最大耐受量和最大給藥量

1、急毒試驗(yàn)最大給藥量和最大耐受量辨析 藥物急性毒性試驗(yàn)最大給藥量和最大耐受量（MTD）是兩個(gè)不同的概念，在藥物非臨床安全性 評(píng)價(jià)中表示的是通過不同研究途徑得出的兩種安全性評(píng)價(jià)參考信息。然而，我們?cè)趯徳u(píng)過程中經(jīng) 常碰到申報(bào)單位提供的中藥急性毒性試驗(yàn)研究資料中將最大耐受量和最大給藥量的概念混淆的 現(xiàn)象。這種概念混淆不但影響了新藥研究資料的科學(xué)性和嚴(yán)謹(jǐn)性，而且一定程度上也影響了對(duì)藥 物急性毒性情況的評(píng)價(jià)和分析?，F(xiàn)行的藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（包括化學(xué)藥和中藥、天然藥物）中明確： 最大耐 受量（Maximal tolerance dose, MTD）:指動(dòng)物能夠耐受的而不引起動(dòng)物死亡的最高劑量”。

2、這一概念的提出主要是出于從獲取安全性信息的角度考慮，有時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的異常反應(yīng)和病理過 程的觀察、分析，較以死亡為觀察指標(biāo)更有毒理學(xué)意義。而最大給藥量的概念則源于采用最大給藥量法進(jìn)行藥物的急性毒性試驗(yàn)，即最大給藥量試 驗(yàn)?，F(xiàn)行化學(xué)藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則中明確：對(duì)于某些低毒的受試物可采用該方法。指 在合理的最大給藥濃度及給藥容量的前提下，以允許的最大劑量單次給藥或24小時(shí)內(nèi)多次給藥 （劑量一般不超過5g/kg體重），觀察動(dòng)物出現(xiàn)的反應(yīng)。一般使用10-20只動(dòng)物，連續(xù)觀察14 天.中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則中明確： 最大給藥量指單次或24小時(shí)內(nèi)多次 （2-3次）給藥所采用的最大給藥

3、劑量。最大給藥量試驗(yàn)是指在合理的給藥濃度及合理的給藥容 量的條件下，以允許的最大劑量給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，觀察動(dòng)物出現(xiàn)的反應(yīng)。”根據(jù)兩者的概念，我們不難發(fā)現(xiàn)兩者的區(qū)別：MTD強(qiáng)調(diào)的是不引起受試動(dòng)物死亡的最高劑量，言下之意如果超過該劑量，就會(huì)出現(xiàn)受試 動(dòng)物死亡情況。因此，理論上講，MTD對(duì)于一個(gè)藥物來說是一個(gè)相對(duì)固定的值，該數(shù)值本身對(duì) 于闡明某個(gè)藥物的急性毒性情況就是一個(gè)重要的參考信息.當(dāng)然，在具體的MTD測定過程中，我 們同樣需要密切觀察和分析受試動(dòng)物在MTD下出現(xiàn)的異常反應(yīng)和病理過程，并綜合起來分析和 評(píng)價(jià)藥物的急性毒性情況。最大給藥量法關(guān)注的不僅僅是最大給藥量的數(shù)值，其另一個(gè)關(guān)注點(diǎn)是在最大給藥量下

4、，受試 動(dòng)物的反應(yīng)情況，可以是無明顯毒性反應(yīng)，也可以是出現(xiàn)某些毒性反應(yīng)（具體是什么應(yīng)詳細(xì)闡明）， 甚至可以是出現(xiàn)少數(shù)動(dòng)物死亡。只有將這兩個(gè)關(guān)注點(diǎn)結(jié)合起來，才能體現(xiàn)最大給藥量法急性毒性 試驗(yàn)的最終結(jié)果。僅僅給出最大給藥量的數(shù)值，而沒有說明最大給藥量下受試動(dòng)物的反應(yīng)情況， 則違背了最大給藥量法（最大給藥量試驗(yàn)）的原則和目的，也未達(dá)到急性毒性試驗(yàn)研究的真正目 的。另外，由于同一個(gè)藥物在急性毒性試驗(yàn)時(shí)采用的受試樣品可能不一致（尤其是中藥新藥研究 過程中，可能采用添加了輔料的制劑成品，也可能是浸膏粉，也可能是粗提物），導(dǎo)致所能配制 的藥物最大濃度發(fā)生變化，致使在一定前提下同一個(gè)藥物的最大給藥量數(shù)值不是唯

