XXXXCB910700-G-腫瘤發(fā)生發(fā)展中關鍵蛋白的功能與調控

1、項目名稱稱：腫瘤發(fā)生生發(fā)展中中關鍵蛋蛋白的功功能與調調控首席科學學家：肖智雄 四川大大學起止年限限：20122.1至至20116.88依托部門門：教育部 四川川省科技技廳一、關鍵鍵科學問問題及研研究內容容本項目擬擬解決的的關鍵科科學問題題是：原原癌蛋白白和抑癌癌蛋白通通路相互互作用和和信號網網絡互動動調控腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展的的分子機機制。惡惡性腫瘤瘤作為細細胞生長長的疾病病，與細細胞生長長、凋亡亡、細胞胞周期、腫瘤細細胞遷移移和侵襲襲等最基基本的生生命過程程緊密相相關。因因此，以以原癌-抑癌蛋蛋白信號號網絡互互動為主主要切入入點，發(fā)發(fā)現(xiàn)及鑒鑒定重要要蛋白的的關鍵新新靶點及及信號通通路新調調控機制

2、制，深入入探討原原癌-抑抑癌蛋白白信號網網絡信號號通路的的動態(tài)變變化，闡闡明其在在腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展過程中中的關鍵鍵作用，是本課課題擬解解決的關關鍵科學學問題。本項目將將以原癌癌蛋白（EGFFR，RRas/Rhoo家族，PI33K）、抑癌蛋蛋白(pp53家家族、BBRCAA1、PPTENN)以及及PI33K/AAkt、MAPPK、GGSK33b等關關鍵信號號通路為為出發(fā)點點，研究究這些原原癌蛋白白-抑癌癌蛋白的的關鍵上上游新調調控因子子、下游游關鍵新新靶點及及其信號號網絡互互動在腫腫瘤細胞胞生長、凋亡、細胞周周期、細細胞遷移移、侵襲襲過程以以及免疫疫球蛋白白受體從從免疫防防御向EEMT惡惡性轉化

3、化轉變中中的功能能和分子子調控機機制。本本項目的的實施不不僅能夠夠完善基基本生命命科學理理論與細細胞癌變變理論體體系，而而且為腫腫瘤診斷斷治療提提供理論論指導意意義和潛潛在的藥藥物新靶靶點，并并對小分分子干擾擾和藥物物篩選提提供新的的思路和和方法。圍繞上述述科學問問題，我我們將利利用細胞胞生物學學、分子子生物學學、生物物物理學學、遺傳傳學、系系統(tǒng)生物物學及蛋蛋白組學學等交叉叉科學技技術方法法，發(fā)揮揮多學科科團隊作作戰(zhàn)的優(yōu)優(yōu)勢，結結合動物物腫瘤模模型以及及臨床標標本，闡闡明原癌癌-抑癌癌蛋白網網絡互動動及其調調控在腫腫瘤細胞胞生長、細胞周周期、EEMT、細胞遷遷移及侵侵襲過程程中的作作用。主主要

4、研究究內容包包括：1解析析原癌蛋蛋白Raas/RRho家家族上游游調控新新蛋白和和下游作作用新靶靶點在腫腫瘤細胞胞遷移的的分子作作用機制制1）深入入闡明GGankkyriin等關關鍵調控控蛋白以以及Hiippoo/MSST1-YAPP2信號號轉導通通路在腫腫瘤遷移移過程中中的作用用。2）鑒定定惡性腫腫瘤遷移移過程中中關鍵調調節(jié)重要要信號通通路中的的蛋白質質復合體體。發(fā)現(xiàn)現(xiàn)新的信信號通路路調控分分子并揭揭示其作作用機制制。3）解析析Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22蛋白質質結構及及其相關關調控蛋蛋白的溶溶液結構構，研究究蛋白的的相互作作用機制制，揭示示其功能能的結構構基

5、礎。4）研究究PIKK3CAA對p663的功功能調控控，解析析PIKK3CAA突變體體蛋白調調控p663蛋白白表達的的分子機機制，闡闡明PII3K通通路與pp63調調控細胞胞遷移和和侵襲的的功能相相關性。5）應用用常見腫腫瘤標本本，對GGankkyriin、HHipppo/MMST11-YAAP2、TApp63和和Npp63基基因等的的表達進進行定性性、定量量和定位位分析，揭示其其在腫瘤瘤中表達達的動態(tài)態(tài)時空關關系。2闡明明抑癌蛋蛋白p553家族族的下游游關鍵新新靶點以以及上游游調控新新蛋白對對腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展的分子子調控機機制研究p553下游游新靶點點Killlinn對S期期監(jiān)控點點的調控控

