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1、基因芯片(Gene Chip)定義基因芯片又稱DNA芯片(DNA Chip)或生物芯片(Biological chip), 是指將大量探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷?,然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交,通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)度及分布進(jìn)而對(duì)靶分子的序列和數(shù)量進(jìn)行分析。基本構(gòu)造1.支持物:如玻片、硅片、NC膜、Nylon膜2.探針:高密度的探針序列按照一定的次序固定在支持物上,每個(gè)位點(diǎn)的序列是已知的外觀探針支持物剖面圖平面局部放大基因芯片技術(shù)流程探針的設(shè)計(jì)與制備支持物的類型與預(yù)處理芯片的制作點(diǎn)樣后處理樣品的準(zhǔn)備雜交與雜交后清洗檢測(cè)分析基本過(guò)程用生物素標(biāo)記并經(jīng)擴(kuò)增(也可使用其它放大技術(shù))的靶序列或樣品然后再與芯片上的大

2、量探針進(jìn)行雜交用鏈霉親和素(streptavidin)偶聯(lián)的熒光素(常用的熒光素還有l(wèi)assamine 和phycoerythrin)進(jìn)行顯色圖象的采集用落射熒光顯微鏡(epifluorescence microscope)、激光共聚焦顯微鏡或其它熒光顯微裝置對(duì)片基掃描由計(jì)算機(jī)收集熒光信號(hào),并對(duì)每個(gè)點(diǎn)的熒光強(qiáng)度數(shù)字化后進(jìn)行分析?;蛐酒姆诸惢蛐酒胁煌姆诸惙椒ǎ?按其片基不同可分為無(wú)機(jī)片基芯片和有機(jī)合成片基芯片; 按其應(yīng)用不同,可分為表達(dá)譜芯片、診斷芯片、檢測(cè)芯片;按其結(jié)構(gòu)不同可分為DNA 陣列和寡核苷酸芯片; 按其制備方法不同可分為原位合成芯片和合成后交聯(lián)芯片(合成后點(diǎn)樣芯片)。制作方

3、法光刻DNA合成法點(diǎn)接觸法噴墨法光刻DNA合成法寡聚核苷酸原位光刻合成技術(shù)是由Affymetrix公司開(kāi)發(fā)的,采用的技術(shù)原理是在合成堿基單體的5羥基末端連上一個(gè)光敏保護(hù)基。合成的第一步是利用光照射使羥基端脫保護(hù),然后一個(gè)5端保護(hù)的核苷酸單體連接上去,這個(gè)過(guò)程反復(fù)進(jìn)行直至合成完畢。使用多種掩蓋物能以更少的合成步驟生產(chǎn)出高密度的陣列,在合成循環(huán)中探針數(shù)目呈指數(shù)增長(zhǎng)。優(yōu)點(diǎn): 合成效率高,點(diǎn)陣密度高,實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化和批量化大規(guī)模生產(chǎn)缺點(diǎn): 設(shè)備昂貴,技術(shù)復(fù)雜,反應(yīng)產(chǎn)率低點(diǎn)接觸法(點(diǎn)膜法)點(diǎn)樣法是將合成好的探針、cDNA或基因組DNA通過(guò)特定的高速點(diǎn)樣機(jī)器人直接點(diǎn)在芯片上。采用的機(jī)器人有一套計(jì)算機(jī)控制三維移

4、動(dòng)裝置;多個(gè)打印/噴印針的打印/噴印頭;一個(gè)減震底座,上面可放內(nèi)盛探針的多孔板和多個(gè)芯片。根據(jù)需要還可以有溫度和濕度控制裝置;針洗滌裝置。打印/噴印針將探針從多孔板取出直接打印或噴印于芯片上。直接打印時(shí)針頭與芯片接觸,而在噴印時(shí)針頭與芯片保持一定距離。優(yōu)點(diǎn):設(shè)備廉價(jià),技術(shù)簡(jiǎn)便,研制周期短,靈活性高 缺點(diǎn):點(diǎn)陣密度低 噴墨法芯片原位噴印合成原理與噴墨打印類似,不過(guò)芯片噴印頭和墨盒有多個(gè),墨盒中裝的是四種堿基等液體而不是碳粉。噴印頭可在整個(gè)芯片上移動(dòng)并根據(jù)芯片上不同位點(diǎn)探針的序列需要將特定的堿基噴印在芯片上特定位置。該技術(shù)采用的化學(xué)原理與傳統(tǒng)的DNA固相合成一致,因此不需要特殊制備的化學(xué)試劑。 三

5、種制作芯片方法的示意圖normalcancerDNADNAGENERAL SCANNING - ScanArray System 檢測(cè)分析芯片技術(shù)的應(yīng)用1. DNA序列測(cè)定基因芯片不僅可對(duì)大量基因或序列同時(shí)、快速進(jìn)行定性、定量分析,而且作為一種極有發(fā)展前途的測(cè)序策略也倍受人們的重視。2. 蛋白質(zhì)芯片 基因組計(jì)劃后的另一項(xiàng)重要計(jì)劃:蛋白組計(jì)劃; 正常與癌變細(xì)胞蛋白譜的差異分析。3. 基因突變檢測(cè)與遺傳病和腫瘤診斷 點(diǎn)突變,基因缺失、擴(kuò)增、插入、重復(fù)、倒位等。4. 藥物篩選 在基因水平上尋找藥物靶標(biāo),毒性對(duì)基因的影響。5. 微型化分析儀器 快速、平行、重復(fù)性檢測(cè)。展望 盡管基因芯片技術(shù)已經(jīng)在一些科

