《食品毒理學(xué)》課件第三章動(dòng)物毒性試驗(yàn)

1、第三章 動(dòng)物毒性試驗(yàn)第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物概述一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化世界上的動(dòng)物通常被我們按照其與人類的關(guān)系分為：野生動(dòng)物（Wild Animal）經(jīng)濟(jì)動(dòng)物（Economic Animal）觀賞動(dòng)物（Ornamental Animal）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（Laboratory Animal）。 是指經(jīng)人工飼育，對(duì)其攜帶微生物實(shí)行控制，遺傳背景明確或來(lái)源清楚 的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其它科學(xué)試驗(yàn)的動(dòng)物 。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化： 指以其它三類動(dòng)物為來(lái)源，人為的使之變?yōu)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物的過(guò)程。 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物： Animal for exeperiment 是指某些未經(jīng)充分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化，而在某些實(shí)驗(yàn)研究中經(jīng)常用到或不可不用

2、的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特點(diǎn)：個(gè)體間的均一性；某些遺傳上的穩(wěn)定 性；比較容易獲得。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分類按微生物控制分： 種類 飼養(yǎng)條件無(wú)菌動(dòng)物（Germfree animal）隔離系統(tǒng)Isolation system悉生動(dòng)物（Gnotobiotic animal ）也叫已知生物體動(dòng)物隔離系統(tǒng)Isolation system無(wú)特定病原體動(dòng)物（SPF動(dòng)物）（Specific pathogen free animal ）屏障系統(tǒng)中Barrier system普通動(dòng)物（Conventional animal）開放系統(tǒng)Open system（國(guó)際上） 我國(guó)的分類標(biāo)準(zhǔn)：1994年國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布一級(jí)，普通動(dòng)物（

3、Conventional animal，CV）二級(jí)，清潔動(dòng)物（Clean animal，CL）三級(jí)，無(wú)特定病原體動(dòng)物（ Specific pathogen free animal ，SPF）四級(jí)，無(wú)菌動(dòng)物（Germfree animal，GF）二級(jí)，清潔動(dòng)物的飼養(yǎng)要求： 有屏障設(shè)施，空氣經(jīng)過(guò)濾凈化，正壓，進(jìn)入飼養(yǎng)環(huán)境的一切物品均應(yīng)嚴(yán)格滅菌：飼料、墊料、飲水、籠器具、工作人員的衣物、實(shí)驗(yàn)用品等。2 按遺傳學(xué)控制分 近交系（Inbred strain）封閉群（Close colony）突變系（Mutant strain）系統(tǒng)雜交動(dòng)物（Hybird anima）現(xiàn)代遺傳工程產(chǎn)生的新品系1）近交系（I

4、nbred strain） 指近交程度相當(dāng)于全同胞兄妹連續(xù)交配20代以上，近交系數(shù)達(dá)98.6%以上，基因達(dá)到高度純合和穩(wěn)定的動(dòng)物群。 常見(jiàn)的培育方式：全同胞兄妹交配（BS mating）父女或母子交配（回交，backcross）堂兄妹交配（cousin mating）不同的近交方式?jīng)Q定了近交程度提高的速度近交程度的衡量是以 近交系數(shù)來(lái)表示的近交系數(shù)指群體中兩個(gè)等位基因源于同祖先同一基因的概率1960年，F(xiàn)alconer經(jīng)試驗(yàn)獲得計(jì)算公式：Fn = 1 - ( 1 - F )nFn 第n代的近交系數(shù) n 近交代數(shù)F 近交系數(shù)的代遞增率同胞兄妹交配：19.1%父女或母子交配： 19.1%堂兄妹交配

