專腎功能以及早期腎損傷檢驗(yàn)

1、關(guān)于專腎功能及早期腎損傷檢驗(yàn)第一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月本章教學(xué)要求： 掌握:腎功能試驗(yàn)中常用的內(nèi)生肌酐清除試驗(yàn)、血尿素、肌酐及尿酸測(cè)定等。 熟悉:腎臟的功能、腎功能的評(píng)價(jià)方法 了解:腎臟的基本結(jié)構(gòu)；尿液總蛋白、微量蛋白的測(cè)定。第二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一、腎臟結(jié)構(gòu)（一 ）解剖學(xué)結(jié)構(gòu)腎臟 髓質(zhì)皮質(zhì)腎小球腎小管腎錐體 髓袢集合管乳頭管第一節(jié) 概 述第三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（二 ）腎臟的組織學(xué)結(jié)構(gòu)1、腎小體:腎小球、腎小囊 2、腎小管:近端小管、髓袢、遠(yuǎn)端小管（三 ）腎臟的血供3、集合管 腎動(dòng)脈血流來自于腹主動(dòng)脈,以每克組織計(jì)算，腎臟是全

2、身血流量最多的器官 第四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、腎臟的生物化學(xué)功能尿液的生成腎小管的內(nèi)分泌功能重要生化功能第五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）尿液的生成1、腎小球?yàn)V過血液 腎小球?yàn)V過 腎小管重吸收 腎小管與集合管分泌 尿液 血液流經(jīng)腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)時(shí)，血液中的水、小分子溶質(zhì)和分子量較小的血漿蛋白質(zhì)，均可以通過腎小球?yàn)V過膜進(jìn)入腎球囊的囊腔中，形成原尿。 影響原尿生成的因素 腎小球?yàn)V過膜的通透性有效濾過壓（effective filtration pressure）腎血流量（renal plasma flow）第六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2腎

3、小管重吸收 （1）近端小管：腎小管的重吸收作用主要在此段進(jìn)行。 （2）髓袢：此段在尿液的濃縮稀釋中起重要作用。 （3）遠(yuǎn)端小管：此段參與機(jī)體對(duì)體液和酸堿平衡的調(diào)節(jié)，在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定中起重要作用。經(jīng)過腎小管的重吸收以后，最終進(jìn)入集合管的濾液不到原尿的2。第七張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3腎小管與集合管分泌 （1）H+、K+、NH4+ ：為腎小管與集合管分泌的機(jī)體正常代謝產(chǎn)物 ；（2）對(duì)氨基馬尿酸、肌酐等都是正常機(jī)體代謝產(chǎn)物，既能從腎小球?yàn)V過，又能從腎小管、集合管分泌。（3）進(jìn)入體內(nèi)的一些外來物質(zhì)，如酚紅、青霉素等藥物也由腎小管與集合管分泌到尿液中。 腎小管和集合管的上皮細(xì)胞能

4、夠?qū)⒓?xì)胞或血液中的一些物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到管腔中 第八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）腎臟的內(nèi)分泌功能1腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（renin-angiotension-aldosterone system）2激肽釋放酶-激肽-前列腺素（killikrein-kinin-prostaglandin）系統(tǒng) 3促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）41，25-二羥維生素D3 此外，腎臟也是一些激素的代謝場(chǎng)所靶器官第九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 腎臟功能試驗(yàn)血清尿素、肌酐、尿酸的測(cè)定尿液總蛋白、微量蛋白的測(cè)定其 它尿液pH、相對(duì)密度及滲透量的測(cè)定第十張，

5、PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一、血清尿素、肌酐、尿酸的測(cè)定非蛋白氮化合物： 尿素、尿酸、肌酐、肌酸、氨、氨基酸、核苷酸等 測(cè)定的意義： 非蛋白氮化合物是體內(nèi)蛋白質(zhì)、肌酸、核酸等的代謝產(chǎn)物，均由腎臟排泄，在一定程度上反映了腎臟的功能，是臨床常用的腎功能指標(biāo)。第十一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）血清尿素的測(cè)定血清尿素水平在一定程度上反映了腎小球的濾過能力。1測(cè)定方法 直接法：二乙酰一肟(w)法間接法：脲酶法 第十二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）二乙酰一肟法（直接法）： 540nm處有吸收峰 （Fearon反應(yīng)） 第十三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于202