6、，闡明明Killlinn抑制DDNA合合成、激激活CHHK1/2的分分子途徑徑及凋亡亡機理，確定KKilllin/N8-50多多肽與DDNA結結合前后后的結構構。解析p553選擇擇性調控控的分子子機制，從KRRAB鋅鋅指蛋白白家族中中篩選pp53調調控分子子，確定定其調控控的細胞胞學效應應。解析SIIRT11-p553復合合體的晶晶體結構構。闡明p663-CCD822通路調調控細胞胞遷移和和侵襲的的機理，研究pp63調調控MAAPK的的機制，闡明pp63-MAPPK通路路與細胞胞遷移和和侵襲的的相關性性。3揭示示細胞周周期中關關鍵蛋白白調控有有絲分裂裂和染色色體穩(wěn)定定性及在在腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展中

7、的功功能和調調控1）建立立微管動動態(tài)不穩(wěn)穩(wěn)定性的的檢測分分析體系系，闡明明微管相相關蛋白白(e.g. PRCC1)對對微管動動態(tài)不穩(wěn)穩(wěn)定性的的直接調調控機制制。2）揭示示微管相相關蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修飾對對有絲分分裂的調調控機制制。3）應用用動物模模型并結結合人類類腫瘤標標本檢測測，明確確微管相相關蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修飾與與惡性腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展及及轉移的的關系。4）解析析微管相相關蛋白白(PRRC1，Nlpp及其截截短體)的三維維結構。4探究究p533、RTTK及免免疫球蛋蛋白受體體三者之之間動態(tài)態(tài)調控機機制在ppIgRR誘導EEMT惡惡性轉

8、化化中的影影響選擇有深深厚研究究背景的的、與EEMT惡惡性轉化化密切相相關的ppIgRR為主攻攻研究對對象，以以免疫球球蛋白轉轉運調控控與惡性性轉化調調控系統(tǒng)統(tǒng)為核心心研究內內容，構構建工程程細胞株株、工程程動物模模型等研研究系統(tǒng)統(tǒng)，探究究pIggR EEMT惡惡性轉化化的分子子機制，重點從從免疫防防御向免免疫背叛叛轉變的的分子開開關以及及受體酪酪氨酸激激酶家族族和p553對其其調控機機制兩個個研究視視角出發(fā)發(fā)，研究究pIggR功能能逆轉的的動態(tài)調調控機制制，闡明明p533、RTTK及免免疫球蛋蛋白受體體三者之之間動態(tài)態(tài)調控機機制，剖剖析EMMT惡性性轉化調調控網絡絡的關鍵鍵節(jié)點分分子；在在此

9、基礎礎上，引引入“基因敲敲除”與“化學干干預”平行研研究策略略，利用用國家化化合物庫庫，篩選選發(fā)現(xiàn)小小分子調調控探針針，從外外源性干干預角度度入手，佐證內內源性調調控的本本質。四個子課課題研究究內容相相互關聯(lián)聯(lián)，從點點到面，將深入入探討原原癌-抑抑癌蛋白白信號網網絡互動動在腫瘤瘤發(fā)生發(fā)發(fā)展過程程中的重重要作用用和分子子機制。二、預期期目標本課題總總體目標標是以惡惡性腫瘤瘤細胞為為研究對對象，深深入探討討原癌蛋蛋白-抑抑癌蛋白白通路相相互作用用和信號號網絡互互動在細細胞生長長、凋亡亡、細胞胞周期和和腫瘤細細胞遷移移等最基基本生命命過程中中的功能能和調控控，發(fā)現(xiàn)現(xiàn)和鑒定定腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展中新的的關

