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1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)四血凝和血凝抑制試驗(yàn)第一張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握血凝和血凝抑制試驗(yàn)的原理,以及使用該試驗(yàn)測定血清抗體水平的操作步驟和結(jié)果判定方法。第二張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月二、實(shí)驗(yàn)原理(一)血凝試驗(yàn)(HA)有些病毒能夠促使某些動(dòng)物(如雞、鵝、豚鼠、綿羊)和人的紅細(xì)胞發(fā)生凝集,這就是紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,稱做血凝試驗(yàn)。病毒凝集紅細(xì)胞是一種較為普遍的現(xiàn)象,可以作為病毒鑒定的一個(gè)指標(biāo)。第三張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月HA試驗(yàn)的原理圖第四張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月病毒血凝素與完整成熟的病毒顆粒結(jié)合較密切,不經(jīng)特殊化學(xué)方法處理不能分開。例如
2、流感、腮腺炎、新城疫等病毒,病毒游離下來后,紅細(xì)胞不能再次被凝集。病毒凝集紅細(xì)胞可以分為3種類型第五張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月病毒血凝素與完整成熟的病毒顆粒易于分開,血凝素呈游離狀態(tài),例如天花、牛痘、鼠痘等病毒,它們的凝集現(xiàn)象是可逆的。象各種腦炎病毒、口蹄疫病毒等,凝集紅細(xì)胞的條件很嚴(yán)格,對(duì)紅細(xì)胞的種類有很嚴(yán)格的選擇,同時(shí)還要掌握反應(yīng)的pH和溫度等。 第六張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)血凝抑制試驗(yàn)(HI)當(dāng)病毒懸液中加入特異性抗體時(shí),這種紅細(xì)胞凝集的現(xiàn)象就被抑制,稱做紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn),也叫血凝抑制試驗(yàn)。第七張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月HI試驗(yàn)的原理圖
3、第八張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月三、試驗(yàn)材料雞新城疫病毒:雞新城疫弱毒株(Lasota)接種雞胚、收獲尿囊液制備。雞紅細(xì)胞:采集健康雞血液,以阿氏液抗凝,以生理鹽水洗滌35次,將血漿、白細(xì)胞等充分洗去,用生理鹽水配置成1%紅細(xì)胞懸液使用。0.85%生理鹽水。被檢血清,采自被檢雞的血清。第九張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月四、操作步驟(一)血凝試驗(yàn)(HA)在血凝板第一排的112孔加入50l生理鹽水。在第1孔中加入50l病毒抗原,反復(fù)吸取混勻后吸50l到第2孔,如此倍比稀釋直到第10孔,混勻后棄50l;最后兩孔(11、12)為細(xì)胞對(duì)照。第十張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6
4、月將1%的紅細(xì)胞輕輕搖動(dòng)混勻,在112孔中每孔加入50l。手工震蕩,37靜置30min后觀察結(jié)果。結(jié)果觀察(血凝價(jià)是1:?)。第十一張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月1:21 1:22 1:23 1:24 1:25 1:26 1: 27 1: 28 1: 29 1: 210 C C 以50%的紅細(xì)胞發(fā)生凝集的病毒懸液的最高稀釋度作為血凝價(jià)的終點(diǎn),即一個(gè)血凝單位。第十二張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月(二)血凝抑制試驗(yàn)(HI)在血凝板的112孔加入50l生理鹽水,最后一孔加100l。第1孔加入待檢血清50l,混勻后吸50l至第2孔,倍比稀釋直至第10孔,混勻后棄50l。從111孔,每孔加稀釋好的50l 4個(gè)血凝單位的病毒懸液。如果血凝價(jià)為1:28,那么4個(gè)血凝單位就是1:26第十三張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月將1%的紅細(xì)胞輕輕搖動(dòng)混勻,在112孔中每孔加入50l。手工震蕩,在37靜置30min后觀察結(jié)果。結(jié)果判定(血凝抑制價(jià)是1:?,被檢血清為陰/陽性)。第十四張,PPT共十七頁,創(chuàng)作于2022年6月HA試驗(yàn)HI試驗(yàn)第十五張,PPT共十
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