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實(shí)驗(yàn)三、植物NR活力測(cè)定體內(nèi)法目的：掌握體內(nèi)法測(cè)定植物組織中的硝酸還原酶原理和方法，明確誘導(dǎo)酶含義。原理：植物細(xì)胞NO3NO3NO2NADH2 NADNO2外界溶液1原理：NO2+磺胺+ 萘基乙烯二胺紅色化合物540nm最大吸收峰測(cè)定OD2材料：在15-25 蒸餾水培養(yǎng)一周小麥苗，實(shí)驗(yàn)前一天分兩組，一組加KNO3，一組加NH4Cl，在白天置光照下處理。方法：取各組苗地上部0.5g,切成合適長(zhǎng)度，放入燒杯中，用玻璃壓住材料，加酶促反應(yīng)液15ml,真空泵抽氣10min,加蓋后置恒溫箱30 20min，取出后立即去除材料。取4ml反應(yīng)過(guò)的液體，加磺胺溶液2ml+萘基乙烯二胺溶液2ml,室溫放置15min后測(cè)540nm OD.顯色、比色測(cè)定NR活力。同時(shí)作空白：4mlH2O +磺胺溶液2ml+萘基乙烯二胺溶液2ml 室溫放置15min測(cè)540nm OD.3制作NO 2標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果計(jì)算：NR活力（NO2生成nmol/g鮮重.h）=根據(jù)OD值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的NO2（nmol） 3 15/4/(?)結(jié)果分析和討論：1、比較KNO3誘導(dǎo)和加NH4Cl的NR活力大小，誘導(dǎo)時(shí)如用NaNO3 替代KNO3結(jié)果會(huì)如何，為什么？如不進(jìn)行光照，結(jié)果會(huì)怎么樣，為什么？42、亞硝酸是過(guò)多施用氮肥后蔬菜中積累的致

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