人體解剖生理學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、實(shí)驗(yàn)二：神經(jīng)-肌肉標(biāo)本的制備與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)內(nèi)容坐骨神經(jīng)排腸肌標(biāo)本的制備刺激強(qiáng)度與骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系骨骼肌單收縮的分析骨骼肌收縮的總和與強(qiáng)直收縮目的要求學(xué)習(xí)蛙類(lèi)動(dòng)物單毀髓與雙毀髓的方法。學(xué)習(xí)并掌握蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)排腸肌標(biāo)本的制備方法。學(xué)習(xí)肌肉實(shí)驗(yàn)的電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。觀(guān)察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系。3 個(gè)時(shí)期。式的改變?；驹硗茴?lèi)的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似，若將蛙的神經(jīng)-肌肉表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等， 制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技

2、術(shù)。肌組織對(duì)于一個(gè)閾上強(qiáng)度的刺激，發(fā)生次迅速的收縮反應(yīng)，稱(chēng)為單收縮。單收縮的過(guò)程可分為 3 個(gè)時(shí)期：潛伏期、收縮期和舒張期。ft直收縮。動(dòng)物與器材蛙或蟾蜍、常用手術(shù)器械(手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)刀、金冠剪、眼科剪、眼科鑷、毀髓針和玻璃分針)、蠟盤(pán)、蛙板(木質(zhì)或硬泡沫塑料)、玻璃板、同定針、鋅銅弓、培養(yǎng)皿或不銹鋼盤(pán)、污物缸、滴管、紗布、粒棉線(xiàn)、任氏液。計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)、張力傳感器(100 g)、保護(hù)刺激電極、支架、雙凹夾、肌槽。實(shí)驗(yàn)方法與步驟一、神經(jīng)肌肉標(biāo)本的制備破壞腦、脊髓 取蟾蜍一只，用自來(lái)水沖洗干凈（勿用手搓）。左手握右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管（5.1-1）。然后將探針改23出

3、椎管。如蟾蜍仍有反射活動(dòng)，表示腦和脊髓破壞不徹底，應(yīng)重新破壞。剪除軀干上部皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蟾蜍的脊柱右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷，然后左手握住蟾蜍的后肢，緊靠柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去(注意避開(kāi)坐骨神經(jīng)),并剪去肛門(mén)周?chē)钠つw，留下脊柱和后肢。剝皮 一只手捏住脊柱的斷端（注意不要捏住脊柱兩側(cè)的神經(jīng)），只手捏住其皮膚的邊緣,向下剝?nèi)ト亢笾钠つw（5.1-2）。將標(biāo)本放在干凈的任氏液中。將手及使用過(guò)的探針、剪刀全部沖洗干凈。分離兩腿 用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本背面朝上，右手用粗剪刀剪去突出的骶骨（也可不進(jìn)行此步）7、8、9到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸?。?

4、.1-3）。游離坐骨神經(jīng)和腓腸肌 用蛙釘或左手的兩個(gè)手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半剪去其它不用的組織 操作從脊柱向小腿方向進(jìn)行。上而下剪去支配腓腸肌以外的神經(jīng)分支，直至腘窩（5.1-4(A)），并搭放在1/3（2/3），制成坐骨神經(jīng)-小腿的標(biāo)本。完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本 將脊椎和坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下，提起腓腸肌的結(jié)扎線(xiàn)剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位，便制成了坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本（圖 5.1-4(B)）。檢驗(yàn)標(biāo)本 用沾有任氏液的鋅銅弓觸及一下（或電刺激刺激）用熱玻棒、食鹽（1%HSO）刺激坐骨神經(jīng)中樞端（或肌肉），觀(guān)察肌肉24收縮

