維生素C含量測(cè)定方法綜述

1、關(guān)于維生素C含量測(cè)定方法綜述第一張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月摘要 目前研究維生素C測(cè)定方法的報(bào)道較多，如滴定法、光度分析法、高效液相色譜法等，各種方法各有特點(diǎn)。特別是高效液相色譜法是近年來(lái)發(fā)展較快的一種方法。本文對(duì)近年來(lái)有關(guān)維生素C的測(cè)定方法進(jìn)行了綜述。第二張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)鍵詞 維生素C 滴定法 光度分析法 高效液相色普法等 第三張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月概述 維生素C是可溶于水的無(wú)色結(jié)晶，是一種分子結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的維生素。維生素C有防治壞血病的功能，所以在醫(yī)藥上常把它叫做抗壞血酸。維生素C能保持巰基酶的活性和谷胱甘肽的還原狀態(tài)，起解毒作用等。其

2、廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑橘等食品中含量尤為豐富。準(zhǔn)確測(cè)定維生素C的含量，對(duì)飲食健康、醫(yī)療保健都具有十分重要的意義。近年來(lái)報(bào)道的測(cè)定方法主要有滴定法、光度法、高效液相色譜法等。第四張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素C的結(jié)構(gòu)式 維生素C：六碳的多羥基內(nèi)酯第五張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月測(cè)定方法滴定法測(cè)定維生素C 分光光度測(cè)定維生素C 高效液相色譜法測(cè)定維生素C 第六張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1 滴定法測(cè)定維生素C 1.1 2，6一二氯靛酚法 1.2 微量滴定法第七張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2

3、,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量其能還原2,6-二氯酚靛酚染料。維生素C具有還原性的烯二醇基，我們通過(guò)氧化還原滴定來(lái)測(cè)定維生素C第八張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2，6-二氯靛酚法 原理2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在酸性介質(zhì)中為紅色，堿性介質(zhì)中為藍(lán)色，與Vc反應(yīng)后，生成無(wú)色的還原型酚亞胺，因此，在酸性條件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液顯玫瑰紅色，即為終點(diǎn)；無(wú)需另加指示劑。第九張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2，6-二氯靛酚法方法取本品適量（約相當(dāng)于Vc50mg），用適量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸試液20ml,再用水稀釋置刻度，搖勻；精密量取

4、稀釋液適量（約相當(dāng)于Vc2mg）置50ml的錐形瓶中,加偏磷酸-醋酸試液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液顯玫瑰紅色,并持續(xù)5s不褪；空白試驗(yàn)：取偏磷酸-醋酸試液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。計(jì)算： (V-V0) F T WW 標(biāo)示量 標(biāo)示量%=反應(yīng)摩爾比100第十張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 維生素C 2,6-二氯酚靛酚 維生素C 2,6-二氯酚靛酚（還原型） （氧化型，粉紅色） （氧化型） （還原型） + + = 2,6-二氯酚靛酚染料的鈉鹽在水溶液中顯藍(lán)色，在酸性溶液中呈紅色，被還原后紅色消失。第十一張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月

5、碘量法原理：由于維生素C分子中的烯二醇基有極強(qiáng)的還原性，能被碘氧化，用碘滴定VCEC6H6O6/C6H8O6=0.18 ,EI2/I-=0.535 終點(diǎn)：淀粉為指示劑，溶液出現(xiàn)穩(wěn)定的藍(lán)色即為終點(diǎn)反應(yīng)式： 第十二張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月碘量法碘的濃度由已知濃度的Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定反應(yīng)式：計(jì)算式：Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%第十三張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月碘量法注意 ！測(cè)定時(shí)：加HAC使溶液呈弱酸性 原因:(1) Vc還原性很強(qiáng)，在空氣中很容易被氧化，在堿性介質(zhì)中更甚(2)I2在堿性介質(zhì)中會(huì)發(fā)生歧化反應(yīng)加HAC可減少VC的副

6、反應(yīng)，避免實(shí)驗(yàn)誤差第十四張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月電位滴定法原理：根據(jù)滴定過(guò)程中電池電動(dòng)勢(shì)的變化來(lái)確定反應(yīng)終點(diǎn).Pt為指示電極，甘汞作參比電極E池E+-E-+E液接電位EI2/I-+k(常數(shù))第十五張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月電位滴定法原理(具體來(lái)說(shuō):) 隨著滴定劑的加入，由于發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，待測(cè)離子濃度將不斷變化；從而指示電極電位發(fā)生相應(yīng)變化；導(dǎo)致電池電動(dòng)勢(shì)發(fā)生相應(yīng)變化；計(jì)量點(diǎn)附近離子濃度發(fā)生突變；引起電位的突變，因此由測(cè)量工作電池電動(dòng)勢(shì)的變化就能確定終點(diǎn)。第十六張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 電位滴定法右圖：電位滴定法基本儀器裝置計(jì)算式：(與碘量法相同)W