10、鍵調調控蛋白白。我們們的研究究將進一一步完善善現(xiàn)有生生命科學學基礎理理論以及及細胞癌癌變理論論體系，同時以以這些信信號通路路網絡和和重要蛋蛋白質的的分子作作用機制制為突破破點，為為癌癥治治療提供供新策略略和新靶靶點。力力求在腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展領領域中取取得原創(chuàng)創(chuàng)性、前前瞻性、突破性性研究進進展，提提升我國國癌癥研研究水平平，保持持國際先先進行列列。本項目的的五年預預期目標標：1建立立一系列列適合于于腫瘤生生長凋亡亡、遷移移和侵襲襲研究的的抑癌蛋蛋白相互互作用研研究體系系，篩選選、發(fā)現(xiàn)現(xiàn)和鑒定定一批選選擇性pp53家家族上游游調控蛋蛋白、全全新性下下游作用用靶點及及其相互互作用，闡明pp53-p6

11、33信號網網絡在腫腫瘤細胞胞遷移和和侵襲中中的作用用機制。2建立立一系列列適合腫腫瘤遷移移和侵襲襲研究的的原癌蛋蛋白通路路的研究究體系，揭示惡惡性腫瘤瘤遷移過過程中GGTPaase Rass/Rhho家族族蛋白的的關鍵重重要信號號通路及及網絡互互動的功功能特點點。3研究究細胞周周期調控控關鍵蛋蛋白對有有絲分裂裂調控的的分子作作用機制制，揭示示該類蛋蛋白及其其網絡互互動在惡惡性腫瘤瘤發(fā)生發(fā)發(fā)展過程程中的關關鍵作用用。4明確確免疫球球蛋白受受體pIIgR在在EMTT惡性轉轉化中的的重要作作用，揭揭示免疫疫球蛋白白受體ppIgRR誘導EEMT惡惡性轉化化的分子子機制。5人才才培養(yǎng)及及基地建建設： 人

12、才培養(yǎng)養(yǎng)：為我我國培養(yǎng)養(yǎng)一批研研究腫瘤瘤發(fā)生發(fā)發(fā)展機制制的創(chuàng)新新性人才才，打造造一支頗頗具國際際競爭力力的優(yōu)秀秀創(chuàng)新群群體，重重點培養(yǎng)養(yǎng)2-33名國際際知名領領銜學科科帶頭人人、2-3名國國家杰出出青年獲獲得者、2-33名中國國科學院院百人計計劃入選選者和一一批博士士后、博博士生、碩士生生。希望通過過本項目目的實施施，取得得具有國國際影響響力并原原創(chuàng)性科科研成果果。在國國際重要要學術刊刊物上發(fā)發(fā)表高水水平論文文50篇篇以上，其中在在影響因因子大于于10的的刊物上上發(fā)表110-115篇，申請專專利100-155項?；亟ㄔO設：綜合合應用基基因差異異篩選技技術、蛋蛋白質組組學技術術、細胞胞內蛋白白

13、質三維維結構成成像技術術、活細細胞與活活體成像像技術、腫瘤細細胞遷移移研究技技術、體體外微管管動態(tài)不不穩(wěn)定性性分析技技術、遺遺傳操作作與模式式動物技技術、XX射線單單晶衍射射分析結結合二維維和多維維核磁共共振（NNMR）技術，建立體體內外多多參數同同步化、時空定定量可視視化的原原癌蛋白白與抑癌癌蛋白結結構與功功能研究究體系，打造國國際同行行矚目的的代表中中國原創(chuàng)創(chuàng)水平的的從事原原癌蛋白白與抑癌癌蛋白之之間網絡絡互動與與腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展機制研研究的平平臺基地地。課題設置置：1課題題設置的的總體思思路課題的設設置主要要考慮當當前癌癥癥研究領領域的研研究重點點和發(fā)展展趨勢，并結合合我國常常見惡性性腫

14、瘤診診治水平平提高的的重大需需求。以以研究原原癌蛋白白-抑癌癌蛋白網網絡通路路及其調調控在細細胞生長長增殖、細胞周周期調控控、腫瘤瘤細胞遷遷移和炎炎癌轉化化等方面面的分子子機制為為出發(fā)點點，深入入探討原原癌蛋白白-抑癌癌蛋白信信號網絡絡互動，以原癌癌蛋白RRas/Rhoo家族、PI33K/AAkt、GSKK3b等等以及抑抑癌蛋白白p533家族、BRCCA1、PTEEN及其其網絡互互動為切切入點，研究新新的上下下游調控控蛋白的的生物學學功能及及其在腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展中中的作用用。并以以這些關關鍵蛋白白為靶點點，篩選選可調控控其功能能的小分分子化合合物，為為臨床腫腫瘤診療療奠定分分子生物物學基礎礎。

