色譜分析法--氣相色譜法

1、氣相色譜法氣相色譜法氣相色譜分類氣相色譜儀器簡(jiǎn)介氣相色譜固定相氣相色譜檢測(cè)器氣相色譜操作條件的選擇毛細(xì)管氣相色譜法簡(jiǎn)介氣固色譜和氣液色譜用氣體作為流動(dòng)相的色譜法稱為氣相色譜法。根據(jù)固定相的狀態(tài)不同，又可將其分為氣固色譜和氣液色譜。氣固色譜是用多孔性固體為固定相，分離的主要對(duì)象是一些永久性的氣體和低沸點(diǎn)的化合物。但由于氣固色譜可供選擇的固定相種類甚少，分離的對(duì)象不多，且色譜峰容易產(chǎn)生拖尾，因此實(shí)際應(yīng)用較少。氣液色譜用高沸點(diǎn)的有機(jī)化合物涂漬在惰性擔(dān)體上作為固定相。由于在氣液色譜中可供選擇的固定液種類很多，容易得到好的選擇性，所以氣液色譜有廣泛的實(shí)用價(jià)值。氣相色譜儀簡(jiǎn)介氣相色譜儀由五大系統(tǒng)組成氣路系

2、統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)控溫系統(tǒng)檢測(cè)和記錄系統(tǒng)。氣相色譜儀氣路系統(tǒng)氣相色譜儀具有一個(gè)讓載氣連續(xù)運(yùn)行、管路密閉的氣路系統(tǒng)。通過(guò)該系統(tǒng)，可以獲得純凈的、流速穩(wěn)定的載氣。它的氣密性、載氣流速的穩(wěn)定性以及測(cè)量流量的準(zhǔn)確性，對(duì)色譜結(jié)果均有很大的影響，因此必須注意控制。常用的載氣有氮?dú)夂蜌錃?，也有用氦氣、氬氣和空氣。載氣的凈化，需經(jīng)過(guò)裝有活性炭或分子篩的凈化器，以除去載氣中的水、氧等不利的雜質(zhì)。流速的調(diào)節(jié)和穩(wěn)定是通過(guò)減壓閥、穩(wěn)壓閥和針形閥串聯(lián)使用后達(dá)到。一般載氣的變化程度1%。載氣的處理皂膜流量計(jì)進(jìn)樣系統(tǒng)在氣相色譜儀中，進(jìn)樣系統(tǒng)的作用是將液體或固體試樣，在進(jìn)入色譜柱之前瞬間氣化，然后快速定量地轉(zhuǎn)入到色譜柱中。進(jìn)

3、樣量的大小，進(jìn)樣時(shí)間的長(zhǎng)短，試樣的氣化速度等都會(huì)影響色譜的分離效果和分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣器和氣化室兩部分。進(jìn)樣器:液體樣品的進(jìn)樣一般采用微量注射器。氣體樣品的進(jìn)樣常用色譜儀本身配置的推拉式六通閥或旋轉(zhuǎn)式六通閥定量進(jìn)樣。氣化室:為了讓樣品在氣化室中瞬間氣化而不分解，因此要求氣化室熱容量大，無(wú)催化效應(yīng)。為了盡量減少柱前譜峰變寬，氣化室的死體積應(yīng)盡可能小。氣體進(jìn)樣旋轉(zhuǎn)式六通閥注射進(jìn)樣器分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)指色譜柱色譜柱主要有兩類：填充柱和毛細(xì)管柱。填充柱由不銹鋼或玻璃材料制成，內(nèi)裝固定相，一般內(nèi)徑為2 4mm，長(zhǎng)1 3 m。填充柱的形狀有U型和螺旋型二種。毛細(xì)管柱又叫空心柱，分為涂