5、有何變化? 如果放上食鹽肌肉無(wú)動(dòng)靜,用任氏液將鹽沖洗掉,再觀(guān)察沖洗過(guò)程中肌肉收縮有何變化?二、刺激強(qiáng)度與骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系實(shí)驗(yàn)儀器用品的準(zhǔn)備(100 g)計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)觀(guān)察啟動(dòng)刺激圖標(biāo)，觀(guān)察肌肉收縮反應(yīng)。如果肌肉無(wú)收縮反應(yīng)，則適當(dāng)增度。同法逐漸增加刺激強(qiáng)度，觀(guān)察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系。34 次同等高度的收縮曲線(xiàn)和刺激強(qiáng)度(圖)。將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入表。表刺激強(qiáng)度與收縮反應(yīng)的關(guān)系實(shí)驗(yàn)次數(shù)實(shí)驗(yàn)次數(shù)刺激強(qiáng)度（mV）收縮幅度（mm）三、骨骼肌單收縮的分析實(shí)驗(yàn)儀器用品的準(zhǔn)備（見(jiàn)上）實(shí)驗(yàn)觀(guān)察刺激腓腸肌選用單刺激方式，調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度、使肌肉收縮的幅度適中(30mm 左右)。將實(shí)驗(yàn)3 個(gè)時(shí)程：潛伏朋

6、、收縮期與舒張期(圖)。（2）刺激坐骨伸經(jīng)將神經(jīng)搭在肌槽的刺激電極上，刺激輸出與肌槽上的刺激電極連接(圖 2。在刺激參數(shù)部不變的情況下，比較刺激神經(jīng)與刺激腓腸肌的單收縮曲線(xiàn)。四、骨骼肌收縮的總和與強(qiáng)直收縮實(shí)驗(yàn)儀器用品的準(zhǔn)備（見(jiàn)上）實(shí)驗(yàn)觀(guān)察收縮的總和510 變化(圖)。強(qiáng)直收縮減慢掃描速度(5mm/5)35mm 1.5 次/s(5)、6 次/s(10)、10 次/s(20)30 次/s(35)45 次50）并記錄肌肉收縮曲線(xiàn)的變化(29)注意事項(xiàng) 1用金屬器械觸碰神經(jīng)干。標(biāo)本的興奮性。制備標(biāo)本時(shí)，神經(jīng)纖維應(yīng)盡可能長(zhǎng)一些，將附著于神經(jīng)干上的結(jié)締組織使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。各儀器應(yīng)妥

7、善接地，儀器之間、標(biāo)本與電極之間應(yīng)接觸良好。經(jīng)常滴加任氏液，保持標(biāo)本濕潤(rùn)思考題?金屬器械碰壓或損傷神經(jīng)與腓腸肌，可能引起哪些不良后果?如何保持標(biāo)本的機(jī)能正常？是 什 么 ？ 5及生理過(guò)程？刺激骨骼肌與刺激神經(jīng)的單收縮曲線(xiàn)有何不同？完全強(qiáng)直收縮的條件與機(jī)制。實(shí)驗(yàn)三：影響神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)的因素觀(guān)察實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂龑?dǎo)蟾蜍坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位，并觀(guān)察其基本波形（電位）。學(xué)習(xí)和掌握神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度測(cè)定的原理和方法。何種影響？實(shí)驗(yàn)原理：蛙類(lèi)的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似，若將蛙的神經(jīng)-肌肉表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反

8、應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等， 制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技術(shù)。奮過(guò)程所發(fā)生的這種電位變化稱(chēng)神經(jīng)干動(dòng)作電位。如果將兩個(gè)引導(dǎo)電極置于正常完整的神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會(huì)先后通過(guò)兩個(gè)引導(dǎo)電極(r1r1,5.5-1)，可記錄到兩個(gè)相反方一個(gè)方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱(chēng)為單向動(dòng)作電位?；淖?，這一點(diǎn)不同于單根神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位。A類(lèi)纖維為主，傳導(dǎo)速度(V)大約為3540 m/s。測(cè)定神經(jīng)沖動(dòng)在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離(d)與通過(guò)這段距離所需的時(shí)間(t)，V=d/tt1，t2，t2t1d(5.5 15.5-2r1r2動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度與動(dòng)作電位產(chǎn)生的速度密切相關(guān),都是以離子運(yùn)

