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文檔簡介

1、藥用植物學實驗課件實驗內(nèi)容1.實驗室規(guī)則2.實驗報告書寫3.臨時裝片制作4.洋蔥表皮細胞觀察5.葉綠體觀察6.作業(yè)畫圖實驗室守則1.組織紀律嚴格遵守,整潔,衛(wèi)生,水電門窗。2.愛護儀器設(shè)備標本等。3.實驗前 必須預習本次實驗,明確實驗的目的要求、內(nèi)容、方法和步驟。備好教科書,繪圖用具(HB、2H鉛筆各一支,橡皮、尺子等)和實驗記錄本。 3.實驗時 觀察,思考,記錄。4.實驗完 按時交實驗報告。 實驗報告書寫要求1.繪圖 HB鉛筆2.格式 【目的要求】、【儀器試劑】、 【實驗材料】、【實驗內(nèi)容】、 【實驗畫圖】3.按要求時間及時交實驗報告4.占30%成績【目的要求】1掌握光學顯微鏡使用與保養(yǎng)2了

2、解顯微鏡的類型與結(jié)構(gòu)2學習“臨時裝片法”及繪制“植物細胞圖” 的基本技術(shù)3掌握植物細胞的基本結(jié)構(gòu)【儀器試劑】顯微鏡、載玻片、蓋玻片尖頭鑷、解剖針、刀片、剪刀吸水紙、擦鏡紙、彎盤、表面皿水合氯醛、稀甘油、碘試液、蒸餾水等顯微鏡鏡座鏡柱載物臺鏡臂通光孔壓片夾細準焦螺旋轉(zhuǎn)換器粗準焦螺旋鏡筒目鏡物鏡遮光器反光鏡顯微鏡的使用1、取鏡和安放2、對光3、安放玻片(切片)4、調(diào)焦5、觀察6、整理(低倍鏡找,高倍鏡觀察)7、歸還顯微鏡(注意事項)光學顯微鏡觀察的樣品必須是透明的薄片,待觀察植物材料需切成很薄的切片,才能在顯微鏡下觀察。顯微鏡的制片分永久制片和臨時制片,永久制片的制作方法和步驟復雜。在教學過程中,

3、要求同學們做的主要是臨時制片。下列是實驗常用器材指用刀片把植物新鮮材料切成薄片,封藏于水中即可觀察(臨時水裝片),通常不經(jīng)染色或簡單染色。亦可經(jīng)脫水與染色制成永久制片。優(yōu)點:臨時水裝片簡單方便;不經(jīng)化學藥物處理,基本保留了植物活體的狀態(tài)。材料不能太大,表面不超過3-5mm。關(guān)鍵是平而薄,無需很完整,只需一角就夠了。臨時制片種類很多,包括涂片、壓片等等 徒手切片法操作過程一般用左手的大拇指、食指和中指3個手指拿住材料,使材料略突出在指尖之上,避免切片時割傷手指;用右手平穩(wěn)地拿住刀片,把刀口放在經(jīng)解剖刀削平的材料平面中間,輕輕地壓住它,以均勻的動作,從刀片刀口下方起,斜著向后拉切。切時用臂力而不是

4、腕力,且不必太用力,否則就不易切薄。在切的過程中,決不能以刀片直接擠壓材料,或以刀片來回拉割材料,并且要始終保持材料與刀片在水平狀態(tài),否則會由于切面偏斜而影響觀察。切片應(yīng)該薄而透明,形狀不要求非常完整,可用刀不同部位一次作幾個切片,然后用蘸水的毛筆取下切片,置于盛水的培養(yǎng)皿中,備用。 柔嫩的器官,例如幼葉,難以直接拿住進行切片,需借助一些維持物。一般用胡蘿卜根或土豆塊莖作為維持物,把要切的材料夾于其中,進行切片,以利于把握操作。將切下的薄片放在載玻片上時,要先在玻片中央加一滴水,把材料放到水滴中,然后用鑷子夾住蓋玻片,將蓋片的一側(cè)先接觸到載玻片中央的水滴,然后用鑷子頂住蓋片的另一側(cè),慢慢放下,

