健康食品之安全性與功效性評(píng)估-投影片1ppt課件

1、安康食品之平安性與效果性評(píng)估1. 申請(qǐng)廠商根本資料表 及安康食品查驗(yàn)登記表2. 產(chǎn)品原料成分規(guī)格含量表。3. 產(chǎn)品之平安評(píng)估報(bào)告。4. 產(chǎn)品之保健效果評(píng)估報(bào)告。5. 保健效果成分鑑定報(bào)告及其檢驗(yàn)方法。6. 保健效果安定性試驗(yàn)報(bào)告。7. 產(chǎn)品製程概要。8. 良好作業(yè)規(guī)範(fàn)之證明資料。9. 產(chǎn)品衛(wèi)生檢驗(yàn)規(guī)格及其檢驗(yàn)報(bào)告。10. 普通營(yíng)養(yǎng)成分分析報(bào)告。11. 相關(guān)研討報(bào)告文獻(xiàn)資料。12. 產(chǎn)品包裝標(biāo)籤及說明書。13. 申請(qǐng)者營(yíng)利事業(yè)登記證影本。14. 完好樣品及審查費(fèi)。15. 磁碟片乙片。 安康食品之申請(qǐng)安康食品之申請(qǐng)廠商應(yīng)本身先確定產(chǎn)品功能及平安性函詢歸屬於那一類安康食品假設(shè)為中草藥性質(zhì)，則轉(zhuǎn)送至行

2、政院衛(wèi)生署中醫(yī)藥委員會(huì)，斷定能否為食品依據(jù)分類，執(zhí)行相關(guān)平安性與功能性評(píng)估平安性評(píng)估之重要性生物平安性試驗(yàn)評(píng)估對(duì)人體的保護(hù)以細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物為方式，以評(píng)估測(cè)試物質(zhì)的毒理性質(zhì) 及其與劑量的相關(guān)性；並預(yù)知其毒性程度、毒性標(biāo)的器官、毒性復(fù)原性及毒性遲發(fā)性。用以建立臨床人體試驗(yàn)的平安劑量及各項(xiàng)毒性反應(yīng)指標(biāo)及檢測(cè)參數(shù)。生物平安性評(píng)估系統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域包裝資料醫(yī)療器材化學(xué)製品工業(yè)環(huán)境安康食品新藥開發(fā)平安性評(píng)估平安性評(píng)估之重要性藥物開發(fā)臨床前試驗(yàn)當(dāng)開發(fā)或設(shè)計(jì)的分子，証實(shí)具有醫(yī)療潛力，即步入臨床前評(píng)估階段。為一系列體內(nèi)、體外之測(cè)試，以決定平安性及藥物活性。藥物療效與活性:藥物動(dòng)力學(xué)(pharmacokinetics)

3、、療效(efficacy) 、吸收、分佈、代謝、排除(absorption, distribution, metabolism, excretion)平安性: 生物平安性評(píng)估(bio-safety assessment)動(dòng)物試驗(yàn):非臨床/臨床前(Preclinical Trial)人體試驗(yàn):即為臨床試驗(yàn)(Clinical Trial) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)用與平安性評(píng)估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)管理小組 (IACUC)Institutional Animal Care and Use Committee3R 原則-取代化(Replacement)、精緻化(Refinement)及減量化(Reduction)安康食品平安性

4、評(píng)估法規(guī)衛(wèi)生署: 藥品非臨床試驗(yàn)平安性規(guī)範(fàn)衛(wèi)生署: 安康食品平安性評(píng)估方法安康食品-平安性評(píng)估平安性評(píng)估分類 安康食品之平安評(píng)估分為四個(gè)類別 第一類： 屬以下二種情形之一者，得免再進(jìn)行毒性測(cè)試。產(chǎn)品之原料為傳統(tǒng)食用且以通常加工食品方式供食者。產(chǎn)品具有完好之毒理學(xué)平安性學(xué)術(shù)文獻(xiàn)報(bào)告及曾供食用之紀(jì)錄，且其原料、組成成分及製造過程與所提具之學(xué)術(shù)文獻(xiàn)報(bào)告完全相符者。 第二類： 產(chǎn)品之原料為傳統(tǒng)食用而非以通常加工食品方式供食者，應(yīng)檢具以下項(xiàng)目之毒性測(cè)試資料?；蚨拘栽囼?yàn)28天口服毒性試驗(yàn) 第三類： 產(chǎn)品之原料非屬傳統(tǒng)食用者，應(yīng)檢具以下項(xiàng)目之毒性測(cè)試資料?；蚨拘栽囼?yàn)90天口服毒性試驗(yàn)致畸試驗(yàn) 第四類：