4、壁、多孔層和涂擔(dān)體空心柱?？招拿?xì)管柱材質(zhì)為玻璃或石英。內(nèi)徑一般為0.2 0.5mm，長(zhǎng)度30 300m，呈螺旋型。色譜柱的分離效果除與柱長(zhǎng)、柱徑和柱形有關(guān)外，還與所選用的固定相和柱填料的制備技術(shù)以及操作條件等許多因素有關(guān)?？刂茰囟认到y(tǒng)溫度直接影響色譜柱的選擇分離、檢測(cè)器的靈敏度和穩(wěn)定性。控制溫度主要指對(duì)色譜柱、氣化室、檢測(cè)室的溫度控制。色譜柱的溫度控制方式有恒溫和程序升溫二種。對(duì)于沸點(diǎn)范圍很寬的混合物，一般采用程序升溫法進(jìn)行。程序升溫指在一個(gè)分析周期內(nèi)柱溫隨時(shí)間由低溫向高溫作線性或非線性變化，以達(dá)到用最短時(shí)間獲得最佳分離的目的。恒溫與程序升溫檢測(cè)和放大記錄系統(tǒng)檢測(cè)器是將載氣里被分離組分的量轉(zhuǎn)

5、變?yōu)榭蓽y(cè)量的信號(hào)（一般電信號(hào)）的裝置。氣相色譜檢測(cè)器有濃度型和質(zhì)量型兩種。常用的檢測(cè)器有熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）、電子捕獲檢測(cè)器（ECD）、氫焰離子化檢測(cè)器（FID）和火焰光度檢測(cè)器（FPD）等。記錄系統(tǒng)是一種能自動(dòng)記錄由檢測(cè)器輸出的電信號(hào)的裝置。氣相色譜固定相氣相色譜固定相可分為固體固定相和液體固定相兩類。液體固定相是將固定液均勻涂漬在擔(dān)體而成。固體固定相用氣相色譜分析永久性氣體及氣態(tài)烴時(shí)，常采用固體吸附劑作固定相。在固體吸附劑上，永久性氣體及氣態(tài)烴的吸附熱差別較大，故可以得到滿意的分離。常用的固體吸附劑 主要有強(qiáng)極性的硅膠，弱極性的氧化鋁，非極性的活性炭和特殊作用的分子篩等。也常用一些人工合成

6、的固定相。人工合成固定相作為有機(jī)固定相的高分子多孔微球是人工合成的多孔共聚物，它既是擔(dān)體又起固定相的作用，可在活化后直接用于分離，也可作為擔(dān)體在其表面涂漬固定液后再使用。人工合成固定相有許多特殊的優(yōu)點(diǎn)。高分子多孔微球分為極性和非極性兩種：（1）非極性的是由苯乙烯、二乙烯苯共聚而成。（2）極性的是苯乙烯、二乙烯苯共聚物中引入極性基團(tuán)。人工合成的固定相的優(yōu)點(diǎn)改變制備條件及原料可以合成各種比表面及孔徑的聚合物。因而可根據(jù)樣品的性質(zhì)進(jìn)行選擇，使分離效果最佳。無(wú)有害的吸附活性中心，極性組分也能獲得正態(tài)峰。無(wú)流失現(xiàn)象，柱壽命長(zhǎng)。具有強(qiáng)疏水性能，特別適于分析混合物中的微量水分。粒度均勻，機(jī)械強(qiáng)度高，具有耐腐

7、蝕性能。熱穩(wěn)定性好，最高使用溫度為200300C。柱超負(fù)荷后恢復(fù)快，還適用于制備色譜。液體固定相-對(duì)固定液的要求固定液一般為高沸點(diǎn)的有機(jī)物，能做固定相的有機(jī)物必須具備下列條件：熱穩(wěn)定性好，在操作溫度下，不發(fā)生聚合、分解或交聯(lián)等現(xiàn)象，且有較低的蒸汽壓，以免固定液流失。通常，固定液有一個(gè)“最高使用溫度”?；瘜W(xué)穩(wěn)定性好，固定液與樣品或載氣不能發(fā)生不可逆的化學(xué)反應(yīng)。固定液的粘度和凝固點(diǎn)低，以便在擔(dān)體表面能均勻分布。各組分必須在固定液中有一定的溶解度，否則樣品會(huì)迅速通過(guò)柱子，難于使組分分離。在選取合適的固定液時(shí)，這是特別需要考慮的方面。固定液和組分分子間的作用力分子間的作用力是一種極弱的吸引力，主要包括

