阿司匹林的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1、石河子大學(xué)小學(xué)期制實(shí)驗(yàn)結(jié)課論文阿司匹林的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、姓名：王義西班級：藥學(xué)（3）班學(xué)號：指導(dǎo)老師：李樂日期：2013年9月3日乙酰水楊酸抗炎藥物的分析王義西石河子大學(xué)藥學(xué)院小學(xué)期藥學(xué)第三組第三實(shí)驗(yàn)組 摘要阿司匹林，化學(xué)名為 2-（乙酰氧基）苯甲酸，作為主要的解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥收載于中國藥典（2010年版）二部，臨床上主要用于治療感冒發(fā)燒，牙痛、肌肉痛及神經(jīng)痛等慢性疼痛，急、慢性風(fēng)濕病及類風(fēng)濕病等，是風(fēng)濕、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療的常用藥物。本品主要的副作用是引起幽門痙攣及刺激胃黏膜的 胃腸道反應(yīng)，長期服用導(dǎo)致胃腸出血。隨著現(xiàn)代藥學(xué)技術(shù)的發(fā)展，目前已有片劑、腸溶片、腸溶膠囊、 泡騰片和栓劑等多種劑型，以阿司匹

2、林為主藥的復(fù)方制劑也層出不窮，形成了阿司匹林含量測定方法的 各異性。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，各種儀器設(shè)備、新方法也應(yīng)用到了阿司匹林的鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測 定中，本文對其作一綜述。關(guān)鍵詞：阿司匹林鑒別雜質(zhì)檢查含量測定HPLC紫外分光光度法 TLC阿司匹林臨床上主要用于治療感冒發(fā)燒 ，牙痛、肌肉痛及神經(jīng)痛等慢性疼痛，急、慢性風(fēng)濕病及類 風(fēng)濕病等，是風(fēng)濕、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療的常用藥物。本文主要對阿司匹林做一綜合論述，通過對阿司匹 林的性狀、鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測定四個方面對乙酰水楊酸進(jìn)行藥物分析。1實(shí)驗(yàn)部分儀器與試劑儀器:紫外分光光度計（Cintra404,GBC ）、電子天平（AB135-S,梅特勒-

3、托利多儀器（上海）有限 公司METTLERTOLEDO、微孔濾膜（尺寸25mm孔徑0.8科，上海半島實(shí)業(yè)有限公司凈入器材廠）高效液相色譜儀、紫外檢測器、自動進(jìn)樣器、色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)、U V -26 0分光光度計、HPLC色譜柱、超純水器、展開槽、水浴鍋、研缽、移液管（1、2、5、10ml）、吸耳球、容量瓶（25、50、100ml）、燒杯（10、100、500ml）、膠頭吸管、直尺試齊復(fù)方乙酰水楊酸片（25mg/片）：阿司匹林貯備液溶液（1.5368m g/ml ）、無水乙醇、氯仿、 丙酮、冰醋酸、甲醇、95充醇、酚酬:指示液、碳酸鈉試液，稀鹽酸、稀硫酸、三氯化鐵試液、乙醛、硫 酸鐵鏤試液（新制）

4、、蒸儲水性狀阿司匹林為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；遇濕氣即緩緩水解。在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醴中溶解，在水或無水乙醴中微溶，在氫氧化鈉或碳酸鈉中溶解，但同時分解。酸性：阿司匹林分子結(jié)構(gòu)中具有鄰為取代苯甲酸結(jié)構(gòu)，故具有酸性。水解性：本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有酯鍵，可發(fā)生水解。吸收光譜特性：本類藥物中有苯環(huán)和特征取代基，均具有紫外和紅外特征光譜。鑒別試驗(yàn)與三氯化鐵反應(yīng)取本品的細(xì)粉適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.1g）,加水10ml,煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。薄層色譜鑒別樣品溶液的制備復(fù)方乙酰水楊酸片 取復(fù)方乙酰水楊酸片1片，研細(xì)，加氯仿15mI,振搖溶解，濾過，濾液作為樣品 溶液?？瞻兹芤旱?/p>