9、動(dòng)為基動(dòng)作電位在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的速度產(chǎn)生影響。儀器與試劑及材料：玻璃分針、蛙板（或玻璃板）、蛙釘、細(xì)線(xiàn)、培養(yǎng)皿、滴管、雙凹夾、培養(yǎng)皿、 1.5 倍氯化鉀任氏液、0.5實(shí)驗(yàn)方法與步驟：神經(jīng)肌肉標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本的制備儀器及標(biāo)本的連結(jié)用浸有任氏液的棉球擦拭神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒上的電極，標(biāo)本盒內(nèi)放置一遠(yuǎn)中端置于引導(dǎo)電極上。5.5-1816Hz，0.10.2ms，2V)0.10.52 ms/cm。外觸發(fā)輸入接刺激器的觸發(fā)輸出端。觸發(fā)選擇置于外觸發(fā)同步。開(kāi)啟至熒光屏中間。5.5-2CH1、CH2觀(guān)測(cè)和測(cè)定雙相動(dòng)作電位緩慢增大刺激強(qiáng)度，在偽跡后出現(xiàn)的先上(負(fù)相波)后下(正相波)的電作電位波形的變化。讀出波寬為

10、某一數(shù)值時(shí)的閾刺激。增大刺激強(qiáng)度的過(guò)程中，偽跡和動(dòng)作電位均隨之加大，但當(dāng)強(qiáng)度加大加大。這是區(qū)別刺激偽跡與動(dòng)作電位的可靠方法之一。5.5-3)將神經(jīng)干標(biāo)本放置的方向倒換后，雙相動(dòng)作電位的波形有無(wú)變化？r1,r15觀(guān)察單相動(dòng)作電位用鑷子將兩個(gè)引導(dǎo)電極r1,r13mol/L溶液的濾紙片貼在第二個(gè)引導(dǎo)電極數(shù)值。6動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定換一根坐骨神經(jīng)，按步驟3（1）搭放在神經(jīng)屏蔽盒的電極上。進(jìn)入“神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度”模擬實(shí)驗(yàn)菜單，或在顯示方式菜單中選擇“比較顯示方式”（則可在一個(gè)通道內(nèi)顯示兩個(gè)通道的圖形個(gè)通道中（或示波器的上、下線(xiàn)）觀(guān)察到先后形成的兩個(gè)雙向動(dòng)作電位波形。t1，下線(xiàn)為t2(t2t1d(

11、即測(cè)定 r245min導(dǎo)速度。255 min的傳導(dǎo)速度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：Vd/(t2t1)(m/s)。注意事項(xiàng)：用金屬器械觸碰神經(jīng)干。標(biāo)本的興奮性。制備標(biāo)本時(shí)，神經(jīng)纖維應(yīng)盡可能長(zhǎng)一些，將附著于神經(jīng)干上的結(jié)締組織使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。各儀器應(yīng)妥善接地，儀器之間、標(biāo)本與電極之間應(yīng)接觸良好。經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標(biāo)本濕潤(rùn)，但要用濾紙片吸去神經(jīng)干上過(guò)多上，以免影響動(dòng)作電位的波形。測(cè)定動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度時(shí)，兩對(duì)引導(dǎo)電極間的距離應(yīng)盡可能大。思考題：KCl特性有矛盾嗎？為什么?引導(dǎo)電極調(diào)換位置后，動(dòng)作電位波形有無(wú)變化?為什么?t1的？4為什么? 附：刺激偽跡 逐漸增大刺激強(qiáng)度時(shí)，在屏幕的左側(cè)基線(xiàn)

