大型生化分析儀上崗考試培訓(xùn)

1、與自動(dòng)生化分析儀使用相關(guān)內(nèi)容的培訓(xùn)培訓(xùn)內(nèi)容：第二單元 全自動(dòng)生化分析儀的分類第三單元 全自動(dòng)生化分析儀的基本結(jié)構(gòu)第四單元 全自動(dòng)生化分析儀安裝準(zhǔn)備第五單元 全自動(dòng)生化分析儀的分析參數(shù)的設(shè)置徐國(guó)賓北京大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn),100034Tel2054/2042第二單元 全自動(dòng)生化分析儀的分類 傳統(tǒng)的臨床檢驗(yàn)，包括生化檢驗(yàn)多是手工勞動(dòng)。 要求技術(shù)人員: 技能嫻熟的， 操作專注， 勞動(dòng)強(qiáng)度大， 工作效率低， 操作結(jié)果存在明顯的個(gè)人差異, 可比性和質(zhì)量受到影響。 不適應(yīng)臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展。 二十世紀(jì)的60年代，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)自動(dòng)化在發(fā)達(dá)國(guó)家已初見(jiàn)端倪。 電子學(xué) 光學(xué) 計(jì)算機(jī)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù) 生物

2、技術(shù) 酶和蛋白質(zhì)純化 抗體制備，特別是單克隆抗體的制備 加速了臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化的進(jìn)程。 我國(guó) 80年代：引進(jìn)全自動(dòng)生化分析儀， 90年代：引進(jìn)自動(dòng)免疫分析儀 全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀 尿液自動(dòng)分析儀 微生物培養(yǎng)與鑒定 新千年：自主研發(fā)出自動(dòng)生化分析儀 血球計(jì)數(shù)儀自動(dòng)化遍及到醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的所有領(lǐng)域。 根據(jù)自動(dòng)化程度生化分析儀 半自動(dòng)生化分析儀 全自動(dòng)生化分析儀 一、半自動(dòng)生化分析儀 網(wǎng)絡(luò)：提供信息最快技術(shù)/真?zhèn)?分析（一）主要技術(shù)指標(biāo)分析過(guò)程中的部分操作：加樣加試劑 手工完成混勻吸入 比色孵育 自動(dòng)完成結(jié)果計(jì)算 特點(diǎn) 體積小 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 操作方便 普通檢查 （特種蛋白檢測(cè)有困難） 適合診所 吸樣廢液蠕動(dòng)泵 比

3、色：石英鹵素?zé)簦?比路士泵Peltier控溫反應(yīng)液（吸液量）：500l左右微量流動(dòng)比色池：數(shù)十微升恒溫器在數(shù)秒內(nèi)使反應(yīng)平衡到要求的溫度溫度波動(dòng)應(yīng)：小于結(jié)果： 由顯示窗顯示 打印 通過(guò)接口將數(shù)據(jù)輸出測(cè)定方法： 動(dòng)力學(xué) 兩點(diǎn)法 終點(diǎn)法檢測(cè)編排項(xiàng)目： 30-100（二）使用注意事項(xiàng) 1.儀器穩(wěn)定： 電壓，溫度，濕度 2.規(guī)定的清洗液清洗管道 實(shí)驗(yàn)間隔，管道用一般情況：去離子水清洗 堿性液清洗 去離子水清洗特殊情況：去離子水清洗 酸性液清洗 去離子水清洗 3.*基于一級(jí)反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)法測(cè)定項(xiàng)目 要嚴(yán)格掌握啟動(dòng)反應(yīng)即刻和吸樣并開(kāi)始記錄吸光度的時(shí)間*基于零級(jí)反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)法測(cè)定項(xiàng)目 （酶催化活性濃度）控制啟動(dòng)

4、反應(yīng)和吸樣并開(kāi)始記錄吸光度的時(shí)間不能擅自縮短延遲時(shí)間*終點(diǎn)法測(cè)定注意到：顯色產(chǎn)物放置時(shí)間對(duì)測(cè)定具有影響*動(dòng)力學(xué)測(cè)定法 代謝物 連續(xù)監(jiān)測(cè)法 酶活力濃度 注意到：在測(cè)定的延遲期內(nèi)底物消耗 溫度控制光源 比色杯 檢測(cè)器 數(shù)據(jù)處理 打印輸出 定量注加系統(tǒng) 樣本 試劑取樣、加試劑、混合、孵育反應(yīng)、檢測(cè)、結(jié)果計(jì)算、清洗由儀器自動(dòng)完成 二、全自動(dòng)生化分析儀連續(xù)流動(dòng)式（管道式）離心式分立式干式 管道式分析儀（流動(dòng)式自動(dòng)生化分析儀）是指測(cè)定項(xiàng)目相同的各待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)在同一管道流動(dòng)的過(guò)程中完成分立式生化分析儀 儀器機(jī)械手向分立的比色皿中自動(dòng)定量注加樣本和試劑，一定溫度下孵育反應(yīng)分別進(jìn)行比色測(cè)定。