5、制備復(fù)方乙酰水楊酸片取片劑輔料（按生產(chǎn)廠家提供的一片處方量稱取）加氯仿15mI,振搖后濾過，濾液作為空白溶液。乙酰水楊酸對照品溶液的制備復(fù)方乙酰水楊酸片稱取水楊酸對照品適量，加氯仿制成每1ml中含水楊酸1 . 0mg勺單一對照品溶液。制法：復(fù)方乙酰水楊酸片 照薄層色譜法 精密量取乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液、乙酰水楊酸對照品溶液各5 ul ,點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以氯仿一乙醴一丙酮一冰醋酸 （27: 18: 1: 2）為展開劑，展距為10cm,展開后，晾干，置紫外燈（254nm）下檢視。樣品溶液所顯的1個斑點(diǎn)的位置與顏色分別與相應(yīng)的對照品溶液所顯的斑點(diǎn)一致，均顯暗黃 色。乙酰水楊酸Rf0. 85。雜質(zhì)

6、檢查比色法 乙酰水楊酸中游離水楊酸的檢查取本品0.1g,力口乙醇1ml溶解后，力口冷水適量使成 50ml立即溶液1ml （取1mol/L鹽酸液1ml加稀硫酸鐵鏤2ml后，再加適量使成 100ml搖勻，30秒鐘內(nèi)）。如顏色與對照液（精密稱取水楊酸0.1g,加水溶解后，加冰醋酸1ml,搖勻，再加水使成1000ml,搖勻）精密量取 1ml,加乙醇1ml,水48ml與上述新制的硫酸鐵鏤溶液1ml ,搖勻比較。不得更深（0.1%）。含量測定藥典規(guī)定每片檢品中含乙酰水楊酸應(yīng)為0.2090.231g0.4g）,置分液漏斗中，加水15ml,搖勻，用氯仿振搖提10ml洗滌，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，殘渣加中性

7、乙精密稱取上述細(xì)粉適量（約相當(dāng)于乙酰水楊酸取4次（20,10,10,10ml ）,提取氯仿液用同一份水醇（對酚酗指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酗指示液3滴，用0.1mol/L氫氧化鈉液滴定，即得（每1ml 0.1mol/L氫氧化鈉液相當(dāng)于 18.02mg的C9H8。4）。按下式計算每片含乙酰水楊酸的克數(shù)g/片:（T V f/W稱樣量）x平均片重高效液相法測定阿司匹林含量色譜條件：ODS為填充劑，流動相：甲醇-冰醋酸-水（8:4:1）檢測波長：276nm理論塔板數(shù)不低于 3000流速:0.8ml/min柱溫：室溫測定方法：精密稱取 2.1864g藥品，置50ml容量瓶中，力口 1%冰醋酸的甲

8、醇溶液適量，在 40-50攝氏度的 水浴中充分振搖使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液作為供試品貯備液，再量取貯備液5ml,置100ml容量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，用微孔過濾膜過濾，進(jìn)樣，記錄色譜圖。取阿司匹林對照品，精密稱取10mg。置于100ml容量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，同法測定。標(biāo)示量=（Cr*Ax/Ar*D*W ） /（W* 標(biāo)示量）*100%紫外分光光度法平行稱量樣品101.0mg、101.8mg、106.0mg ,分別用無水乙醇溶解，定容至 50ml容量瓶中即得。設(shè)定好參數(shù)后，轉(zhuǎn)換進(jìn)入計算模式。先進(jìn)行空

