品管。（2）試劑倉(cāng)：用來(lái)放置實(shí)驗(yàn)試劑，一般都有冷藏裝置，可同時(shí)放置幾十種試劑。（3）樣品和試劑取樣單元：由機(jī)械臂、樣品針或試劑針、吸量器、步進(jìn)馬達(dá)等組成。機(jī)

17、械臂根據(jù)計(jì)算機(jī)的指令攜帶樣品針或試劑針移動(dòng)至指定位置，由吸量器準(zhǔn)確吸量，轉(zhuǎn)移至反應(yīng)杯中。（4）攪拌器：使反應(yīng)液和樣品充分混勻，由電機(jī)和攪拌棒組成。檢測(cè)系統(tǒng)（1）光源：大多采用鹵素?zé)?，工作波長(zhǎng)為325800nm，少數(shù)采用氙燈，工作波長(zhǎng)為285750nm。（2）分光裝置：分光元件一般采用干涉濾光片或光柵。干涉濾光片價(jià)格便宜，使用方便，但易受潮霉變。光柵分光有前分光和后分光兩種，目前自動(dòng)生化分析儀多采用后分光，即光源光線直接透過(guò)樣品，通過(guò)光柵，再進(jìn)行吸光度的檢測(cè)。使用后分光技術(shù)，可以在同一體系中測(cè)定多種成分。（3）比色杯：通常采用石英或者優(yōu)質(zhì)塑料。儀器的檢測(cè)速度與比色杯的數(shù)量也有關(guān)，數(shù)量更多，速度更

18、快。光徑一般為0.5cm1cm，小孔徑比色杯更節(jié)省試劑，一般都校正光徑到1cm。（4）恒溫裝置：通過(guò)溫度控制系統(tǒng)保證反應(yīng)在恒溫環(huán)境下進(jìn)行，反應(yīng)溫度通常為25、30、37。（5）清洗裝置：一般包括吸液針、吐液針和擦拭塊。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)具有樣品識(shí)別、自動(dòng)吸加樣品和試劑、混勻、恒溫調(diào)控、結(jié)果計(jì)算和打印、數(shù)據(jù)管理等功能。3自動(dòng)生化分析儀的參數(shù)設(shè)置與操作（1）波長(zhǎng)的選擇：當(dāng)測(cè)定體系中只有一種組分或混合溶液中待測(cè)組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收峰無(wú)重疊時(shí)，可用單波長(zhǎng)檢測(cè)。一般情況下自動(dòng)生化分析儀常用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)。（2）溫度的選擇：自動(dòng)生化分析儀通常設(shè)有25、30、37三種溫度。（3）分析方法的選擇：主要有終

19、點(diǎn)分析法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法、比濁測(cè)定法等。（4）分析時(shí)間的選擇：一點(diǎn)終點(diǎn)法的分析時(shí)間應(yīng)設(shè)在待測(cè)物質(zhì)反應(yīng)將完成時(shí)，過(guò)早會(huì)由于反應(yīng)未達(dá)到終點(diǎn)而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，過(guò)遲易受其他反應(yīng)物質(zhì)干擾。二點(diǎn)終點(diǎn)法應(yīng)選擇合適的第一試劑和第二試劑加入時(shí)間，以消除標(biāo)本空白和內(nèi)源性物質(zhì)干擾。連續(xù)監(jiān)測(cè)法的分析時(shí)間選擇在零級(jí)反應(yīng)期，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。（5）線性范圍的選擇：主要是設(shè)定吸光度的最大值和最小值。（6）校正方法：自動(dòng)生化分析儀有多種校正方法，常用的有一點(diǎn)校正、兩點(diǎn)校正、多點(diǎn)校正等。練習(xí)與鞏固一、選擇題1自動(dòng)生化儀比色杯的材料多用（D）A.普通玻璃B.隔熱玻璃C.石英和玻璃D.石英和優(yōu)質(zhì)塑料2大多數(shù)生化分析儀的校正后光

20、徑是（B）A. 0.5cmB. 1 cmC. 1.5cmD. 2 cm3.為消除內(nèi)源性干擾自動(dòng)生化分析儀利用下列哪種方法：（C）A.采用雙試劑B.采用單試劑C.采用雙波長(zhǎng)D.采用單波長(zhǎng)4.鹵素?zé)艨梢蕴峁┑墓庠床ㄩL(zhǎng)（A）A. 325800nmB. 400600nmC. 200400nmD. 400700nm5.（A）自動(dòng)生化分析儀的樣品和試劑在各自的試管中反應(yīng)。A.分立式B.離心式C.干化學(xué)式D.連續(xù)流動(dòng)式6.主波長(zhǎng)一般選擇待測(cè)組分的（D)波長(zhǎng)。A.較大B.最小C.峰谷處D.最大7.自動(dòng)生化儀利用物質(zhì)對(duì)光的（C），一般采用（）形式。A.吸收前分光B.發(fā)射后分光C.吸收后分光D.發(fā)射前分光二、填空