5、“順序分析” 離心式自動(dòng)生化分析儀 結(jié)構(gòu)特點(diǎn): 化學(xué)反應(yīng)器裝在離心機(jī)的轉(zhuǎn)子位置上 儀器機(jī)械臂自動(dòng)將樣品和試劑分別置于轉(zhuǎn)頭中 的樣品槽和試劑槽中。 離心機(jī)開(kāi)動(dòng)后圓盤(pán)內(nèi)的樣品和試劑受離心力的 作用流入盤(pán)外比色槽中，混合發(fā)生反應(yīng)，通過(guò) 比色計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。分析特點(diǎn):基于“同步分析”的原理而設(shè)計(jì) 不是隨機(jī)任選式,按項(xiàng)目順序分析比色杯必須人工清洗水平測(cè)光和垂直測(cè)光兩種方式 A=ECL A=EC(TV/S) 干化學(xué)生化分析儀反應(yīng)在固相載體上，測(cè)定的是折射光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)的一類儀器分為全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)項(xiàng)目： 普通臨床生物化學(xué)檢驗(yàn) 藥物檢測(cè) 蛋白測(cè)定 第三單元 自動(dòng)生化分析儀的主要結(jié)構(gòu)1.樣品裝載裝

6、置 樣品盤(pán) 弧 樣品架 直 2.輸送裝置-傳送帶靠步進(jìn)馬達(dá)驅(qū)動(dòng)將試管架依次前移再單架逐管橫移至固定位置樣品分配臂采樣 3.取樣單元 組成：取樣針取樣臂取樣注射器前進(jìn)馬達(dá)采樣針結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：針的前端有液面?zhèn)鞲衅?防止空吸或深入采血管下層的凝血塊 采樣單元的故障高主要原因 血樣 表面有氣泡 未完全凝固就進(jìn)行測(cè)定 極易導(dǎo)致加樣針阻塞 此樣本的測(cè)定值也假性降低；加樣針偏離正確位置 應(yīng)經(jīng)常注意觀察樣品杯或樣品管口徑小 樣品管過(guò)細(xì) 取樣針扎偏：破壞采樣裝置4.注加試劑單元 組成：試劑針試劑瓶和試劑倉(cāng)試劑臂取試劑注射器前進(jìn)馬達(dá)構(gòu)試劑取樣針前端有液面?zhèn)鞲衅鳎悍乐箍瘴蜥樇馍钊朐噭┖械撞恳鹪噭┽樛獗谝后w掛淋。雙試

7、劑有第一試劑和第二試劑取樣單元。很多試劑內(nèi)具有表面活性物質(zhì)，操作不當(dāng)，如震蕩試劑瓶，或加試劑的速度過(guò)快，試劑表面會(huì)有氣泡，此時(shí)試劑取樣針前端的液面?zhèn)鞲衅饕矔?huì)誤以為取到樣品，致使測(cè)定結(jié)果的偏差。試劑瓶形狀及大小規(guī)格不同應(yīng)根據(jù)工作量考慮試劑規(guī)格殘留試劑反復(fù)使用會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性要考慮試劑開(kāi)蓋后在使用過(guò)程中的穩(wěn)定性不要在運(yùn)行中添加、更換試劑封閉系統(tǒng)使用的試劑具有條形碼 儀器設(shè)有條形碼檢查系統(tǒng)，對(duì)試劑的種類、批號(hào)、規(guī)格、有效期等資料，進(jìn)行核對(duì)校驗(yàn)*注意事項(xiàng)：加樣臂和試劑臂的活動(dòng)區(qū)不可放置任何物 品儀器在運(yùn)行過(guò)程中不可用手調(diào)整任何部件， 以免發(fā)生穿刺傷 樣品和試劑的定量注加系統(tǒng)需要定期校正5.反應(yīng)單元組

8、成：反應(yīng)盤(pán) 混合裝置 溫控裝置 反應(yīng)盤(pán)多為轉(zhuǎn)盤(pán)式按固定程序轉(zhuǎn)動(dòng)反應(yīng)和檢測(cè)同在比色杯中進(jìn)行比色杯：石英玻璃 無(wú)紫外光吸收的塑料混合裝置 攪拌棒 攪拌棒具特氟隆不沾涂層 超聲波6.孵育反應(yīng)溫控裝置孵育溫度的調(diào)控和恒定由計(jì)算機(jī)控制理想的孵育溫度波動(dòng)應(yīng)小于0.1 應(yīng)該定期檢測(cè)（水浴裝置的控溫性能可自行檢測(cè)，采用國(guó)家計(jì)量院校準(zhǔn)的溫度計(jì)測(cè)定水溫）保持恒溫的方式有三種空氣浴恒溫： 在比色杯與加熱器之間隔有空氣?？諝庠『銣氐奶攸c(diǎn)是方便、速度快、不需要特殊材料，但穩(wěn)定性和均勻性與各廠家的設(shè)計(jì)有關(guān)。水浴循環(huán)恒溫式 在比色杯周圍充盈有水，加熱器控制水的溫度。水浴恒熱的特點(diǎn)是溫度恒定，但需特殊的防腐劑以保證水質(zhì)的潔凈

