血型的鑒定課件(PPT 24頁)

1、檢 驗 科血 型 的 鑒 定第1頁，共24頁。1ABO血型系統(tǒng)2ABO血型的鑒定3Table of Contents內 容 大 綱RH血型系統(tǒng)45RH血型的鑒定常見疑難血型的鑒定血型鑒定在生活中的應用6第2頁，共24頁。ABO血型系統(tǒng)O型血 O型血是人類最古老的血型 出現于4萬-6萬年前A型血 A型血產生于農耕時代 出現于1.7萬年-2.7萬年前B型血 B型血產生于游牧民族 出現于公元前1.7萬-1.2萬年前AB型血 AB型血 出現不到1000年血型傳說第3頁，共24頁。不具有AB凝集原同時具有AB凝集原只有B凝集原只有A凝集原凝集原B型血A型血ABO血型系統(tǒng)抗原O型血AB型血ABO血型系統(tǒng)是

2、根據紅細胞表面所含的凝集原不同而命名的。 凝集原：附著在紅細胞表面的一種抗原。第4頁，共24頁。ABO血型系統(tǒng)抗體凝集素(抗體)：存在于血清中，與其同名凝集原會發(fā)生抗原抗體反應，導致紅細胞凝集。人血清中含有兩類凝集素：即抗A和抗B。屬于天然抗體，天然抗體多以IgM型為主，不能通過胎盤，而免疫性抗體多以IgG型為主，能通過胎盤。凝集素對血液中紅細胞的影響第5頁，共24頁。ABO血型系統(tǒng)抗A凝集素抗B凝集素同時含有抗A和抗B凝集素不含有抗A和抗B凝集素B血型的血清中A血型的血清中AB血型的血清中O血型的血清中第6頁，共24頁。ABO血型系統(tǒng)抗原遺傳顯性基因：控制顯性性狀的基因。 隱性基因：控制隱性

3、性狀的基因。 ABO 血型系統(tǒng)的基因位點在第 9 對染色體上。人的 ABO 血型受控于A、B、O三個基因。其中A、B為顯性基因，O為隱性基因。第7頁，共24頁。AB型ABO血型鑒定抗原遺傳O型B型A型思考：A、B、AB以及O型血的基因型分別是什么? ABBBAAAoBooo遺傳規(guī)律第8頁，共24頁。ABO血型的鑒定實驗方法：血凝試驗(玻片法、試管法、全自動微板法)，微柱凝膠試驗，流式細胞技術，酶聯免疫吸附試驗。第9頁，共24頁。ABO血型的鑒定實驗原理：血型抗原與相應的抗體在反應介質中形成免疫復合物，出現肉眼可見的凝集現象。第10頁，共24頁。ABO血型的鑒定實驗用具：載玻片 膠頭滴管 棉簽

4、酒精 抗A、B標準血清 一次性采血針 第11頁，共24頁。ABO血型的鑒定準備載玻片1取一載玻片，左右兩側分別標記字母AB。采血3采血針輕刺手指尖，輕輕擠壓傷口使血液流出，分別滴在載玻片的兩側。消毒常規(guī)消毒，用棉簽沾取75%的酒精，對采血部位進行消毒。2滴標準血清在載玻片兩側相應的滴加抗A(藍色)和抗B(橙色)血清后，用棉簽棍將兩側血液與血清混勻，注意一定要換不同的棉簽棍。4混勻觀察5混均后，靜置3-5分鐘后，觀察現象。實驗過程：第12頁，共24頁。ABO血型的鑒定實驗結果：第13頁，共24頁。RH血型系統(tǒng)人類血型目前發(fā)現有30多種，除了ABO血型系統(tǒng)外，還有Rh血型系統(tǒng)等。Rh血型系統(tǒng)根據有