8、靜電力（定向力）、誘導(dǎo)力、色散力和氫鍵力等。非極性分子間的作用力主要是色散力，分子量越大，分子體積越大，色散力越強(qiáng)。存在于極性分子與非極性分子之間的是誘導(dǎo)力。由于在極性分子永久偶極矩電場(chǎng)的作用下，非極性分子也會(huì)極化產(chǎn)生誘導(dǎo)偶極矩。它們之間的作用力叫誘導(dǎo)力。在極性固定液柱上分離極性樣品時(shí)，分子間的作用力主要是靜電力。被分離組分的極性越大，與固定液間的相互作用力就越強(qiáng)，因而該組分在柱內(nèi)滯留時(shí)間就越長(zhǎng)。固定液和組分分子間的作用力極性分子的極性越大，非極性分子越容易被極化，則誘導(dǎo)力就越大。當(dāng)樣品具有非極性分子和可極化的組分時(shí)，可用極性固定液的誘導(dǎo)效應(yīng)分離。苯（B.P.80.1）和 環(huán)己烷（ B.P.8

9、0.8）沸點(diǎn)接近，偶極矩為零，均為非極性分子，若用非極性固定液卻很難使其分離。但苯比環(huán)己烷容易極化，故采用極性固定液，就能使苯產(chǎn)生誘導(dǎo)偶極矩，而在環(huán)己烷之后流出。固定液的極性越強(qiáng)，兩者分離得越遠(yuǎn)。固定液的分類目前用于氣相色譜的固定液有數(shù)百種，一般按其化學(xué)結(jié)構(gòu)類型和極性進(jìn)行分類，其分類的本質(zhì)是固定液與組分間的相互作用力的不同。按固定液的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類:把具有相同官能團(tuán)的固定液排在一起，然后按官能團(tuán)的類型不同分類，這樣就便于按組分與固定液“結(jié)構(gòu)相似”原則選擇固定液時(shí)參考。按固定液的相對(duì)極性分類:極性是固定液重要的分離特性，按相對(duì)極性分類是一種簡(jiǎn)便而常用的方法固定液的選擇在選擇固定液時(shí)，一般根據(jù)固定液

10、的分類按“相似相溶”的規(guī)律選擇，因?yàn)檫@時(shí)的分子間的作用力強(qiáng)，選擇性高，分離效果好。在應(yīng)用中，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況并按如下幾個(gè)方面考慮：第一，非極性試樣一般選用非極性固定液。非極性固定液對(duì)樣品的保留作用，主要靠色散力。分離時(shí)，試樣中各組分基本上按沸點(diǎn)從低到高的順序流出色譜柱；若樣品中含有同沸點(diǎn)的極性和非極性化合物，則極性化合物先流出。固定液的選擇第二，中等極性的試樣應(yīng)首先選用中等極性固定液。在這種情況下，組分與固定液分子之間的作用力主要為誘導(dǎo)力和色散力。分離時(shí)組分基本上按沸點(diǎn)從低到高的順序流出色譜柱，但對(duì)于同沸點(diǎn)的極性和非極性物，由于此時(shí)誘導(dǎo)力起主要作用，使極性化合物與固定液的作用力加強(qiáng)，所以非極性組

11、分先流出。第三，強(qiáng)極性的試樣應(yīng)選用強(qiáng)極性固定液。此時(shí)，組分與固定液分子之間的作用主要靠靜電力，組分一般按極性從小到大的順序流出；對(duì)含有極性和非極性的樣品，非極性組分先流出。幾種常見(jiàn)固定液的相對(duì)極性固定液的分類擔(dān)體擔(dān)體是固定液的支持骨架，使固定液能在其表面上形成一層薄而勻的液膜。擔(dān)體應(yīng)有如下的特點(diǎn)： 第一，具有多孔性，即比表面積大； 第二，化學(xué)惰性且具有較好的浸潤(rùn)性； 第三，熱穩(wěn)定性好； 第四，具有一定的機(jī)械強(qiáng)度，使固定相在制備和填充過(guò)程中不易粉碎。擔(dān)體可以分成兩類：硅藻土類和非硅藻土類。擔(dān)體的種類及性能硅藻土類擔(dān)體是天然硅藻土經(jīng)煅燒等處理后而獲得的具有一定粒度的多孔性顆粒。按其制造方法的不同，