15、2各課課題研究究內容及及其與項項目預期期目標的的關系本項目的的設置以以上述思思路為基基礎，分分為四個個課題：（1）研究原原癌蛋白白 Raas/RRho家家族新的的上游調調控蛋白白和下游游作用靶靶點在EEMT、腫瘤轉轉移的分分子作用用機制；（2）研究抑抑癌蛋白白p533家族下下游關鍵鍵新靶點點、上游游調控新新蛋白、以及相相關信號號通路對對細胞生生長、凋凋亡、細細胞周期期、細胞胞遷移和和侵襲的的功能和和調控；（3）研究細細胞周期期中關鍵鍵新蛋白白調控有有絲分裂裂、染色色體組穩(wěn)穩(wěn)定性以以及在腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展中中的作用用；（44）研究究免疫蛋蛋白和小小分子化化合物在在EMTT和腫瘤瘤轉移的的調控與與干

16、預的的分子機機制。本項目以以正常細細胞癌變變過程中中最基本本的生物物學過程程，包括括細胞周周期、細細胞增殖殖與凋亡亡、EMMT和細細胞遷移移和侵襲襲為中心心，以調調控這些些基本生生物學過過程的關關鍵蛋白白和信號號通路為為主線。前兩個個課題分分別從原原癌蛋白白Rass/Rhho家族族和抑癌癌蛋白pp53家家族的功功能、信信號通路路和調控控機制進進行并行行和相互互交叉的的研究；課題三三著重研研究生命命現(xiàn)象中中最基本本的細胞胞周期中中調控有有絲分裂裂的關鍵鍵蛋白，及其與與前兩個個課題所所涉及的的原癌蛋蛋白抑抑癌蛋白白信號網網絡中關關鍵蛋白白的互動動；課題題四研究究免疫球球蛋白受受體以及及受體酪酪氨酸

17、激激酶家族族對EMMT和腫腫瘤轉移移的調控控網絡。同時研研究小分分子化合合物對這這些過程程的干擾擾，為腫腫瘤診斷斷治療提提供新方方法和新新靶點。本項目的的主要目目標是深深入研究究原癌-抑癌蛋蛋白的相相互作用用。課題題一和課課題二以以原癌蛋蛋白PIIK3CCA、AApakk、Gaankyyrinn、調控控抑制癌癌蛋白pp53、p633為主線線。同時時研究pp53、p633對PII3K和和MAPPK等關關鍵生長長信號通通路的反反饋調控控。課題題三以細細胞有絲絲分裂調調控關鍵鍵蛋白PPRC11、Nllp為切切入點，研究微微管相關關蛋白網網絡對細細胞有絲絲分裂過過程中紡紡錘體形形成以及及中心體體、染色

18、色體分離離的調控控，同時時研究pp53對對這些蛋蛋白分子子及其網網絡互動動的上游游調控。課題四四以免疫疫球蛋白白受體EEMT惡惡性轉化化的分子子機制研研究為切切入點，研究免免疫球蛋蛋白受體體功能逆逆轉的動動態(tài)調控控機制以以及p553、RRTK及及免疫球球蛋白受受體三者者之間動動態(tài)調控控機制，剖析EEMT惡惡性轉化化中新的的關鍵節(jié)節(jié)點蛋白白的結構構組成，闡明其其動態(tài)變變化的網網絡調控控機制。 四個子子課題研研究平臺臺相互交交叉、研研究內容容相互關關聯(lián)，從從點到面面，課題題一和課課題二中中已建立立的蛋白白組學、蛋白質質結構解解析平臺臺、和課課題四已已建立的的小分子子化合物物篩選平平臺為整整個項目目