5、一或相對(duì)固定 的一個(gè)數(shù)值，但只要結(jié)合在該劑量下受試動(dòng)物的反應(yīng)情況，上述得出不同最大給藥量數(shù)值的急性 毒性試驗(yàn)便可較為全面、客觀地闡明和反映某一藥物的急性毒性情況。讓我們來看一個(gè)具體的案例：某一申報(bào)臨床研究的中藥復(fù)方口服制劑，其研究單位在進(jìn)行急毒試驗(yàn)時(shí)，先進(jìn)行半數(shù)致死量 （LD50）測定預(yù)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在最大給藥濃度和最大給藥體積下（膠囊內(nèi)容物給藥），未見動(dòng)物 出現(xiàn)死亡。研究單位便轉(zhuǎn)而進(jìn)行了最大耐受量（MTD）測定試驗(yàn)，采用在一天內(nèi)間隔6小時(shí)兩 次灌胃給予受試物（膠囊內(nèi)容物）最大給藥濃度和最大給藥體積，折合成生藥給藥量為40.19g /kg，給藥后連續(xù)觀察14天，記錄給藥后動(dòng)物出現(xiàn)的反應(yīng)情況。其試驗(yàn)

6、結(jié)論如下：小鼠急性毒 性測定結(jié)果表明，xxx膠囊口服毒性很小，未能測出LD50，在進(jìn)行小鼠最大耐受量試驗(yàn)時(shí)， 也無明顯中毒癥狀及死亡發(fā)生，故限于給藥濃度和給藥體積，測得xxx膠囊小鼠口服的最大耐 受量為40.19g （生藥）/kg，相當(dāng)于人臨床擬用量（0.15g/kg）的267.93倍。該研究資料中存在下列問題：第一、在采用膠囊內(nèi)容物最大給藥濃度和最大給藥體積給藥未見動(dòng)物出現(xiàn)死亡的情況下，轉(zhuǎn) 而進(jìn)行膠囊內(nèi)容物的MTD測定試驗(yàn)，其本身違背了 MTD的概念。如嚴(yán)格按MTD的定義，此 種情況下已經(jīng)無法測定本品膠囊內(nèi)容物的MTD。其實(shí)，研究單位進(jìn)而進(jìn)行的是該品種膠囊內(nèi)容物的最大給藥量法急性毒性試驗(yàn)即最

7、大給藥量 試驗(yàn)。測得的40.19g生藥/kg不是本品的MTD，而是本品膠囊內(nèi)容物的最大給藥量。此時(shí)， 申報(bào)單位還應(yīng)該在結(jié)論中描述該最大給藥量下，受試動(dòng)物出現(xiàn)的反應(yīng)情況。第二、按本急毒研究預(yù)試驗(yàn)的提示，實(shí)際上采用本品的制劑成品（膠囊內(nèi)容物）已經(jīng)無法測 定其MTD；但如果選用本品的純浸膏粉作為受試物，由于去掉了輔料，可以使藥物的配制濃度 （含生藥量濃度）提高，此時(shí)也許能測出本品的MTD，甚至是LD50，而且本品的MTD 一般 會(huì)大于40.19g生藥/kg。第三、對(duì)于以上試驗(yàn)的結(jié)論還有一種粗糙的表述方法，即本品的LD5040.19g生藥/kg 或MTD40.19g生藥/kg。當(dāng)然，這樣的試驗(yàn)結(jié)論對(duì)于

8、反應(yīng)和評(píng)價(jià)本品的急性毒性情況沒有太 大的參考價(jià)值。申報(bào)單位或研究者出現(xiàn)最大給藥量和最大耐受量概念的混淆是有一定的歷史背景和原因的。 筆者曾查閱較多以往有關(guān)新藥臨床前安全性評(píng)價(jià)與實(shí)踐的書籍和研究文獻(xiàn)，其中絕大部分參考書 籍和文獻(xiàn)對(duì)最大給藥量法急性毒性試驗(yàn)未作詳細(xì)、明確的介紹，甚至也有將最大給藥量和MTD 的概念混淆的；以前頒布的中藥新藥研究指南和新藥（西藥）毒理學(xué)研究指導(dǎo)原則也未 能將最大給藥量和MTD的概念進(jìn)行明確的界定。但是，藥物的安全性評(píng)價(jià)工作是與時(shí)俱進(jìn)的。 國家藥品監(jiān)督管理局1999年頒布的中藥新藥藥理毒理研究的技術(shù)要求中就已明確，可以 采用最大給藥量試驗(yàn)進(jìn)行中藥急性毒性試驗(yàn)，該要求指出如因受試物的濃度或體積限制，無法 測出半數(shù)致死量（L D50 ）時(shí)，可做最大給藥量試驗(yàn)。試驗(yàn)應(yīng)選用擬推薦臨床試驗(yàn)的給藥途徑， 以動(dòng)物能耐受的最大濃度、最大體積的藥量一次或一日內(nèi)2-3次給予動(dòng)物（如用小鼠，動(dòng)物數(shù) 不得少于20只，雌雄各半），連續(xù)觀察7天，詳細(xì)記錄動(dòng)物反應(yīng)情況，計(jì)算出總給藥量（折合 生藥量g/kg）”。我國現(xiàn)行的藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則以及FDA、ICH的相關(guān)指導(dǎo)原則 均對(duì)MTD和最大給藥量的概念進(jìn)行了明確定義和界定，其原因是研究人員已經(jīng)認(rèn)識(shí)到對(duì)這兩個(gè) 概念的明確和區(qū)分，可以