12、可分為紅色擔(dān)體和白色擔(dān)體兩種。 紅色擔(dān)體因含少量氧化鐵顆粒而呈紅色。其機(jī)械強(qiáng)度大，孔徑小，比表面積大，表面吸附性較強(qiáng)，有一定的催化活性，適用于涂漬高含量固定液，分離非極性化合物。 白色擔(dān)體是天然硅藻土在煅燒時(shí)加入少量碳酸鈉之類助熔劑，使氧化鐵轉(zhuǎn)化為白色的鐵硅酸鈉。白色擔(dān)體的比表面積小，孔徑大，催化活性小，適用于涂漬低含量固定液，分離極性化合物。 硅藻土類擔(dān)體在使用前必須進(jìn)行預(yù)處理。硅藻土的顯微圖像硅藻土擔(dān)體的預(yù)處理普通硅藻土擔(dān)體的表面并非完全惰性，而是具有硅醇基（Si-OH），并有少量的金屬氧化物。因此，它的表面上既有吸附活性，又有催化活性。如果涂漬的固定液量較低，則不能使其吸附中心和催化中心

13、完全遮蓋。用這種固定相分析樣品，將會(huì)造成色譜峰的拖尾，并可能發(fā)生化學(xué)反應(yīng)和不可逆吸附，為此，在涂漬固定液前，應(yīng)對(duì)擔(dān)體進(jìn)行預(yù)處理，使其表面鈍化。常用的預(yù)處理方法有：（1）酸洗（除去堿性基團(tuán)）；（2）堿洗（除去酸性基團(tuán)）；（3）硅烷化（消除氫鍵結(jié)合力）；（4）釉化（表面玻璃化、堵微孔）。典型色譜柱及其性質(zhì)氣相色譜檢測(cè)器好的氣相色譜檢測(cè)器必須滿足多方面的要求。根據(jù)檢測(cè)器原理和響應(yīng)方式的不同，可以將檢測(cè)器分為質(zhì)量型檢測(cè)器和濃度型檢測(cè)器。常用的檢測(cè)器有：熱導(dǎo)池檢測(cè)器，氫火焰離子化檢測(cè)器，電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)器的性能指標(biāo)對(duì)色譜分析的質(zhì)量有非常重要的影響。濃度型檢測(cè)器和質(zhì)量型檢測(cè)器濃度型檢測(cè)器測(cè)量的是載氣中組

14、分濃度的瞬間變化，即檢測(cè)器的響應(yīng)值正比于組分的濃度。如熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）、電子捕獲檢測(cè)器（ECD）。質(zhì)量型檢測(cè)器測(cè)量的是載氣中所攜帶的樣品進(jìn)入檢測(cè)器的速度變化，即檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)正比于單位時(shí)間內(nèi)組分進(jìn)入檢測(cè)器的質(zhì)量。如氫焰離子化檢測(cè)器（FID）和火焰光度檢測(cè)器（FPD）。理想的檢測(cè)器的要求熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）熱導(dǎo)池檢測(cè)器是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，性能穩(wěn)定，線性范圍寬，對(duì)無(wú)機(jī)、有機(jī)物質(zhì)都有響應(yīng)，靈敏度適中的檢測(cè)器，因此在氣相色譜中廣泛應(yīng)用。熱導(dǎo)池檢測(cè)器是根據(jù)各種物質(zhì)和載氣的導(dǎo)熱系數(shù)不同，采用熱敏元件進(jìn)行檢測(cè)的。通常載氣與樣品的導(dǎo)熱系數(shù)相差越大，靈敏度越高。由于被測(cè)組分的導(dǎo)熱系數(shù)一般都比較小，故應(yīng)選用

15、導(dǎo)熱系數(shù)高的載氣。常用載氣的導(dǎo)熱系數(shù)大小順序?yàn)镠2 He N2。因此在使用熱導(dǎo)池檢測(cè)器時(shí)，為了提高靈敏度，一般選用H2為載氣。當(dāng)橋電流和鎢絲溫度一定時(shí)，如果降低池體的溫度，將使得池體與鎢絲的溫差變大，從而可提高熱導(dǎo)池檢測(cè)器的靈敏度。但是，檢測(cè)器的溫度應(yīng)略高于柱溫，以防組分在檢測(cè)器內(nèi)冷凝。熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)簡(jiǎn)稱氫焰檢測(cè)器。它具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，靈敏度高，死體積小，響應(yīng)快，穩(wěn)定性好的特點(diǎn)，是目前常用的檢測(cè)器之一。FID僅對(duì)含碳有機(jī)化合物有響應(yīng)，對(duì)某些物質(zhì)，如永久性氣體、水、一氧化碳、二氧化碳、氮的氧化物、硫化氫等不產(chǎn)生信號(hào)或者信號(hào)很弱。氫焰檢測(cè)器是以氫氣和空氣燃燒的火焰作