9、，且要定期更換循環(huán)水。恒溫液循環(huán)間接加熱式 比色杯周圍流動(dòng)著一種特殊的恒溫液（具無(wú)味、無(wú)污染、惰性、不蒸發(fā)等特點(diǎn)）。比色杯和恒溫液之間有極小的空氣狹縫，恒溫液通過(guò)加熱狹縫的空氣達(dá)到恒溫。與水浴式循環(huán)式相比不需要特殊保養(yǎng)。7.清洗系統(tǒng)探針和攪拌棒采用激流式或瀑布式等方式自動(dòng)沖洗。比色杯清洗裝置 吸液針 吐液針 擦拭刷 吸去杯壁上掛淋的水， 刷體內(nèi)部有負(fù)壓抽吸裝置 注意擦拭刷是否磨損樣本針 試劑針 攪拌棒 比色杯 清洗機(jī)構(gòu)（清洗針、清洗液、水）清洗工作流程吸出反應(yīng)液（吸干）注入洗液（吸干） 堿性液沖洗 酸性液沖洗 去離子水沖洗三遍擦干應(yīng)用生化分析儀的重要注意事項(xiàng)：?jiǎn)⒂们埃?正確安裝、調(diào)試 檢測(cè)方法

10、學(xué)的驗(yàn)證 攜帶和交叉污染試驗(yàn)及糾正啟用后： 正確使用、維護(hù)和保養(yǎng) 質(zhì)量控制攜 帶 污 染交 叉 污 染攜帶（交叉）污染 測(cè)試項(xiàng)目 A試劑殘留（試劑針、攪拌棒、比色杯） 干擾下一個(gè)測(cè)試 B樣本1(高濃度)項(xiàng)目樣本針(攜帶)污染干擾樣本2測(cè)定引發(fā)交叉污染的原因共有化 (試劑/樣本針/攪拌)處理能力提高( 犧牲沖洗的強(qiáng)度和時(shí)間為代價(jià))使用/維護(hù)不當(dāng) 污垢積聚 沖洗力低下(儀器/配件老化/欠維護(hù))測(cè)定次序不當(dāng)沖洗方式安排不當(dāng)試劑組成樣本攜帶交叉污染查明及避免（樣本針）樣本：高值血清 ，1000倍稀釋血清 ，生理鹽水方法：按順序（129號(hào)）分析某一項(xiàng)目，如 LDH。平均值A(chǔ)平均值B交叉污染率（%）= 1

11、00 0.3%正常 AB10002135791164212224262818314681115171020232527121929避免樣本攜帶污染方法： 樣本針的檫拭 給出分析項(xiàng)目名稱/指定特殊清洗液試劑攜帶交叉污染 Amylase試劑 鈣 ALP試劑 鎂 鎂試劑 鐵 含磷酸鹽的緩沖液 磷 膽固醇試劑 膽汁酸 基于Trinder反應(yīng) 基于Trinder反應(yīng) 高含量測(cè)定項(xiàng)目(Glu) 高含量測(cè)定項(xiàng)目(Ua) 試劑廠家應(yīng)提供特定儀器,一定試劑排序后,測(cè)定交叉污染; 實(shí)驗(yàn)室的試劑排位與試劑廠家推薦的不同,或試劑生產(chǎn)企業(yè)未能夠提供試劑交叉污染試驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)該自己,或請(qǐng)有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)支持做交叉污染試驗(yàn); 避

12、免試劑交叉污染的方法調(diào)整通道（加樣）順序設(shè)置避免交叉污染程序, 選擇相關(guān)項(xiàng)目指定清洗液將有交叉污染的項(xiàng)目,放在不同儀器上選擇試劑間交叉污染少的測(cè)定試劑比色杯污染的查明及避免杯空白升高，杯間差變大殘留成分對(duì)下一分析的影響第1循環(huán)全部項(xiàng)目第2、3、4、5循環(huán)受干擾項(xiàng)目較大的偶然誤差,一般是由于殘留成分的影響比色杯交叉污染避免方法：常規(guī)操作中的清洗特殊清洗從試劑選擇上考慮常規(guī)清洗程序工作正常8比色系統(tǒng)(1)光源 鹵素?zé)?波長(zhǎng):325800nm氙燈,波長(zhǎng): 285750 nm 壽命長(zhǎng)發(fā)光強(qiáng)度不夠時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警，應(yīng)及時(shí)更換 （2）比色杯 比色杯也是反應(yīng)杯 光徑 材料：石英、硬質(zhì)玻璃或優(yōu)質(zhì)塑料 要定期

13、檢查清洗 及時(shí)更換不合格的比色杯（3） 單色器 各類自動(dòng)生化分析儀應(yīng)用的是可見(jiàn)-紫外吸收光譜法，即監(jiān)測(cè)200700nm光區(qū)某特定波長(zhǎng)下發(fā)色基團(tuán)吸光度的變化，輔以微機(jī)軟件系統(tǒng)的計(jì)算來(lái)完成測(cè)定 可見(jiàn)-紫外吸收光譜定量的基礎(chǔ)是Lamber-Beer定律。該定律說(shuō)明的是一定濃度范圍內(nèi)吸光物質(zhì)對(duì)單色光吸收的強(qiáng)弱與該物質(zhì)的濃度之間的關(guān)系 A=-lgT=ECL 傳統(tǒng)的分光光度測(cè)定： 前分光 在光源燈和樣品杯之間先要用濾光片、棱鏡或光柵分光，通過(guò)可調(diào)的狹縫，取得與樣品“互補(bǔ)”的單色光之后，照射到樣品杯，再用光電池或光電管作為檢測(cè)器，測(cè)定樣量對(duì)單色光的吸收量 現(xiàn)代大多生化分析儀采用： 后分光測(cè)量技術(shù) 將一束白光