21、題1自動(dòng)生化分析儀按照反應(yīng)裝置分為（分立式）、（干化學(xué)式）、（管式）和（離心式）四類。2自動(dòng)生化分析儀的分析方法（終點(diǎn)分析法）、（連續(xù)檢測(cè)法）和（比濁測(cè)定法）。3.自動(dòng)生化儀通常設(shè)有（25）、（30）和（37度）三種溫度。4.自動(dòng)生化儀中的校準(zhǔn)品是為了校準(zhǔn)（系統(tǒng)）誤差，質(zhì)控品是為了控制（隨機(jī)）誤差。5.儀器的管理系統(tǒng)一般選用5%的（次氯酸鈉）溶液清洗，蠕動(dòng)泵（6）月更換一次。三、簡(jiǎn)答題1.何為后分光光路系統(tǒng)，有何特點(diǎn)？2.自動(dòng)生化分析儀的工作原理和基本結(jié)構(gòu)？免疫分析相關(guān)儀器1酶免疫分析儀 酶免疫分析是目前臨床應(yīng)用最多的。免疫分析技術(shù)，可分為非均相(或異相)酶免疫測(cè)定和均相酶免疫測(cè)定兩種方法。均

22、相酶免疫分析法測(cè)定對(duì)象是激素、藥物等小分子抗原或者是半抗原。非均相酶免疫分析法與均相酶免疫分析法最大的區(qū)別是前者需要將游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物分離。酶免疫分析儀基本工作原理就是分光光度法，在光電比色計(jì)或分光光度計(jì)的基礎(chǔ)上根據(jù)ELISA技術(shù)的特點(diǎn)而設(shè)計(jì)。與普通光電比色計(jì)的不同之處在于：比色液的容器不是比色皿，而是用塑料微孔板；酶標(biāo)儀以垂直光束通過(guò)微孔板中的待測(cè)液；酶標(biāo)儀通常使用光密度OD來(lái)表示吸光度。現(xiàn)在大部分的酶標(biāo)儀還加上了判讀系統(tǒng)和軟件操作分析系統(tǒng)等。酶免疫分析儀大多采用96孔的微孔板。酶免疫分析儀維護(hù)的重點(diǎn)是在光學(xué)部分，防止濾光片霉變。2.發(fā)光免疫分析儀全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)采用化學(xué)發(fā)光

23、技術(shù)和磁性微粒子分離技術(shù)相結(jié)合的免疫分析系統(tǒng)。小分子抗原物質(zhì)測(cè)定采用的是競(jìng)爭(zhēng)法，而大分子抗原物質(zhì)測(cè)定采用的是夾心法。全自動(dòng)微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)采用磁性微粒作為固相載體，以堿性磷酸酶作為發(fā)光劑，固相載體的應(yīng)用擴(kuò)大了測(cè)定的范圍。全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀發(fā)生在電極的表面，應(yīng)用了免疫學(xué)、鏈酶親合素生物包被技術(shù)及電化學(xué)發(fā)光標(biāo)記技術(shù)。3免疫比濁分析儀免疫比濁法根據(jù)檢測(cè)原理的不同又分為透射比濁法和散射比濁法。前者是在180角測(cè)定透射光的強(qiáng)度，后者是在5-96方向上（折射）測(cè)定散射光強(qiáng)度免疫透射比濁測(cè)定原理：抗原抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過(guò)剩時(shí)，形成的復(fù)

24、合物隨抗原增加而增加，反應(yīng)液的濁度亦隨之增加。速率散射比濁法原理：抗體過(guò)量的前提下，抗原抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。在抗原與抗體反應(yīng)的最高峰測(cè)定其復(fù)合物形成的量，信號(hào)的強(qiáng)度與抗原濃度成正比。4.時(shí)間分辨熒光免疫分析儀基本原理：用鑭系三價(jià)稀土離子及其螯合物(如Eu3+螯合物)作為示蹤物標(biāo)記抗原、抗體、核酸探針等物質(zhì)；當(dāng)免疫反應(yīng)發(fā)生后，將結(jié)合部分和游離的部分分離，根據(jù)稀土離子螯合物的熒光光譜的特點(diǎn)用時(shí)間分辨熒光分析儀延緩測(cè)量時(shí)間，等到背景熒光降低到零以后再測(cè)定。排除標(biāo)本中非特異性熒光的干擾，所得信號(hào)完全是稀土元素螯合物發(fā)射的特異熒光。根據(jù)熒光強(qiáng)度判斷反應(yīng)體系中分析物的濃度