6、學(xué)研究和醫(yī)學(xué)臨床實(shí)踐中得到了一些應(yīng)用,但是在一些領(lǐng)域尤其在獸醫(yī)領(lǐng)域中基因芯片技術(shù)還尚處于初步的探索發(fā)展階段,在基因治療和基因疫苗的研制等方面基因芯片技術(shù)還沒(méi)有得到廣泛的應(yīng)用,但隨著生物信息學(xué)的進(jìn)步和發(fā)展,基因芯片技術(shù)一定會(huì)進(jìn)一步成熟,必將給人類提供越來(lái)越多的方便,發(fā)揮越來(lái)越大的重要作用,從而幫助人們認(rèn)識(shí)、掌握和利用生命科學(xué)的規(guī)律。1、不是井里沒(méi)有水,而是你挖的不夠深。不是成功來(lái)得慢,而是你努力的不夠多。2、孤單一人的時(shí)間使自己變得優(yōu)秀,給來(lái)的人一個(gè)驚喜,也給自己一個(gè)好的交代。3、命運(yùn)給你一個(gè)比別人低的起點(diǎn)是想告訴你,讓你用你的一生去奮斗出一個(gè)絕地反擊的故事,所以有什么理由不努力!4、心中沒(méi)有過(guò)

7、分的貪求,自然苦就少。口里不說(shuō)多余的話,自然禍就少。腹內(nèi)的食物能減少,自然病就少。思緒中沒(méi)有過(guò)分欲,自然憂就少。大悲是無(wú)淚的,同樣大悟無(wú)言。緣來(lái)盡量要惜,緣盡就放。人生本來(lái)就空,對(duì)人家笑笑,對(duì)自己笑笑,笑著看天下,看日出日落,花謝花開(kāi),豈不自在,哪里來(lái)的塵埃!5、心情就像衣服,臟了就拿去洗洗,曬曬,陽(yáng)光自然就會(huì)蔓延開(kāi)來(lái)。陽(yáng)光那么好,何必自尋煩惱,過(guò)好每一個(gè)當(dāng)下,一萬(wàn)個(gè)美麗的未來(lái)抵不過(guò)一個(gè)溫暖的現(xiàn)在。6、無(wú)論你正遭遇著什么,你都要從落魄中站起來(lái)重振旗鼓,要繼續(xù)保持熱忱,要繼續(xù)保持微笑,就像從未受傷過(guò)一樣。7、生命的美麗,永遠(yuǎn)展現(xiàn)在她的進(jìn)取之中;就像大樹(shù)的美麗,是展現(xiàn)在它負(fù)勢(shì)向上高聳入云的蓬勃生機(jī)

8、中;像雄鷹的美麗,是展現(xiàn)在它搏風(fēng)擊雨如蒼天之魂的翱翔中;像江河的美麗,是展現(xiàn)在它波濤洶涌一瀉千里的奔流中。8、有些事,不可避免地發(fā)生,陰晴圓缺皆有規(guī)律,我們只能坦然地接受;有些事,只要你愿意努力,矢志不渝地付出,就能慢慢改變它的軌跡。9、與其埋怨世界,不如改變自己。管好自己的心,做好自己的事,比什么都強(qiáng)。人生無(wú)完美,曲折亦風(fēng)景。別把失去看得過(guò)重,放棄是另一種擁有;不要經(jīng)常艷羨他人,人做到了,心悟到了,相信屬于你的風(fēng)景就在下一個(gè)拐彎處。10、有些事想開(kāi)了,你就會(huì)明白,在世上,你就是你,你痛痛你自己,你累累你自己,就算有人同情你,那又怎樣,最后收拾殘局的還是要靠你自己。11、人生的某些障礙,你是逃

9、不掉的。與其費(fèi)盡周折繞過(guò)去,不如勇敢地攀登,或許這會(huì)鑄就你人生的高點(diǎn)。12、有些壓力總是得自己扛過(guò)去,說(shuō)出來(lái)就成了充滿負(fù)能量的抱怨。尋求安慰也無(wú)濟(jì)于事,還徒增了別人的煩惱。13、認(rèn)識(shí)到我們的所見(jiàn)所聞都是假象,認(rèn)識(shí)到此生都是虛幻,我們才能真正認(rèn)識(shí)到佛法的真相。錢多了會(huì)壓死你,你承受得了嗎?帶,帶不走,放,放不下。時(shí)時(shí)刻刻發(fā)悲心,饒益眾生為他人。14、夢(mèng)想總是跑在我的前面。努力追尋它們,為了那一瞬間的同步,這就是動(dòng)人的生命奇跡。15、懶惰不會(huì)讓你一下子跌倒,但會(huì)在不知不覺(jué)中減少你的收獲;勤奮也不會(huì)讓你一夜成功,但會(huì)在不知不覺(jué)中積累你的成果。人生需要挑戰(zhàn),更需要堅(jiān)持和勤奮!16、人生在世:可以缺錢,但不能缺德;可以失言,但不能失信;可以倒下,但不能跪下;可以求名,但不能盜名;可以低落,但不能墮落;可以放松,但不能放縱;可以虛榮,但不能虛偽;可以平凡,但不能平庸;可以浪漫

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