6、2年6月（2）脲酶法（間接法） 第一步： ， 首先利用脲酶催化尿素水解生成銨鹽，銨鹽在堿性條件下釋放出氨。然后再用不同的方法測(cè)定銨鹽或氨，在測(cè)定過程中需防止外源性氨的污染。第十四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月酶偶聯(lián)速率法： 第二步： 納氏試劑顯色法：或酚-次氯酸鹽顯色法： （波氏法） 或第十五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、方法學(xué)評(píng)價(jià) 二乙酰一肟法： 靈敏度高、操作較為簡便、線性范圍較窄（150mmol/L）特異性不高；本法難以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，目前臨床上已很少使用。脲酶法： 特異性強(qiáng)，反應(yīng)專一，易受體液及環(huán)境中氨的干擾，因此測(cè)定時(shí)需嚴(yán)防外源性氨的污染。一般用于手工操作測(cè)定

7、，適合基層單位開展；但試劑穩(wěn)定性差。酶偶聯(lián)速率法：準(zhǔn)確度和靈敏度較高，多用于自動(dòng)分析系統(tǒng)，試劑較貴電導(dǎo)法：準(zhǔn)確性高，反應(yīng)所需時(shí)間很短，適合自動(dòng)化分析，但規(guī)范實(shí)驗(yàn)條件有一定困難。第十六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 【參考范圍】 血清3.07.2mmolL （速率法） 尿液357535mmol24h（速率法）【臨床意義】 由于腎臟有強(qiáng)大的儲(chǔ)備能力，因此，僅在腎小球?yàn)V過率下降至正常的50以下時(shí)，血漿或血清中尿素濃度才會(huì)升高，故該指標(biāo)靈敏度不高，不能作為早期腎功能指標(biāo)。尿素作為腎臟功能指標(biāo)，還會(huì)受到許多腎外因素的影響。各種原因如肝功能衰竭等導(dǎo)致血清氨水平升高，都會(huì)使各種測(cè)定尿素方法的結(jié)果

8、偏高。第十七張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月血清尿素和血清肌酐濃度與GFR的關(guān)系見圖14-2。第十八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）血清肌酐的測(cè)定外源性肌酐內(nèi)源性肌酐在控制外源性肌酐攝取時(shí)，測(cè)定血清肌酐可作為腎濾過功能的指標(biāo)。1測(cè)定方法（2）Jaffe反應(yīng)法（苦味酸法）：肌酐與堿性苦味酸作用，生成黃紅色化合物，在510nm處比色分析。（1）肌氨酸氧化酶法： 第十九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）酶偶聯(lián)速率法： 在340nm處監(jiān)測(cè)吸光度值的降低，可測(cè)量肌酐含量。（3）肌氨酸氧化酶法： 第二十張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2方法學(xué)評(píng)價(jià) Jaff

9、e反應(yīng)法 是測(cè)定肌酐常用的方法，適用于血、尿標(biāo)本的檢測(cè)。但最大的問題是非特異性干擾大（假肌酐）。特異性高，適用于自動(dòng)化分析。但試劑價(jià)格昂貴且不易保存。酶偶聯(lián)速率法第二十一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月假肌酐：一些具有還原性能與堿性苦味酸生成紅色的物質(zhì) 維生素C、丙酮、乙酰乙酸、-酮酸、葡萄糖、蛋白質(zhì)以及頭孢菌素類抗生素、強(qiáng)心甙、甲基多巴等 排除假肌酐的干擾： 吸附法速率法二次讀數(shù)法在手工操作中制備無蛋白濾液或加入十二烷基硫酸鈉去除蛋白質(zhì)干擾，在連續(xù)流動(dòng)自動(dòng)化生化分析儀中可采用透析器清除蛋白質(zhì)。在緩沖液中加入硼酸鹽消除葡萄糖、維生素C的干擾。 第二十二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于20