5、產(chǎn)品之原料非屬傳統(tǒng)食用且含有致癌物之類似物者，應(yīng)檢具以下項(xiàng)目之毒性測(cè)試資料?；蚨拘栽囼?yàn)90天口服毒性試驗(yàn)致畸試驗(yàn)致癌性試驗(yàn)繁衍試驗(yàn)安康食品-平安性評(píng)估平安性評(píng)估分類安康食品平安性評(píng)估投與方式Routes Administration/TreatmentPer-oral 【p.o.; 胃導(dǎo)管餵食intragastric intubation】Incorporated with feed平安性試驗(yàn)之分類普通毒性試驗(yàn)(General toxicity study)單劑量急性毒性試驗(yàn)14天重覆劑量亞急性28天與亞慢性90天毒性試驗(yàn)慢性毒與致癌性毒性試驗(yàn)2430個(gè)月特殊毒性試驗(yàn)(Specific to

6、xicity study)基因毒性試驗(yàn)生殖與發(fā)育毒性試驗(yàn)皮膚、眼球、免疫、神經(jīng)及其他毒性試驗(yàn)安康食品平安性評(píng)估試驗(yàn)1. 基因毒性試驗(yàn) -Gene mutation test with bacteria -Chromosomal aberration with mammalian cells in culture -Micronucleus test with rodents2. 單劑量急性毒性試驗(yàn)3. 28天重複劑量亞急性毒性試驗(yàn)4. 90天重複劑量亞慢性毒性試驗(yàn)5. 致畸性試驗(yàn)6. 慢性/致癌性試驗(yàn)7. 繁衍毒性試驗(yàn)安康食品平安性評(píng)估特殊毒性試驗(yàn)基因毒性試驗(yàn)(Genotoxicity):評(píng)估

7、測(cè)試物質(zhì)直接或間接引發(fā)的基因傷害程度。沙門氏菌逆突變分析(Ames test):運(yùn)用已突變需靠外界提供組胺酸(histidine)才干生存之沙門氏菌(Salmonella typhimurium)試驗(yàn)菌種，假設(shè)試驗(yàn)菌種能在缺乏組胺培養(yǎng)基中產(chǎn)生菌落，表示有致突變物質(zhì)存在。染色體結(jié)構(gòu)異常分析(Chromosomal Aberration Test)染色體結(jié)構(gòu)異常分析(chromosomal aberration):是搜集分裂中期之細(xì)胞，製作染色體玻片，在顯微鏡下觀察染色體(chromosome)之形態(tài)並分析結(jié)構(gòu)異常之比例。微小核分析(Micronucleus Assay)動(dòng)物體內(nèi)微小核分析(Mic

8、ronucleus assay):採(cǎi)用分析周邊血液內(nèi)網(wǎng)狀紅血球(reticulocyte)含微小核(micronuclei)之頻率，並計(jì)算網(wǎng)狀紅血球佔(zhàn)全體紅血球之比例以作評(píng)估利用鏡檢觀察 。 網(wǎng)狀紅血球：為骨髓新生之紅血球安康食品平安性評(píng)估普通毒性試驗(yàn)測(cè)試物質(zhì)經(jīng)投予後，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物能夠產(chǎn)生之毒性影響，以瞭解毒性變化之產(chǎn)生，或同時(shí)測(cè)定無毒性顯示之劑量(no-observed-adverse-effect-level; NOAEL 或no-observed-effect-level; NOEL)及其致癌性。急性毒試驗(yàn)(Acute toxicity study) 目的:了解測(cè)試物質(zhì)過量能夠引發(fā)之急性毒