9、白調(diào)零，分別對3個不同濃度的樣品溶液進(jìn)行3次平行檢測。標(biāo)示量=A*D*W*1000/E*100*W*B*100%2結(jié)果與討論鑒別阿司匹林與三氯化鐵試液在加熱條件下反應(yīng)生成紫堇色。阿司匹林與碳酸鈉試液加熱水解，得水楊酸鈉及醋酸鈉，加過量稀硫酸酸化后，產(chǎn)生醋酸的臭氣。薄層色譜阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)品：Rf=5.1/7.3弋0.699阿司匹林供試品：Rf=5.0/7.3弋0.685兩者的Rf值基本接近，由此可得供試品中含有阿司匹林。雜質(zhì)檢查2.2.1比色法如圖所示左：標(biāo)準(zhǔn)品 右：供試品含量測定兩步滴定法g/片二(T V f/W 稱樣量)X平均片重 =(18.02mg/ml X 22.1ml X 1/0.916

10、2g) X 0.5039g=0.219g/片(圖見附件1)標(biāo)示量=(Crx Ax/Ar x D x W) /(W x 標(biāo)示量)乂 100%=10 X 1565247 X 0.5039/100 XX 0.2=(782623.5 /826330.66)X 100%心 95.0%計算得平均 制劑規(guī)格范圍為 格。本品不合格可 樣品未完全溶解；編號濃度A（平均值）白 r)95%-105%,所以該藥品不合(mg/ml)林/、里B12.0160.65262.94%22.0260.68323.07%能的原因：在制備樣品時，32.1140.7253.26%樣品制備后沒有立即測量，標(biāo)示量 B%=3.09%。藥典規(guī)

11、定可能有樣品分解。3結(jié)論鑒別實(shí)驗(yàn)與三氯化鐵反應(yīng)本方案設(shè)計加熱使阿司匹林水解成水楊酸，水楊酸在中性或弱酸性條件下加熱與三氯化鐵試液反應(yīng)，酚羥基與三價鐵結(jié)合生成紫堇色鐵配合物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)了如上陳述的紫堇色。說明供試品中含有阿司匹林。水解反應(yīng) 本方案利用的是阿司匹林的水解反應(yīng)，但在實(shí)驗(yàn)操作后只出現(xiàn)了氣泡和醋酸的臭氣，并未析出白色沉淀。分析實(shí)驗(yàn)失敗的原因有以下四點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備的稀硫酸經(jīng)PH試紙測試為深紅色，表明并不是符合實(shí)驗(yàn)使用的稀硫酸，濃度較高；所取用的藥片中阿司匹林含量較少，加熱水解后產(chǎn)生的水楊酸就會相應(yīng)的更少；水解不充分致使生成的水楊酸很少，無法產(chǎn)生明顯可見的白色沉淀。薄層色譜法TLC法為鑒別

12、阿司匹林方法中最優(yōu)先選擇的鑒別方法，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品與供試品試液的Rf值極其相近，說明供試品中含有阿司匹林。雜質(zhì)檢查比色法 阿司匹林的雜質(zhì)檢查采用了較常用和主觀的比色法，由上圖所示，左（標(biāo)準(zhǔn)品）顏色比右（供試品）顏色深，供試品顏色不得比標(biāo)準(zhǔn)品顏色更深，說明供試品中的雜質(zhì)限量符合藥典規(guī)定，為合格品。含量測定水解后剩余量滴定法水解后剩余量滴定法利用阿司匹林酯鍵在堿性環(huán)境下易水解的特性，加入估量的氫氧化鈉滴定液，加熱水解酯鍵后，再用硫酸滴定液回滴定剩余的氫氧化鈉滴定液。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計算所得阿司匹林的平均片重為0.219g,而使用的藥片的規(guī)格為 0.2g,說明所測定的阿司匹林的含量合格。HPLC法 HPL