10、22年6月【參考范圍】血清44133molL （速率法）尿液（苦味酸法）嬰兒88176mmolkg24h 兒童44352mmolkg24h 成人 男718mmol24h 女5.316mmol24h【臨床意義】 血清肌酐濃度較血清尿素濃度更能準(zhǔn)確地反映腎小球的功能。在臨床上同時(shí)測(cè)定血清肌酐濃度和血清尿素濃度，在鑒別腎前性或腎后性尿毒癥上有一定意義。 第二十三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3內(nèi)生肌酐清除率 在控制外源性肌酐攝取的情況下，體內(nèi)肌酐產(chǎn)量恒定，并且由于前述肌酐在腎臟中的排泄方式，故臨床上通過內(nèi)生肌酐清除率近似地反映腎小球?yàn)V過功能，稱為內(nèi)生肌酐清除率。 內(nèi)生肌酐清除率 腎清除率

11、：指單位時(shí)間內(nèi)多少毫升血漿中的某物質(zhì)經(jīng)腎臟清除。 若某物質(zhì)由腎小球?yàn)V過后，既不被腎小管重吸收又不被腎小管所分泌，那么它的腎清除率可以反映腎小球?yàn)V過率（GFR）。第二十四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）測(cè)定方法 受試者禁食肉類三天，試驗(yàn)日禁用茶、咖啡，停用利尿劑，試驗(yàn)前避免劇烈運(yùn)動(dòng)，飲用足量的水，使尿量不少于1mlmin。 準(zhǔn)確收集24小時(shí)尿，記錄尿量、身高、體重。在收集尿液的同時(shí)，最好在收集尿液的中期，收集血樣。對(duì)收集的尿樣及血樣進(jìn)行肌酐測(cè)定。按照下列公式計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率。 U：尿液肌酐濃度（molL） V：每分鐘尿量（mlmin） P：血肌酐濃度（molL） 1.73：標(biāo)準(zhǔn)

12、體表面積（m2） A：實(shí)際體表面積（m2）第二十五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月【參考范圍】 80120mlmin1.73m2（2）方法學(xué)評(píng)價(jià)： 操作簡便,及時(shí)檢測(cè)或?qū)⒛驑?biāo)本冷藏可減少此誤差。測(cè)定前應(yīng)充分飲水，使尿量不少于1mlmin【臨床意義】 Ccr降低可反映腎小球的早期損害，并可根據(jù)其降低的程度來判斷腎小球?yàn)V過功能損傷程度：Ccr也用于指導(dǎo)治療。第二十六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）血清尿酸的測(cè)定 來自體內(nèi)和食物中嘌呤代謝的最終產(chǎn)物，主要從腎臟排泄。血尿酸濃度受腎小球?yàn)V過功能、腎小管重吸收及分泌功能的影響1測(cè)定方法（1）磷鎢酸還原法：無蛋白濾液中的尿酸在堿性

13、條件下使磷鎢酸還原生成藍(lán)色的鎢藍(lán)，可在650700nm波長下進(jìn)行比色測(cè)定。第二十七張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）尿酸酶法：尿酸可在尿酸酶的作用下氧化生成尿囊素、CO2、及H2O2。根據(jù)測(cè)定方法可分為三類：酶聯(lián)紫外分光法紫外分光法：尿酸酶催化前后吸光度的差值與尿酸濃度成正比。酶聯(lián)比色法：第二十八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2方法學(xué)評(píng)價(jià) 尿酸酶酶聯(lián)紫外分光法適合于自動(dòng)化分析磷鎢酸法試劑易得、費(fèi)用低廉，但靈敏度較低尿酸酶-紫外分光法簡單、快速、特異性好、靈敏度高、易于自動(dòng)化，但需要精密儀器，標(biāo)本中蛋白質(zhì)會(huì)提高空白管的吸光度?！緟⒖挤秶?血清 成人 男210430mo

14、lL 女150370molL 尿液 1545mmol24h【臨床意義】第二十九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、尿液總蛋白、微量蛋白的測(cè)定尿液總蛋白的測(cè)定2尿蛋白的定量測(cè)定1尿蛋白的定性檢查3尿液蛋白質(zhì)電泳 4方法學(xué)評(píng)價(jià) 【參考范圍】兒童 40mg24h 成人 30130mg24h【臨床意義】用于泌尿系統(tǒng)疾病及一些全身性疾病的篩選、療效觀察等 5蛋白尿的選擇性指數(shù) 第三十張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、尿液pH、相對(duì)密度及滲透量的測(cè)定（一）尿液pH值的測(cè)定（二）尿液相對(duì)密度測(cè)定（三）尿液滲透量的測(cè)定第三十一張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月四、其 它（一）尿液