9、性，及顯示測(cè)試物質(zhì)的目標(biāo)器官與遲發(fā)毒性建立重覆劑量毒性評(píng)估時(shí)，劑量範(fàn)圍之選擇LD50方法:常用囓齒類動(dòng)物，經(jīng)單一劑量投予，並觀察14天預(yù)試驗(yàn)正試驗(yàn)觀察臨床癥狀、解剖及肉眼病理檢查、如有必要並做目標(biāo)器官之組織病理診斷單劑量急性毒試驗(yàn)普通毒性試驗(yàn)亞急性毒試驗(yàn)(Subacute toxicity study):每天連續(xù)28天投與亞慢性毒試驗(yàn)(Subchronic toxicity study): 連續(xù)3個(gè)月投與目的: 評(píng)估測(cè)試物質(zhì)重覆運(yùn)用所呵斥的累積性毒性、測(cè)試物質(zhì)毒性標(biāo)的器官、及毒性之復(fù)原性方法: 持續(xù)不同時(shí)間內(nèi)，重覆給予動(dòng)物試驗(yàn)物質(zhì)觀察臨床癥狀與毒性反應(yīng)臨床病理檢驗(yàn)組織病理診斷重覆劑量毒試驗(yàn)普通

10、毒性試驗(yàn)?zāi)康? 在1至2年(囓齒類動(dòng)物)的試驗(yàn)期間中，確定長(zhǎng)期投與測(cè)試物質(zhì)在動(dòng)物身上呵斥腫瘤的能夠性，以評(píng)估測(cè)試物質(zhì)能否可長(zhǎng)期運(yùn)用。方法: 需運(yùn)用兩種以上囓齒類動(dòng)物動(dòng)物觀察臨床癥狀與毒性反應(yīng)臨床病理檢驗(yàn)組織病理診斷致癌性試驗(yàn)(Carcinogenicity)普通毒性試驗(yàn)臨床前試驗(yàn)-平安性評(píng)估生殖與發(fā)育毒性試驗(yàn) 致畸胎性試驗(yàn) (Teratogenicity) 器官發(fā)生期，評(píng)估試驗(yàn)物質(zhì)對(duì)胚胎發(fā)育之影響及呵斥畸 胎之能夠性。動(dòng)物: 小鼠、大鼠；雌雄1:1共居一飼養(yǎng)箱中；每組共20對(duì)；兔子則為每組共12對(duì)。投藥期: 雌大鼠、小鼠為第6-15懷孕日 雌兔為第7-16懷孕日 觀察項(xiàng)目:於第20懷孕日(兔子

11、則第29懷孕日)，以安樂死解剖。算出胚胎死亡、妊娠成立數(shù)目等。檢查產(chǎn)仔數(shù)、測(cè)生存胎兒稱重、性別判斷、檢查外表、內(nèi)部器官等。新生兒進(jìn)行骨骼與內(nèi)臟組織檢查。臨床前試驗(yàn)-平安性評(píng)估生殖與發(fā)育毒性試驗(yàn) 繁衍試驗(yàn)(Fertility and reproductive toxicity) 懷孕前至懷孕初期，評(píng)估試驗(yàn)物質(zhì)對(duì)雌、雄兩性動(dòng)物的生殖力及對(duì)受精卵運(yùn)送著床的影響。動(dòng)物: 小鼠、大鼠；雌雄1:1共居一飼養(yǎng)箱中；每組共20對(duì)。投藥期: 雄鼠 (約5-6周齡)，每天投藥共60天，在進(jìn)行交配期間內(nèi)亦每天投藥，至交配勝利為止。 雌鼠為性成熟(約9-10周齡)，投藥兩周，然後進(jìn)行交配，交配期間亦每天投藥，至交配勝

12、利後，持續(xù)投藥至胚胎器官構(gòu)成期(約為6th懷孕日)觀察項(xiàng)目:雄鼠交配勝利後，以安樂死解剖，觀察睪丸與副睪。雌鼠懷孕第21天，以安樂死解剖，檢查卵巢黃體數(shù)目，胚胎著床與被吸收數(shù)目，及胚胎死亡率。安康食品平安性評(píng)估試驗(yàn)技術(shù)與項(xiàng)目動(dòng)物飼養(yǎng)與臨床觀察動(dòng)物房環(huán)境與進(jìn)出管控，動(dòng)物房堅(jiān)持在溫度232、濕度5010%及光照12小時(shí)亮、12小時(shí)暗。試驗(yàn)期間之動(dòng)物臨床觀察包括眼睛檢查、運(yùn)用檢眼鏡檢查眼睛的外部及內(nèi)部構(gòu)造。定期之飼料攝取、體重增減紀(jì)錄試驗(yàn)任務(wù)、藥物投與安康食品平安性評(píng)估試驗(yàn)技術(shù)與項(xiàng)目臨床病理血液檢驗(yàn): hematocrit、hemoglobin、erythrocyte count、total and