14、（混合光）先照到樣品杯，然后再用光柵分光，同時(shí)用一列發(fā)光二極管排在光柵后面作為檢測(cè)器。 后分光的優(yōu)點(diǎn)： 是不需移動(dòng)儀器比色系統(tǒng)中的任何部件，可同時(shí)選用雙波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，這樣可降低比色的噪聲，提高分析的精確度。 單色器（分光裝置）：干涉濾光片光柵干涉濾光片： 插入式 可旋轉(zhuǎn)的圓盤(pán)式 插入式就是將需用的濾光片插入濾片槽中 圓盤(pán)式是將儀器配備的濾光片都安裝在圓盤(pán)中，使用時(shí)旋轉(zhuǎn)至所需濾光片處即可 干涉濾光片價(jià)格便宜，但易變潮霉變，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，半自動(dòng)生化分析儀多采用此種濾光片光柵全息反射式 玻璃上覆蓋一層金屬膜后制成， 有一定程度的相差，易被腐蝕蝕刻式凹面 所選波長(zhǎng)固定地刻制在凹面玻璃上，

15、耐磨損、抗腐蝕、無(wú)相差9.樣本條形碼識(shí)讀系統(tǒng) 樣本的唯一標(biāo)識(shí)清楚 記錄樣本采集時(shí)間 記錄樣本接收時(shí)間 減少勞動(dòng)強(qiáng)度 自動(dòng)化的要求 依賴HIS的建設(shè)（醫(yī)生工作站）醫(yī)院主機(jī)急診看診門(mén)診看診 準(zhǔn)備採(cǎi)血試管下醫(yī)囑令檢體處理 分派處急診掛號(hào)處門(mén)診掛號(hào)處分派工作令回傳檢驗(yàn)報(bào)告值下醫(yī)囑令批價(jià)收費(fèi)上傳檢驗(yàn)報(bào)告值 LIS SERVER& DATABASE下載醫(yī)囑令下醫(yī)囑令批價(jià)收費(fèi)病房看診查詢檢驗(yàn)報(bào)告查詢檢驗(yàn)報(bào)告查詢檢驗(yàn)報(bào)告急診採(cǎi)血 準(zhǔn)備採(cǎi)血試管中央採(cǎi)血室(採(cǎi)血)病房採(cǎi)血 準(zhǔn)備採(cǎi)血試管 送病房信息流程條形碼識(shí)讀系統(tǒng)：掃描系統(tǒng)信號(hào)整形譯碼器 以光源掃射黑條/白空相間的條碼符號(hào) （一維條碼） 由于黑條/白空對(duì)光的反射

16、不同 不同寬窄的條符反射光持續(xù)時(shí)間不同 產(chǎn)生強(qiáng)度不同的反射光 經(jīng)光電轉(zhuǎn)換元件接收并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)強(qiáng)度的電信號(hào) 最后通過(guò)信號(hào)整形，由譯碼器翻譯用于手工粘貼的普通條碼貼完條碼的試管 All-in-one 的概念條形碼格式與參數(shù)初步規(guī)劃：大小直/橫式參數(shù)內(nèi)容：姓名病歷號(hào)碼 性別年齡申請(qǐng)科別病房 優(yōu)先*申請(qǐng)單號(hào)樣本種類 抽血量日期時(shí)間注意事項(xiàng) 檢驗(yàn)組別管別索引抗凝劑 保存期限 條形碼提供的信息臨床實(shí)驗(yàn)室工作流程與自動(dòng)化 前處理系統(tǒng)生化免疫樣品保存血球血凝尿原樣品分類樣品自動(dòng)運(yùn)送手工運(yùn)送手工檢查外送樣品物理連接多個(gè)分析儀的系統(tǒng)第1代樸素設(shè)備連接數(shù)量與報(bào)告時(shí)間的關(guān)系報(bào)告時(shí)間連接分析儀數(shù)量大家的期望實(shí)際時(shí)間分析

17、報(bào)告時(shí)間連接分析儀數(shù)量實(shí)際的結(jié)果實(shí)際成本分析報(bào)告時(shí)間連接分析儀數(shù)量投入的資金物理連接多個(gè)分析儀的系統(tǒng)第1代樸素功能最大集成化的、模塊組合方式的連接系統(tǒng)（分析儀是一個(gè)模塊）第2代發(fā)展生化分析模塊組CentrifugeDecappingAliquottingReceptionlabelingSample sorting生物化學(xué)免疫學(xué)免疫學(xué)物理連接多個(gè)分析儀的系統(tǒng)第1代前處理功能最大集成化的、模塊組合方式的、物理連接系統(tǒng)（分析儀是一個(gè)模塊）第2代模塊組合方式非在線分析儀方式第3代第四單元 全自動(dòng)生化分析儀安裝準(zhǔn)備1. 自動(dòng)生化分析儀工作環(huán)境的要求 儀器工作空間實(shí)驗(yàn)室面積足夠大，以保證儀器的操作、保養(yǎng)