12、上第一個(gè)波即為偽它的產(chǎn)生機(jī)制有二，一是通過(guò)刺激電極與記錄電極之間的電容偶合進(jìn)入放大器， 細(xì)胞膜的電纜學(xué)說(shuō) 細(xì)胞外液和細(xì)胞內(nèi)液均為含電解質(zhì)的液體，可以看作為兩個(gè)導(dǎo)體，有一定的電阻；細(xì)胞膜是含脂質(zhì)的膜，相對(duì)地視作絕緣體，與前雙極記錄法 本實(shí)驗(yàn)使用的記錄方法為雙極記錄法，所記錄到的電位變刺激的極性法則 以直流電作用于神經(jīng)時(shí)，在通電、斷電時(shí)均可產(chǎn)生興記錄介質(zhì) 通常所說(shuō)雙相動(dòng)作電位的波形，其記錄介質(zhì)是空氣或油。若上滴過(guò)多的任氏液。實(shí)驗(yàn)四：蛙類(lèi)離體心臟灌流及藥物影響（綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)離體蛙心灌流的實(shí)驗(yàn)方法，了解離體器官的研究方法。了解腎上腺素、乙酰膽堿等激素、神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)心臟活動(dòng)的調(diào)節(jié)意義。實(shí)

13、驗(yàn)原理：壞，例如酸堿度及離子濃度的急劇改變等，心臟的活動(dòng)就會(huì)受到影響。釋放乙酰膽堿，使心肌收縮力量減弱，心率減慢。的影響與其內(nèi)部所含物質(zhì)的成份有關(guān)。動(dòng)物與器材：蛙心夾,計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng),張力傳感器,滴管,培養(yǎng)皿,污物缸,紗布,棉線(xiàn),橡皮泥, ,0.65%NaCl1%CaCl1%KCl3%2.5%NaHCO1:50002乙酰膽堿,300U/ml方法與步驟：取一只蛙或蟾蜍,雙毀髓后背位于蠟盤(pán)中,仔細(xì)識(shí)別心臟周?chē)拇笱?。在左?dòng)脈下方穿一線(xiàn),于動(dòng)脈圓錐處結(jié)扎,再?gòu)淖笥覂蓜?dòng)脈下方穿一線(xiàn),并打一活蛙心套管,然后將盛有少量任氏液的斯氏蛙心套管,由開(kāi)口處插入動(dòng)脈圓錐.當(dāng)套管進(jìn)到大動(dòng)脈圓錐基部時(shí),應(yīng)將套管稍稍后

14、退,提取蛙心夾連線(xiàn)并使蛙心套管尖端向動(dòng)脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進(jìn),經(jīng)動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)。此時(shí)可見(jiàn)吸去套管中的血液,更換新鮮任氏液。穩(wěn)定套管后,輕輕提起備用線(xiàn),將左右動(dòng)脈連同插入的套管用雙結(jié)扎緊(不得漏液),再將結(jié)線(xiàn)固定在套管的小玻璃鉤上,然心室內(nèi)余血,使血管內(nèi)灌流液不再有殘留血液,保持套管內(nèi)液面高度一致,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將插好的離體心臟套管固定在支架上,用蛙心夾住少許的心尖部肌肉.再將蛙心尖上的系線(xiàn)繞過(guò)一個(gè)滑輪與張力傳感器相連。注意:勿使灌流液滴到張力傳感器上,調(diào)節(jié)顯示器的心臟收縮的曲線(xiàn)幅度適中。實(shí)驗(yàn)觀(guān)察度。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)及結(jié)果觀(guān)察溫度對(duì)無(wú)機(jī)離子蛙心活動(dòng)的影響A、把蛙心套管內(nèi)任氏液全部換為 0.

15、65%NaCl 溶液，觀(guān)察心跳變化。B0.65%NaCl1%CaCl2溶液 12 滴，觀(guān)察心跳變化。C1%CaCl121%KCl122觀(guān)察心跳變化。DKCl0.01%23觀(guān)察心跳變化。遞質(zhì)和激素對(duì)蛙心活動(dòng)的影響A、把含腎上腺素的溶液吸出，換以任氏液，加入 0.01%乙酰膽堿溶液 12滴，觀(guān)察心跳變化。B、把含乙酰膽堿的溶液吸出，換以任氏液，加入 3%乳酸溶液 12 滴，觀(guān)察心跳變化。待心跳變化明顯時(shí)，立即加入 2.5%NaHCO3逐步恢復(fù)。心血管藥物對(duì)蛙心活動(dòng)的影響溶液 12 滴，觀(guān)察心跳K實(shí)驗(yàn)結(jié)果。觀(guān)察自己提取的植物制劑和人民常飲用的化合物對(duì)例題蛙心的活動(dòng)影響中草藥：夾竹桃葉、蟾酥、蛙皮素、