13、 differential leukocyte counts 及凝血因子 (例如clotting time、prothrombin time、activated partial thromboplastin time ) 等之測(cè)量。 血清生化檢驗(yàn): 血清生化檢驗(yàn)內(nèi)容包括電解質(zhì)的平衡、醣類的代謝、及肝與腎功能等。尿液檢驗(yàn): 顯微鏡觀察尿沈渣，測(cè)量尿液之量、酸鹼值與比重，並測(cè)量尿液中之protein, glucose, ketones, bilirubin 與 occult blood等。安康食品平安性評(píng)估試驗(yàn)技術(shù)與項(xiàng)目肉眼觀察 試驗(yàn)期間進(jìn)行臨床觀察，並記錄動(dòng)物能否有臨床癥狀或其他異常。動(dòng)物飼養(yǎng)期

14、間如有死亡狀況時(shí)或飼養(yǎng)期間結(jié)束時(shí)得以安樂死人道處理euthanasia犧牲剖檢動(dòng)物，並找出致死緣由cause of death並計(jì)算動(dòng)物存活率survivability。屍體剖檢時(shí)，肉眼觀察及記錄動(dòng)物的器官與組織之變化，並測(cè)量主要臟器分量。 器官絕對(duì)分量值(absolute value)與相對(duì)分量值(relative value) (v.s. brain) 。組織病理診斷試驗(yàn)結(jié)束後，將各組動(dòng)物以乙醚麻醉犧牲後剖檢，取出臟器稱重後以10中性福馬林緩衝液固定保管，經(jīng)組織固定、脫水及蠟浸潤(rùn)處理，再以組織包埋機(jī)製作成組織蠟塊，組織蠟塊以旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)切成厚度約為 2-4 m 的石蠟薄片，經(jīng)H.E.hem

15、atoxylin and eosin stain染色、封片製作成組織病理切片後，由毒性病理師做顯微鏡觀察診斷。安康食品平安性評(píng)估試驗(yàn)技術(shù)與項(xiàng)目安康食品管理衛(wèi)生署認(rèn)定之保健效果調(diào)節(jié)血脂功能腸胃道功能改善免疫調(diào)節(jié)功能調(diào)節(jié)血糖功能護(hù)肝功能針對(duì)化學(xué)性肝損傷改善骨質(zhì)疏鬆功能抗疲勞功能延緩衰老功能不易構(gòu)成體脂肪功能調(diào)節(jié)血壓效果 促鐵吸收效果輔助調(diào)整過敏體質(zhì)牙齒保健功能調(diào)節(jié)血脂功能進(jìn)行至少人體實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之一人體實(shí)驗(yàn)必須委託國(guó)內(nèi)外大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)、醫(yī)藥等相關(guān)研討所、醫(yī)學(xué)中心或其他中央衛(wèi)生主管機(jī)關(guān)認(rèn)可之研討機(jī)構(gòu)執(zhí)行，需有醫(yī)師參與。每組人數(shù) 8人。實(shí)驗(yàn)期4週。實(shí)驗(yàn)採(cǎi)自體比較的方式，假設(shè)其於實(shí)驗(yàn)後比實(shí)驗(yàn)前有明顯(P

16、0.05)改善，則可認(rèn)定該產(chǎn)品具有該項(xiàng)生理功能。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須來自公立研討機(jī)構(gòu)、公私立大學(xué)或其他中央衛(wèi)生主管機(jī)關(guān)認(rèn)可之實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。每組動(dòng)物8隻。建議實(shí)驗(yàn)飼料應(yīng)有2-3組高低不同的欲測(cè)保健食品劑量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)期4-8週或是視實(shí)驗(yàn)需求而定。實(shí)驗(yàn)必須記錄每隻動(dòng)物之體重改變與平均每日飼料攝取量。檢測(cè)項(xiàng)目：三酸甘油酯TG、總膽固醇TC、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)值腸胃道功能改善進(jìn)行至少人體實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之一假設(shè)廠商所提產(chǎn)品的相關(guān)科學(xué)研討證據(jù)不明確或缺乏時(shí)，須同時(shí)進(jìn)行人體實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以加強(qiáng)證據(jù)之可信度。改善胃腸功能必須明確具有以下五種功能指標(biāo)之。促進(jìn)消化吸