25、，達(dá)到定量分析的目的。5放射免疫分析以放射性核素作為標(biāo)記物。最理想且臨床最常用的放射性核素是125 I練習(xí)與鞏固一、選擇題1酶免疫分析技術(shù)用于樣品中抗原或抗體的定量測(cè)定是基于（C）A酶標(biāo)記物參與免疫反應(yīng)B固相化技術(shù)的應(yīng)用，使結(jié)合和游離的酶標(biāo)記物能有效地分離C含酶標(biāo)記物的免疫復(fù)合物中酶可催化底物顯色，其顏色深淺與待測(cè)物含量相關(guān)D酶催化免疫反應(yīng)，復(fù)合物中酶的活性與樣品測(cè)值呈正比2均相酶免疫分析法的測(cè)定對(duì)象主要是（A）A小分子抗原或半抗原B不完全抗體C免疫復(fù)合物D補(bǔ)體3微孔板固相酶免疫測(cè)定儀器(酶標(biāo)儀)的固相支持是（D）A玻璃試管B磁性小珠C磁微粒DPVC微孔板4電化學(xué)發(fā)光免疫分析中，電化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行

26、在（C）A液相中B固相中C電極表面上D氣相中5速率散射比濁法之所以能比傳統(tǒng)的沉淀反應(yīng)試驗(yàn)大大地縮短時(shí)間，主要是因?yàn)椋ˋ）A在抗原抗體反應(yīng)的第一階段判定結(jié)果B不需復(fù)雜的儀器設(shè)備C使用低濃度的瓊脂或瓊脂糖D反應(yīng)的敏感度高6透射免疫比濁法檢測(cè)的原理是（D）A測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中免疫復(fù)合物反射的光的強(qiáng)度B測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中免疫復(fù)合物折射的光的強(qiáng)度C測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中免疫復(fù)合物吸收的光的強(qiáng)度D測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，透過(guò)的光的強(qiáng)度7散射免疫比濁法檢測(cè)的原理是（B）A測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中免疫復(fù)合物反射的光的強(qiáng)度B測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中免疫復(fù)合

27、物折射的光的強(qiáng)度C測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，被其中免疫復(fù)合物吸收的光的強(qiáng)度D測(cè)定光線通過(guò)反應(yīng)混合液時(shí)，透過(guò)的光的強(qiáng)度8最適合于時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定的熒光物質(zhì)（C）A異硫氰酸熒光素B四乙基羅丹明C鑭系稀土元素（Eu 3+）D藻紅蛋白9酶免疫分析儀的維護(hù)重點(diǎn)是（B）A計(jì)算機(jī)B光學(xué)部分，防止濾光片霉變C傳動(dòng)裝置D電倍增管二、簡(jiǎn)答題1速率散射免疫比濁法的基本原理是什么？酶免疫分析儀測(cè)定法基本工作原理？臨床電化學(xué)分析技術(shù)相關(guān)儀器1.pH值測(cè)定常用的指示電極是pH玻璃膜電極。2.離子選擇性電極是一種用特殊敏感膜制成的，對(duì)溶液中特定離子具有選擇性響應(yīng)的電極。3.電解質(zhì)分析儀多采用離子選擇性電極法，將離子選擇

28、性電極和參比電極插入被測(cè)樣品中組成電池，然后通過(guò)測(cè)量原電池電動(dòng)勢(shì)進(jìn)行測(cè)試分析。濕式電解質(zhì)分析儀由離子選擇性電極、參比電極、分析箱、測(cè)量電路、控制電路、驅(qū)動(dòng)電機(jī)和顯示器等組成。最重要的是電極系統(tǒng)，電極系統(tǒng)包括指示電極和參比電極。指示電極包括pH、Na+、K+、Li+、Cl-、Ca2+、Mg2+等離子選擇性電極。參比電極一般是銀/氯化銀電極。干式電解質(zhì)分析儀干化學(xué)測(cè)定法目前主要有兩類：反射光度法，離子選擇性電極（ISE）方法。4.血?dú)夥治鰞x結(jié)構(gòu)和工作原理血?dú)夥治鰞x：儀器結(jié)構(gòu)包括：電極系統(tǒng)、管路系統(tǒng)和電路系統(tǒng)三部分。被測(cè)血液樣品在管路系統(tǒng)的抽吸下，進(jìn)入樣品室內(nèi)的測(cè)量毛細(xì)管中。毛細(xì)管的管壁上開(kāi)有四個(gè)孔

