培養(yǎng)基認識以及選擇

1、關(guān)于培養(yǎng)基的認識及選擇第一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基的成分營養(yǎng)物質(zhì)：水、蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇類、血液、無機鹽、雞蛋、動物血清、生長因子（Vit、aa、嘌呤、嘧啶等）。氮源氮源和碳源 無糖碳源和能源氯化鈉：維持酶的活性、調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓磷酸鹽：緩沖作用第二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基的成分凝固物質(zhì)：最常用的為瓊脂(agar)，它是從石花菜中提出來的一種半乳糖膠，100溶解，40凝固，可利用瓊脂來改變培養(yǎng)基的物理性狀(固體或半固體)，它是理想的固體培養(yǎng)基的賦形劑，其本身不被細菌分解利用，也無營養(yǎng)作用。第三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月

2、培養(yǎng)基的成分抑菌劑和指示劑： 不是細菌生長繁殖的必需物質(zhì)，是制備細菌的選擇、鑒別培養(yǎng)基和判斷結(jié)果的需要。 常用的指示劑有：酚紅、中性紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍、中國蘭等酸堿指示劑，美蘭為常用的氧化還原指示劑。 常用的抑菌劑有：膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及一些染料和某些抗生素等。第四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基的分類 液體培養(yǎng)基：牛肉湯(牛肉浸液+1%蛋白胨 +0.5%NaCl pH7.4) 半固體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基+0.20.5% agar 固體培養(yǎng)基：液體營養(yǎng)物+ 2% agar 按物理性狀第五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基的分類基礎(chǔ)培養(yǎng)基：

3、是其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)，如普通肉 湯、 普通瓊脂平板、斜面、高層營養(yǎng)培養(yǎng)基：BAP、羅琴培養(yǎng)基、呂氏血清斜面選擇培養(yǎng)基：SS平板、BS平板、Mac平板等鑒別培養(yǎng)基：糖發(fā)酵管、MIU、KIA、TSI等特殊培養(yǎng)基：厭氧培養(yǎng)基、高滲培養(yǎng)基等按用途第六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月常用的培養(yǎng)基血瓊脂平板巧克力平板淋球菌平板念珠菌顯色平板MAC平板SS平板EMB平板TCBS平板M-H平板M-H血平板轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基第七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月血瓊脂平板適用于各類細菌生長觀察細菌菌落形態(tài)判斷溶血情況 -溶血環(huán)：菌落周圍呈綠色，紅細胞不完全溶解 -溶血環(huán)：菌落周圍的培養(yǎng)基內(nèi)紅細胞完全被破

4、壞 溶血：不溶血第八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月巧克力平板主要用于嗜血桿菌的分離：含有、因子添加萬古霉素抑制革蘭陽性菌，但有時-溶血的鏈球菌會形成草綠色溶血環(huán)大多數(shù)革蘭陰性菌都會生長第九張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月淋球菌平板用于分離淋病奈瑟菌加入萬古霉素和多粘菌素B溶液抑制革蘭陽性菌和真菌生長第十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月念珠菌顯色平板分離酵母樣真菌鑒別培養(yǎng)基：不同的真菌顯示出不同顏色的菌落第十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月MAC平板選擇性培養(yǎng)基：供腸道致病菌分離培養(yǎng) 非發(fā)酵菌鑒別抑制劑膽鹽：抑制革蘭陽性菌指示劑中性紅：區(qū)分分解乳糖和不

5、分解乳糖的細菌腸道致病菌不分解乳糖，非致病菌分解乳糖 第十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月SS平板強選擇性培養(yǎng)基：用于志賀菌和沙門菌的分離抑制劑枸櫞酸鈉、膽鹽、硫代硫酸鈉協(xié)同作用與煌綠共同抑制腸道非病原菌及大部分大腸埃希菌。其中膽鹽還能抑制革蘭陽性菌。指示劑中性紅沙門菌菌落特點：無色半透明，產(chǎn)H2S與培養(yǎng)基內(nèi)三價鐵離子反應呈黑色中心。志賀菌菌落特點：無色不透明或透明，邊緣整齊第十三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月EMB平板弱選擇性培養(yǎng)基抑制革蘭陽性菌伊紅和美藍兩種染料一酸一堿作為指示劑細菌分解乳糖時產(chǎn)酸，使伊紅美藍結(jié)合成紫紅色化合物，有時呈金屬光澤不分解乳糖的細菌菌落為無

6、色或灰白色有的細菌產(chǎn)堿過多而出現(xiàn)藍色菌落第十四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月TCBS平板硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基霍亂弧菌和副溶血弧菌分離培養(yǎng)堿性瓊脂膽酸鈉、牛膽粉、硫代硫酸鈉和檸檬酸鈉及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群氯化鈉可刺激弧菌的生長以麝香草酚蘭和溴麝香草酚蘭為指示劑霍亂弧菌分解蔗糖產(chǎn)酸，菌落呈黃色半透明，圓形扁平，帶有黏性不易挑起副溶血弧菌不分解蔗糖，菌落呈藍綠色半透明，大而扁平，帶有黏性第十五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月M-H平板水解酪蛋白瓊脂用于細菌藥敏試驗瓊脂擴散法（K-B法）胸腺嘧啶核苷酸含量低，不干擾磺胺類藥物測定控制鈣、鎂離子濃度

7、，不干擾氨基糖苷類藥物測定第十六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月M-H血平板M-H瓊脂中加入5%脫纖維羊血用于鏈球菌藥敏試驗第十七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基阿米斯轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基：支原體培養(yǎng)拭子Cary-Blair運送培養(yǎng)基：彎曲菌、沙門菌、志賀菌的標本采集和保存緩沖甘油鹽水保存液：糞便標本保存改良Cary-Blair運送培養(yǎng)基：厭氧菌標本第十八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基的選擇大部分細菌培養(yǎng)標本：血平板、巧克力平板大便培養(yǎng)標本：EMB、SS、MAC、TCBS酵母樣真菌培養(yǎng)標本：念珠菌顯色平板淋球菌培養(yǎng)標本：淋球菌平板中段尿標本：血平板第十九張

8、，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基接種劃線方法：平板分區(qū)劃線 沾取標本均勻涂布于平板培養(yǎng)基邊緣一小部分（為一區(qū)）；然后將接種環(huán)火焰滅菌，待冷后只通過一區(qū)2 3 次后連續(xù)劃線（為二區(qū)）；依次可供劃線3 5 區(qū)，火焰滅菌接種環(huán)。目的：分離出單個菌落第二十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基接種劃線方法：穿刺接種 用經(jīng)滅菌后的接種針挑取菌落或培養(yǎng)物，由培養(yǎng)基中央刺到距管底約03 05cm 處，然后沿穿刺線退出接種針。目的：用于微量生化管接種第二十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基接種劃線方法：液體接種用左手持培養(yǎng)基與菌種管，右手持接種環(huán)，其小指與無名指及無名指與中指之間各拔取并夾持一個棉塞，火焰滅菌試管口， 以滅菌冷卻后的接種環(huán)沾取菌種，傾斜液體培養(yǎng)基管，先在管壁與液面交界處研磨（研磨處以試管直立后液體能淹沒接種物為主），然后再在液體中擺動2 3 次接種環(huán)，塞好棉塞后輕輕混合即可。目的：細菌增菌及保存第二十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年