17、收改善腸內(nèi)細(xì)菌菌相幫助改善胃腸運(yùn)動(dòng)有助於胃黏膜之保護(hù)作用抑制幽門螺旋桿菌人體實(shí)驗(yàn)必須委託國(guó)內(nèi)外大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)、醫(yī)藥等相關(guān)研討所、醫(yī)學(xué)中心或其他中央衛(wèi)生主管機(jī)關(guān)認(rèn)可之研討機(jī)構(gòu)執(zhí)行，需有醫(yī)師參與。每組人數(shù) 8人，且必須有控制組。實(shí)驗(yàn)期2週。促進(jìn)消化吸收消化酵素活性的測(cè)定：如trypsin, chymotrypsin, amylase, lipase, leucine amino peptidase, disaccharidase。觀察食慾、食量、體重、血紅素、胃腸腹脹感、糞便形狀及次數(shù)、胃腸運(yùn)動(dòng)及小腸吸收等指標(biāo)變化。等指標(biāo)的變化。改善腸內(nèi)細(xì)菌菌相檢測(cè)益生菌：Bifidobacterium檢測(cè)有害或無

18、益菌：Clostridium perfringens幫助改善胃腸運(yùn)動(dòng)，促進(jìn)腸道正常機(jī)能之維持胃腸運(yùn)動(dòng)(活性碳、腸鋇計(jì)檢查或核子醫(yī)學(xué)檢查) 、胃黏膜保護(hù)觀察糞便之乾重、粒數(shù)、水分及形狀有助於胃黏膜之保護(hù)作用，維持腸道正常機(jī)能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)離體實(shí)驗(yàn)：培養(yǎng)鼠胃黏膜細(xì)胞，測(cè)定胃黏膜細(xì)胞之存活率viability的變化MTT assay?；铙w實(shí)驗(yàn)：胃酸的分泌測(cè)定：雄性實(shí)驗(yàn)絕食老鼠24小時(shí)，胃部幽門結(jié)紮，再予以縫合復(fù)原，搜集胃液並定量胃液體積，並以0.1N NaOH溶液滴定，求其實(shí)驗(yàn)組及控制組之總酸度之變化假設(shè)p0.05，即可斷定測(cè)試食品具有胃黏膜保護(hù)作用之功能。減少胃內(nèi)幽門螺旋桿菌人體實(shí)驗(yàn)篩去習(xí)慣特異及安康不

19、良的參與者。進(jìn)行尿素呼氣試驗(yàn)urea breath test，以得13CO2 /12CO2比值即UBT值。就UBT值決定受試對(duì)象建議UBT10O者。免疫調(diào)節(jié)功能進(jìn)行至少人體實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：建議選用小鼠，常用的Balb/c或是B6小鼠皆可，6-8週大，雄鼠或雌鼠皆可，每組隻數(shù)為單一性別至少10隻。非特異性免疫反應(yīng)脾臟或是淋巴結(jié)細(xì)胞增殖反應(yīng)抗體分泌實(shí)驗(yàn)細(xì)胞激素分泌實(shí)驗(yàn)分離脾臟細(xì)胞及外表標(biāo)記分析自然殺手細(xì)胞活性吞噬細(xì)胞活性特異性免疫反應(yīng)OVA誘發(fā)的特異性抗體產(chǎn)生OVA-特異性的T細(xì)胞增殖反應(yīng)OVA-特異性的細(xì)胞激素製造遲發(fā)性過敏反應(yīng)delayed-type hypersensitivit