18、、維修的方便及各種配套設(shè)施（如純水機(jī)、UPS不間斷電源）電腦控制設(shè)備的安置。 儀器工作條件沒(méi)有陽(yáng)光直接照射灰塵非常少平坦沒(méi)有震動(dòng)地板承重為儀器重量的130%-140%接地電壓波動(dòng)10%避免：化學(xué)腐蝕物品 灰塵 電磁輻射 溫度和濕度 溫度應(yīng)控制在1830，工作時(shí)波動(dòng)小于2，部分儀器內(nèi)設(shè)置了允許溫度范圍，當(dāng)溫度超過(guò)允許范圍時(shí)儀器自動(dòng)停止檢測(cè)。 濕度有嚴(yán)格要求，濕度過(guò)高可能引起儀器部件的生銹發(fā)霉等情況降低使用壽命或儀器不工作，過(guò)于干燥則可能引起靜電增加，灰塵吸附增加而干擾光路系統(tǒng)的穩(wěn)定性。電源的要求 應(yīng)根據(jù)儀器對(duì)電源的要求和總負(fù)載量設(shè)計(jì)專用電路 要求始終連接符合要求的地線并連接UPS不間斷電源（最好

19、延時(shí)30分鐘以上）。 不正常狀態(tài)（如停電等）下的關(guān)機(jī)有可能降低儀器的使用壽命和測(cè)定數(shù)據(jù)的丟失。 2.自動(dòng)生化分析儀的用水及處理 臨床檢驗(yàn)中必須使用純水配置試劑和淋洗容器，完善的純水或精制水的來(lái)源才能獲得良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 蒸餾水 蒸餾法是最早使用的純化水的方法，也是普遍使用的方法,但不是純化水的理想方法。這是因?yàn)橛么笳麴s器制成的蒸餾水重金屬、無(wú)機(jī)物、懸浮物和微生物的污染較多，CO2不能去除。 蒸餾水的物理化學(xué)檢查見(jiàn)中國(guó)藥典二部。去離子水 原水通過(guò)陽(yáng)離子交換柱時(shí)，原水中陽(yáng)離子與柱中陰離子基團(tuán)結(jié)合，氫離子被置換出來(lái)，當(dāng)經(jīng)陽(yáng)離子樹(shù)脂處理過(guò)的水流過(guò)陰離子交換柱時(shí)，水中陰離子滯留在柱中，柱中氫氧根被置換出

20、來(lái)，后者與H反應(yīng)生成水。 RH + M+ RM +H （陽(yáng)離子交換柱） ROH + X RX + OH （陰離子交換柱） H+ + OH H2O離子交換樹(shù)脂具一定壽命，使用期限與水中 所含雜質(zhì)量有關(guān)。經(jīng)過(guò)陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂后的水應(yīng)不含任何離 子，電阻可達(dá)18M/CM(25)，柱效高，電 阻也大。隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng)，純化水的電阻減少， 當(dāng)下降到一定范圍（生化用水應(yīng)0.5 M/CM），應(yīng)更換離子交換柱。 目前多用混合式離子交換樹(shù)脂柱來(lái)純化水，即在柱內(nèi)裝有陽(yáng)離子和陰離子交換樹(shù)脂的混合物。水通過(guò)混合床時(shí)逐步自動(dòng)去除陰、陽(yáng)離子。離子交換樹(shù)脂不能去除水中非電離狀態(tài)的有機(jī)物，懸浮顆粒和微生物。離子交換樹(shù)脂純化

21、水的方法不應(yīng)單獨(dú)應(yīng)用，而應(yīng)放在經(jīng)蒸餾或反滲透裝備后面處理經(jīng)其初步純化過(guò)的水，以延長(zhǎng)交換柱的壽命。反滲透水 反滲透是用加壓的方法使水滲透過(guò)極微 小的滲透膜 反滲透膜的孔徑約為，較細(xì)菌 （1m），病毒0.4m)要小 可過(guò)濾95%以上的溶解和非溶解的無(wú)機(jī)物、 重金屬、細(xì)菌、病毒顆粒； 裝置多放在離子交換柱前，為后者提供初 級(jí)純水。4.純水系統(tǒng)-超純水的制備國(guó)產(chǎn)純水系統(tǒng)可替代國(guó)外產(chǎn)品純水系統(tǒng)基本組成：聚酯纖維過(guò)濾柱5m活性碳過(guò)濾匣 去除有機(jī)物反滲透器 多級(jí)混合離子交換床懸浮粒子膜過(guò)濾單元反滲透-離子交換純水制備系統(tǒng)工作流程示意圖目前，對(duì)于生化分析儀用水尚無(wú)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。但一般可從電阻或電導(dǎo)率、氯離子含量、

22、不揮發(fā)物、懸浮物和微生物、有機(jī)物幾個(gè)方面來(lái)檢測(cè)水的質(zhì)量。檢查方法參照中國(guó)藥典。臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室主張用水超純水，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。 純水機(jī)技術(shù)指標(biāo)：采用單片機(jī)控制，在線檢測(cè)超純水水質(zhì)當(dāng)水質(zhì)低于要求時(shí)，水質(zhì)報(bào)警器可自動(dòng)報(bào)警，提示用戶更換超純水柱高水位自動(dòng)關(guān)機(jī)低水位自動(dòng)開(kāi)機(jī)自動(dòng)監(jiān)測(cè)進(jìn)水端壓力。當(dāng)水壓不夠時(shí)，主機(jī)高壓泵自動(dòng)停止工作，避免高壓泵空轉(zhuǎn)影響工作 進(jìn)水壓要求反滲透膜自動(dòng)沖洗在線監(jiān)測(cè)反滲透水電導(dǎo)率，以提示用戶及時(shí)更換反滲透膜水質(zhì)：1 M/CM，25產(chǎn)水量：40140L/h進(jìn)水水源：自來(lái)水電阻率儀量程020 M/CM，分辨率0.1 M/CM第五單元 全自動(dòng)生化分析儀的分析（測(cè)定

