畢業(yè)論文-金蓮花化學(xué)成分的初步研究

1、沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 目錄 沈 陽(yáng) 藥 科 大 學(xué)本 科 畢 業(yè) 論 文 論文題目：金蓮花化學(xué)成分的初步研究起止時(shí)間：2014年10月14日- 2015年6月 22日姓名學(xué)號(hào)學(xué)院專(zhuān)業(yè)：中藥學(xué)院中藥學(xué)（日語(yǔ)強(qiáng)化）專(zhuān)業(yè)年級(jí)班級(jí)：2010級(jí)中藥學(xué)（日語(yǔ)強(qiáng)化）1班指導(dǎo)教師：實(shí)習(xí)單位：中藥學(xué)院天然藥物化學(xué)教研室沈 陽(yáng) 藥 科 大 學(xué)本科畢業(yè)論文任務(wù)書(shū)學(xué)生姓名專(zhuān)業(yè)、年級(jí)、班中藥學(xué)（日語(yǔ)強(qiáng)化）專(zhuān)業(yè) 2010級(jí) 一班論文題目金蓮花化學(xué)成分的初步研究實(shí)習(xí)單位沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院天然藥物化學(xué)教研室 (單位公章)研究主要內(nèi)容：通過(guò)查閱大量文獻(xiàn)，對(duì)金蓮花的化學(xué)成分、藥理活性及應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行總結(jié)概括。在此基礎(chǔ)之上采用

2、正相硅膠柱色譜法、反相硅膠柱色譜法、Sephadex LH-20柱色譜、高效液相色譜、重結(jié)晶等分離技術(shù)對(duì)金蓮花進(jìn)行分離和純化，最后通過(guò)NMR技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。預(yù)期目標(biāo)：充分掌握查閱各種文獻(xiàn)和中藥材的提取分離方法，進(jìn)一步熟悉NMR技術(shù)的結(jié)構(gòu)鑒定方法，能夠從金蓮花提取物中分離鑒定3個(gè)化合物。論文工作進(jìn)度安排（起止時(shí)間）：2014年10月14日2014年11月10日：查閱文獻(xiàn)，確立實(shí)驗(yàn)方法2014年11月11日2014年12月20日：提取藥材金蓮花2014年12月21日2015年6月5日：分離純化提取物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定2015年6月6日2015年6月22日：總結(jié)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，撰寫(xiě)畢業(yè)論文，準(zhǔn)備畢業(yè)答辯指導(dǎo)

3、教師（簽字）： 填表時(shí)間： 年 月 日教研室意見(jiàn)： 教研室主任（簽字）：學(xué)院意見(jiàn)： 學(xué)院院長(zhǎng)（簽章）： 下達(dá)任務(wù)時(shí)間： 年 月 日 沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 中文摘要 目 錄中文摘要2英文摘要3 金蓮花的研究概況 41.1 前言 41.2 金蓮花化學(xué)成分的研究進(jìn)展 41.3 藥理活性及其它應(yīng)用 7 金蓮花的化學(xué)成分研究 92.1 從金蓮花中分離得到的化合物的編號(hào)，名稱(chēng)，結(jié)構(gòu)和鑒定方法 92.2 化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定 9第三章 實(shí)驗(yàn)部分 113.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器 113.2 藥材的提取與分離 11第四章 結(jié)果與討論13參考文獻(xiàn) 14致謝 16沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 摘要 摘 要金蓮花(Trol

4、lius chinensis Bunge)為毛茛科(Rannuculaceae)金蓮花屬多年生草本植物，分布于山西、河南北部、河北、陜西、內(nèi)蒙古東部、遼寧和吉林西部。它在民間應(yīng)用廣泛，具有極大的藥用開(kāi)發(fā)價(jià)值。本文綜合利用正相硅膠柱色譜、反向硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、高效液相色譜、重結(jié)晶等分離技術(shù)，從金蓮花提取純化后的粉末中分離了3個(gè)化合物，根據(jù)理化性質(zhì)以及NMR技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，分別為：3-甲氧基-4-羥基苯乙醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、葒草苷。 關(guān)鍵詞：金蓮花；分離技術(shù)；結(jié)構(gòu)鑒定 沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 Abstract AbstractTrollius chinensis

5、 Bunge(Ranunculaceae) is a perennial herb,widely distributed in Shanxi,north of Henan,Hebei, Shanxi, east of Inner Mongolia,and west of Liaoning and Jilin provinces. Its flowers are widely used and have great medicinal development value. The normal phase silica gel column chromatography, reversed ph