16、為能源，利用含碳化合物在火焰中燃燒產(chǎn)生離子，在外加的電場(chǎng)作用下，使離子形成離子流，根據(jù)離子流產(chǎn)生的電信號(hào)強(qiáng)度，檢測(cè)被色譜柱分離出的組分。氫火焰離子化檢測(cè)器電子捕獲檢測(cè)器電子捕獲檢測(cè)器（ECD）在應(yīng)用上僅次于熱導(dǎo)池和氫火焰的檢測(cè)器。它只對(duì)具有電負(fù)性的元素，如含有鹵素、硫、磷、氮的物質(zhì)有響應(yīng)，且電負(fù)性越強(qiáng)，檢測(cè)器靈敏度越高。電子捕獲檢測(cè)器是一個(gè)具有高靈敏度和高選擇性的檢測(cè)器，它經(jīng)常用來(lái)分析痕量的具有電負(fù)性元素的組分，如食品、農(nóng)副產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留量，大氣、水中的痕量污染物等，電子捕獲檢測(cè)器是濃度型檢測(cè)器，其線性范圍較窄，因此，在定量分析時(shí)應(yīng)特別注意。電子捕獲檢測(cè)器檢測(cè)器的性能指標(biāo)通用性檢測(cè)器要求適用范

17、圍廣；選擇性檢測(cè)器要求選擇性好。表征檢測(cè)器性能的參數(shù)有: 噪聲和漂移 靈敏度(響應(yīng)值或應(yīng)答值) 檢測(cè)限(檢出限) 最小檢出量（不要求） 線性范圍和響應(yīng)時(shí)間噪聲和漂移無(wú)樣品通過(guò)檢測(cè)器時(shí),由儀器本身和工作條件等的偶然因素引起的基線起伏稱為噪聲用基線峰峰值的寬度表示基線隨時(shí)間向某一方向的緩慢變化稱為漂移檢出限檢出限定義為：檢測(cè)器恰能產(chǎn)生二(或三)倍于噪音（ 2RN ）時(shí)的單位時(shí)間（單位：s）引入檢測(cè)器的樣品量（單位：g）或單位體積（單位：cm3 ）載氣中需含的樣品量。濃度型檢測(cè)器，檢出限 Dc = 2RN / Sc Dc的物理意義指每毫升載氣中含有恰好能產(chǎn)生二倍于噪聲信號(hào)的溶質(zhì)毫克數(shù)。質(zhì)量型檢測(cè)器，

18、檢出限 Dm = 2RN / Sm Dm的物理意義指每秒通過(guò)的溶質(zhì)克數(shù)，恰好能產(chǎn)生二倍于噪聲的信號(hào)（ 2RN ）。檢出限不僅決定于靈敏度，而且受限于噪聲，所以它是衡量檢測(cè)器性能的綜合指標(biāo)。靈敏度當(dāng)一定濃度或一定質(zhì)量的組分進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生一定的響應(yīng)信號(hào)R。以進(jìn)樣量c（單位：mg.cm-3 或g.s-1）對(duì)響應(yīng)信號(hào)（R）作圖得到一條通過(guò)原點(diǎn)的直線。直線的斜率就是檢測(cè)器的靈敏度（S）。靈敏度可定義為信號(hào)（R）對(duì)進(jìn)入檢測(cè)器的組分量（C）的變化率： S = R / C 對(duì)于濃度型的檢測(cè)器， R取mV， C取mg.cm-3 ，靈敏度S的單位是mV.cm3 mg -1，對(duì)于質(zhì)量型檢測(cè)器， C取g.s-1 ，

