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文檔簡介
1、臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程之楊若古蘭創(chuàng)作第一節(jié) 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)血慣例檢查【標(biāo)本】抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血) .【方法】血液細(xì)胞主動分析儀測定法 .【試劑】血液細(xì)胞主動分析儀配套試劑 .【操作】詳見本人實(shí)驗(yàn)室血液細(xì)胞主動分析儀使用手冊 .【附注】.血慣例包含白細(xì)胞計數(shù)及分類、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞比積、血小板計數(shù)等項目 .這些項目亦有響應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)材料 . 半主動及全主動血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計上均請求用抗凝靜脈血.其長處為:1)靜脈血能精確地反映病人實(shí)際情況,反復(fù)性好;2)利于耽誤儀器的使用壽命;3)解決了采血盤的交叉感染成績等.3.血細(xì)胞計數(shù)利用EDTA K2:為抗凝劑(EDT
2、A K2 2H2。1.52.2mg可抗凝1ml血). 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管.抗凝血收集后在室溫中儲存應(yīng)不超出6h;如需建造血涂片應(yīng)在 2h內(nèi)完成.測定前必須將EDTA K2抗凝血充分混勻.血細(xì)胞分析儀測定最適溫度為1822C,低于15c或高于30C,均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變,影響各參數(shù)的結(jié)果. 血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能當(dāng)作一種過篩手段,當(dāng)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯升高或降低;白細(xì)胞分類由現(xiàn)異常結(jié)果(兩頭細(xì)胞群百分率A8.0%);紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用顯微鏡檢查及分類 .嗜酸性粒細(xì)胞直接計數(shù)【標(biāo)本】末梢血或抗凝靜脈血.【方法】
3、直接計數(shù)法 .【試劑】Hinkelmann 液;乙醇 -伊紅濃縮液;伊紅 -丙酮濃縮液.【操作】1小試管中加濃縮液0.38ml.常法取末梢血20ul,加入管內(nèi)混勻,待紅細(xì)胞溶解后兩側(cè)充池.靜置35min,用低倍鏡(須要時用高倍鏡)鏡下計數(shù)10個大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù).總數(shù)x 20X 106=嗜酸性粒細(xì)胞/L.附注】血液濃縮后應(yīng)于1h 內(nèi)計數(shù)終了 .充池前要充分混勻,但又不宜用力過猛 .住院病人收集標(biāo)本時間力求統(tǒng)一,以避免受日間生理變更的影響 .紅細(xì)胞沉降率測定【標(biāo)本】 TOC o 1-5 h z 抗凝靜脈血.【方法】魏氏法 .【試劑】109mmol/L 枸櫞酸鈉溶液.【操作】1.3mmX 10