6、ase silica gel column chromatography, sephadex LH-20, HPLC, recrystallization had been used for the separation and purification and three compounds had been separated from Trollius chinensis Bunge flowers of extract separation.According to the physical and chemical properties and NMR technology to t

7、he structure identification, respectively is:methyl p-hydroxybenzoate、OrientinKeywords: Trollius chinensis Bunge; HYPERLINK /link?url=1hu6Z-j43WXbLG9YeT6sP0m8Qwj63u9FLbwaZADw9OkPHyJwOQdO-LqqzMaIs9-dDDYCj_-f7s7c5Gyy9IdraCtewyFybM_RONwubUd7Giu&ie=utf-8&f=8&tn=56060048_4_pg&wd=%E5%88%86%E7%A6%BB%E6%8A%

8、80%E6%9C%AF%E7%94%A8%E8%8B%B1%E8%AF%AD%E6%80%8E%E4%B9%88%E8%AF%B4&ssl_s=1&ssl_c=ssl1_14e01f1d586&searchRadio=on t /_blank isolation technique; structure identification沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第一章 金蓮花的研究概況 沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第一章 金蓮花的研究概況 第一章 金蓮花的研究概況1.1前言金蓮花別名旱金蓮、旱地蓮、金芙蓉、金梅草等，是毛茛科金蓮花（Trollius chinensis Bunge）的干燥花，多年生宿

9、根草本植物，其花可供藥用，味苦，性寒，無(wú)毒。藥材呈不規(guī)則團(tuán)狀，皺縮，顏色為金黃色或棕黃。金蓮花生長(zhǎng)在海拔1000-2200米的山地草坡或疏林下。金蓮花屬植物中，在中國(guó)常見(jiàn)的品種有，金蓮花（T.chinensis Bge.），短瓣金蓮花（T.ledebouri Reichb.），長(zhǎng)瓣金蓮花（T.macropetalus Fr.Schmidt.），阿爾泰金蓮花（T.altaicus C.A.Meg.），亞洲（寬瓣）金蓮花（T.asiaticus L.）等十幾種，其多為野生狀態(tài)，在我國(guó)分布較為廣泛。金蓮花在中國(guó)民間藥用歷史悠久，是清代始建應(yīng)用的一種草藥，在中、蒙藥中有很高的醫(yī)用價(jià)值。據(jù)記載中藥金蓮花

10、功能為清熱解毒、治上感、扁桃體炎、咽炎等；蒙藥多配方用，治療創(chuàng)傷、目赤、癰腫。其化學(xué)成分主要含有黃酮類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、香豆素類(lèi)、生物堿類(lèi)，藥理活性顯示它對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和多種病毒有明顯的抑制作用。基于金蓮花目前的化學(xué)成分和藥理活性，為以后金蓮花藥用價(jià)值的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)，作者對(duì)金蓮花的化學(xué)成分進(jìn)行了初步的研究。1.2金蓮花化學(xué)成分的研究進(jìn)展根據(jù)現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道，已經(jīng)從金蓮花中提取分離的化學(xué)成分主要有黃酮類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、生物堿類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)。除上述成分外，還有香豆素、樹(shù)脂、多糖、鞣質(zhì)及多種甾醇類(lèi)化合物，但相關(guān)報(bào)道很少。1.2.1黃酮類(lèi)成分研究表明，黃酮類(lèi)是金蓮花主要的化學(xué)成分及其有效活性成分。目前已從金蓮花

11、中提取分離出近20種黃酮類(lèi)化合物，以1葒草苷（Orientin）、2牡荊苷（Vitexin）為主。金蓮花屬中黃酮類(lèi)成分多數(shù)以黃酮苷的形式存在，而少數(shù)以游離的形式存在。其化學(xué)結(jié)構(gòu)特征是：基本骨架為黃酮、黃酮醇。1992年，劉麗娟等首次從長(zhǎng)瓣金蓮花中得到兩種黃酮類(lèi)化合物：3牡荊素-2-O-D-吡喃木糖苷（vitexin-2-O-D-pyranxyloside）和 4葒草素-2-O-D-吡喃木糖苷（orientin-2-O-D-pyranxyloside）。2000年，黃文哲等又從短瓣金蓮花中分離到一種氧苷黃酮槲皮素-3-O-新橙皮糖苷。2004年，宋冬梅等還從阿爾泰金蓮花中分離到一種甲氧基黃酮柯伊