5、無D抗原分為Rh陽性和Rh陰性。第14頁，共24頁。RH血型系統(tǒng)抗原及抗體Rh血型系統(tǒng)抗原Rh血型系統(tǒng)能識別的抗原共43種，常見的抗原有五種，分別是D、C、 E、c、e。以D抗原的抗原性最強，故常以其存在與否定為Rh陽性或陰性，即凡含D抗原者為Rh陽性，不含D抗原者為Rh陰性。Rh血型系統(tǒng)抗體天然Rh抗體很少，絕大多數Rh抗體由輸血或妊娠刺激機體免疫系統(tǒng)產生的IgG型免疫性抗體。主要Rh血型系統(tǒng)抗體有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五種，其中抗D最為常見。在鹽水介質試驗系統(tǒng)中可檢測出某些Rh抗體，表明這些Rh抗體具有IgM的性質可能來自免疫反應抗體形成早期。第15頁，共24頁。Rh血型的鑒定方法及

6、原理 酶介質法 紅細胞表面的唾液酸帶負電荷，使用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細胞表面的唾液酸，降低紅細胞表面的負電荷，減少細胞間的排斥力，促進Rh抗原與相應抗體間的結合從而產生紅細胞凝集。 聚凝胺試驗 聚凝胺是帶高價陽離子的季銨鹽，溶解后產生的正電荷中和紅細胞表面的負電荷，減少細胞間的排斥力，有利于紅細胞凝集。如果是由Rh抗體致敏的紅細胞產生的凝集，是特異的不可逆凝集。非抗體致敏紅細胞凝集則是可逆性凝集。 鹽水介質抗D試驗 采用免疫球蛋白變性劑處理人源IgG類抗D血清，使小分子的IgG抗體分子增大成為具有大分子的“IgM”的性質，能在鹽水介質中與相應紅細胞發(fā)生凝集，可用于Rh血型的快速鑒定。第16頁，

7、共24頁。Rh血型的鑒定方法及原理 抗球蛋白試驗 又稱Coombs試驗，是檢測紅細胞上不完全抗體的經典方法。不完全抗體多與其相應的紅細胞結合，在鹽水介質中不出現凝集反應，Coombs試驗利用抗球蛋白抗體作為第2抗體，通過連接致敏紅細胞表面的特異性Rh抗體，使致敏紅細胞出現特異性凝集。 低離子強度試驗 紅細胞外圍的陰離子是紅細胞的穩(wěn)定因素之一，降低反應介質的離子強度可減少細胞外圍的陰離子，促進帶正電荷的IgG型Rh抗體與紅細胞結合發(fā)生凝集反應，從而增加紅細胞的凝集強度。第17頁，共24頁。常見疑難血型定義：疑難血型是指一種血型難以鑒定或判定的現象。特點：正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+（正常凝

8、集3+4+） 正反定性不一致干擾因素：生理因素(年齡、ABO亞型、先天無抗體、冷凝集素) 臨床治療（大量輸液、近期輸過異性紅細胞或血漿） 實驗技術原因（標本混淆、試劑質量問題、靜脈輸液處采樣）分類：紅細胞抗原減弱或丟失（ABO亞型、白血病、輸異性血、急性大出血） 紅細胞額外反應（自身抗體、紅細胞未洗滌、紅細胞上粘附大量蛋白） 混合凝集（近期輸異性血、造血干細胞移植） 血型定型減弱或無反應（年齡、先天性ABO抗體缺失）第18頁，共24頁。常見疑難血型的鑒定分析思路（三步法）第一步：排除人為因素或在技術上可能發(fā)生的操作失誤； 重新采集血樣，核對試劑、器材，規(guī)范地復檢ABO血型第二步：了解臨床資料，分析可能出現的原因；第三步：排除不可能的原因，歸納不能排除的原因，設計驗證試驗。舉例說明紅細胞抗原減弱或丟失(ABO亞型、正定型ABO抗原減弱)紅細胞額外反應（自身抗體）第19頁，共24頁。常見疑難血型的鑒定ABO亞型實驗結果：正定型與反定型不一致、正定型被檢紅細胞凝集弱解決方法：加抗-AB、抗-H、抗Bc第20頁，共24頁。常見疑難血型的鑒定正定型AB抗原減弱實驗結果：正定型與反定型不一致、正定型被檢紅細胞凝集弱、正定型呈mf樣解決方法：加抗-AB第21頁，共24頁。常