7、vc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%優(yōu)點(diǎn)：解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時(shí)無(wú)法指示終點(diǎn)的問(wèn)題第十七張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2 分光光度測(cè)定維生素C2.1 2，4一二硝基苯肼分光光度法2.2 鉬藍(lán)比色法2.3 其他方法第十八張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2，4一二硝基苯肼分光光度法 原理：維生素C在空氣中尤其在堿性介質(zhì)中極易被氧化成脫氫抗壞血酸反應(yīng)式： 第十九張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2，4一二硝基苯肼分光光度法pH5,脫氫抗壞血酸內(nèi)環(huán)開(kāi)裂，形成二酮古洛糖酸二酮古洛糖酸第二十張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2, 4一二

8、硝基苯肼分光光度法脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波長(zhǎng)有最大吸收脎的結(jié)構(gòu)：第二十一張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月分光光度法樣品溶液與VC標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述方法同樣處理500nm處測(cè)吸光度下圖：721型分光光度計(jì)第二十二張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月鉬藍(lán)比色法 馬占玲等用鉬藍(lán)比色法測(cè)定青椒中還原型維生素C含量的基本原理和方法。測(cè)定波長(zhǎng)839 nm，維生素C含量在00040024 mgmL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，回收率為972。該方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確。 第二十三張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月鉬藍(lán)比色法逯家輝等提出了一種測(cè)定維生素C

9、的新方法，它是基于Folin B試劑與抗壞血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介質(zhì)中反應(yīng)生成脫氫抗壞血酸，反應(yīng)產(chǎn)物在910 nm波長(zhǎng)處有最大吸光度進(jìn)行定量分析。該方法的線性范圍為0500gmL，相關(guān)系數(shù)r=0999 86，回收率為981210215。第二十四張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法原理方法結(jié)果維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差異，而片劑輔料旋光度保持不變差示旋光法消除輔料的影響，直接測(cè)出該制劑的含量討論與第二十五張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法方法TEXT1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取維生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸鈉0.37g,置于100mL

10、容量瓶中,用新沸冷卻的蒸餾水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液。TEXT原理方法結(jié)果討論與第二十六張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系量取10.0mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)液于50mL量瓶中,用水稀釋至50mL。測(cè)定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氫氧化鈉固體(每次約50mg),每次溶解后,測(cè)定一次溶液的pH及其旋光度,得到維生素C溶液的pH及旋光度關(guān)系原理方法結(jié)果討論與第二十七張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月差示旋光法選定pH為2.2和6.2第二十八張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法2）差示旋光度與溶

11、液濃度關(guān)系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)液各兩份,分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容；一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容，靜置3min后,用220mm測(cè)定管，以前者為空白，測(cè)定后者的差示旋光度(a)。文獻(xiàn)結(jié)果：線性方程為a=0 205*C+ 005，r=09964原理方法結(jié)果討論與第二十九張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法3）輔料干擾試驗(yàn)取混合輔料20mg(淀粉、硬脂酸鎂、EDTA、糊精等按處方比例混勻)兩份分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容,一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容,濾去不溶物,

12、濾液在兩種pH值測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：輔料的差示旋光度為零，說(shuō)明輔料對(duì)維生素C含量的測(cè)定不干擾。原理方法結(jié)果討論與第三十張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法4）穩(wěn)定性試驗(yàn)同一測(cè)試樣品，在120min內(nèi)，每隔3min測(cè)定一次差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：差示旋光度基本不變?cè)矸椒ńY(jié)果討論與第三十一張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法5）回收率試驗(yàn)精密稱取維生素C精制品500.0mg兩份，分別置于50mL容量瓶中，各加入20mg輔料，分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液，測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：平均回收率為97.8，變異系數(shù)cv為1.03原理方法結(jié)果討論

13、與第三十二張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法方法TEXT6）樣品測(cè)定取維生素C片劑10片，稱重研碎后分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液(相當(dāng)于含Vc 20mg/mL)，濾去不溶物，測(cè)定濾液的差示旋光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算其含量。TEXT原理討論方法結(jié)果與第三十三張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 差示旋光法方法TEXT1）維生素易被氧化,空氣及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液時(shí)使用新沸冷卻水,同時(shí)加人EDTA作為穩(wěn)定劑；2）樣品測(cè)定時(shí)，片劑部分物質(zhì)不能完全溶解，必須過(guò)濾除去，然后測(cè)定濾液的差示旋光度。TEXT原理討論方法結(jié)果與第三十四張，PPT共五十頁(yè)，

14、創(chuàng)作于2022年6月3 高效液相色譜法測(cè)定維生素C3.1 HYPERSILC8色譜柱法3.2 VenusilXBPC18柱法3.3 其他方法第三十五張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月HYPERSILC8色譜柱法 采用HYPERSILC 8色譜柱，用01低濃度的草酸作流動(dòng)相，陳昌云等采用005 molL磷酸二氫鉀緩沖液：甲醇=80：20 (vv)作流動(dòng)相。流速為10mLmin，二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm。 第三十六張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3.2 VenusilXBPC18柱法 系統(tǒng)采用VenusilXBPC18柱(46x250 mm，5g)，用02的偏磷酸的水