4、0mm試管1支,在2ml容量處刻上記號,加抗凝劑0.4ml. 靜脈采血后,取下針頭,加血至刻度,扭轉(zhuǎn)混合.用血沉管(300mmx 2.5mm)汲取上述混勻血液至0刻度處,拭去管外附著的血液,將管垂豎立在血沉架上.記時,室溫中靜置 1h,觀察血漿高度,以紅細(xì)胞下沉的毫米數(shù)陳述之 .【附注】.紅細(xì)胞在單位時間內(nèi)下沉的速度與血漿蛋白的量與質(zhì),血漿中脂類的量和質(zhì),紅細(xì)胞的大小與數(shù)量,是否成串錢相聚和血沉管的內(nèi)徑、清潔度、放置地位是否垂直,室溫高低等身分都有關(guān)系 . 標(biāo)本收集時應(yīng)空腹. 血液和抗凝劑的比例要精確 .血沉管內(nèi)徑要尺度(2.5mm),放置要垂直. TOC o 1-5 h z 做血沉的標(biāo)本要在
5、收集后3h 內(nèi)測定,并充分混勻.室溫過低、過高和貧血時,對結(jié)果有影響.為此,血沉應(yīng)盡量放在1825c室溫下測定.室溫過高時血沉加快,可以按溫度系數(shù)校訂.室溫過低時血沉減慢,沒法校訂.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)【標(biāo)本】末梢血或抗凝靜脈血.【方法】百分計數(shù)法.【試劑】10g/L 煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液或 10g/L 煌焦油藍(lán) ACD 溶液 .【操作】.于小試管中滴加1 滴煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液或煌焦油藍(lán)ACD 溶液 . 加入末梢血或靜脈血2 滴于上述試管中,混勻 .靜置1520min后,取用1滴制成薄片. 油鏡下檢查1000 個紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù),以百分率或絕對值陳述.【附注】.活體染色時間不克不及過短,室溫低
6、時,放37溫箱. 網(wǎng)織紅細(xì)胞也可用 Miller 窺盤計數(shù)法、熒光染色或流式細(xì)胞儀計數(shù)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計數(shù)【標(biāo)本】末梢血 .【方法】百分計數(shù)法 .【試劑】. 甲醇;.堿性亞甲基藍(lán)染液(保管 23周).【操作】.按常法制成薄血片,天然干燥后,用甲醇固定3min.用堿性亞甲基藍(lán)染液染色12min,水洗待干. 用油鏡計數(shù)1000個紅細(xì)胞中嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù),以百分率陳述【附注】用堿性亞甲基藍(lán)染液染色后,紅細(xì)胞呈淺藍(lán)綠色,嗜堿性點(diǎn)彩呈深藍(lán)色 .也可用瑞氏染色,嗜堿性點(diǎn)彩呈藍(lán)黑色.因?yàn)辄c(diǎn)彩紅細(xì)胞分布不勻,須要時擴(kuò)大計數(shù)紅細(xì)胞數(shù).第二節(jié) 體液及排泄物檢查尿液檢驗(yàn)?zāi)驊T例檢查【標(biāo)本】新穎尿液 .【方法】化學(xué)試
7、帶法.【試劑】各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶 .【操作】詳見本人實(shí)驗(yàn)室的尿液化學(xué)分析儀使用手冊 .【附注】尿慣例檢查使用尿液化學(xué)分析儀,目前能進(jìn)行810項檢測( PH 、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸 TOC o 1-5 h z 鹽、比重、白細(xì)胞) .這些項目亦有響應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)材料.