細(xì)菌-酵母-霉菌的形態(tài)與菌落特征觀察

1、實(shí)驗(yàn)四、細(xì)菌，酵母，霉菌的形態(tài)和菌落特征觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募?xì)菌：觀察食品中常見細(xì)菌的平板菌落特征，了解細(xì)菌的菌落在細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢泄上的重要性酵母菌：1.學(xué)習(xí)并掌握觀察酵母菌的形態(tài)及出芽繁殖的基本方式學(xué)習(xí)區(qū)分酵母的死活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法觀察酵母的平板菌落特征，了解酵母菌的菌落在貞菌形態(tài)學(xué)檢左上的重要性霉菌：1.學(xué)習(xí)并掌握觀察四類常見霊菌形態(tài)特征的基本方法掌握青靈，曲霉的小室栽片培養(yǎng)法，以便更好地觀察其個(gè)體形態(tài)觀察靈菌的平板菌落特征，了解霉菌的菌落特征在幺攵狀真菌形態(tài)學(xué)檢龍上的重要性二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)菌：將單個(gè)微生物細(xì)胞或多個(gè)同種細(xì)胞接種于固體壇養(yǎng)基表而，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)，以母細(xì)胞為中 心，在有限空間中大量繁殖

2、，擴(kuò)展成一堆肉眼可見的有一泄形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞群落，成為菌落。若將某一 純種細(xì)胞大量密集接種于固體培養(yǎng)基表而，菌體生長的各菌落連接成片，稱為菌苔。各種細(xì)菌在平板上生 成的菌落均具有一左特征，對(duì)細(xì)菌的分類，鑒圧有重要意義，菌落主要用于微生物的分離，純化，鑒泄， 計(jì)數(shù)等研究和選種，育種等實(shí)際工作中。酵母菌：以出芽繁殖為主要特征的不運(yùn)動(dòng)的單細(xì)胞貞核微生物，其細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)有明顯分化，個(gè) 體大小比常見細(xì)菌大幾倍甚至幾十倍，酵母菌的形態(tài)通常有球狀，卵圓狀，橢圓狀，柱狀，或香腸狀等多 種。酵母菌的無性繁殖主要有芽殖，裂殖和產(chǎn)生擲抱子和厚垣砲子。有性繁殖通過結(jié)合產(chǎn)生子囊抱子。酵 母菌的母細(xì)胞在一系列的芽殖后若

3、長大的子細(xì)胞和母細(xì)胞不分離，就會(huì)形成藕節(jié)狀的假菌絲，稱假絲酵弘美藍(lán)是一種無毒的弱氧化劑染料，英氧化型呈藍(lán)色，還原型呈無色。用美藍(lán)對(duì)酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色 時(shí)，由于細(xì)胞的新陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。 因此，具有還原能力的酵母活細(xì)胞為無色,而死細(xì)胞或代謝作用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色,故可 用美藍(lán)鑒別細(xì)胞的死活。但應(yīng)注意美藍(lán)的濃度不宜過高（一般以0.05%濃度為宜），染色時(shí)間不宜過長，否 則對(duì)細(xì)胞活性有影響。酵母菌在固體培養(yǎng)基上的菌落比細(xì)菌較大而厚（凸起）。英表而光滑而濕潤（有的酵母菌老齡時(shí)成干 燥而皺縮狀），質(zhì)地柔軟而黏稠，容易用接種環(huán)挑起，

4、不透明，顏色多為乳白色或奶油色，少數(shù)為紅色。 菌落的顏色、光澤、質(zhì)地、表而和邊緣形狀等特征都是酵母菌分類、鑒左的依據(jù)。篷菌：有復(fù)雜的菌絲體組成，分為基內(nèi)菌絲或營養(yǎng)菌絲，氣生菌絲或繁殖菌絲，有范志菌絲產(chǎn)生砲 子。觀察霉菌的形態(tài)常有三種方法：乳酸石炭酸棉藍(lán)浸片法、小室載玻片法、玻璃紙培養(yǎng)法。乳酸石炭酸棉藍(lán)浸片法，是將培養(yǎng)物置于乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液中，制成畫菌制片。由于霉菌菌絲較 粗大，置于水中觀察時(shí)，菌絲容易收縮變形，故常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液制片使細(xì)胞不會(huì)變形，染液的 藍(lán)色能增強(qiáng)反差，并具有防腐、防干燥、防止抱子飛散作用。但用接種針（或小攝子）挑取菌絲體時(shí)，菌 體各部分結(jié)構(gòu)在制片時(shí)易被破壞，不利

