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1、第八章臨床分子生物學檢驗一、選擇題 TOC o 1-5 h z 1.下列核酸在波長為 260時,光吸收強度大小排列正確的是:()A . GATCBo ATGC. CGTAD. GCAT.鑒別靶分子的雜交是:()A . B.C. D.斑點雜交.在做檢測時,對全血抗凝抗凝劑最好選用:()A.肝素 B. 2C. 2 D,草酸鉀. 一般分子中的堿基數(shù)組成規(guī)律,下列說法錯誤的是:()A . A 二 C, G=TB .=C不同中堿基組成不相同D .同一個不同組織細胞中堿基組成相同.核酸分子儲存和傳遞遺彳劫言息是通過:()A .核昔的結(jié)構(gòu)B.磷酸二酯鍵C .堿基順序D 核甘酸的結(jié)構(gòu).分子生物學對醫(yī)學的發(fā)展已
2、經(jīng)起到越來越大的作用,許多分子生物學的發(fā)現(xiàn)對 分子生物學的發(fā)展都起到里程碑的作用,基因就是由轉(zhuǎn)化功能的所組成,最早 的發(fā)現(xiàn)者是: ()A .B. A1C.D.基因擴增檢測方法也有檢測的靈敏度,一般適時熒光定量的檢測下限是:()A 103 拷貝/B. 104 拷貝/mlC. 102 拷貝/D. 105 拷貝/ml.和徹底水解后的產(chǎn)物為:()A .核糖相同,部分堿基不同.核糖不同,堿基相同C.核糖相同,堿基相同D.核糖不同,部分堿基不同.下列堿基僅存在于中而不存在于中的是:()A.鳥喋吟 B.尿喀咤C.胸腺喀咤 D.腺喋吟二填空題.核酸的最大紫外吸收波長在 ,蛋白質(zhì)的最大吸收波長在 .雙鏈中的堿基
3、對有 、。.根據(jù)分子和結(jié)構(gòu)不同,可以分為.核酸變性過程中,紫外光吸收達到最大值50%時溫度稱為 。其主要與核酸的 最終含量有關。.水解后主要產(chǎn)物是 、。.核酸(和)分子除含有 、四種元素外,還 含有大量的 元素。.技術(shù)是當今分子生物學使用最多的技術(shù)之一,它一般都有 , , 三個基本反應步驟構(gòu)成。.核酸水解后首先得到核甘酸,核甘酸可以繼續(xù)水解得到 和 。.通用遺傳密碼中代表終止密碼的三種密碼是 、和。 TOC o 1-5 h z .方法擴增片段是,在反應中除了用該片段作為模板外,尚需加人、和。.在分子中還有大量的磷 (P), P的含量大約為 。三是非題.核酸變性時,堿基對之間的氫鍵斷開,堆積力也
4、受到破壞,共價鍵斷裂。 ().核酸雜交原理就是根據(jù)核酸分子間互補。().在中性或堿性溶液中,核酸主要帶正電荷。().核酸相對分子質(zhì)量很大,因此核酸溶液具有很大黏性。().分子雜交可以發(fā)生在任何只有互補核甘酸順序兩條單股核酸單鏈之間,如/、 /、/等。().核酸水解后首先得到核甘酸,核甘酸可以繼續(xù)水解得到核昔和磷酸。().在高分子溶液中一般球形分子比線形分子的具有較大的黏度。().核酸的最大吸收波長在 280 ,而蛋白質(zhì)的最大吸收波長在 260。().酚一氯仿提取法是我們在提取時所用的經(jīng)典方法,現(xiàn)在仍然被許多實驗室所采 用。 ().組成的四種堿基是腺喋吟 (A)、鳥喋吟(G)、胞喀咤(C)、胸腺