5、使蓋玻片與載玻片之間充滿水,如有氣泡,要掀起蓋片,重新放置。 徒手制作的切片可以直接在光鏡下觀察,也可以經(jīng)過簡易的組織化學染色,以使結(jié)構(gòu)看得更清楚,同時可觀察到細胞各部分的化學成分。常用的染料有:亞甲基藍、1中性紅或1番紅水溶液等。染色的方法是將切片放在載玻片上后,用吸水紙吸去多余的水分,滴上一滴染料,經(jīng)過12min后,用水沖洗一下,蓋上蓋玻片,在顯微鏡下觀察。植物細胞的構(gòu)造 將臨時裝片放在低倍鏡下觀察,可看到許多無色透明的稍長形的細胞,彼此緊密相連,沒有細胞間隙。在細胞中,可見到浸埋在細胞質(zhì)中的圓形的細胞核,如不清晰,可由蓋玻片一側(cè)加稀碘液一滴,用吸水紙在另一側(cè)稍吸;使碘液布滿整個標本而染色

6、,幾分鐘后觀察,可見細胞質(zhì)被染成淺黃色,細胞核被染成較深的黃色,細胞各部分顯得較為清晰移動裝片,選擇幾個較清楚的細胞置于視野中央,換用高信物鐃再仔細觀察;注意識別下例各部分:植物細胞結(jié)構(gòu)光鏡下分為四個部分(1)細胞壁 植物細胞所特有。為細胞的最外層, 比較透明。調(diào)節(jié)細調(diào)焦螺旋和光圈、可見兩細胞間實際上為三層;,兩側(cè)為相鄰兩個細胞的細胞壁;中間是兩個細胞共有的胞間層。(2)細胞膜 光鏡下不易分辨。(3)細胞質(zhì) 無色透明膠狀物,緊貼在胞壁內(nèi),被中央大液泡擠成一薄層,僅細胞兩端較明顯。 (4)細胞核 埋在胞質(zhì)內(nèi),貼近胞側(cè)壁呈扁圓形或球形。仔細觀察,可見包在細胞核外面的核膜,細胞核內(nèi)有13個發(fā)亮的顆粒

7、,即核仁。(有的細胞看不見細胞核是因為該細胞被撕破,只剩一半了)(5)液泡:位于細胞中央,占細胞體積的大部分(洋蔥表皮細胞占95%),由于液泡內(nèi)充滿細胞液;所以比細胞質(zhì)更透明。有的細胞含有大量的花青素,可有顏色。 制作洋蔥表皮臨時裝片從洋蔥鱗莖上剝下一片肉質(zhì)鱗葉,用鑷子撕取其內(nèi)表皮少許,用刀片切取3-5mm大小的一塊,按臨時裝片法,置于載玻片上預先加好的水淌中,用鑷子將其展乎,然后將蓋玻片沿水滴一側(cè)慢慢蓋下,防止產(chǎn)生氣泡,用吸水紙沿蓋玻片一側(cè)吸掉多余酌水。植物細胞的結(jié)構(gòu)-洋蔥內(nèi)表皮制作紅皮洋蔥內(nèi)表皮的臨時水裝片,鏡下觀察細胞結(jié)構(gòu)。低倍鏡下細胞壁較透明,細胞質(zhì)無色均勻,細胞核扁球形,高倍鏡下可見

8、其內(nèi)13個發(fā)亮的核仁。紫皮洋蔥表皮細胞觀察(基本結(jié)構(gòu)) (凈、滴、取、浸、展、蓋、染)采標本裝片放標本調(diào)焦觀察與畫圖(細胞基本結(jié)構(gòu)與形態(tài))質(zhì)體(示教).葉綠體質(zhì)體 植物細胞中由雙層膜包圍的具有光合作用和貯藏功能的細胞器。是有生命的。根據(jù)所含色素和功能不同,質(zhì)體分為白色體、葉綠體和有色體。(3種質(zhì)體均可以光合作用的,而后含物是沒有生命的)。 (1)白色體:撕取紫鴨跖草葉下表皮一小塊,制成臨時裝片;置最先進顯微鏡下觀察,可見在細胞核周圍有很多微小無色顆粒,即白色體。 (2)葉綠體:取何首烏葉,撕去葉表皮,用刀片刮取少量葉肉細胞,涂在載玻片上,制成臨時裝片。鏡檢可見到眾多橢圓形的綠色顆粒,即葉綠體。