23、） 參數(shù)的設(shè)置原則 生化分析儀的參數(shù)即儀器工作的指令，操作者通過(guò)參數(shù)控制儀器完成一系列復(fù)雜而有序的操作程序。 參數(shù)種類很多，有些參數(shù)是在生產(chǎn)制造中設(shè)置好的，如分析儀的一些通用操作，取樣、沖洗、檢測(cè)、數(shù)據(jù)處理等，其程序均已經(jīng)固化在存儲(chǔ)器里，用戶不能修改，只需選擇即可工作。 另外一些參數(shù)屬于測(cè)試項(xiàng)目的指令，即測(cè)定參數(shù) 臨床化學(xué)量值溯源的目標(biāo)新鮮血清不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、一致 在我國(guó)目前臨床化學(xué)常規(guī)測(cè)定中，使用的分析系統(tǒng)一般有兩種。 一種是使用原廠家提供的試劑、校準(zhǔn)品和儀器，即所謂的“封閉系統(tǒng)”。 這類系統(tǒng)的測(cè)定參數(shù)固化在儀器中，除由于批號(hào)改變需要更改校準(zhǔn)的定值外，其他測(cè)定參數(shù)一般勿需更改。 商品

24、試劑帶有與之配套的校準(zhǔn)品，這類商品試劑規(guī)定了不同型號(hào)生化分析儀的測(cè)定參數(shù)，以保證測(cè)定結(jié)果的量值溯源。 這一類測(cè)定系統(tǒng)稱為“開(kāi)放的配套系統(tǒng)”。為了保證測(cè)定結(jié)果的溯源符合試劑出品商的聲明，必須嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)輸入測(cè)定參數(shù)。 Why?如果校準(zhǔn)品基質(zhì)效應(yīng)小，具有互通性，那：如果校準(zhǔn)品有基質(zhì)效應(yīng)，則需要通過(guò)比對(duì)的方法確定indirect standardisation via human pool seraReferenceReference method human seraRoutine methodReference standardisation of master calibrator(母校

25、正品定值方案 1)Routine method with Master-lot calibrator Reference method / material5 human pool sera master calibratorMaster-lot calibrator is mathematically adjustedvia the formula y = ax + b so that slope (a) = 1 and intercept (b) = 0indirect standardisation via human pool seraSales calibratorMaster ca

26、libratorRoutine method concentration cRoutine method absorbance AValue assignment in calibrator sales lotsThe sales lots are assigned as unknown samples with the master lot calibrator on analyzer with the routine method主（母）校準(zhǔn)品賦值兩條途徑 使用人混合血清，通過(guò)與參考方法的方法學(xué)比較的間接校準(zhǔn)。使用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn) (參考物質(zhì) 如. NIST)的直接校準(zhǔn)。picture place

27、holder 用于對(duì)商品校準(zhǔn)品和控制品的賦值。 源于常規(guī)產(chǎn)品的一個(gè)生產(chǎn)批號(hào)，與商品校準(zhǔn)品具有相同基質(zhì)。 儲(chǔ)存于-80穩(wěn)定約2年。工廠母校準(zhǔn)品（Master Calibrator）又：主校準(zhǔn)品小結(jié)：必須嚴(yán)格按照廠家提出的要求，正確輸入測(cè)定參數(shù)；與特定系統(tǒng)配套的校準(zhǔn)品不可用于其它測(cè)定系統(tǒng)。否則，會(huì)影響到測(cè)定的準(zhǔn)確性。 測(cè)試項(xiàng)目參數(shù)有很多，根據(jù)功能可以將其分為三個(gè)部分 檢測(cè)參數(shù) 校準(zhǔn)參數(shù) 監(jiān)測(cè)性參數(shù) 一、分析檢測(cè)參數(shù) 分析檢測(cè)參數(shù)是指項(xiàng)目分析應(yīng)具備的基本參數(shù)，包括被分析項(xiàng)目：名稱單位檢測(cè)方法主/副波長(zhǎng)反應(yīng)方向試劑量和樣品量反應(yīng)時(shí)間和計(jì)時(shí)時(shí)間1被分析項(xiàng)目名稱 項(xiàng)目名稱常以項(xiàng)目的英文縮寫(xiě)來(lái)表示 ALT

28、PchE DBil Ua TBA AST Glu TC Urea ALP HbA1C TG SCr GGT Alb HDL-C CCr LDH TP LDL-C hs-CRP CK preAlb ApoAI ASO Amylase TBil ApoB AF Ref to Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry2.單位(Unit) 臨床化學(xué)檢驗(yàn)中的計(jì)量單位應(yīng)為法定計(jì)量單位。 離子如鉀、鈉、氯、總碳酸氫鹽以及含量較大的代謝物如葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、尿素、L-乳酸、-羥基丁酸的計(jì)量單位為mmol/L.對(duì)于含量相對(duì)較低的代謝物，如尿酸、膽汁酸等，其計(jì)量單