15、酶的測(cè)定（二）尿液氨基酸的測(cè)定（三）腎功能指標(biāo)新進(jìn)展第三十二張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1尿微量清蛋白測(cè)定2-微球蛋白32-微球蛋白4Tamm-Horsfall蛋白 腎臟髓袢升支與腎遠(yuǎn)曲小管的上皮細(xì)胞分泌的一種糖 蛋白,為一種腎特異性蛋白質(zhì)5纖維蛋白降解產(chǎn)物6視黃醇結(jié)合蛋白第三節(jié) 早期腎損傷檢驗(yàn)第三十三張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 腎功能特殊檢驗(yàn) 在控制外源性肌酐攝取的情況下，體內(nèi)肌酐產(chǎn)量恒定，并且由于前述肌酐在腎臟中的排泄方式，故臨床上通過內(nèi)生肌酐清除率近似地反映腎小球?yàn)V過功能，稱為內(nèi)生肌酐清除率。 內(nèi)生肌酐清除率 一、反映腎小球?yàn)V過功能的實(shí)驗(yàn)?zāi)I清除率：指單

16、位時(shí)間內(nèi)多少毫升血漿中的某物質(zhì)經(jīng)腎臟清除。 若某物質(zhì)由腎小球?yàn)V過后，既不被腎小管重吸收又不被腎小管所分泌，那么它的腎清除率可以反映腎小球?yàn)V過率（GFR）。第三十四張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）測(cè)定方法 受試者禁食肉類三天，試驗(yàn)日禁用茶、咖啡，停用利尿劑，試驗(yàn)前避免劇烈運(yùn)動(dòng)，飲用足量的水，使尿量不少于1mlmin。 準(zhǔn)確收集24小時(shí)尿，記錄尿量、身高、體重。在收集尿液的同時(shí)，最好在收集尿液的中期，收集血樣。對(duì)收集的尿樣及血樣進(jìn)行肌酐測(cè)定。按照下列公式計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率。 U：尿液肌酐濃度（molL） V：每分鐘尿量（mlmin） P：血肌酐濃度（molL） 1.73：標(biāo)準(zhǔn)體表面

17、積（m2） A：實(shí)際體表面積（m2）第三十五張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月胱抑素（Cys-C）: 特性: 胱氨酸蛋白酶抑制劑，可全部由腎小球?yàn)V過且全部在腎小管分解，不被重吸收及分泌測(cè)定方法：免疫學(xué)方法參考區(qū)間：臨床意義第三十六張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、反映腎小管重吸收功能的試驗(yàn)：（一）尿酶檢驗(yàn)1、腎損害和抗生素毒性的酶：NAG2、尿路感染：NAG、GRS3、腎腫瘤：LDH、ALP、GRS4、腎排斥反應(yīng)：LYS、GRD、NAG、GGT(二)酚紅排泄實(shí)驗(yàn)（PSP）方法：注射一定量的酚紅，測(cè)定2小時(shí)內(nèi)尿中排泄量（尿液加堿即可）參考值即臨床意義：腎小管排泄功能第三十七張

18、，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、尿蛋白電泳：不同分子量的尿蛋白與腎疾病的關(guān)系第三十八張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1.多項(xiàng)指標(biāo)綜合分析(1)尿素氮（BUN）；肌酐（Cr）；尿酸(UA)；內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)； (2)血清、尿2微球蛋白（2-MG） (3)尿液、血清1-MG (4)尿液總蛋白；尿微量白蛋白；尿轉(zhuǎn)鐵蛋白；尿免疫球蛋白2.結(jié)合臨床癥狀和體征3.其他診斷第五節(jié) 腎功能綜合分析一、腎功能的評(píng)價(jià)方法二、常見腎疾病的檢驗(yàn)結(jié)果分析(自學(xué))第三十九張，PPT共四十三頁，創(chuàng)作于2022年6月復(fù)習(xí)題一、名詞解釋1、NPN、2、腎小球率過濾 3、胱抑素3、腎清除率二、填空題1、NPN中的成分包括、等2、尿酸是代謝產(chǎn)物，測(cè)定血清尿酸的主