19、研究關關鍵蛋白白的功能能、調控控及分子子機制提提供技術術平臺和和支持。其相互互關系如如下圖所所示：三、研究究方案課題一：研究原原癌蛋白白Rass/Rhho家族族上游調調控蛋白白和下游游作用靶靶點在腫腫瘤細胞胞遷移的的分子作作用機制制基于原癌癌蛋白RRas等等誘導腫腫瘤的小小鼠模型型，利用用ORIIS系統(tǒng)統(tǒng)， 應應用高通通量基因因沉默技技術和高高內涵技技術等手手段鑒定定惡性腫腫瘤遷移移過程中中關鍵蛋蛋白質，并探討討這些蛋蛋白質在在腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展過程中中的功能能與調控控；深入入研究GGankkyriin等癌癌基因以以及Hiippoo/MSST1-YAPP2信號號轉導通通路在腫腫瘤遷移移中的作作用

20、；人人腫瘤中中Gannkyrrin等等關鍵調調控蛋白白的表達達水平與與腫瘤細細胞的轉轉移程度度的相關關性分析析；利用用NMRR解析GGankkyriin等關關鍵蛋白白質及其其復合體體的結構構，我們們將利用用已建立立的穩(wěn)定定表達各各種PIIK3CCA突變變體的細細胞株分分析PII3K信信號通路路調控Np663蛋白白表達的的分子機機制。利利用特異異性磷酸酸化抗體體重點探探索Akkt蛋白白激酶激激活狀態(tài)態(tài)對Np663蛋白白表達調調控的影影響。驗驗證p663是否否是介導導PI33K信號號通路調調控腫瘤瘤轉移的的關鍵因因素。研研究并評評估p663信號號通路在在腫瘤細細胞遷移移和侵襲襲中的臨臨床相關關性。

21、承擔單位位：四川川大學，軍事醫(yī)醫(yī)學科學學院， 中科院院生物物物理所課題負責責人： 肖智雄雄教授主要學術術骨干：李慧艷艷副研究究員，袁袁增強研研究員經費比例例：277%課題二：研究抑抑癌蛋白白p533家族及及新的上上游調控控蛋白和和下游作作用靶點點對腫瘤瘤發(fā)生發(fā)發(fā)展的分分子調控控機制研究p553下游游新靶點點蛋白KKilllin對對細胞周周期S期期監(jiān)控點點的功能能和調控控。明確確Killlinn在S期期染色質質上的定定位、及及其與DDNA復復制蛋白白RPAA和PCCNA之之間相互互關系，闡明KKilllin抑抑制DNNA合成成的分子子機理。揭示KKilllin在在DNAA損傷應應答過程程中的功功

22、能，闡闡明Kiilliin 激激活DNNA監(jiān)測測點蛋白白CHKK1和CCHK22的分子子途徑及及細胞凋凋亡機理理，為腫腫瘤化療療放療提提供進一一步的理理論基礎礎。通過過NMRR溶液結結構分析析，確定定Killlinn/N88-500多肽與與DNAA結合前前后的結結構及抑抑制DNNA合成成的分子子機理。解析對對p533蛋白功功能選擇擇性調控控的分子子機制。以我們們新發(fā)現(xiàn)現(xiàn)的選擇擇性調控控p533下游細細胞凋亡亡活性的的KRAAB型鋅鋅指蛋白白Apaak為切切入點，從KRRAB鋅鋅指蛋白白家族4400多多個成員員中篩選選鑒定新新的p553選擇擇性調控控分子，確定它它們所調調控的細細胞學效效應及與與

23、腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展的關系系，探索索Apaak對pp53靶靶基因轉轉錄調控控區(qū)的表表觀遺傳傳學調節(jié)節(jié)機制。 解析析SIRRT1-p533蛋白復復合體的的晶體結結構。以以我們發(fā)發(fā)現(xiàn)的pp63下下游新靶靶點CDD82/KAII1為切切入點，闡明pp63-CD882通路路調控細細胞遷移移和侵襲襲的分子子機理。同時研研究p663調控控MAPPK的分分子機制制，闡明明p633-MAAPK信信號通路路與細胞胞遷移和和侵襲的的功能相相關性。承擔單位位： 四四川大學學， 軍軍事醫(yī)學學科學院院， 中中科院生生物物理理所課題負責責人： 梁朋教教授主要學術術骨干： 李沁沁桐副教教授，李李力副研研究員，楊娜副副研究員員經