5、于觀察其完整形態(tài)。蘇菌在固體培養(yǎng)基上生長成棉絮狀（毛廉），蜘蛛網(wǎng)狀（根簽），絨毛狀（曲霊）和地毯狀（青霍） 的菌落。其繁殖方式多為無性繁殖和少數(shù)有性繁殖霍菌的菌絲體及其菌落形態(tài)特征是賽菌分類，鑒定的重 要依據(jù)。三、實(shí)驗(yàn)材料菌種：大腸桿菌、酵母菌、根霊、青廉、黑曲蘇。試劑：0.1%美藍(lán)染色液、乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液。儀器和英他用具：光學(xué)顯微鏡、接種環(huán)、灑精燈、載玻片、蓋玻片、銀子。四、實(shí)驗(yàn)步驟細(xì)菌的菌落特征觀察。（1）酵母菌死活細(xì)胞的鑒別：在載玻片中央加1滴美藍(lán)染色液，然后按無菌操作以接種環(huán)挑取少 量酵母菌苔和染色液混勻，染色23min。染色液不宜過多或過少，否則在加蓋玻片時(shí)菌液溢出或有氣泡。 列

6、取一淸潔蓋玻片，將一邊和菌液接觸，以45度角緩慢覆蓋菌液。將制片先用低倍鏡，再用髙倍鏡觀察， 區(qū)分死細(xì)胞（藍(lán)色）、活細(xì)胞（無色）、老齡細(xì)胞（淡藍(lán)色）。（2）酵母菌的菌落特征觀察。（1）霊菌的形態(tài)觀察：乳酸石炭酸棉藍(lán)浸片法。在載玻片上滴1滴乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液，用接 種環(huán)（或銀子）從霊菌菌落邊緣挑取少量已產(chǎn)砲子的菌絲，置于載玻片上的染液中，小心地將菌絲分散開。 蓋上蓋玻片（勿壓入氣泡和移動(dòng)蓋玻片，以免影響觀察）,宜于低倍鏡和高倍鏡下觀察三類缶菌內(nèi)容如下:根霊：用低倍鏡觀察抱子囊梗、囊軸等，用髙倍鏡觀察抱子囊抱子的形狀、大小。曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生抱子著生位巻，辨認(rèn)分生抱子梗、頂囊

7、、小梗和分生 抱子。青雷：在髙倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生抱子梗、副技、小梗和分生抱子的形狀等。（2）総菌的菌落特征觀察。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.大腸桿菌的菌落特征觀察：小菌落（直徑l-2mm）,菌落邊緣整齊，圓形，表而有光澤、濕潤、光 滑、呈灰白色。2.（1）酵母菌死活細(xì)胞的鑒別：無色為活細(xì)胞，藍(lán)色為死細(xì)胞。CV 二 v （髙倍鏡下的酵母菌）（2）酵母菌的菌落特征觀察：小菌落（直徑l-2mm）,菌落表而光滑、濕潤、粘稠，易挑起，菌落質(zhì) 地均勻，正反面和邊緣.中央部位的顏色一致。3. （1） 菌的形態(tài)觀察。 根霉：可觀察到抱子麥梗、麥軸。（低倍鏡下（髙倍鏡下） 曲霉：可觀察到分生砲子梗、頂囊.分生抱子

8、。 青霉：可觀察到分生抱子梗、小梗等。（2）監(jiān)菌的菌落特征觀察。根霉：蔓延生長.充滿整個(gè)培養(yǎng)基，白色蜘蛛網(wǎng)狀。（根霉在PDA培養(yǎng)基上）黑曲靈：局限生長，直徑23cm結(jié)構(gòu)疏松，絨毛狀，邊緣生長稀疏，呈白色，中央部分顏色暗綠，反而 白色。（黑曲霉在孟加拉紅培養(yǎng)基上）青霉：局限生長，直徑lcm左右，菌落絨狀、厚實(shí)，中央呈注灰綠色，反而暗黃色。六、思考題1 你主要根拯哪些形態(tài)特征來區(qū)分根靈和毛霉，青霉和曲芻？列表比較它們?cè)谛螒B(tài)結(jié)構(gòu)上的異同。菌落特征菌體形態(tài)特征菌落顏色菌落大小菌落組織形狀菌落表而形狀根霉白色遍布整個(gè)培養(yǎng)基蜘蛛網(wǎng)狀疏松的菌絲有假根，有匍匐菌絲,有囊托,無囊領(lǐng)毛霉白色大菌落棉絮狀緊密的菌絲有假根，無匍匐 菌絲,無奏托，有囊領(lǐng)冃毎注灰綠色較小菌落絨狀厚實(shí)分生抱子梗頂 端呈掃帚狀曲霍邊緣呈白色，中央部分顏色暗綠較大絨