20、y檢測(cè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 人體實(shí)驗(yàn)方法與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)類似調(diào)節(jié)血糖功能進(jìn)行至少人體實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之一假設(shè)廠商所提產(chǎn)品的相關(guān)科學(xué)研討證據(jù)不明確或缺乏時(shí)，須同時(shí)進(jìn)行人體實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以加強(qiáng)證據(jù)之可信度。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳性自發(fā)高血糖動(dòng)物肥胖小鼠化學(xué)物誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物STZ誘導(dǎo)檢測(cè)項(xiàng)目空腹血糖值測(cè)定葡萄糖氧化酵素法(glucose oxidase assay)己糖激酵素法(hexokinase assay)葡萄糖去氫酵素法(glucose dehydrogenase assay)葡萄糖耐量測(cè)定(Glucose tolerance test)其他測(cè)定尿糖值、餐後血糖值、空腹及餐後血漿胰島素等空腹8小時(shí)後之葡萄糖耐量

21、試驗(yàn)或飲食耐量試驗(yàn)醣化血色素(glycosylated Hb) 測(cè)定比色法：醣化血紅素經(jīng)氧化、水解使變成為5-hydroxymethylfufural，此物再和2-thio-barbituric acid產(chǎn)生顏色反應(yīng)，比色而測(cè)得HbA1。電泳法：利用agarose gel、pH 6.3，進(jìn)行血色素電泳分析。圓柱層析法：利用KCN和醣化血色素反應(yīng)產(chǎn)生CN-醣化血色素，然後通過陽(yáng)離子交換樹脂圓柱層析，在適當(dāng)pH下，使醣化血色素先析出，以比色法測(cè)出各醣化血色素之百分比。陽(yáng)離子交換高效液相層析法 (HPLC法)：利用phosphate cyanide緩衝液、Bio-Rex 70陽(yáng)離子交換樹脂及400

22、psi壓力，分離各種HbA1。普通生化測(cè)定血糖、血脂、血紅蛋白、總蛋白測(cè)定、尿酸和酮體等應(yīng)視產(chǎn)品特性及相關(guān)考量加測(cè)，以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)報(bào)告之效能。人體實(shí)驗(yàn)護(hù)肝功能-針對(duì)化學(xué)性肝損傷只需動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)估方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物四氯化碳誘發(fā)大小白鼠慢性肝損傷實(shí)驗(yàn)方式檢測(cè)項(xiàng)目血清：測(cè)定與肝傷害相關(guān)之成分或酵素活性GOT (AST) 、GPT (ALT) 、TG、Cholesterol肝臟：測(cè)定各種與抗氧化功能相關(guān)之成分或酵素活性Glutathione (GSH)Glutathione reductase (GSH Rd)Glutathione peroxidase (GSH Px)Superoxide dismut

23、ase (SOD)Catalase病理切片觀察改善骨質(zhì)疏鬆功能進(jìn)行至少人體實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之一假設(shè)廠商所提產(chǎn)品的相關(guān)科學(xué)研討證據(jù)不明確或缺乏時(shí)，須同時(shí)進(jìn)行人體實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以加強(qiáng)證據(jù)之可信度。人體實(shí)驗(yàn)每組人數(shù)30人，受試者宜為安康之成年人，男女各半15人，女性受試者必須非懷孕、非授乳者。實(shí)驗(yàn)得選擇以下鈣質(zhì)生物利用率測(cè)定或骨質(zhì)密度測(cè)定，能同時(shí)進(jìn)行二者更佳。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)宜採(cǎi)成熟或年老之大白鼠(rats)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，性別視實(shí)驗(yàn)需求而自行擬定，但以年老或卵巢切除之雌性動(dòng)物為佳。進(jìn)行股骨femur、脛骨tibia或其他適當(dāng)骨骼的切片，計(jì)算其骨小樑數(shù)目；亦可測(cè)股骨或其他適當(dāng)骨骼的骨質(zhì)密度質(zhì)量/體積、灰分與鈣質(zhì)