24、費比例例：266.5%課題三：研究有有絲分裂裂關鍵調調控蛋白白在腫瘤瘤發(fā)生發(fā)發(fā)展中的的作用及及分子機機制研究有絲絲分裂調調控關鍵鍵蛋白PPRC11和Nllp的分分子作用用機制及及其網絡絡互動對對細胞周周期及有有絲分裂裂的調控控，并揭揭示這些些蛋白及及其作用用網絡對對惡性腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展及及轉移的的作用機機制，最最終明確確以這些些蛋白為為核心的的網絡互互動、信信號傳導導及蛋白白修飾在在惡性腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展及及轉移，甚至治治療過程程中的重重要意義義。建立立微管動動態(tài)不穩(wěn)穩(wěn)定性的的檢測分分析體系系，闡明明微管相相關蛋白白(e.g. PRCC1)對對微管動動態(tài)不穩(wěn)穩(wěn)定性的的直接調調控機制制。揭示示微管

25、相相關蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修飾對對有絲分分裂的調調控機制制。應用用動物模模型并結結合人類類腫瘤標標本檢測測，明確確微管相相關蛋白白(PRRC1，Nlpp)及其其磷酸化化修飾與與惡性腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展及及轉移的的關系。解析微微管相關關蛋白(PRCC1，NNlp及及其截短短體)的的三維結結構。承擔單位位：中國國醫(yī)學科科學院， 北京京大學課題負責責人： 姜偉教教授主要學術術骨干： 童彤彤研究員員, 夏斌教教授經費比例例：266.5%課題四：研究免免疫蛋白白和小分分子化合合物在腫腫瘤發(fā)生生發(fā)展中中的調控控與干預預的分子子機制選擇有深深厚研究究背景的的、與EEMT惡惡性轉化化密切相

26、相關的ppIgRR為主攻攻研究對對象，以以免疫球球蛋白轉轉運調控控與惡性性轉化調調控系統(tǒng)統(tǒng)為核心心研究內內容，構構建工程程細胞株株、工程程動物模模型等研研究系統(tǒng)統(tǒng)，探究究pIggR在EEMT惡惡性轉化化中的分分子機制制，重點點從免疫疫防御向向免疫背背叛轉變變的分子子開關以以及受體體酪氨酸酸激酶家家族和pp53對對其調控控機制兩兩個研究究視角出出發(fā)，研研究pIIgR功功能逆轉轉的動態(tài)態(tài)調控機機制，闡闡明p553、RRTK及及免疫球球蛋白受受體三者者之間動動態(tài)調控控機制，剖析EEMT惡惡性轉化化調控網網絡的關關鍵節(jié)點點分子；在此基基礎上，引入“基因敲敲除”與“化學干干預”平行研研究策略略，利用用國

27、家化化合物庫庫，篩選選發(fā)現(xiàn)小小分子調調控探針針，從外外源性干干預角度度入手，佐證內內源性調調控的本本質。承擔單位位： 中中科院上上海藥物物所課題負責責人： 耿美玉玉研究員員主要學術術骨干： 俞強強研究員員，黃敏敏副研究究員 經費比例例：200%四、年度度計劃研究內容容預期目標標第一年1 建建立一系系列適合合于腫瘤瘤細胞遷遷移和侵侵襲研究究的研究究體系；利用OOriss系統(tǒng)和和高內涵涵技術鑒鑒定關鍵鍵蛋白質質;2，研究究Killlinn與RPPA和PPCNAA在細胞胞周期的的相對定定位；篩篩選Appak的的DNAA結合序序列，研研究Appak選選擇性調調控p553介導導的細胞胞凋亡的的分子機機理

28、。3. 研研究PRRC1對對中心體體介導的的微管形形成和動動態(tài)不穩(wěn)穩(wěn)定性；研究確確定Nllp與BBRCAA1相結結合的功功能域，檢測其其對細胞胞內中心心體分離離，紡錘錘體形成成和細胞胞有絲分分裂的影影響。4.檢測測分析ppIgRR高表達達前后基基因和蛋蛋白表達達的差異異，初步步探討前前述獲得得的候選選目標分分子（群群）在ppIgRR誘導EMMT的具具體調控控機制；研究ppIgRR表達情情況與EEMT惡惡性轉化化的臨床床相關性性研究。1.建立立腫瘤細細胞轉化化及遷移移和侵襲襲模型；篩選、發(fā)現(xiàn)一一批新的的Rass通路關關鍵介導導子及腫腫瘤轉移移相關蛋蛋白質。2. 篩篩選、發(fā)發(fā)現(xiàn)和鑒鑒定一批批新的p