9、(水裝片)(3)有色體:用解剖針挑取番茄的果肉少許,置載玻片上壓碎,制成臨時裝片,鏡檢時可見到有色體,注意其形狀和顏色是否相同。葉綠體白色體有色體定義 葉綠體是綠色植物細胞內(nèi)進行光合作用的結(jié)構(gòu),是一種質(zhì)體。葉肉細胞中含的葉綠體數(shù)通常是數(shù)十到數(shù)百個。已知有的一個細胞含有數(shù)千個以上葉綠體的例子,以及僅有一個葉綠體的例子。 功能 幾乎可以說一切生命活動所需的能量來源于太陽能(光能)。綠色植物是主要的能量轉(zhuǎn)換者是因為它們均含有葉綠體(Chloroplast)這一完成能量轉(zhuǎn)換的細胞器,它能利用光能同化二氧化碳和水,合成貯藏能量的有機物,同時產(chǎn)生氧。所以綠色植物的光合作用是地球上有機體生存、繁殖和發(fā)展的根

10、本源泉。成分 葉綠素(量大)、胡蘿卜素和葉黃素。葉綠體含有葉綠素a、b而呈綠色,容易區(qū)別於另類兩類質(zhì)體無色的白色體和黃色到紅色的有色體。葉綠素a、b的功能是吸收光能,通過光合作用將光能轉(zhuǎn)變成化學能。葉綠體主要由脂類和蛋白質(zhì)分子組成,此外在葉綠體基質(zhì)中還有少量DNA和RNA。形態(tài) 許多植物葉綠體是直徑5微米,厚2-3微米的凸透鏡形狀,呈葉綠體扁球狀。但低等植物中則含有板狀、網(wǎng)眼狀、螺旋形、星形、杯形等非常大的葉綠體。光學顯微鏡高倍鏡觀察葉綠體,呈綠色粒狀結(jié)構(gòu)(基粒)。電鏡觀察,葉綠體由雙層單位膜構(gòu)成。葉綠體觀察葉肉細胞含有豐富的葉綠體。采標本裝片放標本調(diào)焦觀察與畫圖(葉綠體分布與形態(tài))制作臨時裝

11、片染色有時會看見質(zhì)壁分離現(xiàn)象質(zhì)壁分離后看到的無色區(qū)域應(yīng)該是原生質(zhì)體與細胞壁的間隙,在KNO3溶液中發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞會吸收K+和NO3-,使細胞液濃度增大,從而由失水轉(zhuǎn)為吸水,所以質(zhì)壁分離會自動復原。(壁與質(zhì)間為所吸收的液體液泡的顏色和位置有變化嗎?,紫皮洋蔥液泡內(nèi)含有大量的花青素,有色。質(zhì)壁分離列舉生活實例蔬菜受凍以后可以發(fā)生??梢詮驮瓎??施肥過多會出現(xiàn)什么現(xiàn)象呢?鹽堿地栽培作物如何?)1、調(diào)節(jié)清晰后讓老師驗收!2、清洗載玻片,用紗布擦干放回原處!保持解剖盤的干燥!3、廢舊蓋玻片、用過的洋蔥、吸水紙放進污物杯!顯微鏡的使用 臨時裝片的制作細胞基本結(jié)構(gòu).1、取鏡安放2、對光3、安放玻片4、調(diào)焦5、觀察6、整理1、擦 2、滴3、取 4、展5、蓋 6、染思考題觀察紫色洋蔥表皮細胞質(zhì)壁分離和質(zhì)壁分離復原實驗,能證明發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象的是:A液泡由小變大,紫色變淺 B液泡由小變大,紫色變深 C液泡由大變小,紫色變淺

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