19、靈敏度S的單位是mV.s .g-1 。線性范圍和響應(yīng)時(shí)間線性范圍:檢測(cè)器的線性范圍定義為在檢測(cè)器呈線性時(shí)最大和最小進(jìn)樣量之比，或最大允許進(jìn)樣量（濃度）與最小檢測(cè)量（濃度）之比。響應(yīng)時(shí)間:響應(yīng)時(shí)間指進(jìn)入檢測(cè)器的某一組分的輸出信號(hào)達(dá)到其值的63%所需的時(shí)間。一般小于1s。色譜分離操作條件的選擇一個(gè)混合物能否為色譜柱所分離，取決于固定相與混合物中各組分分子間的相互作用的大小是否有區(qū)別，但在色譜分離過(guò)程中各種操作因素的選擇是否合適，對(duì)于實(shí)現(xiàn)分離的可能性也有很大的影響。在通常的氣相色譜分析中，需要選擇的分離條件主要有：載氣的種類和流速色譜柱的性質(zhì)：固定液的種類，擔(dān)體的性質(zhì)和粒度，色譜柱的柱溫和柱長(zhǎng)進(jìn)樣時(shí)

20、間和進(jìn)樣量載氣流速載氣及其線速的選擇 根據(jù)van Deemter方程的數(shù)學(xué)簡(jiǎn)化式為 H = A + B / u + C u 可得到H-u關(guān)系曲線。圖中曲線的最低點(diǎn)，塔板高度最小，柱效最高，所以該點(diǎn)對(duì)應(yīng)的流速即為最佳流速載氣種類 各項(xiàng)因素對(duì)板高H的影響當(dāng)u值較小時(shí)，分子擴(kuò)散項(xiàng)B/u將成為影響色譜峰擴(kuò)張的主要因素，此時(shí)，宜采用相對(duì)分子質(zhì)量較大的載氣（N2、Ar），以使組分在載氣中有較小的擴(kuò)散系數(shù)。當(dāng)u較大時(shí)，傳質(zhì)項(xiàng)Cu將是主要控制因素。此時(shí)宜采用相對(duì)分子質(zhì)量較小，具有較大擴(kuò)散系數(shù)的載氣（H2、He），以改善氣相傳質(zhì)。H = A + B / u + C u 柱溫柱溫是一個(gè)重要的色譜操作參數(shù)，它直接影

21、響分離效能和分析速度。柱溫不能高于固定液的最高使用溫度，否則會(huì)造成固定液大量揮發(fā)流失。某些固定液有最低操作溫度。一般地說(shuō)，操作溫度至少必須高于固定液的熔點(diǎn)，以使其有效地發(fā)揮作用。降低柱溫可使色譜柱的選擇性增大，但升高柱溫可以縮短分析時(shí)間，并且可以改善氣相和液相的傳質(zhì)速率，有利于提高效能。所以，這兩方面的情況均需考慮。在實(shí)際工作中，一般根據(jù)試樣的沸點(diǎn)選擇柱溫、固定液用量及擔(dān)體的種類。對(duì)于寬沸程混合物，一般采用程序升溫法進(jìn)行。程序升溫柱長(zhǎng)由于分離度正比于柱長(zhǎng)的平方根，所以增加柱長(zhǎng)對(duì)分離是有利的。但增加柱長(zhǎng)會(huì)使各組分的保留時(shí)間增加，延長(zhǎng)分析時(shí)間。因此，在滿足一定分離度的條件下，應(yīng)盡可能使用較短的柱子

22、。擔(dān)體的粒度由范氏速率理論方程式可知，擔(dān)體的粒度直接影響渦流擴(kuò)散和氣相傳質(zhì)阻力，間接地影響液相傳質(zhì)阻力。隨著擔(dān)體粒度的減小，柱效將明顯提高，但粒度過(guò)細(xì)，阻力將明顯增加，使柱壓降增大，對(duì)操作帶來(lái)不便。速率理論方程式A項(xiàng)中的是反映擔(dān)體填充不均勻性參數(shù)，降低，即擔(dān)體粒度均勻，形狀規(guī)則，有利于提高柱效。進(jìn)樣時(shí)間和進(jìn)樣量進(jìn)樣速度必須很快，因?yàn)楫?dāng)進(jìn)樣時(shí)間太長(zhǎng)時(shí)，試樣原始寬度將變大，色譜峰半峰寬隨之變寬，有時(shí)甚至使峰變形。一般地，進(jìn)樣時(shí)間應(yīng)在1s以內(nèi)。色譜柱有效分離試樣量隨柱內(nèi)徑、柱長(zhǎng)及固定液用量不同而異。柱內(nèi)徑大，固定液用量高，可適當(dāng)增加試樣量。但進(jìn)樣量過(guò)大，會(huì)造成色譜柱超負(fù)荷，柱效急劇下降，峰形變寬，保留時(shí)