29、p53家家族下游游關鍵靶靶點及其其相互作作用蛋白白質。分分析Kiilliin作為為DNAA單鏈高高親合蛋蛋白抑制制DNAA合成的的分子機機理以及及Apaak的DDNA結結合能力力在其選選擇性調調控p553靶基基因中的的功能。3 分分析PRRC1對對體外微微管動態(tài)態(tài)不穩(wěn)定定性的直直接調控控機制；初步明明確Nllp與BBRCAA1結合合的細胞胞生物學學意義。4. 初初步鑒定定pIggR介導導EMTT的調控控分子及及其在ppIgRR誘導EEMT的的可能調調控機制制；初步步分析明明確pIIgR與與EMTT惡性轉轉化在11-2種種腫瘤組組織的臨臨床相關關性。發(fā)表6-12篇篇研究論論文。第二年1.探討討G

30、annkyrrin，Hipppo/MSTT1-YYAP22等對RRas誘誘發(fā)的腫腫瘤遷移移能力的的影響以以及影響響細胞遷遷移和侵侵潤的分分子機制制; 分分析PIIK3CCA突變變體蛋白白調控Np663蛋白白表達的的分子機機制。2. 檢檢測Kiilliin對 ATMM和ATTR蛋白白磷酸化化及穩(wěn)定定性的影影響；篩篩選KZZNF家家族中新新的p553調控控分子，確認其其選擇性性功能；篩選SSIRTT1及SSIRTT1與底底物p553肽段段結合復復合物的的結晶條條件；鑒鑒定與Np663調控控CD882/KKAI11和MKKP3表表達的分分子機制制。3. 研研究PRRC1對對紡錘體體形成的的影響；明確

31、PLLK1在在Nlpp蛋白分分子的磷磷酸化位位點及與與BRCCA1相相互作用用的關鍵鍵位點。明確BBRCAA1-NNlp-PLKK1之間間網絡互互動對NNlp在在中心體體定位，有絲分分裂及蛋蛋白穩(wěn)定定性的作作用。4.研究究候選目目標分子子（群）在pIIgR誘誘導EMMT的具具體調控控機制；進一步步研究ppIgRR表達與與EMTT惡性轉轉化的臨臨床相關關性；探探討pIIgR轉轉運相關關分子對對其介導導的EMMT效應應的影響響。1.闡明明Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22等參與與腫瘤細細胞遷移移和侵襲襲的分子子機制； 驗證證篩選到到的新的的Rass通路關關鍵介導導子對腫腫

32、瘤遷移移和侵襲襲的影響響。闡明明PI33K信號號通路調調控Np663蛋白白表達的的分子機機制；2. 闡闡明Kiilliin誘導導CHKK1和CCHK22磷酸化化及穩(wěn)定定性增加加的分子子機制；獲得一一批新的的p533上游調調控分子子；獲得得SIRRT1與與p533相互作作用的結結構基礎礎；闡明明Np663調控控CD882/KKAI11和MKKP3表表達的分分子機制制。3. 闡闡明微管管相關蛋蛋白PRRC1對對體外紡紡錘體形形成的直直接調控控機制；闡明NNlp被被PLKK1磷酸酸化修飾飾的細胞胞生物學學意義，明確BBRCAA1-NNlp-PLKK1之間間的網絡絡互動的的細胞生生物學功功能。4. 闡

33、闡明候選選目標分分子（群群）在ppIgRR誘導EMMT的分分子調控控機制；明確ppIgRR與腫瘤瘤EMTT惡性轉轉化的相相關性；確定ppIgRR作為復復發(fā)轉移移預測標標志物及及潛在藥藥靶的可可行性；初步闡闡明調控控pIggR轉運運相關分分子對其其介導的的EMTT效應的的影響。發(fā)表6-12篇篇研究論論文；申申請1-2項中中國發(fā)明明專利。第三年1.分析析Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22蛋白質質結構，以與人人腫瘤轉轉移程度度的相關關性;研研究 PPIK33CA對對Np663的負負調控的的生物學學意義。2. 研研究Kiilliin，AATM/ATRR的磷酸酸與及DDNA合合