15、溶液作為流動(dòng)相，流速1 mlmin，檢測(cè)波長(zhǎng)240 nm；維生素C濃度在01-10 mgmL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。該方法回收率9989，標(biāo)準(zhǔn)偏差091，操作簡(jiǎn)便、靈敏、可靠 第三十七張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法原理 維生素C具有 較強(qiáng)還原性，可使藍(lán)色染料2，6-二氯靛酚鈉定量地還原成無(wú)色的酚亞胺，而本身被氧化成去氫抗壞血酸，利用此特征進(jìn)行薄層掃描法測(cè)定含量。 第三十八張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法操作方法與結(jié)果（1）試紙的制備 2,6-二氯靛酚鈉 (DCP-Na)溶于無(wú)水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，濾紙?jiān)谑⒂蠨CP-Na乙醇溶液的展開(kāi)缸

16、中浸漬3min，邊浸邊搖展開(kāi)缸，使濾紙均勻著色，充分被染料溶液所飽和。取出懸掛于暗處，晾干后，立即放入干燥器中避光保存，備用。 第三十九張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法（2）緩沖溶液的配制 稱取檸檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M 氫氧化鈉 420ml，并用蒸餾水稀釋至刻度，此溶液的pH應(yīng)為3.5。否則，用酸或堿調(diào)整 pH值，保存于冰箱中。 第四十張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法3）掃描條件確定 在制備的染料試紙上定量點(diǎn)上維生素C對(duì)照品進(jìn)行掃描 ，維 生素 C在 290nm 處有最大吸收，420nm處無(wú)吸收，故選擇1=290nm， 2=42

17、0nm雙波長(zhǎng)反射式鋸齒掃描。原理方法結(jié)果討論與第四十一張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法4）線性實(shí)驗(yàn) 4.1）對(duì)照品溶液的配制 精密稱取維生素C標(biāo)準(zhǔn)品100mg，用緩沖溶液配成lmg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱取維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3、4、5ml，分別置于10ml容量瓶中，用緩沖溶液稀釋至刻度。4.2）測(cè)定 用5l定量毛細(xì)管，分別吸取上述溶液各5 l，點(diǎn)于試紙上 。點(diǎn)樣后晾干，并將試紙 固定在20cm20cm玻璃板上，放入薄層掃描儀。測(cè)定A 的積分值 (峰面積)作為縱坐標(biāo)Y ，點(diǎn)樣量為橫 坐標(biāo)X，得一直線方程 Y=15692X+130225，r= 09991 原理方法結(jié)果討論與

18、第四十二張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 薄層掃描法方法TEXT5）樣品的含量測(cè)定 取維生素 C片10片，研細(xì)，精密稱取平均片重一片的粉末，放入100ml容量瓶中，加入緩沖液至刻度，振搖，使維生 素 C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用緩沖液稀釋至刻度。用 5 l定量毛細(xì)管點(diǎn)樣品溶液與不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液于同一試紙上 ，然后掃描 測(cè)定峰面積，由工作曲線法計(jì)算維生素C片中的維生素C含量。TEXT原理方法結(jié)果討論與第四十三張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法6）回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取維生素C對(duì)照品20mg，其它原輔料適量，置 10ml容量瓶中，加緩沖液稀釋

19、至刻度，振搖，濾過(guò) ，棄初濾液。分別吸取續(xù)濾液與對(duì)照品維生 素 C液各5 l點(diǎn)于同一試紙上，按上述條件進(jìn)行掃描測(cè)定。第四十四張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月薄層掃描法點(diǎn)樣時(shí)各點(diǎn)間距應(yīng)大于10mm，掃描測(cè)不定期波長(zhǎng)可做少量變動(dòng)，但每次測(cè)定必須固定同一測(cè)定波長(zhǎng)點(diǎn)樣量 在38l之間線性關(guān)系較好，當(dāng)點(diǎn)樣量為10 l，線性關(guān)系較差。 原理方法結(jié)果討論與第四十五張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)束語(yǔ)總之，維生素C的測(cè)定方法很多，各種方法各有特點(diǎn)，常用的滴定法方法簡(jiǎn)單，但在滴定有色物質(zhì)終點(diǎn)不易判斷，分光光度法操作費(fèi)時(shí)，高效液相色譜法是目前發(fā)展較快的一種方法，方法靈敏，選擇性好，有較好的發(fā)展前

20、景。毛細(xì)管電泳n51是近幾年新興的分析方法，具有效率高、分析時(shí)間短、樣品處理簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，但有待于進(jìn)一步完善。 第四十六張，PPT共五十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月參考文獻(xiàn)1吳春艷水果中維生素C含量的測(cè)定及比較J武漢理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2oo7，29(3)：90912王元秀，莊海燕微量滴定法測(cè)定獼猴桃中維生素C的含量J1濟(jì)南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版，2001，15(4)：374，3張穎，等不同產(chǎn)地枸杞子中維生素C含量測(cè)定J中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2004，24(8)：5005014袁葉飛，甄漢深，歐賢紅分光光度法測(cè)定大棗中的維生素C含量J安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，25(2)：40-415馬占玲，等青椒中還原型維生素C含量的測(cè)定J渤海大學(xué)學(xué)