12、利素，這是首次從金蓮花屬植物中分離到該物質(zhì)。 1.2.2有機(jī)酸類(lèi)成分目前研究發(fā)現(xiàn)金蓮花的有機(jī)酸成分主要有1金蓮酸（globeflowery acid）、2藜蘆酸（veratric acid）、軟脂酸（palmitic acid）等。2008年，李勝銀等分離出4-(-D-glucopyranosyloxy)-3-(3-methyl-2-butenyl)benzoic acid。2010年，劉召陽(yáng)等從金蓮花中又分離得到一種有機(jī)酸類(lèi)化合物烏蘇酸。2012年， 魏金霞等從金蓮花中分離出原兒茶酸。 1 21.2.3生物堿類(lèi)成分通過(guò)查閱大量國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)得知，目前從金蓮花中提取分離得到的生物堿類(lèi)成分有三種，外

13、國(guó)文獻(xiàn)報(bào)道中分離得到兩種吡咯雙烷類(lèi)生物堿（Pyrrolizidine alkaloids），千里光寧（ Senecionine）和全緣堿（ Integerrimine）。2012年，國(guó)內(nèi)學(xué)者魏金霞等從金蓮花中分離出一種新的生物堿金蓮花堿（Trolline）。金蓮花堿：無(wú)色片狀結(jié)晶(甲醇)，mp 165.0167.0。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性，提示結(jié)構(gòu)中存在酚羥基；體積分?jǐn)?shù)為10% 硫酸乙醇溶液顯淡黃色斑點(diǎn)，紫外 365 nm 波長(zhǎng)下顯黃色熒光。1.2.4揮發(fā)油類(lèi)成分1998年，馮學(xué)峰報(bào)道金蓮花中的揮發(fā)油以揮發(fā)性脂肪酸為主，相對(duì)含量較高的有十四烷酸（tetradecanoic acid，21.

14、34%）、十二烷酸（dodecanoic acid，20.57%）、十六烷酸（hexadecuneic acid， 5.46%）、9,12,15-十八碳三烯酸（9,12,15-octadecatnenoic acid，4.47%）、正二十一烷（n- heneicosane，2.30%）、十四酸甲酯（methyl tetradecanoate，1.51%）、十六酸甲酯（methyl hexadecanoate，1.50%）、癸酸（decanoic acid，1.31%）、芳樟醇（1inaloo，1.32%）。1.3藥理活性及其它應(yīng)用近年來(lái)，許多學(xué)者對(duì)金蓮花屬植物抗菌、抗病毒、抗氧化活性成分的研究

15、日益增多，主要包括黃酮類(lèi)和有機(jī)酸類(lèi)化合物。在臨床上表現(xiàn)為它對(duì)上呼吸道感染、扁桃體炎、咽炎和急性中耳炎等癥有效，對(duì)急性闌尾炎、細(xì)菌性痢疾、泌尿系統(tǒng)感染、急慢性支氣管炎等也有較好的治療效果。目前，已有學(xué)者對(duì)其它中藥材的發(fā)酵成分及其應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行了一系列的研究并取得相應(yīng)的成果，但對(duì)金蓮花發(fā)酵物的研究領(lǐng)域仍然處于一片空白。1.3.1抗菌活性1973年,北京制藥廠(chǎng)的體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,金蓮花抑菌譜較廣,在體外對(duì)革蘭氏陽(yáng)性球菌和革蘭氏陰性桿菌均有較好的作用,如綠膿桿菌、甲鏈球菌、肺炎雙球菌、卡他球菌、痢疾桿菌等菌。尤其是對(duì)綠膿桿菌的作用比較明顯。2001年，楊宜婷等用枯草芽孢桿菌 ATCC6633、表皮葡

16、萄球菌 ATCC12228、金黃色葡萄球菌 ATCC6538P、藤黃微球菌 ATCC9314 作為受試菌種發(fā)現(xiàn)金蓮花試樣的抑菌效果為：總黃酮牡荊苷+葒草苷原金蓮酸，從而得出金蓮花屬植物的抑菌活性是多種化學(xué)成分協(xié)同作用的效果。1.3.2抗病毒活性金蓮花水提液對(duì)CoxB3病毒有很強(qiáng)的抑制作用，對(duì)CoxA24變異株有一定抑制作用。蘇連杰等用金蓮花乙醇提取物對(duì)感染流感病毒的小鼠進(jìn)行研究，結(jié)果顯示中、高劑量組感染病毒小鼠的存活時(shí)間明顯延長(zhǎng)。1.3.3抗氧化活性2006年，周欣等指出：短瓣金蓮花中牡荊苷、葒草苷、槲皮素-3-O-新橙皮糖苷、槲皮素-3-O-巢菜糖苷等四種黃酮苷單體具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性。