5、：8%同父異母者交配：11.0% 近交系動(dòng)物的特點(diǎn)基因位點(diǎn)的純合性 (homozygosity)遺傳組成的同源性 (isogenicity)長(zhǎng)期遺傳的穩(wěn)定性 (stability)表現(xiàn)性的均一性 (uniformity)遺傳特征的可辨別性 (identifiability)遺傳組成的獨(dú)特性 (individuality)國(guó)際分布性 (international distribution)背景資料的完整性 (background data)常用的近交系動(dòng)物 日前世界上至少有250個(gè)小鼠品系，111個(gè)大鼠品系，20個(gè)家兔品系和14個(gè)豚鼠品系。在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最多的絕大部分是小鼠和大鼠的近交系。 小鼠常

6、用的近交品系主要有：C57BL、C3H、BALB/c、DBA/2、CBA、A、AKR、NAB、B10.D2、SJL。 大鼠常用的近交品系主要有：F344、LEW、BN、SHR、DA、PVG、WAG、AC1、WF、WKY。2）封閉群（Close colony） 也稱非近交系（noninbred strain）、遠(yuǎn)交群和遠(yuǎn)交原種（outbred）。特點(diǎn)：具有雜合性，避免了近交衰退；較強(qiáng)的繁殖力和生活力，表現(xiàn)為：產(chǎn)仔多、胎間隔短、生 長(zhǎng)塊、成熟早、疾病抵抗力強(qiáng)，成本低，可大量供應(yīng)。個(gè)體差異較大常用品系：小鼠：昆明、NIH、ICR、LACA；大鼠：Wistar、SD；Dunkin Harleg 豚鼠；

7、新西蘭兔等。培育要求： 5年以上不從外部引種，即不引進(jìn)任何新的基因；只在群內(nèi)進(jìn)行隨機(jī)交配；群體大小應(yīng)保持在50只以上。3）突變系（Mutant strain） 正常染色體的基因發(fā)生突變而具有了各種遺傳缺陷的動(dòng)物，進(jìn)行定向培育而成的近交系；或用遺傳學(xué)方法將突變基因?qū)胍延傻慕幌?；這樣具有突變基因的近交系稱突變系。 如果將突變基因保持在一個(gè)封閉群當(dāng)中，稱突變?cè)N（mutant stock）。4）系統(tǒng)雜交動(dòng)物（Hybird anima）指兩個(gè)不同近交系雜交產(chǎn)生的第一代動(dòng)物，也叫F1 動(dòng)物。特點(diǎn)：具有雜交優(yōu)勢(shì)?？共×?qiáng)，對(duì)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)處理的耐受性強(qiáng)，克服了近交衰退，適于各種長(zhǎng)期慢性實(shí)驗(yàn)；遺傳和表現(xiàn)型

8、的一致性。具有與近交系相似的個(gè)體均一性同時(shí)具有兩個(gè)親本片系的特點(diǎn)。不能進(jìn)一步繁殖而保持其遺傳組成不變，否則會(huì)出現(xiàn)遺傳 分離和基因重組。5）現(xiàn)代遺傳工程產(chǎn)生的新型品系 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 指以實(shí)驗(yàn)方法導(dǎo)入的外源基因在其染色體基因組內(nèi)穩(wěn)定整合并能遺傳給后代的動(dòng)物。 如果外源基因在動(dòng)物染色體上整合穩(wěn)定，則能進(jìn)一步繁殖而保持外源DNA的存在。嵌合體動(dòng)物 指將動(dòng)物早期胚胎進(jìn)行分割與同種或異種的胚胎細(xì)胞聚合而發(fā)育成的個(gè)體。 不能進(jìn)一步繁殖，只能在需要時(shí)隨時(shí)生產(chǎn)。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇原則 根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?，可考慮以下幾個(gè)原則： 1. 近似性原則2.差異性原則3.易化原則4.相容和匹配原則 5.重復(fù)性和均一性原則 6

