初始污染菌回收率方法驗(yàn)證

1、公司代碼文件編號(hào)第1頁(yè)共4頁(yè)類別：編號(hào)部門：頁(yè)碼初始污染菌回收驗(yàn)證方案版次：口新訂口替代:制定人:年月日審批會(huì)簽人：生效日期：年月日公司代碼文件編號(hào)第2頁(yè)共4頁(yè)1驗(yàn)證目的初始污染菌是產(chǎn)品屏障系統(tǒng)表面或內(nèi)的活微生物數(shù)量。初始污染菌回收率用于補(bǔ)償無(wú)法從產(chǎn)品和/或培養(yǎng)基中完全取出的微生物的數(shù)值。也是對(duì)某一特定的技術(shù)從產(chǎn)品上移除和/或培養(yǎng)微生物的能力的測(cè)定值。2適用范圍適用于我公司一次性使用活檢鉗的初始污染菌的檢測(cè)3檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010版附錄微生物限度檢查法ISO11737-1:2006醫(yī)療器械的滅菌微生物學(xué)方法第一部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的測(cè)定GB/T19973-12005醫(yī)療器械的滅菌微生物學(xué)方

2、法第一部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的估計(jì)GB15980-1995一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)4實(shí)驗(yàn)設(shè)備與材料設(shè)備百級(jí)超凈工作臺(tái)、無(wú)菌檢查膜過(guò)濾器、電動(dòng)吸引器、電熱干燥箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌器、電子天平、pH計(jì)、冰箱。培養(yǎng)基及稀釋液營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液、0.1%蛋白胨溶液。其他實(shí)驗(yàn)材料微孔濾膜（孔徑W0.45um,直徑約50mm）、量筒、剪刀、鑷子、吸管、酒精燈、三角燒瓶、試管、培養(yǎng)皿。5實(shí)驗(yàn)程序抽樣。從每個(gè)清洗批次的產(chǎn)品中隨機(jī)抽樣,抽取3件。洗脫在陰性實(shí)驗(yàn)室里以無(wú)菌操作方式將實(shí)驗(yàn)樣品分別浸入裝有已知容量的300ml的0.1%蛋白胨溶液

3、的適當(dāng)容器中,運(yùn)用手工振動(dòng)法洗脫產(chǎn)品上的微生物,用于洗脫產(chǎn)品外表面初始污染菌。接種5.3.1采用薄膜過(guò)濾法，將供試液平均倒入兩個(gè)濾杯中進(jìn)行抽濾，用100ml（每張濾膜每次沖洗量）pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜，每張濾膜沖洗三次，將濾膜（菌面朝上）公司代碼文件編號(hào)第3頁(yè)共4頁(yè)分別置于營(yíng)養(yǎng)瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂平板上培養(yǎng)。將沖洗過(guò)的供試品以上述方法再?zèng)_洗兩次，共三次。再將剩余供試品加入滅菌好融化的50ml營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中作為瓊脂覆蓋。其余每條供試品逐一操作，方法同上。5.3.2陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)：僅使用同一批次滅菌0.1%蛋白胨溶液、pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液過(guò)濾，將濾膜（菌面朝上）分別

4、置于營(yíng)養(yǎng)瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂平板上培養(yǎng)作為陰性對(duì)照。培養(yǎng)溫度依據(jù)2010版中國(guó)藥典中的培養(yǎng)條件要求：細(xì)菌3035f3天，霉菌、酵母菌2328f5天。（必要時(shí)可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至7天）結(jié)果分析回收率二第一次沖洗得到的微生物數(shù)量/沖洗N次得到的微生物總數(shù)量*100%,回收率應(yīng)大于70%。菌數(shù)吏邈,第一件第二件第三件第一次沖洗A1B1C1第二次沖洗A2B2C2第三次沖洗A3B3C3瓊脂覆蓋A4B4C4空白對(duì)照000總共菌落數(shù)A總B總C總第一次沖洗的回收率A1/A總B1/B總C1/C總根據(jù)上述數(shù)據(jù)，計(jì)算出第一次沖洗的回收率的平均數(shù)，以后每一季度監(jiān)測(cè)一次，初始污染菌的菌落報(bào)告，以得到菌落數(shù)/回收率的數(shù)值報(bào)告。檢測(cè)人/日期：復(fù)核人/日期：公司代碼文件編號(hào)第4頁(yè)共4頁(yè)6相關(guān)記錄產(chǎn)品名稱生產(chǎn)批號(hào)型號(hào)規(guī)格抽樣數(shù)量檢驗(yàn)依據(jù)檢驗(yàn)