必須了解所用試帶各膜塊留意事項、藥物干擾.要留意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差別,須要時用手工法復(fù)查 .尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段,當(dāng)?shù)鞍住㈦[血、白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白“”或以上)時,應(yīng)進(jìn)行鏡檢.尿液色彩、透明度等普通性狀異常時也應(yīng)陳述.本一周氏(Bence-Jon
8、eS蛋白定性檢查【標(biāo)本】新穎尿液 .【方法】熱沉淀反應(yīng)法 .【試劑】200g/L 磺基水楊酸溶液; 0.1) .操作】1.先將尿液用磺基水楊酸法作蛋白定性檢查,如呈陰性反應(yīng),則可認(rèn)為尿液標(biāo)本中本周氏蛋白陰性.取透明尿液4ml 于試管中,再加入醋酸鹽緩沖液1ml ,混勻后,放置 56水浴中15 分鐘.如有渾濁或出現(xiàn)沉淀,再將試管放入沸水中,煮沸 3 分鐘,觀察試管中渾濁或沉淀的變更,如渾濁變清、渾濁減弱或沉淀減少,均提示本-周氏蛋白陽性.若煮沸后,渾濁添加或沉淀增多,標(biāo)明此尿液中還有其它蛋白質(zhì),此時應(yīng)將試管從沸水中取出,立即過濾 .如濾液開始透明,溫度降低后渾濁,再煮沸時又透明,提示本-周氏蛋白
9、為陽性.【附注】過多的本-周氏蛋白,在90以上不容易完整溶解,故需與對看管比較,也可將尿液濃縮后再測 .煮沸過濾除去尿中白、球蛋白時,動作要敏捷,并需堅持高溫,否則本 - 周氏蛋白也會濾去 .尿乳糜定性檢查【標(biāo)本】 TOC o 1-5 h z 新穎尿液.【試劑】. 乙醚(AR);.蘇丹in醋酸乙醇染色液或猩紅染色液.【操作】.取尿510ml,加乙醍23ml,混合振搖后,使脂肪溶于乙醍.靜置數(shù)分鐘后, 2000r/min 離心 5min.汲取乙醍與尿液的界面層涂片,加蘇丹田醋酸乙醇染色液或猩紅染色液 1 滴 . 鏡檢觀察是否有紅色脂肪小滴.【附注】.尿液中加少量飽和氫氧化鈉,再加乙醚,有助于澄清
10、 .將分離的乙醍層隔水蒸干,若留有油狀沉淀,也可加蘇丹田,鏡檢證明有沒有脂肪小滴.尿膽色素原定性試驗(yàn)【標(biāo) 本 】新穎尿液 .【試劑】對二甲氨基苯甲醛試劑;飽和醋酸鈉溶液;氯仿;正丁醇 .【操作】.在試管中,加入尿標(biāo)本2ml及對二甲氨基苯甲醛試劑2ml,混合.立即加飽和醋酸鈉溶液4ml,混合,加氯仿 3ml,振搖混合后,上層水溶液呈紅色者為陽性反應(yīng) . 陽性結(jié)果利用下法證明:如尿膽原含量多,用一次氯仿不克不及完整抽提尿膽原,應(yīng)多次用氯仿抽提,直至氯仿層呈淡粉紅色或無色為止,再觀察上層水溶液色澤.如上層水溶液為紅色時,再加正丁醇4ml抽提,如水溶液仍呈紅色則證明尿中膽色素元為陽性 .附注】.醋酸鈉
11、溶液必須為飽和液.當(dāng)尿膽色素原濃度太高時,應(yīng)將尿標(biāo)本濃縮25100倍. 尿液必須新穎,不克不及久置.尿苯丙酮酸定性試驗(yàn)【標(biāo)本】新穎尿液 .【方法】三氯化鐵法 .【試劑】100g/L 三氯化鐵液;磷酸鹽沉淀劑 .【操作】.尿液4ml加磷酸鹽沉淀劑1ml,混勻,靜置3min,如由現(xiàn)沉淀,可用濾紙過濾或離心除去.濾液中加入濃鹽酸 23滴和100g/L三氯化鐵溶液23滴,每加1 滴立即觀察色彩變更.以尿液顯藍(lán)綠色并持續(xù)24min ,為陽性 .【附注】.尿中若含酚類藥物(如水楊酸制劑)及氯丙嗪,也可與氯化鐵結(jié)合顯色,試驗(yàn)前應(yīng)停用此類藥物.膽紅素也可形成假陽性.小兒出生后6 周內(nèi)不容易查出.故于出生6 周