13、C法測定阿司匹林含量的色譜圖見附件一，將原來高濃度的試液稀釋了10倍和100倍再進(jìn)針后，色譜圖較之前更理想，面積的值高達(dá)100%,說明所測供試品中雜質(zhì)含量減少，相應(yīng)阿司匹林的含量較高。數(shù)據(jù)處理的結(jié)果百分標(biāo)示量約為95%,則表明供試品的阿司匹林含量合格。由于制劑的含量限度較寬，因而對于制劑的含量測定方法應(yīng)以專一性為主，可更好地測定制劑的成分， 以便更好的控制質(zhì)量，而HPLC法可以滿足所有的要求。故我組采用了專一性與精確度都較好的HPLC法測定阿司匹林的含量。紫外分光光度法利用紫外分光光度法進(jìn)行阿司匹林的含量測定，計算得平均標(biāo)示量B%=3.09%。藥典規(guī)定制劑規(guī)格范圍為95%-105%,所以該藥品

14、不合格，說明實(shí)驗(yàn)失敗，分析失敗的原因有：在制備樣品時，未完全溶解；樣品制備后沒有立即測量，可能有樣品分解；過濾不充分，仍有雜質(zhì)殘存， 影響測定儀器操作不當(dāng)。實(shí)驗(yàn)心得：通過本次試驗(yàn)，使我更加深刻的了解了藥物分析的全部過程，對一個藥物質(zhì)量的評定，首先通過鑒別，再通過雜質(zhì)檢查，最后含量測定，每一步都特別關(guān)鍵。我們組實(shí)驗(yàn)的完成靠的是我們大家的一起動手，一起思考，團(tuán)結(jié)在一起。實(shí)驗(yàn)過程中也遇到了很多 的問題，這時候就需要我們冷靜的思考，哪里出現(xiàn)了問題，是藥品不對還是方法不對，如果一個方法分 析三次而且做了三次，還是有很大的問題，我們會選擇另一個方案，并且努力去分析上次實(shí)驗(yàn)的錯誤點(diǎn)。在紫外分光光度法含量測定

15、實(shí)驗(yàn)中，我們小組就遇到了很大的麻煩，連著做了四次，吸光度一直都在1以上，出現(xiàn)相同的錯誤。最大原因就是前面沒有認(rèn)真思考，只是盲目的在做。后來詢問了老師，也分析 出了原因。在做高效液相色譜分析法前，因?yàn)槲覀冃〗M了解到前面小組做很多次都是失敗，于是在做此HPLC法之前我們就去了解別的小組失敗的原因，他們的溶劑試劑，流動性成分及比例。等全部了解完之后，再 開始動手，結(jié)果一次性成功了，我們出的峰(見附件一)很理想，第一個樣品的峰可能由于雜質(zhì)太多，出的峰也比較多。后來我們給樣品稀釋，分別稀釋10倍和100倍。使雜質(zhì)濃度減少，出的峰更是理想。實(shí)驗(yàn)中需要我們嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度，發(fā)現(xiàn)問題要耐心分析。感受實(shí)驗(yàn)的過程，讓自

16、己通過一次實(shí)驗(yàn)真正有 所收獲。/、 iv 、, r t參考文獻(xiàn)1朱景申.藥物分析國家執(zhí)業(yè)藥師資格考試應(yīng)試指南M.西安：中國醫(yī)藥科技出版社，2000.163-167.2何英梅，賀軍權(quán).小劑量阿司匹林腸溶片含量測定商榷 J.中國藥事，2005,19(2):110-111.3國家藥典委員會.中國藥典S.二部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.283-284 附件一阿司匹林HPLC色譜圖標(biāo)準(zhǔn)品HPLC:樣品HLPC峰#保留時間面積面積分離度拖尾因子理論塔板#12.61810000.695800.063峰#保留時間面積面積分離度拖尾因子理論塔板#10.35693920.524801.72617.80221.42530940.17292.158076.30732.62156524787.4652.550.7531350.51643.535364252.0354r 0.861059.056 153.959218061.21850.186033.957164.399137810.770100074.85245761.3733r 00 110.673 185.506118500.6622P 0.159089.6751