藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課

1、試驗(yàn)七、抗精神分裂癥、 抗驚厥藥物作用研究熱情似火的PPT tomato實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）學(xué)習(xí)動(dòng)物基本操作技能小鼠的捉拿、固定及不同給藥途徑的給藥方法。 （2）掌握藥效學(xué)研究試驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則。 （3）學(xué)習(xí)抗精神分裂癥、抗驚厥藥物作用研究方法。 （4）利用小鼠電刺激激怒實(shí)驗(yàn)，小鼠驚厥實(shí)驗(yàn)觀察未知化合物或混合物的藥物作用。（1）小鼠的捉拿與固定 （2）給藥途徑一、實(shí)驗(yàn)基本實(shí)驗(yàn)操作技能實(shí)驗(yàn)內(nèi)容右手提起鼠尾, 左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠耳及頭

2、部皮膚而固定。注意事項(xiàng)：小鼠捉拿與固定方法注意事項(xiàng)：1. 取背部及后腿皮下，注射時(shí)用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入，固定后即進(jìn)行注射。 皮下注射給藥途徑注意事項(xiàng)： 1、針頭刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破內(nèi)臟。針頭與腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。 2、使用針頭不宜太粗，避免藥液注射后從注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。 腹腔注射給藥途徑注意事項(xiàng)：1.用左手拇指和食指抓住鼠兩耳和頭部皮膚，其他三指抓住背部皮膚，將鼠抓持在手掌內(nèi)，固定好動(dòng)物，頭部和頸部保持很平,右手取注射器進(jìn)行灌胃。2.灌時(shí)針頭沿鼠口角通過食管進(jìn)入胃內(nèi)。灌時(shí)如很通暢，則表示針頭已進(jìn)入胃內(nèi)；如

3、動(dòng)物有嘔吐動(dòng)物或強(qiáng)烈掙扎，必須拔出后按上述方法重新操作。決不可進(jìn)針不順硬向里插。 灌胃給藥給藥途徑注意事項(xiàng)：1.操作時(shí)先將動(dòng)物固定在暴露尾部的鼠尾固定器中，使尾巴露出。尾部用4550的溫水浸潤半分鐘或用75%酒精反復(fù)擦拭，使血管擴(kuò)張，并可使表皮角質(zhì)軟化。2.采用右手持注射器連4(1/2)號(hào)細(xì)針頭，對(duì)準(zhǔn)血管中央以小于30角進(jìn)針，一般盡量選用尾靜脈下1/3處，約距尾尖2-3厘米。當(dāng)針頭在尾靜脈平行推進(jìn)少許后，左手的三指將針頭和鼠尾一起捏住并固定。先緩注少量藥液，如無阻力，表示針頭已進(jìn)入靜脈，可繼續(xù)注入。如出現(xiàn)白色皮丘說明未刺入血管，應(yīng)拔出針頭重新穿刺。注射完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲以止血。靜脈給藥給

4、藥途徑二、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則 一、對(duì)照原則 1. 陰性對(duì)照 2. 陽性對(duì)照 3. 模型對(duì)照 4. 配對(duì)對(duì)照 5. 組間對(duì)照 6. 歷史對(duì)照二、隨機(jī)原則 三、重復(fù)原則 1.重現(xiàn)性 2.重復(fù)數(shù)四、量效關(guān) 系原則五、單盲和雙 盲原則教學(xué)分組在一個(gè)教學(xué)單元內(nèi)，根據(jù)學(xué)生人數(shù)，將學(xué)生分為8組，每組25人，分為上、下兩個(gè)班。試驗(yàn)方案受試樣品：受試藥A,B。上半班采用受試藥A試驗(yàn)，下半班采用受試藥B試驗(yàn)。建議樣品：A-洋金花水提取物；B-洋金花醇提取物。教學(xué)實(shí)驗(yàn)安排及內(nèi)容試驗(yàn)材料0.08%氯丙嗪，5%可拉明，1%苯巴比妥鈉，生理鹽水。 小白鼠1822g，雄性，非同籠喂養(yǎng)。 動(dòng)物試劑、藥品A藥、B藥。建議受