24、?？蛊诠δ苓M(jìn)行至少人體實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之一假設(shè)廠商所提產(chǎn)品的相關(guān)科學(xué)研討證據(jù)不明確或缺乏時(shí)，須同時(shí)進(jìn)行人體實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以加強(qiáng)證據(jù)之可信度?，F(xiàn)階段安康食品的抗疲勞功能，乃針對(duì)經(jīng)過運(yùn)動(dòng)測(cè)試後，延緩運(yùn)動(dòng)期間疲勞的發(fā)生或促進(jìn)運(yùn)動(dòng)後疲勞消除之評(píng)估。人體實(shí)驗(yàn)人數(shù)12人，受試者必須為安康之成年人 (20-40歲)。每位受試者採(cǎi)自體比較的方式進(jìn)行耐力運(yùn)動(dòng)才干測(cè)定。最大攝氧量 (VO2 max) 測(cè)試運(yùn)動(dòng)才干測(cè)定固定強(qiáng)度與時(shí)間之耐力運(yùn)動(dòng)才干測(cè)試延緩運(yùn)動(dòng)期間疲勞之評(píng)估、促進(jìn)運(yùn)動(dòng)後疲勞消除之評(píng)估運(yùn)動(dòng)至力竭之耐力運(yùn)動(dòng)才干測(cè)定延緩運(yùn)動(dòng)期間疲勞之評(píng)估、促進(jìn)運(yùn)動(dòng)後疲勞消除之評(píng)估四擇一血液分析 血氨、血乳酸、血糖、肌酸激

25、酶、游離脂肪酸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)810週齡之雄性小鼠、Wistar或SD大鼠游泳測(cè)試先進(jìn)行游泳適應(yīng)；末次餵食後3060分鐘，將鼠放入水溫271 的玻璃水缸中，強(qiáng)迫鼠進(jìn)行游泳掙扎，直到體力耗費(fèi)殆盡下沉溺死為止。為了縮短試驗(yàn)時(shí)間，可在鼠背部綁上鉛絲進(jìn)行負(fù)重游泳。負(fù)分量可依據(jù)動(dòng)物月齡選擇體重的25%，在試驗(yàn)前應(yīng)禁食1224小時(shí)。(1) 故以單隻游泳較佳(2) 各組水溫應(yīng)控制一致(3) 鉛絲纏繞時(shí)的鬆緊應(yīng)適宜。(4) 假設(shè)鼠漂浮在水面四肢不動(dòng)，觀察者可用木棒在其附近攪動(dòng)。跑步機(jī)測(cè)試先進(jìn)行跑步機(jī)適應(yīng)；末次餵食後3060分鐘，在跑步機(jī)的末端設(shè)置電擊區(qū)。假設(shè)鼠落入電擊區(qū)，而經(jīng)過多次電擊仍無法起身往前跑即斷定已經(jīng)力竭。

26、生化值測(cè)定 血尿素氮試驗(yàn)、肝醣試驗(yàn)、血乳酸試驗(yàn)延緩衰老功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 生存及生化 與人體實(shí)驗(yàn)都要做。假設(shè)人體試驗(yàn)沒顯著延緩衰老效果，但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)看到有不錯(cuò)的結(jié)果，建議可允許標(biāo)示為在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)闡明有延長(zhǎng)生命作用。生存實(shí)驗(yàn)：利用生物的整個(gè)生存過程來觀察受試物對(duì)壽命的影響。小鼠生存實(shí)驗(yàn)：選用小鼠12月齡小鼠，每組40隻，雌雄各半；大鼠生存實(shí)驗(yàn)：選用大鼠18月齡大鼠，每組30隻，雌雄各半；果蠅生存實(shí)驗(yàn)：選用果蠅Oregen品系。不一定需進(jìn)行生化實(shí)驗(yàn)老齡動(dòng)物、過氧化損傷處理動(dòng)物或國(guó)際認(rèn)可之老化模型動(dòng)物任選其一。過氧化損傷模型動(dòng)物：D-半乳糖模型、輻照模型、溴代苯模型 受試者：未服用任何藥物身心安康之成年人，需

27、包括部分老年人 (六十五歲以上) ，需有對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，每組不少於二十人。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人體實(shí)驗(yàn)氧化指標(biāo)測(cè)定項(xiàng)目：氧化修飾後蛋白羰基功能基含量、血漿蛋白含硫功能基及谷胱甘肽、 DNA之8羥基-2-去氧鳥嘌呤核苷、以血球?yàn)榉绞皆u(píng)估抗氧化製劑對(duì)降低自在基氧化損傷、定量磷脂膽鹼過氧化氫PCOOH以及磷脂、TBARS含量。斷定基準(zhǔn)：六項(xiàng)氧化指標(biāo)中，可任選三項(xiàng)做實(shí)驗(yàn)，至少須要一組實(shí)驗(yàn)為正反應(yīng) (positive data) ，並且不能有負(fù)相反應(yīng) (negative data)。以上氧化指標(biāo)之實(shí)驗(yàn)方法，假設(shè)有文獻(xiàn)或有其他科學(xué)方法佐證之，亦可採(cǎi)用。生化指標(biāo)測(cè)定項(xiàng)目：超氧化物歧化酵素、葡萄糖六磷酸去氫酵素、觸酵素