34、成復制制叉停頓頓的功能能相關性性；研究究KZNNF家族族成員與與p533的相互互作用及及腫瘤相相關性；研究SSIRTT1對pp53活活性調控控的蛋白白結構基基礎；研研究Np663對MMAPKK信號通通路的負負調控的的分子機機制。3.分析析PRCC1對細細胞內微微管動態(tài)態(tài)不穩(wěn)定定性及紡紡錘體形形成的影影響；研研究Nllp蛋白白關鍵磷磷酸化位位點及其其功能相相關性； 分析析BRCCA1的的磷酸化化對細胞胞轉化能能力的影影響。4. 研研究與轉轉運相關關調控分分子對ppIgRR誘導EEMT的的影響機機制，探探討其作作為轉移移標志物物的可行行性；分分析受體體酪氨酸酸激酶與與pIggR在惡惡性轉化化中的功

35、功能相關關性及其其在pIIgR介介導的EEMT發(fā)發(fā)生發(fā)展展中的作作用機制制；在此此基礎上上，初步步研究pp53對對受體酪酪氨酸激激酶家族族分子（群）在在pIggR介導導的EMMT發(fā)生生發(fā)展中中的影響響機制；1.分析析Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22蛋白質質結構；明確GGankkyriin、HHipppo/MMST11-YAAP2與與人腫瘤瘤轉移程程度的相相關性；闡明PPI3KK信號通通路對Np663調控控的生物物學意義義。2.闡明明Killlinn誘導細細胞凋亡亡的信息息通道；揭示對對p533具有選選擇性調調控作用用的KZZNF在在腫瘤發(fā)發(fā)生發(fā)展展中的功功能；明明確

36、p553去乙乙?；扌揎椀慕Y結構與其其功能的的相關性性；揭示示p633與MAAPK通通路及在在腫瘤轉轉移中的的的功能能關聯(lián)。3. 闡闡明PRRC1對對細胞內內微管動動態(tài)不穩(wěn)穩(wěn)定性、紡錘體體形成以以及染色色體穩(wěn)定定性的直直接調控控機制；闡明NNlp磷磷酸化修修飾在細細胞惡性性轉化過過程中的的意義，明確pp53-BRCCA1-Nlpp-PLLK1信信號網絡絡互動在在致癌過過程中的的作用機機理。4. 闡闡明與轉轉運相關關調控核核心分子子對pIIgR誘誘導EMMT的影影響機制制，明確確其作為為轉移標標志物的的可行性性；揭示示與pIIgR誘誘導EMMT相關關的受體體酪氨酸酸激酶及及其調控控機制，明確pp

37、53對對該過程程的影響響。發(fā)表7-12篇篇研究論論文；申申請1-2項中中國發(fā)明明專利。第四年1.研究究Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22在動物物模型中中對腫瘤瘤細胞遷遷移和侵侵潤的影影響；研研究PII3K-p633信號通通路調控控腫瘤細細胞轉移移的分子子機制。2. 建建立Kiilliin基因因敲除小小鼠；利利用小鼠鼠模型確確認KZZNF家家族成員員對p553調控控的重要要性；模模擬p553肽段段設計抑抑制SIIRT11去乙酰?；富罨钚缘男⌒》肿右忠种苿谎芯縉p663-MMAPKK信號通通路與腫腫瘤轉移移的臨床床相關性性。3. 研研究PRRC1在在裸鼠模模型中對對與

38、腫瘤瘤發(fā)生發(fā)發(fā)展及轉轉移的作作用；研研究PRRC1-Aurroraa B-Nlpp為核心心的中小小體蛋白白分子網網絡，并并確定該該網絡對對中小體體形成以以及對細細胞胞質質分裂的的作用。4. 完完善受體體酪氨酸酸激酶對對pIggR從免免疫防御御向免疫疫背叛轉轉變分子子調控機機制以及及p533對其的的影響機機制，探探討候選選分子作作為轉移移標志物物的可行行性；篩篩選靶向向免疫球球蛋白受受體EMMT調控控網絡的的活性小小分子。1.明確確Gannkyrrin、Hipppo/MSTT1-YYAP22在動物物模型中中對腫瘤瘤細胞遷遷移和侵侵襲的影影響；闡闡明PII3K信信號通路路對Np663蛋白白表達的的機制，解析PPIK