12、后檢查為好.大多數(shù)苯丙酮尿癥患者的尿液可由現(xiàn)陽性.但約1/41/2病例可能會漏檢. 亦可采取 2, 4-二硝基苯肼法.尿沉渣檢查【標(biāo)本】新穎尿液(最好收集清晨中段尿) .【方法】顯微鏡檢查法 .【操作】. 取刻度離心管,倒入混合后的新穎尿液10ml, 1500r/min 離心 5min. 棄去上層清液,留下0.2ml 沉渣,輕搖離心管,使尿沉渣有構(gòu)成分充分混勻 .取尿沉渣0.02ml,滴在載玻片上,用 18mm x 18mm的蓋玻片覆蓋. TOC o 1-5 h z .鏡檢觀察,用10X 10鏡頭,觀察其中有構(gòu)成分的全貌及管型用10X 40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成分及計算數(shù)量,應(yīng)觀察 10個視野所見
13、最低和最高值,記錄結(jié)果.管型用高倍鏡鑒定,但計數(shù)數(shù)量按低倍鏡觀察20 個視野,算出一個視野的平均值,記錄結(jié)果.尿結(jié)晶和鹽類數(shù)量以每一高倍視野、 2 、3 、4 陳述.【附注】清晨空腹第一次尿(普通情況應(yīng)收集中段尿),應(yīng)在1h 內(nèi)送檢 .見到各種上皮細(xì)胞也應(yīng)陳述,陳述方式參照白細(xì)胞.亦可采取染色尿沉渣鏡檢.尿沉渣定量檢查【標(biāo)本】新穎晨尿 .附注】方法】一小時尿沉渣計數(shù)法.【操作】. 標(biāo)本收集:患者先排尿棄去,精確收集3h 尿液于干燥容器內(nèi)送檢(標(biāo)本留取時間 5:308:30).精確測量3h尿量,充分混合.取混勻尿液10ml,置刻度離心管中,1500r/min離心5min,用吸管吸棄上層尿液9ml
14、,留下1ml,充分混勻汲取混勻尿液1 滴,注于血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi).細(xì)胞共數(shù)10 個大方格,管型共數(shù) 20 個大方格.終極計算出紅細(xì)胞/h 、白細(xì)胞 /h 、管型 /h.【附注】尿液應(yīng)新穎, PH 應(yīng)在 6 以下 .尿液比重最好在1.026 以上 .如尿液中含多量磷酸鹽時,應(yīng)加少量稀醋酸液(切勿加多),使其溶解;含大量尿酸鹽時,應(yīng)加溫使其溶解.亦可采取尿沉渣定量分析板或尿沉渣主動分析儀進(jìn)行尿沉渣定量檢查,詳見有關(guān)材料.絨毛膜促性腺激素檢測【標(biāo)本】新穎尿液 .【方法】金標(biāo)抗體檢測法.【操作】見試劑盒說明書.若質(zhì)控點(diǎn)和測定點(diǎn)均不呈現(xiàn)紅色,暗示試劑失效.糞便檢驗(yàn)糞便的顯微鏡檢查【標(biāo)本】新穎糞便 .【方法】
15、直接涂片鏡檢法 .【操作】.潔凈玻片上加等滲鹽水12滴,選擇糞便的不正常部分,或挑取分歧部位的糞便做直接涂片(最好取大玻片,制成涂片后,應(yīng)覆以蓋片 .涂片的厚度以能透過印刷物筆跡為準(zhǔn))檢查. 在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊,則在該涂片上滴加 1 滴碘液,在高倍鏡下細(xì)心鑒別,如仍不克不及決定時,可取全量糞便濃縮法檢查 .隱血試驗(yàn)【標(biāo)本】新穎糞便 .【方法】免疫學(xué)檢測法 .【操作】取一片潔凈干燥的載玻片,滴加23滴蒸儲水,取糞便少許,調(diào)成均勻混懸液.取糞便隱血試紙條,按說明書操縱,將試紙條的反應(yīng)端浸濕 .在 5min 內(nèi)觀察結(jié)果.以反應(yīng)線及質(zhì)控線均呈藍(lán)色帶為陽性.【附注】 TOC o 1-5 h z 若兩