28、、麩胱甘肽過氧化酵素、麩胱甘肽還原酵素活性測(cè)定方法斷定基準(zhǔn)：五項(xiàng)生化指標(biāo)中，至少須要三組實(shí)驗(yàn)為正反應(yīng) (positive data)，並且不能有負(fù)相反應(yīng) (negative data)。以上生化指標(biāo)之實(shí)驗(yàn)方法，假設(shè)有文獻(xiàn)或有其他科學(xué)方法佐證之，亦可採(cǎi)用。不易構(gòu)成體脂肪功能肥胖癥可分為以下兩種：?jiǎn)渭冃苑逝?simple obesity) 續(xù)發(fā)性肥胖(secondary obesity) 本功能評(píng)估方法以單純性肥胖癥為對(duì)象，評(píng)估保健食品之不易構(gòu)成體脂肪功能。人體實(shí)驗(yàn)BMI27之單純性肥胖者，無心臟、肝臟、腎臟、內(nèi)分泌及其他器官之艱苦疾病，非精神病患者，沒有服用藥物。採(cǎi)用本身對(duì)照或組間對(duì)照方式，每組

29、必須大於10人，必須採(cǎi)用單盲或雙盲方法。實(shí)驗(yàn)期間至少4週。平安性指標(biāo)必測(cè)項(xiàng)目：普通狀況、血液常規(guī)檢查、血液生化分析、飲食紀(jì)錄。平安性指標(biāo)選測(cè)項(xiàng)目：血中酮體濃度及電解質(zhì)平衡狀態(tài)、尿液、心肺功能檢查。效果性指標(biāo)：BMI、腰臀比、體脂肪。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)原理一：以高熱量飼料誘發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之肥胖癥後，投與受試物。原理二：同時(shí)投與高熱量飼料與受試物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：1012週齡之雄性SD、Wistar大白鼠或小白鼠。平安性指標(biāo)必測(cè)項(xiàng)目血脂質(zhì)、肝臟脂質(zhì)、血糖、肝功能、腎功能。平安性指標(biāo)選測(cè)項(xiàng)目血中酮體濃度、電解質(zhì)平衡狀態(tài)。效果性指標(biāo)必測(cè)項(xiàng)目體重、攝食量及食物利用率、體脂肪量效果性指標(biāo)選測(cè)項(xiàng)目脂肪細(xì)胞數(shù)目及大小、脂肪組織之

30、脂解酶活性、脂蛋白脂解酶(lipoprotein lipase)活性等。調(diào)節(jié)血壓效果必須進(jìn)行人體試食實(shí)驗(yàn)假設(shè)廠商所提產(chǎn)品的相關(guān)科學(xué)研討證據(jù)不明確或缺乏時(shí)，須同時(shí)進(jìn)行人體試食實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以加強(qiáng)證據(jù)之可信度。原理：以受試物給予原發(fā)性高血壓動(dòng)物，觀察受試物對(duì)高血壓動(dòng)物模型的收縮壓與舒張壓指標(biāo)的影響，評(píng)價(jià)受試物的調(diào)節(jié)血壓作用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：原發(fā)性高血壓老鼠以SHR為主，對(duì)照組動(dòng)物為WKY (Wistar Kyoto)老鼠。 受試者：參加人體試食實(shí)驗(yàn)之受試者為原發(fā)性高血壓患者，收縮壓介於130179 mmHg，舒張壓介於85109 mmHg，兩者有一項(xiàng)核實(shí)即可確診，且應(yīng)本著自覺自願(yuàn)的原則。受試人數(shù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束每組至少20人。並於受試前後作血液生化分析如血球、血脂質(zhì)、肝、腎功能、血糖、尿酸、電解質(zhì).等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人體實(shí)驗(yàn)促鐵吸收效果食物鐵可用率的評(píng)估方法分為體外in vitro測(cè)量法、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)法與人體實(shí)驗(yàn)法三