9、.易獲性原則：還要考慮是否經(jīng)濟(jì)及是否容易飼養(yǎng)管理 還要注意動(dòng)物的種類、品種或品系、質(zhì)量（遺傳、微生物及營(yíng)養(yǎng)狀況）和健康狀況等。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇原則 根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體目的和要求，可考慮以下幾個(gè)方面： 1.選用與人類的機(jī)能、代謝結(jié)構(gòu)、及疾病特點(diǎn)相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 2.選用遺傳背景明確、具有已知菌群及模型性狀顯著且穩(wěn)定的動(dòng)物。 3.選用解剖生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蟮膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物4.選用具有符合研究需要的某些特殊反應(yīng)的動(dòng)物。 5.選用人畜共患疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物6.選用傳統(tǒng)應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 四、嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的意義1.代謝方式與人接近，對(duì)化學(xué)物質(zhì)敏感。 2.體型大小適中。 3.自然壽命不長(zhǎng)，繁殖力強(qiáng)。 4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)

10、物化程度高。 常選用大、小白鼠。其它嚙齒類動(dòng)物如豚鼠、長(zhǎng)爪沙鼠、地鼠等， 五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)的種屬差異 毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)一般要求用兩種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（其中一種為非嚙齒類）對(duì)同一毒物進(jìn)行試驗(yàn)，以得到的兩個(gè)LD50之比來(lái)劃分種屬差異的大?。?LD50（A）LD50（B） 易感性 3 沒(méi)有種屬差異 3.19 中等種屬差異 9 明顯種屬差異 六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼育環(huán)境溫度： 各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的最適溫度如下表，且要求溫差不大于3，動(dòng)物小鼠大鼠兔貓狗靈長(zhǎng)類溫度15-2018-2215-2015-2015-2020-24濕度： 濕度過(guò)高微生物易于繁殖，過(guò)低（40)易使灰塵飛揚(yáng)，相對(duì)濕度還影響體溫調(diào)節(jié)。因此，濕度以4070為宜

11、，尤以45 55為最適相對(duì)濕度。 （一）氣候因素氣流速度及空氣清潔度 ： 要求空氣中的NH3不超過(guò)20ppm。因此要求有5-15次小時(shí)的換氣量。氣流速度為10-25cms。再加上適當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)密度和日常清潔工作。 光照 ： 光照與動(dòng)物性周期有密切關(guān)系，尤其鼠類要避免日光直射。因此可以采用完全的人工光照，晝夜明暗交替，12h：12h或10 h ：14 h 。音響、噪音: 可引起動(dòng)物緊張，大、小鼠尤怕突然音響，要求噪音不高于65分貝，一般60分貝以下（狗除外）。 （二）物理化學(xué)因素6. 臭氣 動(dòng)物室內(nèi)的臭氣主要有氨、甲基硫醇、硫化氫等物質(zhì)。以氨的濃度最高，故一般以氨的含量作為衡量空氣質(zhì)量的重要指標(biāo)。當(dāng)

12、氨濃度較高時(shí)，會(huì)刺激動(dòng)物的粘膜而引起流淚、咳嗽，嚴(yán)重時(shí)可引起急性肺水腫，而造成動(dòng)物死亡。高濃度的氨引起動(dòng)物體質(zhì)下降，從而影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果。 為了抑制動(dòng)物室內(nèi)的臭氣，應(yīng)減少動(dòng)物飼養(yǎng)密度，23日左右頻繁地更換籠具、墊料，增加換氣次數(shù)。我國(guó)動(dòng)物室的氨濃度標(biāo)準(zhǔn)為14mgm3以下。7. 粉塵 包括微生物在內(nèi)。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室的粉塵可引起鼻、咽喉炎、哮喘、發(fā)熱、皮膚炎等過(guò)敏性癥狀，粉塵中的微生物也可造成動(dòng)物污染。粉塵的數(shù)量與空氣過(guò)濾效果、換氣次數(shù)、空氣濕度、飼養(yǎng)方式、人員操作等有關(guān)。（三）居住因素：籠具、墊料、飲水器等七、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng) 要求飼料蛋白質(zhì)最少占1315，最好18-24,但通常不超過(guò)30，而其中13為營(yíng)