29、，孔內(nèi)分別插有pH、PCO2和PO2三支測(cè)量電極和一支參比電極。pH和pH參比電極共同組成對(duì)pH值的測(cè)量系統(tǒng)。血液樣品進(jìn)入樣品室的測(cè)量管后，管路系統(tǒng)停止抽吸，樣品同時(shí)被四個(gè)電極所感測(cè)。電極產(chǎn)生對(duì)應(yīng)于pH、PCO2和PO2三項(xiàng)參數(shù)的電信號(hào)。這些電信號(hào)分別經(jīng)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換后送到微處理機(jī)。經(jīng)微機(jī)處理系統(tǒng)處理、運(yùn)算后，再分別被送到各自的顯示單元顯示或打印機(jī)打印出測(cè)量結(jié)果。測(cè)定后的樣本被沖洗液排入廢液瓶。5.血?dú)夥治鰞x電極主要包括兩大類，即離子極（主要有K+、Na+、Li+、Ca2+、Cl-、pH和PCO2）和伏安型傳感器（主要是PO2）。一般使用四支電極，分別是pH、PCO2、PO2電極和pH參比電極

30、。管路系統(tǒng)完成自動(dòng)定標(biāo)、自動(dòng)測(cè)量、自動(dòng)沖洗等，在工作過(guò)程中，該系統(tǒng)出現(xiàn)的故障最多。氣路系統(tǒng)提供PCO2和PO2兩種電極定標(biāo)時(shí)所用的兩種氣體。液路系統(tǒng)提供pH值電極系統(tǒng)定標(biāo)用的緩沖液，并用于測(cè)量和沖洗。血?dú)夥治鰞x具有真空泵、蠕動(dòng)泵兩個(gè)泵。練習(xí)和鞏固一、選擇題1.血?dú)夥治鰞x的電化學(xué)傳感器中，屬于伏安型傳感器的是（）A. pH玻璃電極B. PO2電極C. PCO2電極D. K電極2.電化學(xué)分析儀器所使用的電極中，現(xiàn)在常用的內(nèi)參比電極是（）A.鉑電極B.銀電極C.銀-氯化銀電極D.甘汞電極3.能夠指示血液樣本中pH值大小的電極是（）A.鉑電極B.玻璃電極C.銀-氯化銀電極D.甘汞電極4.離子選擇電極膜

31、電位產(chǎn)生的機(jī)理是（）A.離子吸附作用B.離子交換反應(yīng)C.電子交換反應(yīng)D.電子置換反應(yīng)5. PO2電極屬于（）A.離子選擇電極B.金屬電極C.氧化還原電極D.離子交換電極6.臨床上大量使用的電解質(zhì)分析儀，測(cè)量樣本溶液中離子濃度的電極是（）A.離子選擇電極B.金屬電極C.氧化還原電極D.離子交換電極7.濕式電解質(zhì)分析儀中為各種試劑流動(dòng)提供動(dòng)力的是（）A.三通閥B.蠕動(dòng)泵C.真空泵D.吸樣器8 血?dú)夥治鰞x氣路系統(tǒng)提供的氣體是（）A. CO2和O2B. CO2C. O2D.空氣二、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述血?dú)夥治鰞x的基本結(jié)構(gòu)及工作原理。血液分析相關(guān)儀器1.血細(xì)胞分析儀1.1電阻抗法血細(xì)胞檢測(cè)原理：血細(xì)胞電阻值大

32、于稀釋液的電阻值；當(dāng)細(xì)胞通過(guò)檢測(cè)器微孔的孔徑感受區(qū)時(shí)，在內(nèi)外電極之間恒流源電路上，電阻值瞬間增大，產(chǎn)生一個(gè)電壓脈沖信號(hào)；產(chǎn)生的脈沖信號(hào)數(shù)，等于通過(guò)的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號(hào)幅度大小與細(xì)胞體積大小成正比。1.2聯(lián)合檢測(cè)型原理：主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類，實(shí)質(zhì)是選用較特異的方法將血液中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細(xì)胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。共有特點(diǎn)是：均使用了鞘流技術(shù)。容量、電導(dǎo)、光散射檢測(cè)技術(shù)；光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)；多角度激光散射聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)；電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合技術(shù)。1.3網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理： 依據(jù)網(wǎng)織紅細(xì)胞中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合，熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比，用流式