29、位為mol/L 。 1979年國(guó)際生化學(xué)會(huì)為使酶活性單位與國(guó)際單位制（SI)相一致，規(guī)定1個(gè)催量的每單位為：規(guī)定的條件下，1秒鐘轉(zhuǎn)化的1mol底物的酶量。 酶的計(jì)量單位為“katal”(符號(hào)kat)，含量以Kat/L表示。由于katal/L單位較大，臨床仍以U/L表示，前者轉(zhuǎn)化為后者需乘以。1 U : umol/min1kat:mol/s1kat=16.67 U1U=1umol/min =(1/1000)/(1/60) mol/s1kal=(1/60)/(1/1000) U 對(duì)于蛋白，包括總蛋白、白蛋白以及其他體液中的特定蛋白的濃度單位根據(jù)含量的大小以g/L或mg/L等單位表示。2. 反應(yīng)溫度

30、選擇 IFCC推薦的酶催化活性濃度測(cè)定溫度為37。 臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室所做其他項(xiàng)目，如血糖、血脂等也都用37測(cè)定。 1979年，IFCC制定了酶活性測(cè)定的總則，提出酶測(cè)定的條件，如底物濃度、pH、緩沖液種類和濃度、輔酶和輔因子以及測(cè)定的延滯期、測(cè)定酶活性的時(shí)間間隔等，應(yīng)控制在最適條件下，以保證酶具有最大的催化活性。此后其陸續(xù)發(fā)布了AST、ALT、LDH、CK、GGT、ALP、AMY等酶在30測(cè)定參考方法; IFCC第一批發(fā)布的酶測(cè)定參考方法規(guī)定酶反應(yīng)溫度為30，是因?yàn)榻饘冁壍娜埸c(diǎn)為29.9容易標(biāo)化。但在實(shí)際工作中，當(dāng)室溫超過(guò)25時(shí)，生化分析儀控制酶反應(yīng)溫度有困難。 2002年又重新發(fā)布了37新的測(cè)

31、定參考方法（見(jiàn)表1）。 3. 波長(zhǎng)選擇單波長(zhǎng) 多選在指示物最大吸收波長(zhǎng)處此時(shí)檢測(cè)具有最高的靈敏度和最好的穩(wěn)定性。雙波長(zhǎng) 由于生化分析儀多采用光電二極管陣列檢測(cè)，很容易做雙波長(zhǎng)檢測(cè)。 雙波長(zhǎng)檢測(cè)的原理是同時(shí)檢測(cè)兩個(gè)波長(zhǎng)下的吸光度，即用主波長(zhǎng)的吸光度減去副波長(zhǎng)的吸光度來(lái)計(jì)算待測(cè)物的含量。 第二波長(zhǎng)，即副波長(zhǎng)設(shè)置的主要作用來(lái)補(bǔ)償發(fā)光燈每次閃動(dòng)給結(jié)果造成的差異。副波長(zhǎng)的選擇原則： 副波長(zhǎng)應(yīng)趨近于主波長(zhǎng)，但吸光度應(yīng)為“0”。 如干擾物（內(nèi)源性色源，如溶血、乳糜）在主波長(zhǎng)和副波長(zhǎng)處吸收量相同，那么副波長(zhǎng)的設(shè)置就可以有效地減少干擾物造成的偏差。 副波長(zhǎng)如果設(shè)置的不合適，會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)偏差。 例如，以

32、NADH為指示物的測(cè)定項(xiàng)目，選擇340nm為測(cè)定波長(zhǎng)，副波長(zhǎng)應(yīng)選在400nm左右合適，如選在380nm，因?yàn)?80nm處NADH具有吸收，會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。染料結(jié)合法來(lái)測(cè)定某些物質(zhì)的含量； 很多染料在可見(jiàn)區(qū)就有吸收，此時(shí)應(yīng)觀察不同濃度待測(cè)物與染料結(jié)合后是否有等吸收的波長(zhǎng)，如有，則應(yīng)選擇等吸收處作為測(cè)定的第二波長(zhǎng)。4. 測(cè)定方法與讀點(diǎn)時(shí)間的選擇 （1）終點(diǎn)法： 一定反應(yīng)條件下反應(yīng)達(dá)到平衡，反應(yīng)液的吸光度不再增加(或降低)，吸光度的增加(或降低)與被測(cè)定物的濃度成正比。 應(yīng)用終點(diǎn)法測(cè)定的項(xiàng)目有血清總蛋白、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸、總膽固醇、甘油三酯、總膽紅素、結(jié)合膽紅素、高密度脂蛋白-膽固醇、

33、鐵、鈣、鎂等。 這類測(cè)定檢測(cè)的波長(zhǎng)一般都在可見(jiàn)光區(qū)，受樣本色源的影響小。 終點(diǎn)測(cè)定法是最常用的分析法。優(yōu)點(diǎn)是吸光度信號(hào)變化大，吸光度穩(wěn)定，對(duì)孵浴溫度的精度、時(shí)間等的要求不高，所以重復(fù)性好、精密度高。 對(duì)于用酶作為催化劑來(lái)檢測(cè)代謝物的測(cè)定，反應(yīng)的級(jí)別為一級(jí)，反應(yīng)體系中各組分的含量均較大，反應(yīng)達(dá)到平衡的時(shí)間一般為2-3min。如反應(yīng)達(dá)到平衡的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，說(shuō)明試劑的質(zhì)量不高或試劑失效。 對(duì)于化學(xué)測(cè)定方法，反應(yīng)一般比較迅速，一般在反應(yīng)后1-2min反應(yīng)就可以達(dá)到平衡。根據(jù)監(jiān)測(cè)讀點(diǎn)的不同，終點(diǎn)法還可以分為：一點(diǎn)終點(diǎn)法：生物樣品與相應(yīng)的試劑在反應(yīng)系統(tǒng)（反應(yīng)杯）內(nèi)充分混合，在一定溫度下，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的反應(yīng)，通

