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文檔簡介
1、二次元電気泳動基本補足:分子量求方1SDSPAGE泳動像分子量推定?質(zhì)移動距離、分子量既知質(zhì)比較、目的質(zhì)分子量算出同中既知質(zhì)(分子量)泳動分子量移動距離測、分子量対応移動距離片対検量線目的移動距離分子量求2SDS分子量使用代表的質(zhì)3分子量算出手順綺麗揃場合)分子量各位置明確、分離上端 移動距離正確分子量44.6mm33.523.612 .76.73.64)片対橫軸(普通目盛)移動距離、縦軸(対數(shù)目盛)分子量、分子量各値)移動度分子量標準曲線求5)目的位置明確、移動距離正確)數(shù)値)求標準曲線式(y2672490.7341)代入 分子量算出分子量28.5mm26724928.5 0.7341228
2、51.49求分子量6分子量算出手順別比較場合)分子量各位置明確、分離上端 移動距離正確)同場所泳動移動距離正確分子量BPB7分子量)移動距離、分子量移動距離相対値(相対移動度:Rf値)計算0.250.671.08)片対橫軸(普通目盛)値、縦軸(対數(shù)目盛)分子量 、分子量各値)Rf値分子量標準曲線求9)目的位置明確、移動距離正確)流同場所、泳動 移動距離)移動距離、目的質(zhì)値計算 )求標準曲線式(y=15154x0. 7425)代入、分子量 算出分子量0.571.0151540.57 0.742522771.73求分子量10二次元電気泳動分子量使方分子量11SDS分子量測定上注意點塩基性富質(zhì)SDS結(jié)合量少、移動度 小見分子量大分子內(nèi)疎水性富部分多場合、SDS結(jié)合量多、移動度大見分子量小糖質(zhì)酸性質(zhì)SDS結(jié)合量少、移動度小見分子量大多量體構(gòu)造質(zhì)分子、SDS 単一分子量、分子生體內(nèi) 機能狀態(tài)分子量例)免疫重鎖2本軽鎖2本S-S結(jié)合構(gòu)造S-S結(jié)合切斷約50kDa約22kDa現(xiàn)12免疫構(gòu)造黃色部分Light chain (L鎖)緑色部分Heavy
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