33、細(xì)胞術(shù)檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞大小和RNA含量及血紅蛋白的含量，由計(jì)算機(jī)分析得出各種參數(shù)。1.4血紅蛋白測(cè)定原理：采用光電比色原理2.血液凝固分析儀血液凝固分析儀是對(duì)血栓與出血有關(guān)成分自動(dòng)檢測(cè)的臨床常規(guī)檢驗(yàn)儀器。在血栓/出血實(shí)驗(yàn)室中最基本的設(shè)備就是血凝儀。血凝儀檢測(cè)原理 主要檢測(cè)方法：有凝固法（生物物理法）、底物顯色法（生物化學(xué)法）、免疫學(xué)法等。血凝儀主要采用光學(xué)法，根據(jù)血液凝固過(guò)程中濁度逐漸增強(qiáng)，導(dǎo)致光強(qiáng)度變化。根據(jù)光學(xué)測(cè)定的原理不同，又可分為散射比濁法和透射比濁法。透射比濁法是根據(jù)血漿凝固過(guò)程中黏度逐漸增大，標(biāo)本吸光度逐漸增強(qiáng)來(lái)確定檢測(cè)終點(diǎn)。散射比濁法是根據(jù)血漿凝固過(guò)程中黏度逐漸增大，標(biāo)本散射光強(qiáng)度

34、逐漸增強(qiáng)來(lái)確定檢測(cè)終點(diǎn)。雙磁路磁珠法原理：其中一對(duì)磁路產(chǎn)生交替電磁場(chǎng)，另一對(duì)磁路利用測(cè)試杯中磁珠擺動(dòng)對(duì)磁力線的切割產(chǎn)生電信號(hào)，檢測(cè)磁珠擺動(dòng)幅度的變化，擺動(dòng)幅度衰減到50%為終點(diǎn)。3.血液黏度計(jì)旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)：是以牛頓的粘滯定律為理論依據(jù)，常見(jiàn)有筒-筒式和錐板式黏度計(jì)。轉(zhuǎn)動(dòng)的力矩通過(guò)樣本傳遞到錐體；樣本越粘稠，傳入的力矩越大。信號(hào)大小與樣本黏度成正比。評(píng)價(jià)：重復(fù)性：取比容在0.400.45血樣，取后10次（測(cè)量11次）計(jì)算CV值，在高剪切率時(shí)，血液表觀黏度CV3%；在低剪切率時(shí)，血液表觀黏度CV5%。靈敏度與量程，儀器的測(cè)力傳感器應(yīng)具有10mPa靈敏度才能測(cè)定1s-1的血液黏度，對(duì)于恒定剪切應(yīng)力的

35、黏度計(jì)，控制范圍包括100mPa1000mPa。4.自動(dòng)血沉分析儀原理：利用紅細(xì)胞下沉過(guò)程中血漿濁度的改變，采用紅外線探測(cè)或者其他光電技術(shù)定時(shí)掃描紅細(xì)胞和血漿界面位置，動(dòng)態(tài)記錄血沉全過(guò)程，由計(jì)算機(jī)處理檢測(cè)結(jié)果。練習(xí)和鞏固一、選擇題1.血細(xì)胞分析儀是用來(lái)檢測(cè)（D）A.紅細(xì)胞異質(zhì)性B.白細(xì)胞異質(zhì)性C.血小板異質(zhì)性D.全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性2.下面有關(guān)血凝儀檢測(cè)原理的敘述中，不正確的是（A）A.雙磁路雙磁珠法檢測(cè)的是光信號(hào)B.凝固法是最常用的檢測(cè)方法C.凝固法以血漿凝固達(dá)50%時(shí)作為判定的終點(diǎn)D.底物顯色法屬生物化學(xué)法3下述有關(guān)電阻抗血細(xì)胞檢測(cè)原理的敘述中，不正確的是（A）A.白細(xì)胞的電阻抗值最大B.小紅細(xì)胞可干擾血小板的測(cè)定C.直流電、恒流電路D.脈沖數(shù)等于細(xì)胞數(shù)4白細(xì)胞的三分群分類中，第三群細(xì)胞區(qū)中主要是（C）A.淋巴細(xì)胞B.單核細(xì)胞C.中性粒細(xì)胞D.嗜堿性粒細(xì)胞5電阻抗檢測(cè)原理中脈沖、振幅和細(xì)胞體積之間的關(guān)系是