17、例如，它們對(duì)DPPH 自由基有很強(qiáng)的清除作用，能明顯的清除OH 和抑制大鼠紅細(xì)胞氧化性溶血的作用。1.3.4臨床應(yīng)用早在1973年北京制藥廠(chǎng)就將金蓮花片劑及針劑應(yīng)用于臨床，治療扁桃體炎、呼吸道感染等。隨著人們不斷對(duì)金蓮花的研究，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)其抗菌譜廣、療效顯著且無(wú)明顯毒副作用，臨床用于治療泌尿系統(tǒng)感染療效極好。根據(jù)現(xiàn)有資料顯示，臨床采用金蓮花軟膠囊治療咽炎，無(wú)論是治愈率還是癥狀改善方面都比阿莫西林軟膠囊療效好，臨床推廣性很高，發(fā)展前景廣闊。1.3.5保健價(jià)值金蓮花嫩梢、花蕾及新鮮種子可作辛辣調(diào)味品。金蓮花茶是承德百姓家里的常備的，為優(yōu)質(zhì)的民間茶，其保健價(jià)值得到了大家的認(rèn)可?；ǘ涓鶕?jù)其風(fēng)味特點(diǎn)和個(gè)

18、人習(xí)慣，可拌、可炒、可燉、可泡，也可做餡制做各種風(fēng)味獨(dú)特的點(diǎn)心。歐美人則更喜歡用來(lái)調(diào)制沙拉、制作三明治以及做湯等。1.3.6卷煙加香隨著社會(huì)的進(jìn)步和科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們對(duì)生活質(zhì)量愈發(fā)關(guān)注，因此金蓮花應(yīng)用到卷煙加香工藝中的前景廣闊。金蓮花浸膏中的揮發(fā)性成分具有清甜的花香，對(duì)提高卷煙的抽吸品質(zhì)具有重要作用。其中，高級(jí)脂肪酸能改變卷煙煙氣的粗劣感而使其具有清甜柔和的味道，酯類(lèi)物質(zhì)特有的香氣則可以提高和改善卷煙的氣味，使之更香醇，味道更佳。金蓮花浸膏中的微量香味物質(zhì)同樣不容小覷，如苯乙醛的玉簪花香氣濃郁，苯乙醛的玫瑰香氣清甜，環(huán)檸檬醛具有獨(dú)特的甜味。綜上所述，金蓮花浸膏可以應(yīng)用于卷煙加工工藝中，以增加

19、卷煙的香氣，減輕嗆鼻的刺激感，掩蓋煙草的雜昧，使卷煙具有獨(dú)特的風(fēng)味口。沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第二章 金蓮花的化學(xué)成分研究 沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第二章 金蓮花的化學(xué)成分研究 第二章 金蓮花的化學(xué)成分研究本實(shí)驗(yàn)采用正相硅膠柱色譜法、反相硅膠柱色譜法、Sephadex LH-20柱色譜、高效液相色譜、重結(jié)晶等分離技術(shù)，從金蓮花提取純化后的粉末中分離了3個(gè)化合物，根據(jù)理化性質(zhì)以及NMR技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，分別為3-甲氧基-4-羥基苯乙醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、葒草苷。2.1 從金蓮花中分離得到的化合物的編號(hào)，名稱(chēng)，結(jié)構(gòu)和鑒定方法No.NameStructureMethodsComp 13-甲氧基-

20、4-羥基苯乙醇1H-NMRComp 2對(duì)羥基苯甲酸甲酯1H-NMRComp 3葒草苷1H-NMR2.2 化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定化合物1：黃色油狀物（甲醇），Mp。紫外254nm下顯暗斑，10%硫酸-乙醇顯粉紅色，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性，提示結(jié)構(gòu)中存在酚羥基。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）譜中： 8.79（1H，s）為酚羥基質(zhì)子信號(hào)， 6.78（1H，d，J = 8.12Hz），6.63（1H，d，J = 2.0Hz），6.56（1H，dd，J = 8.12，2.0Hz）為苯環(huán)ABX偶合系統(tǒng)質(zhì)子信號(hào)；同時(shí)存在一組-CH2-CH2-質(zhì)子信號(hào) 3.52（2H，t，J = 7.2Hz）和