34、過(guò)比色系統(tǒng)測(cè)得反應(yīng)平衡后在特定的波長(zhǎng)下吸光度值，讀取的吸光度值由微機(jī)系統(tǒng)處理并計(jì)算測(cè)定結(jié)果。兩點(diǎn)終點(diǎn)法：生物樣品與所用雙試劑中試劑1充分混合，在一定溫度下孵浴一定時(shí)間時(shí)，在特定波長(zhǎng)下，讀取吸光度值，然后加入啟動(dòng)反應(yīng)試劑啟動(dòng)主反應(yīng)，在反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)，第二次讀取吸光度值。兩次吸光度差值由微機(jī)系統(tǒng)處理并計(jì)算測(cè)定結(jié)果。 兩點(diǎn)終點(diǎn)法的優(yōu)點(diǎn)是可以減低樣本空白對(duì)測(cè)定的影響。 但由于第一試劑的組成（如pH等）和第二試劑不同，所以兩點(diǎn)終點(diǎn)法對(duì)于內(nèi)源性色原對(duì)測(cè)定的干擾的排除可能是有限的。要確認(rèn)色原物質(zhì)對(duì)測(cè)定影響的程度仍然必須做干擾實(shí)驗(yàn)。 （2）一級(jí)動(dòng)力學(xué)法： 動(dòng)力學(xué)法的概念是與終點(diǎn)法相對(duì)而言的，測(cè)定的是反應(yīng)動(dòng)態(tài)過(guò)

35、程中的吸光度的變化。 一級(jí)動(dòng)力學(xué)法測(cè)定的是反應(yīng)動(dòng)態(tài)過(guò)程中吸光度的變化，該變化與待測(cè)物的濃度成正比。 （3）零級(jí)動(dòng)力學(xué)法 指反應(yīng)速度與被測(cè)定物濃度的零次方成正比，與被測(cè)定物濃度無(wú)關(guān)，在反應(yīng)時(shí)間內(nèi)，測(cè)定溶液在某一波長(zhǎng)下吸光度均勻地減小或增加，減小或增加的速度與被測(cè)物的活性或濃度成正比。 零級(jí)動(dòng)力學(xué)法即通常所說(shuō)的速率法，也被稱為連續(xù)監(jiān)測(cè)法，主要用于酶活性的測(cè)定。如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、堿性磷酸酶、-谷氨氨?；D(zhuǎn)移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。 SKm1km 50% Vmax2km 66%3km 75%4Km 80%10km 90%11km12km酶催化活力濃度，應(yīng)采用配套的校準(zhǔn)

36、物校正5.反應(yīng)方向 反應(yīng)方向分正向（Positive 或 Increase）和負(fù)向（Negative或Decrease）兩種，吸光度增加者為正向反應(yīng)，下降者為負(fù)向反應(yīng)。 6.試劑量(Reagent volume) 樣品量（Sample volume） 1l起步 精確到0.1l 試劑的劑型可以分為單試劑、雙試劑，加試劑的過(guò)程則相應(yīng)的有單試劑方式、雙試劑方式。 目前生化分析儀大多采用雙試劑分析，它可以提高試劑的穩(wěn)定性和抗干擾性。 對(duì)于不同的機(jī)型，第一試劑量、第二試劑量、第三試劑量和總反應(yīng)量有不同的取量范圍，在設(shè)置取量參數(shù)時(shí)，應(yīng)注意體積的上限和下限。 樣品體積與反應(yīng)液總體積的比值是方法學(xué)基本參數(shù)；

37、樣品占總體積比例應(yīng)在10以下。含量低、吸光度低的被測(cè)吸光物質(zhì)，樣品用量較大； 而方法靈敏、吸光度高的實(shí)驗(yàn)方法，樣品用量較??； 樣品試劑比增大，樣品內(nèi)源性干擾增加，方法特異性會(huì)下降；比例減少，檢測(cè)信號(hào)偏低，信噪比(噪音信號(hào))增大，精密度下降，偶然誤差會(huì)增加。 樣本/試劑用量及其比，應(yīng)以試劑說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，不宜輕易改動(dòng)。7. 反應(yīng)時(shí)間（Reaction time） 計(jì)時(shí)時(shí)間（Read time） 反應(yīng)時(shí)間:指分析儀一個(gè)檢測(cè)周期的時(shí)間，一般小于10分鐘。多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀可以連續(xù)監(jiān)測(cè)整個(gè)反應(yīng)周期。 計(jì)時(shí)時(shí)間:讀取該時(shí)間段吸光度的變化，計(jì)算樣本濃度。 終點(diǎn)法動(dòng)力學(xué)法 一級(jí)反應(yīng) 延遲期 一級(jí)反應(yīng)期 零級(jí) 延遲期 零級(jí)反應(yīng)線性期 吸光度 A時(shí)間 T試劑空白界限底物耗盡界限動(dòng)力學(xué)法測(cè)定反應(yīng)進(jìn)程曲線8.底物消耗 在連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定酶活性或代謝物時(shí)，