16、條線均不顯色,說明試紙條失效.本法因?yàn)殚g斷性出血或出血在糞便平分布不均等身分,可形成假陰性結(jié)果 .本法因?yàn)樗幬锏染売?,對正凡人檢查有時會得到陽性結(jié)果.亦可采取化學(xué)試帶法、鄰甲聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法等.收集標(biāo)本前3日應(yīng)禁食動物性食物及富含葉綠素食物、鐵劑、中藥 .但本法不受動物血紅蛋白的干擾,試驗(yàn)前不須禁食肉類.糞膽素檢查【標(biāo)本】新穎糞便 .【方法】氯化高汞煮沸法 .【試劑】飽和氯化高汞溶液.【操作】.于小試管內(nèi)置糞便一小塊,加飽和氯化高汞溶液數(shù)毫升. 將糞塊調(diào)勻,加熱煮沸 3min ,立即觀察色彩反應(yīng) .【附注】.結(jié)果不容易判定時,應(yīng)留意糞便色彩,須要時以鹽水代替試劑做空白對照 . 當(dāng)糞便顆粒經(jīng)
17、煮沸后如有紅色又有綠色出現(xiàn),說明標(biāo)本內(nèi)既含糞膽 素又含膽紅素,罕見于腸炎、腹瀉等腦脊液檢驗(yàn)潘氏(Pandy)球蛋白定性試驗(yàn)【標(biāo)本】 TOC o 1-5 h z 新穎腦脊液.【試劑】5%苯酚溶液(棕色瓶內(nèi)保管).【操作】取試劑23ml,置于小試管內(nèi),用毛細(xì)滴管滴入腦脊液12滴,襯以黑色布景,立即觀察結(jié)果,陳述陰性或陽性及陽性的程度.細(xì)胞計數(shù)【標(biāo)本】新穎腦脊液.【試劑】細(xì)胞計數(shù)板;紅細(xì)胞濃縮液;冰乙酸;1%冰乙酸.【操作】1.細(xì)胞總數(shù) :( 1)澄清腦脊液:混勻后用滴管直接滴入計數(shù)池,計數(shù)10 個大方格內(nèi)紅、白細(xì)胞數(shù),其總和即為每ul 的細(xì)胞數(shù).(如細(xì)胞較多,可計數(shù)一大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)x 10).(
18、2)渾濁或帶血腦脊液:用血紅蛋白吸管汲取混勻的腦脊液20ul,加入含紅細(xì)胞濃縮液0.38ml 的小試管內(nèi),混勻后滴入計數(shù)池內(nèi),用低倍鏡計數(shù) 4 個大方格中的細(xì)胞總數(shù),再乘以 50 即為每 ul 腦脊液的細(xì)胞 總數(shù) .2白細(xì)胞數(shù):(1)非血性標(biāo)本:小試管內(nèi)放入冰乙酸12滴,動彈試管,使內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之,然后滴加混勻的腦脊液34滴,數(shù)分鐘后,混勻充入計數(shù)池,按細(xì)胞總數(shù)操縱中的紅、白細(xì)胞計數(shù)法計數(shù).( 2)血性標(biāo)本:將混勻的腦脊液用1%冰乙酸溶液濃縮后,按細(xì)胞總數(shù)操縱中的紅、白細(xì)胞計數(shù)法計數(shù),結(jié)果X濃縮倍數(shù)3細(xì)胞分類:( 1)直接分類法:白細(xì)胞計數(shù)后,將低倍鏡換成高倍鏡,直接在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞
19、核的形狀分別計數(shù)單個核細(xì)胞(包含淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞,應(yīng)數(shù)100 個白細(xì)胞,并以百分率暗示.若白細(xì)胞少 TOC o 1-5 h z 于 100 個,應(yīng)直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字.( 2)染色分類法:如直接分類不容易區(qū)分細(xì)胞時,可將腦脊液離心沉淀,取沉淀物 2 滴,加正常血清1 滴,推片制成均勻薄膜,置室溫或37溫箱內(nèi)待干,進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類.如見有不克不及分類的細(xì)胞,應(yīng)另行描述陳述.【附注】腦脊液慣例包含普通性狀檢查、潘氏(Pandy)球蛋白定性試驗(yàn)及細(xì)胞計數(shù) .計數(shù)應(yīng)及時進(jìn)行.細(xì)胞計數(shù)時,應(yīng)留意新型隱球菌與白細(xì)胞的區(qū)別計數(shù)池用后,利用 75%乙醇消毒 60min.漿膜腔