16、煙葉、茶葉等。有機(jī)化合物：乙醇、甲醇等。（鮮組織用量多些泡冷卻后備用。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)觀(guān)察的項(xiàng)目數(shù)量10進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)：3復(fù)正常后再進(jìn)行下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。錯(cuò)。響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。蛙心插管內(nèi)液面應(yīng)保持恒定高度。保持記紋鼓轉(zhuǎn)速均勻一致。思考題：本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明心肌的那些生理特征？用實(shí)驗(yàn)說(shuō)明內(nèi)環(huán)境相對(duì)恒定的意義。試分析任氏液中適量離子,鈣離子,鉀離子對(duì)心肌的影響。為何強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)保持灌流液面的恒定?灌流量對(duì)心臟活動(dòng)的有什么影響？試想,活的機(jī)體在心交感神經(jīng)興奮時(shí)或迷走神經(jīng)興奮時(shí)對(duì)心臟有何影響附：離子和藥物對(duì)離體蛙心活動(dòng)的影響的解釋K對(duì)心臟活動(dòng)的影響：總體看來(lái)心肌對(duì)細(xì)胞外 K濃度變化比較敏感；但是不同部位心肌的敏感性有所不同，心房

17、肌最敏感，房室束浦肯野纖維系統(tǒng)次之，竇房結(jié)敏感性較低。細(xì)胞外液鉀濃度增高時(shí)，對(duì)興奮性的影響與其濃度增高的程度有關(guān)。當(dāng) K 濃度輕度或者中度升高時(shí)，細(xì)胞內(nèi)外K的濃度梯度減小，K外流的力量減弱,靜息電位（RP）的絕對(duì)值減小,和閾電位(TP)差值減小,細(xì)胞的興奮性增高；當(dāng) K 的濃度大幅度的升高，RP 的絕對(duì)值減?。?nèi)55mv 左右）時(shí)，鈉通道的開(kāi)放效率降低，鈉通道逐漸失活，興奮性降低或者喪失，嚴(yán)重時(shí)，可導(dǎo)致心肌停搏于舒張狀態(tài)。此時(shí)，僅由Ca2的內(nèi)流來(lái)構(gòu)成動(dòng)作電位，故上升支小而緩慢，使興奮傳導(dǎo)速度減慢，傳導(dǎo)性降低。K程加速，平臺(tái)期縮短，不應(yīng)期也縮短。KCa2在細(xì)胞膜上有競(jìng)KCa2減少，心肌細(xì)胞內(nèi)C

18、a2Ca2能力。4 期自動(dòng)除極速度減慢，導(dǎo)致竇房結(jié)自律性降低，心率減慢。Ca2對(duì)心臟活動(dòng)的影響：Ca2Na用。因此，細(xì)胞外Ca2濃度發(fā)生變化時(shí)，與Ca2Na動(dòng)都將受到影響，而對(duì)靜息電位則無(wú)明顯作用。Ca2NaNa0電位的差距加大，興奮性降低；發(fā)生興奮后，Na0Ca202Ca20Ca2極加速、不應(yīng)期和動(dòng)作電位時(shí)程均縮短。Ca2Ca2Ca2去甲腎上腺素對(duì)心臟活動(dòng)的影響：去甲腎上腺素與心肌細(xì)胞膜上的cAMPCa2Ca24If，使心率加快。乙酰膽堿對(duì)心臟活動(dòng)的影響：McAMPCa2可以能使傳導(dǎo)速度減慢，心率降低。50.65NaCl 對(duì)心臟活動(dòng)的影響：0.65NaClCa2濃度、K+濃度大大降低，使心肌的收縮能力減弱，心率減慢。63乳酸對(duì)心臟活動(dòng)的影響：