13、養(yǎng)價(jià)值較高的蛋白質(zhì)。 飼料中脂肪占4-6，一般不超過(guò)10。 碳水化合物在40-70左右，粗纖維要占10-15 鈣占1.5，磷占0.75。 此外，還要注意維生素E和B族維生素及食鹽的供應(yīng)。大鼠對(duì)Vk與Vc無(wú)特殊要求，但豚鼠應(yīng)注意Vc供應(yīng)，兔子飼料中應(yīng)保證有足夠的纖維素，狗的飼料中應(yīng)有一定的肉食，還要保證有適當(dāng)?shù)膽敉饣顒?dòng).成分名稱成分含量%主要微量元素含量（每kg飼料中）主要維生素含量（每kg飼料中）粗蛋白18鐵 不低于100mg銅 不低于10 mg 不高于250 mg鋅 不低于30 mg錳 不低于80 mg維生素A 不低于7000IU維生素D3 不低于800IU維生素E 不低于60IU維生素K3

14、 不低于3mg維生素B6 不低于8mg維生素B12 不低于0.02mg粗纖維5粗灰分8鈣0.8-1.8總磷0.6-1.2賴氨酸1.35食鹽0.5水分10大、小鼠生長(zhǎng)維持顆粒飼料北京科澳協(xié)力飼料有限公司按照GB149243-2001標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn) 大、小鼠繁殖顆粒飼料成分名稱成分含量（%）主要微量元素含量（每kg飼料中）主要維生素含量（每kg飼料中）粗蛋白20鐵 不低于100mg銅 不低于10 mg 不高于250 mg鋅 不低于80 mg錳 不低于80 mg維生素A 不低于15000IU維生素D3 不低于600IU維生素E 不低于120IU維生素K3 不低于10mg維生素B6 不低于12mg維生素B1

15、2 不低于0.01mg粗纖維5粗灰分8鈣0.8-1.8總磷0.6-1.2賴氨酸1.35食鹽0.5水分10第二節(jié)常用試驗(yàn)動(dòng)物的一般處理一、試驗(yàn)前觀察 動(dòng)物在試驗(yàn)前，一般要觀察一周，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室生活條件，同時(shí)淘汰一部分不健康與不適用的動(dòng)物。 慢性毒性試驗(yàn)要求比較嚴(yán)格，最好觀察兩周，并反復(fù)仔細(xì)觀察。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須健康并發(fā)育正常，體型豐滿，毛濃密且緊貼于皮膚表面，有光澤，眼明亮而有神，天然孔無(wú)分泌物，周圍清潔，食欲良好，運(yùn)動(dòng)敏捷自如，無(wú)異常姿態(tài)。 生理常數(shù)項(xiàng)目 大 鼠 小 鼠 豚 鼠 家 兔 貓 狗 妊娠天數(shù)（日） 2123 1821 6572 2832 6068 5863斷奶天數(shù)（日） 25

16、30 2030 2135 4555 60 60 斷奶時(shí)體重（g） 50 1014 200 700 性成熟時(shí)期（月） 2.53 2 4 68 34 12 性成熟時(shí)體重（g） 150250 2030 500700 1000 出入較大每年胎次 47 47 35 35 23 2 每胎仔數(shù) 59 59 15 35 36 110 自然壽命（年） 22.5 1.52 68 49 1012 20 體溫（） 37.539.5 3839 3839.5 3839.5 3839 37.539呼吸頻率（次分） 70100 140180 80120 5060 1030 脈搏（次分） 270350 540720 23039

17、0 120140 70120血壓（mmHg） 90120 133160 7590 82124 120140常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理常數(shù)二、試驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)與標(biāo)記 1 染色標(biāo)記： 常用于大鼠、小鼠、豚鼠等動(dòng)物紅色（0.5中性紅或品紅溶液）代表十位數(shù)黃色（35苦味酸染料）代表個(gè)位數(shù) 習(xí)慣上按前中后和左中右次序分成9區(qū)，代表19。這樣，用此種方法即可標(biāo)記99只動(dòng)物。二、試驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)與標(biāo)記 鼠尾染色標(biāo)記法二、試驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)與標(biāo)記 2 剪耳標(biāo)記： 用于兔、大鼠等 在耳朵不同部剪一小孔（或用打孔器打一小孔）表示一定號(hào)碼。3 其它，如掛牌和剪毛等方法 三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和保定 大小鼠兔豚鼠犬 四、被檢物的給予方式和途徑