20、積液檢查漿膜粘蛋白定性試驗(yàn)(Rivalta反應(yīng))【標(biāo)本】新穎漿膜腔積液.【試劑】冰醋酸 .【操作】取100ml量筒,加蒸儲水100ml,滴入冰醋酸 0.1ml (PH35),充分混勻,靜止數(shù)分鐘,將穿刺液靠近量筒液面逐滴輕輕滴下,在黑色布景下,觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其降低速度等,陳述陰性或陽性及陽性的程度.細(xì)胞學(xué)檢查【標(biāo)本】新穎漿膜腔積液.【操作】細(xì)胞總數(shù)及有核細(xì)胞計數(shù)方法基本與腦脊液同,漏由液中有核細(xì)胞數(shù)量常在100X 106/L以下;滲生液中有核細(xì)胞數(shù)量較多,常在500 x 106/L以上.細(xì)胞分類:穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心,用沉淀物涂片后以瑞氏染色法進(jìn)行分類須要時制備稍厚涂片,在干燥前
21、放置乙醚乙醇等量混合液中固定30min,用蘇木素-伊紅(HE)或巴氏法染色查找癌細(xì)胞.精液檢查精子活動率【標(biāo)本】新穎精液 .【操 作 】取新穎標(biāo)本混勻后,在溫?zé)岵F嫌酶弑剁R觀察100 個精子,計數(shù)活動精子與不活動精子的比例,計算精子活動的百分率.【附注】如室溫低于10c時,應(yīng)將標(biāo)本先放入37c溫育510min后鏡檢.精子活力【標(biāo)本】新穎精液 .【操作】取上述新穎濕片標(biāo)本,觀察精子的活動力,以0級至IV級陳述.精子計數(shù)【標(biāo)本】新穎精液 .【試劑】精子濃縮液.【操作】1.于小試管內(nèi)加精子濃縮液0.38ml,吸液化精液20ul,加入濃縮液內(nèi)搖勻 .2. 充分搖勻后,滴入血細(xì)胞計數(shù)池內(nèi),靜置12mi
22、n,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計數(shù)如精子數(shù)少,可計數(shù)2 個大方格內(nèi)精子數(shù),數(shù)得總數(shù)乘 10 萬即為每毫升精液內(nèi)精子數(shù),再換算成X109/L陳述.如精子數(shù)多,可計數(shù)5 個中方格內(nèi)精子數(shù),加 6 個零,即為每ml精液內(nèi)精子數(shù)再換算成x109/L陳述.【附 注】收集精液前應(yīng)防止性生活 37 天,精液宜用清潔干燥之小瓶收集,避孕套內(nèi)的精液不宜收集.收集精液標(biāo)本后應(yīng)在一小時內(nèi)檢查,冬季應(yīng)留意保溫.由現(xiàn)一次異常結(jié)果,應(yīng)隔一周后復(fù)查,反復(fù)查 23次方能得由比較精確的結(jié)果.如低倍鏡、高倍鏡檢查均無精子,應(yīng)將精液離心沉淀后再涂片檢查,如兩次均無精子,陳述“無精子” .精子形狀觀察【標(biāo)本】新穎精液 .【