5、試藥A-洋金花水提物；B-洋金花醇提物。受試物YSD-4（或5）型藥理生理多用儀及附件激怒盒，萬用電表，小動(dòng)物電子秤，鼠籠，1ml注射器，5號(hào)針頭試驗(yàn)器材試驗(yàn)一電刺激小鼠激怒試驗(yàn) 試驗(yàn)二抗驚厥試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容原理： 以弱電流或低電壓刺激鼠足部，引 起鼠間對(duì)峙、格斗和互咬等激怒反應(yīng)，以此為指標(biāo)觀察受試物的對(duì)狂躁動(dòng)物的鎮(zhèn)靜作用。 以氯丙嗪為陽性對(duì)照藥、生理鹽水為陰性對(duì)照藥。1 電刺激小白鼠激怒試驗(yàn)篩選指標(biāo)：取異籠喂養(yǎng)的小鼠各一只，稱重后，放入附件激怒盒的導(dǎo)電銅絲板上，把蓋子蓋上后，將電源打開，調(diào)節(jié)交流電輸出旋鈕，直至小鼠出現(xiàn)激怒反應(yīng)，刺激電壓一般為30V左右。激怒反應(yīng)表現(xiàn)為：兩鼠對(duì)立、前肢離地、對(duì)峙

6、、互相嘶咬等，若刺激1min以上仍未出現(xiàn)者棄之不用。以上方法挑選有激怒反應(yīng)的合格小鼠四對(duì)，編號(hào)。并記錄刺激電壓值。 小鼠篩選方法：實(shí)驗(yàn)步驟第一對(duì)小鼠第二對(duì)小鼠第三對(duì)小鼠第四對(duì)小鼠生理鹽水 0.08%氯丙嗪 4mg/ml(按原生藥含量)A藥或B藥高濃度 2mg/ml(按原生藥含量)A藥或B藥低濃度 給藥：腹腔注射給藥體積0.1ml/10g 給藥20min后，先用萬用電表調(diào)節(jié)刺激輸出電壓至給藥前引起激怒反應(yīng)的閾電壓，斷開電源，將一對(duì)小鼠置于導(dǎo)電銅絲板上，再打開電源，刺激1min觀察兩對(duì)小鼠給藥前后反應(yīng)的差異。造急性模型原理： 可拉明為中樞興奮藥，過量可引起驚厥。本試驗(yàn)以可拉明為驚厥模型，觀察受試藥

7、物的抗驚厥作用。 戊巴比妥鈉為長效抗驚厥藥。本實(shí)驗(yàn)以之為陽性藥。2 抗驚厥試驗(yàn) 1%苯巴比妥溶液 生理鹽水 受試物高劑量組， 4mg/mlA或B溶液受試物低劑量組 2mg/ml A或B溶液陰性對(duì)照組陽性對(duì)照組受試藥物組給藥方式：預(yù)防 i.p.給藥給藥體積均為0.1ml/10g實(shí)驗(yàn)步驟 造模方法：給藥20min后 皮下注射5%可拉明（0.1ml/10gb.w.） 觀察并記錄小鼠反應(yīng)和死亡情況。表1 受試物對(duì)電刺激小白鼠激怒作用的影響原始記錄表2 受試物對(duì)可拉明致小鼠驚厥作用的影響原始記錄按上下班統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，計(jì)算陽性率或死亡率，并進(jìn)行顯著性差異比較。數(shù)據(jù)用表格表示，示范表格如下：結(jié)果處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表3 受試物對(duì)電刺激小鼠激怒作用的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表4 受試物對(duì)可拉明致小鼠驚厥作用的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果1刺激電壓必須由小到大，過低不能引起激怒，過高會(huì) 引起小鼠逃避。2. 且每次刺激完后，應(yīng)將刺激電壓調(diào)至最小，并將小鼠放 回鼠籠，以免在銅絲板上排便影響導(dǎo)電。3小白鼠驚厥前兆為豎尾、洗臉等