18、 1消化道染毒法 1)灌胃法： 是將液態(tài)、氣或固態(tài)受試化合物溶于某溶劑中，配制成一定濃度，裝入注射器等定量容器，經(jīng)過(guò)導(dǎo)管注入胃內(nèi)。 該種方法特點(diǎn)、要求： 能準(zhǔn)確掌握給予被檢物的劑量與時(shí)間需做成一定劑型對(duì)每只動(dòng)物逐一進(jìn)行，工作量大，且容易造成損傷所以，一般只適用于一次給予被檢物的急性毒性試驗(yàn)，灌胃前，動(dòng)物應(yīng)停食12h，否則胃的充盈程度不同，影響結(jié)果，灌胃后，至少經(jīng)3h再喂食。 被檢物的配制 用水或經(jīng)過(guò)加熱的植物油配成均勻水溶液或油溶液。 在水和油中均不溶的物質(zhì)，可用吐溫60（tween60）或吐溫80水溶液配成乳狀液將被檢物在蛋黃中研勻，逐滴加入植物油，蛋黃與油的比例為7.5：5，然后再加入適量

19、水配成乳液 也可用13的淀粉液或13羧甲基纖維素溶液配成懸浮液。 在各種溶液中，被檢物濃度可根據(jù)給予動(dòng)物劑量和可能灌入的液體容積而定。小鼠0.20.7ml；大鼠14ml左右為宜，大動(dòng)物一般最多不超過(guò)動(dòng)物體重的2。2) 自由采食（又叫喂飼法） 指將受試物摻入飼料或飲水中，讓動(dòng)物自由攝入。 這種方法由于動(dòng)物攝食量的變化和攝食中的損失，劑量不夠精確但無(wú)上述灌胃法缺點(diǎn)，適用于多次給藥的慢性試驗(yàn)中。將被檢物摻入飼料中，必須注意下列問(wèn)題： 被檢物必須在飼料中混合均勻，在飼料中不揮發(fā)、不分解破壞； 被檢物不與飼料起反應(yīng)，不影響飼料的感官性狀和動(dòng)物食欲； 不降低飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和消化吸收率； 應(yīng)盡量保證摻有被檢

20、物的飼料，按設(shè)計(jì)劑量全部被試驗(yàn)動(dòng)物攝入； 動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育期間，隨時(shí)調(diào)整摻入數(shù)量，以保證按公斤體重計(jì)算的劑量穩(wěn)定。 將被檢物摻入飲水的方法的基本原則與摻入飼料類似，每日飲水量小鼠約為1.53ml，大鼠815ml。在食品毒理學(xué)研究中，該方法較少采用。 3)吞咽膠囊 指將一定劑量的受試化學(xué)物裝入藥用膠囊內(nèi)，強(qiáng)制放入到動(dòng)物的舌后咽部，迫使動(dòng)物咽下。 此種方法劑量準(zhǔn)確，尤其適用于易揮發(fā)、易水解和有異味的化合物，適于兔、貓、狗等大動(dòng)物。 2 經(jīng)呼吸道 染毒 適于氣體、粉塵、蒸汽等狀態(tài)的毒物，這種方式又可分為兩種類型： 2）氣管注入： 是將受試物注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物氣管或肺內(nèi)。此種類型實(shí)際上相當(dāng)于對(duì)動(dòng)物進(jìn)行一次“手術(shù)