21、2.57（2H，t，J = 7.2Hz）； 3.71（3H，s）為甲氧基信號(hào)。將上述波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致，鑒定該化合物為3-甲氧基-4-羥基苯乙醇（3-methoxy-4-hydroxymandelic），結(jié)構(gòu)式如下：化合物2：無(wú)色針狀結(jié)晶（甲醇）。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性，溴甲酚綠反應(yīng)陰性，提示結(jié)構(gòu)中存在酚羥基而無(wú)羧基。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）譜中：10.34（1H，s）為活潑羥基信號(hào)，一組對(duì)位取代苯環(huán)上AABB偶合系統(tǒng)質(zhì)子 6.85（2H，d，J = 8.8Hz），7.82（2H，d，J = 8.8Hz），同時(shí)給出 3.78（3H，s）為甲氧基信號(hào)。將上述波譜數(shù)

22、據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致，鑒定該化合物為對(duì)羥基苯甲酸甲酯（methyl p-hydroxybenzoate）結(jié)構(gòu)式如下：化合物3：黃色粉末（甲醇）。鹽酸-鎂粉反應(yīng)陽(yáng)性，三氯化鋁反應(yīng)陽(yáng)性，Molisch反應(yīng)陽(yáng)性，提示該化合物為黃酮苷類(lèi)化合物。1H-NMR（400MHz，DMSO-d6）譜中： 13.18（1H，brs）為5位締合酚羥基質(zhì)子信號(hào)； 7.53（1H，brd，J = 8.3 Hz），7.48（1H，brs），6.86（1H，d，J = 8.3 Hz）為黃酮B環(huán)ABX偶合系統(tǒng)質(zhì)子信號(hào)； 6.64（1H，s）為3位質(zhì)子信號(hào)； 6.26（1H，s）為6位質(zhì)子信號(hào)； 4.68（1H，d，J = 9

23、.8 Hz）為糖端基質(zhì)子信號(hào)，根據(jù)其偶合常數(shù)判斷其為碳苷類(lèi)化合物，且其苷鍵為構(gòu)型； 3.233.86（6H，m）為糖上其它的氫信號(hào)。上述理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照基本一致，故鑒定該化合物為葒草苷（orientin），結(jié)構(gòu)式如下：沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)部分 沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第三章 實(shí)驗(yàn)部分 第三章 實(shí)驗(yàn)部分3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料金蓮花由陜西慧科植物開(kāi)發(fā)有限公司提供。HPD-100型大孔樹(shù)脂（滄州寶恩吸附材料科技有限公司）；薄層色譜硅膠GF254、柱色譜硅膠（青島海洋化工廠(chǎng)）；SephadexLH-20（Amersham Pharmacia Biot

24、ech AB公司）；色譜甲醇（天津康科德科技有限公司）；其他試劑（分析純，市售）3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮盛華儀器廠(chǎng)），SHB-型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司），DLSB-5/20型低溫冷卻液循環(huán)泵，HS3120D 型超聲波清洗器( 昆山市超聲儀器有限公司) ，電子恒溫水浴鍋（天津力泰斯儀器有限公司）；UV-8紫外燈（北京亞興泰機(jī)電設(shè)備有限公司）；干燥箱（南京沃環(huán)科技實(shí)業(yè)有限公司）；YP202N電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；TH-2000型數(shù)控超聲波清洗器（濟(jì)寧天華超聲電子儀器有限公司 ）；ARX-400、AV-600核磁共振儀（瑞士Bruk

25、er公司）。3.2藥材的提取與分離3.2.1 金蓮花藥材提取與藥用成分富集取金蓮花的干燥花7.5 kg，用16倍量60%乙醇回流提取3次，每次1.5小時(shí)，合并提取液濃縮至75 L，抽濾，備用。大孔樹(shù)脂初步分離 （1）大孔樹(shù)脂預(yù)處理：商品樹(shù)脂均殘留惰性溶劑，故使用前根據(jù)應(yīng)用需要，必須進(jìn)行不同深度的預(yù)處理。將適量的D101型大孔樹(shù)脂置于桶狀容器中，使用95%乙醇浸泡，直至浸泡液澄清，且經(jīng)過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收溶劑后，燒瓶底無(wú)白色殘留物為止。將乙醇清洗后的樹(shù)脂用蒸餾水反復(fù)浸泡，除去漂浮于水面的樹(shù)脂殘屑。經(jīng)過(guò)95%乙醇、蒸餾水洗滌，以低濃度乙醇溶液樹(shù)脂裝柱即可。（2）大孔樹(shù)脂富集黃酮類(lèi)化合物：將金蓮花提取液