23、試劑】革蘭或瑞氏染液.【操作】革蘭或瑞氏染色后用油鏡觀察,陳述異常精子的百分比 .前列腺液檢查【標(biāo)本】新穎前列腺液(臨床醫(yī)師作前列腺推拿術(shù)后,收集標(biāo)本于清潔玻片上,立即送檢) .【操作】肉眼觀:記錄液體色彩、是否混有血液、黏稠度(有沒有膿塊) .濕片鏡檢:高倍鏡下觀察白細(xì)胞、紅細(xì)胞、卵磷脂小體,其次為上皮細(xì)胞、精子、淀粉樣體等,須要時革蘭染色查細(xì)菌 .陰道分泌物檢查【標(biāo)本】陰道分泌物 .【操作】清潔度:取陰道分泌物,用生理鹽水涂片,高倍鏡檢查,根據(jù)所含白細(xì)胞(或膿細(xì)胞)、上皮細(xì)胞、桿菌、球菌的多少,分成IIV度 .滴蟲檢查:在濕片鏡下如見梨形,比白細(xì)胞大2 倍,頂端有鞭毛 4根,在2542c溫
24、度下可活動的滴蟲(在寒冷天氣,標(biāo)本要采納保溫措施),陳述之.霉菌檢查:在濕片高倍鏡下如見卵圓形霉菌孢子,陳述之.痰液檢查顯微鏡檢查【標(biāo)本】痰液 .【操作】選擇膿樣、干酪樣或帶膿樣血液部分,取1 小塊置玻片上,直接與生理鹽水混合,涂成薄片,加蓋片后輕壓之,用低倍鏡及高倍鏡檢查 .留意有沒有紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、彈力纖維、枯什曼螺旋體、夏科- 雷登結(jié)晶、膽紅素結(jié)晶、硫磺樣顆粒(放線菌塊)、寄生蟲卵(可見蛔蟲卵、肺吸蟲卵)、痢疾阿米巴、真菌孢子、心力衰竭細(xì)胞、載碳細(xì)胞、癌細(xì)胞等.嗜酸性粒細(xì)胞檢查【標(biāo)本】痰液 .【試劑】瑞氏或伊紅- 美藍(lán)染色液.【操作】取痰液做直接涂片,干燥后用瑞氏或伊紅 -美藍(lán)
25、染色液染色,油鏡下計數(shù) 100個白細(xì)胞,陳述嗜酸性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù).第三節(jié) 血栓與止血的檢驗(yàn)血管壁與內(nèi)皮細(xì)胞檢驗(yàn)出血時間( BT )出血時間檢測是指皮膚受特定條件的內(nèi)傷后,出血自行停止所需的時間.此過程反映皮膚毛細(xì)血管與血小板彼此感化,包含血小板粘附,血小板活化和釋放和血小板聚集等反應(yīng) .出血時間“測定器法”自肘前窩凹下二橫指處,經(jīng)慣例消毒后,使刀片由“測定器”內(nèi)刺入皮膚,啟動秒表,每隔半分鐘用干凈濾紙吸干流出的血液,直至出血天然停止,按停秒表,記錄出血時間 .Duke法,自耳垂或指尖取血.【 方法與操縱】見全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版)留意事項 】測定器法:采納部位應(yīng)保暖,血液應(yīng)主動流出 .因?yàn)?/p>
26、刺入皮膚的刀片長度和深度均固定,故“測定器法”的結(jié)果較為精確 .濾紙吸干流出血液時,應(yīng)防止與傷口接觸.試驗(yàn)前 1 周內(nèi)不克不及服用抗血小板藥物,如阿司匹林等,以避免影響結(jié)果 .血小板數(shù)量和功能檢驗(yàn)血小板計數(shù)和平均血小板體積測定血小板計數(shù):目視計數(shù)法 .【標(biāo)本】 TOC o 1-5 h z 末梢血或抗凝靜脈血.【 方法與操縱】見全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版) .【試劑】.草酸銨法濃縮液. 許汝和濃縮液.【附注】血小板濃縮液要清潔.防微粒和細(xì)菌凈化.試管和吸管也應(yīng)清潔、干凈.針刺應(yīng)稍深,使血流通暢 .拭去第一滴血后,首先采血作血小板檢 TOC o 1-5 h z 測,動作要快,防止血小板聚集和破壞