21、”。 1）呼入接觸法： 即將受試動(dòng)物置于含有一定濃度的外來(lái)化學(xué)物的染毒柜中，或其它器皿中，動(dòng)物自然吸入化學(xué)物。 3 經(jīng)皮膚染毒 主要有浸尾試驗(yàn)和皮膚涂藥試驗(yàn)。 其目的是鑒定化學(xué)物經(jīng)皮膚吸收作用、局部刺激作用、致敏作用、光感作用等。比如化妝品安全性鑒定。 五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別鑒別 1 大鼠與小鼠： 幼年時(shí)主要依肛門與生殖孔的距離區(qū)分，間距大并有毛者為雄性，小并無(wú)毛者為雌性。 成年雌性在腹部還可摸到乳頭，雄性臥位時(shí)可見(jiàn)睪丸。 2 家兔： 雄性生殖孔為圓形，用手指扒開可見(jiàn)中間有圓錐狀稍向下彎的陰莖，氣溫高時(shí)可見(jiàn)到或觸及睪丸。 雌性生殖孔為一橢圓形間隙，呈尖葉形，上寬下窄，且距肛門較近，成年兔腹部可見(jiàn)乳

22、頭。 六、生物材料的采集 1血樣的采集 1）斷尾采血 ：大、小鼠，可少量多次采血。 2）眼眶后靜脈叢采血： 大、小鼠，中等采血量多次采血。 3）心臟采血： 大鼠、豚鼠、兔等， 4）斷頭采血： 大、小鼠，一次大量采血。 5）摘眼球采血：大、小鼠，一次，大量6）耳緣靜脈采血：兔，多次7）股靜脈或股動(dòng)脈采血：大鼠、兔等，一次（放血）或多次（抽血）試驗(yàn)。采血量較大。 8）頸靜脈或頸動(dòng)脈采血：大鼠、兔等，多次 選擇采血方法應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種、所需采血量、采血次數(shù)和操作條件確定。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的允許采血量 動(dòng)物品種 最大安全采血量（ml） 最小致死采血量（ml） 小鼠 0.1 0.3 大鼠 1.0 2.0 豚鼠

23、 5.0 10.0 家兔 10.0 40.0 2 血液標(biāo)本的選擇1）全血：采血時(shí)加入適當(dāng)抗凝劑，使血液不產(chǎn)生凝固，含有有形成份的標(biāo)本。含水約81%。 常用于碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白、硫血紅蛋白、細(xì)胞培養(yǎng)等測(cè)定，及制備血中各種細(xì)胞和全血分析用。 常用抗凝劑有：肝素、草酸鉀、草酸鈉、草酸銨、草酸鋰、枸櫞酸鈉等。2）血漿：全血中加入適當(dāng)抗凝劑，去除細(xì)胞成份后剩余部分的標(biāo)本。含水約93%。 3）血清：是血漿中除去凝血因子纖維蛋白原的標(biāo)本 血清是生化分析中最常用的標(biāo)本。 采血后可立即分離，可避免凝血時(shí)和運(yùn)輸時(shí)溶血。其中含有一種纖維蛋白原和前凝血酶。 多用于血液凝固機(jī)制方面的檢驗(yàn)，如游離血紅蛋白、變性血紅蛋白、纖維蛋白質(zhì)的分析及血漿分析3 尿液的收集 因動(dòng)物不同而異。 包括代謝籠法、導(dǎo)尿管法、輸尿管引出法和膀胱瘺管法等。 4 組織勻漿的制備 用器械在一定的溶液中將組織細(xì)胞磨碎，其設(shè)備為勻漿器。 現(xiàn)用的勻漿器有玻璃勻漿器、高速組織搗碎機(jī)、超聲波勻漿器等。 七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法 頸椎脫臼法（適于大、小鼠）；空氣栓塞法（適于犬、兔等大動(dòng)物）；大量放血法（適于大、小鼠、犬等多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物）。 第三節(jié) 毒理學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì)一、試驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容 1 、擬定相互比較的各種因素和水平。 2、 確定試驗(yàn)的對(duì)象及數(shù)量3 、分組：必須按照適當(dāng)?shù)囊?guī)律將試驗(yàn)對(duì)象有計(jì)劃的進(jìn) 行