26、用D101大孔吸附樹(shù)脂柱色譜分離純化，先用水洗脫，后用50%乙醇溶液洗脫，最后得到50%乙醇洗脫物630 g。提取流程圖如下所示： 3.2.2 硅膠柱色譜初步分離：取50%乙醇洗脫物110 g進(jìn)行硅膠柱色譜（200 - 300目）分離，以不同比例的二氯甲烷-甲醇（100:0 - 0:100）進(jìn)行梯度洗脫，每個(gè)流份收集300 ml，共收集513個(gè)流份，薄層鑒別合并后共得到13個(gè)流份（Fr.1 - 13）。3.2.3 化合物分離純化1:1-0:100 Fr.1- Fr.3Fr.4約1.76g，用3.0g柱層析硅膠拌樣，以二氯甲烷-甲醇（100:0 - 0:100）進(jìn)行梯度洗脫，將樣品根據(jù)TLC顯色

27、狀況及紫外下?tīng)顩r合并為5 組流分。5 組流分分別采用重結(jié)晶法及高效液相，得到化合物1及化合物2。Fr.11約11.2g，用18g柱層析硅膠拌樣，以二氯甲烷-甲醇（100:0 - 0:100）進(jìn)行梯度洗脫，將樣品根據(jù)TLC顯色狀況及紫外下?tīng)顩r合并為10 組流分，F(xiàn)r.11.6采用Sephadex-LH20柱色譜和高效液相，得到化合物3。 沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 第四章 結(jié)果與討論 第四章 結(jié)果與討論采用反復(fù)硅膠柱色譜法、SephadexLH-20柱色譜法、重結(jié)晶等方法進(jìn)行分離純化，金蓮花提取純化后的粉末中分離了3個(gè)化合物，根據(jù)理化性質(zhì)以及NMR技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，分別為3-甲氧基-4-羥基苯乙醇

28、、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、葒草苷。沈陽(yáng)藥科大學(xué)本科畢業(yè)論文 參考文獻(xiàn) 參考文獻(xiàn)1錢(qián)莊, 周哲, 石雪靜, 等. 金蓮花化學(xué)成分及其提取分離的研究進(jìn)展J. 中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué), 2014,(02):95-98.2王書(shū)華, 饒娜, 安芳. 金蓮花多糖的分離純化及其抗氧化作用研究J. 中成藥, 2013,(11):2384-2389.3李世相, 趙鳳舞. 金蓮花化學(xué)成分提取及抗菌作用研究J. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2013,32(5):8-12.4周哲, 錢(qián)莊, 石雪靜, 等. 金蓮花活性成分研究及其應(yīng)用J. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2014,10(12):42-44.5宋成英, 黃俊懿. 金蓮花有效成分的提取分離與藥動(dòng)

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31、展J. 中國(guó)現(xiàn)代中藥, 2007,(03):29-33.16黃建茹, 索全伶, 朱明達(dá), 等. 金蓮花屬藥用植物的研究與應(yīng)用J. 內(nèi)蒙古石油化工, 2006,(07):4-5.17朱殿龍, 丁萬(wàn)隆, 陳士林. 金蓮花屬植物的研究進(jìn)展J. 世界科學(xué)技術(shù), 2006,(04):26-33.18任正博, 張振學(xué), 周偉利, 等. 金蓮花化學(xué)成分研究J. 中國(guó)現(xiàn)代中藥, 2006,(02):14-15.19范新田, 傅強(qiáng), 李鳳麗, 等. 金蓮花研究現(xiàn)狀與展望J. 北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2006,(02):131-134.20羅麗榮, 蔣柏泉, 白蘭莉. 金蓮花有效藥用成分提取研究J. 江西化工, 2006,(03):96-98.21蘇連杰, 王輝, 蘇志偉, 等. 金蓮花屬植物的化學(xué)成分與藥理作用J. 國(guó)外醫(yī)藥(植物藥分冊(cè)), 2005,(01):14-16.22鄒建華, 楊峻山