27、.采納標(biāo)本后盡快計數(shù).血液濃縮液充分混勻后,滴入計數(shù)池內(nèi)后,要靜置1015min.室溫高時留意堅持計數(shù)池四周的濕度,以避免水分蒸發(fā) .計數(shù)時光線要適中,留意有折光性的血小板與雜質(zhì)灰塵相區(qū)別,附在血細(xì)胞旁邊的血小板也要留意,不要漏掉.血小板計數(shù)儀計數(shù)【標(biāo)本】末梢血 .【 方法與操縱】使用血小板計數(shù)儀及與其相匹配的濃縮液.操縱詳見儀器使用說明書 .平均血小板體積( MPV )測定【標(biāo)本】2 或肝素)【 方法與操縱】主動化血細(xì)胞計數(shù)儀均可檢測血小板功能檢驗(yàn)血小板粘附試驗(yàn)【標(biāo)本】自靜脈取血1.01.5ml.【方法】.玻珠柱法:1)操縱:見全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版)2)留意事項:1)取血過程必須順利
28、,把握血液通過玻珠柱的速度,流速太快,粘附率降低,流速太慢會使粘附率增高 . TOC o 1-5 h z 2)玻珠柱為一次性器具,用后即棄去.3)待用玻珠柱應(yīng)置于干燥器中儲存,受潮后粘附率降低. 玻璃濾器法:【標(biāo)本】自靜脈取血1.5ml.【 方法與操縱】見全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版) .血小板聚集試驗(yàn)( PAgT )【標(biāo)本】自肘靜脈取血4.5ml 注入于含 0.5ml 109mmol/L 枸椽酸鈉的硅化離心管內(nèi),充分混勻 .【試劑】.富含血小板血漿(PRP)及貧含血小板血漿(PPP). 血 小 板 聚 集 引 誘 劑 ADP 、 腎 上 腺 素 、 膠 原 、 瑞 斯 托 霉 素(Risto
29、cetin)等. TOC o 1-5 h z 【 方法與操縱】PAgT 比濁法,按全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版)步調(diào)操縱.【 留意事項 】血標(biāo)本中pH6.88.5之間時,可測得最好結(jié)果.pH V 6.4或10.0時,可使聚集按捺或消逝.阿司匹林、潘生丁、肝素、雙噴鼻豆素等可按捺聚集,特別阿司匹林按捺聚集感化時間可持續(xù) 1 周 .采血后標(biāo)本應(yīng)放在1525 下,切忌冰箱內(nèi)保管,并在3h 內(nèi)作完實(shí)驗(yàn) .凝血因子檢驗(yàn) TOC o 1-5 h z 全血凝固時間檢驗(yàn)(CT )【標(biāo)本】靜脈取血 3ml.【 方法與操縱】試管法、硅管法操縱拜見全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版) .【附注】.靜脈取血要提綱契領(lǐng),盡量
30、減少組織液和空氣混入 . 水浴箱溫度要恒定,過高或過低,可影響結(jié)果.活化部分凝血活酶時間測定( APTT )【標(biāo)本】自靜脈取血,用 109mmol/L 枸椽酸鈉作 1:9抗凝 .【試劑】市售成套試劑 .【 方法與操縱】按試劑及有關(guān)儀器說明書請求進(jìn)行.【附注】.標(biāo)本應(yīng)及時檢測,最遲不超出2h. 分離血漿應(yīng)在3000r/min ,離心 10min.本試驗(yàn)較試管法全血凝血時間敏感,能檢由因子皿:CV25%輕型血友病 .血漿凝血酶原時間測定( PT ,一期法)【標(biāo)本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝.【試劑】.組織凝血活酶浸出液;液;【 方法與操縱】見全國臨床檢驗(yàn)操縱規(guī)程(第二版) .【附注】采血后宜在1h 內(nèi)完成,置冰箱4保管,不該超出 4h, -20下可放置 2 周,-70可放置6 個月 .水溫箱控制在37 1,過高過低均影響結(jié)果.簡易凝血活酶生成試驗(yàn)( STGT )【標(biāo)本】取全血 0.04ml 加 5ml 蒸餾水
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