5、喀咤(T)。().技術(shù)是以或為模板進行核酸的體外擴增技術(shù)。().技術(shù)是現(xiàn)在常用的一種擴增技術(shù),它的基本步驟的順序是退火、變性、延伸。().免疫印演技術(shù)及是一種印漬技術(shù)和抗原抗.在臨床基因擴增檢驗診斷實驗室工作的實驗操作人員必須經(jīng)過業(yè)務培訓并取得 上崗證書。 ().無論是還是,在多核甘酸鏈內(nèi)既有酸性的磷酸基又有堿性的含氮雜環(huán)堿,因此核酸是兩性電解質(zhì)。().在實驗中,退火是指在極端的和受熱條件下,核酸分子中的氫鍵斷裂,螺旋解開的一個過程。().臨床基因擴增診斷實驗室的設置必須遵循一定的原則,而這些基本原則制定的主要依據(jù)就是使建立的基因擴增診斷實驗室結(jié)果的準確性能夠得到保證,能忠實的反映被檢的,臨床
6、樣本的真實情況。( )四討論題.簡述核酸探針及其應用。.簡述技術(shù)的基本原理及基本反應步驟。.什么叫人類基因組計劃,它對醫(yī)學上的研究具有哪些意義?.簡述核酸分子雜交的基本原理、類別和應用。.簡述基因診斷檢測的臨床應用o.核酸產(chǎn)物主要用哪些方法檢測,它們分別用在哪些情況下?.簡述芯片技術(shù)的應用。參考答案選擇題1 B2 B3 C 4 A 5 C 6 D 7 A D9 B填空題 260280. A = T G = C4解鏈溫度磷酸脫氧核糖堿基C H O N P7變性退火延伸8戊糖含氮堿基耐熱酶 引物. 9% 10%是非題1. X 2, V 3. X 4.,5.,6.,7. X8,X 9. V 10.
7、X 11. V 12. XX 14. V 15. V 16. X 17. V討論題.核酸探針的應用主要是:一小段已知序列的多聚核甘酸用同位素、生物素、 和熒光染料標記它的末端或者全鏈, 我們就把這一段多聚核苷酸序列稱為探針o 可以用于檢測特異或序列片段, 可以用于遺傳病的基因診斷, 用于限制性片段長度多態(tài)性作疾病的相 關分析,法醫(yī)學上的性別分析和性別鑒定。 (1) 的基本原理是以需要擴增的為模板,以一對分別與模板的 5 ,和 3,末端相互補的寡核苷酸片段為引物, 在聚合酶的作用下, 按照半保留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的合成,重復這一過程,即可使目的片段得到擴增。(2)的基本步驟包括:
8、變性:將反應系統(tǒng)加熱至95,使模板全部變性變成單鏈。退火:將溫度下降至適當溫度,使引物與模板退火結(jié)合。延伸:將溫度升至72,聚合酶以底物催化的合成反應。上述三個步驟稱為一個循環(huán),這樣的循環(huán)重復2530次,就可以得到大量的目標。.人類基因組計劃是指:1991年,由美國眾議院批準的一個1.5年的人類基因組研究計劃,花費金額約為 30 億美元,該項目很快得到各國科學家和各國政府的所重視。1994 年,我國也加入到其中的相關研究項目,人類基因組分析的主要內(nèi)容包括:遺傳圖分析、物理圖分析、轉(zhuǎn)錄圖分析、基因組序列測定等。人類基因組計劃的實施大大促進了醫(yī)學的發(fā)展, 的遺傳作圖和物理作圖對于認識疾病相關基因具有巨大的推動作用。 遺傳性疾病的基因定位,尤其是對多基因位點將可以進行全基因組的定位掃描,使得確定致病基因的工作更為容易。.核酸分子雜交:單鏈的核酸分子在合適的溫度和離子強度下,通過堿基互補形成雙鏈雜交體的一類技術(shù)。核酸分子雜交分為液相雜交、固相雜交、原位雜交、基因芯片技術(shù)。 主要應用用于未知的檢測, 用于檢測未知, 原位雜交用于組織和細胞中的基因定 位。5基因診斷檢測:主要應用于感染病原的檢測、遺傳病的診斷、組織配型及腫瘤 的早期診斷等。.核酸產(chǎn)物的主要的檢測方法有:凝膠電泳分析法:主要用于產(chǎn)物的檢測。 微孔板夾心雜交法( )本法可避免電泳和雜交的繁雜步
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