復(fù)習(xí)免疫學(xué)課件

1、免疫學(xué)原理與應(yīng)用主講:高 璐第一章 免疫學(xué)緒論1免疫（immunity）：是機(jī)體識(shí)別并清除“自己”和“非己”抗原性異物的功能，借以維持機(jī)體的生理平衡與穩(wěn)定。其結(jié)果通常對(duì)機(jī)體有利，但在某些條件下可對(duì)機(jī)體造成病理損害。 免疫學(xué)（immunology）：是研究免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能，理解其對(duì)機(jī)體有益的防衛(wèi)功能和有害的病理作用及其機(jī)制，以發(fā)展有效的免疫學(xué)措施，實(shí)現(xiàn)防病治病的目的。第一章 免疫學(xué)緒論2免疫防御（immunological defence） 指機(jī)體排斥外源性異物的能力。免疫自穩(wěn)（immunological homeostasis） 指機(jī)體識(shí)別和清除自身衰變殘損的組織細(xì)胞的能力，以維持正常內(nèi)環(huán)

2、境穩(wěn)定。免疫監(jiān)視（immunological surveillance） 指機(jī)體殺傷和清除異常突變細(xì)胞的能力，以監(jiān)視和抑制惡性腫瘤在體內(nèi)生長。免疫的基本功能第一章 免疫學(xué)緒論3 免疫的類型（適應(yīng)性免疫）（固有性免疫）第一章 免疫學(xué)緒論41. 自然免疫性(natural immunity)：自然免疫性又稱先天免疫性(innate immunity)，是機(jī)體在接觸外來的侵染物之前就已經(jīng)存在的免疫性，所以自然免疫性是機(jī)體先天就有的，而且始終存在的防御機(jī)制。2. 獲得免疫性(acquired immunity)：獲得免疫性是當(dāng)機(jī)體與外來侵害物接觸(稱為免疫作用)之后才獲得的免疫特性。這種獲得的免疫性對(duì)

3、誘發(fā)的抗原有特異性，所以獲得免疫又稱為特異免疫性(specific immunity)或者適應(yīng)免疫性(adaptive immunity)。參與獲得性免疫應(yīng)答的細(xì)胞主要包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞等3.主動(dòng)免疫(active immunization) 抗原進(jìn)入機(jī)體以后一方面能誘導(dǎo)B細(xì)胞分泌抗體，有一些B細(xì)胞雖不產(chǎn)生抗體，但對(duì)于接觸過的抗原有記憶能力，如果再次接觸同樣的抗原，機(jī)體可產(chǎn)生更多的抗體，這些抗體與入侵的抗原特異地結(jié)合，抑制或破壞抗原使其失去致病能力，這種由抗原免疫機(jī)體誘導(dǎo)而獲得免疫性的方式。4.被動(dòng)免疫(passive immunization) 如果把具有特異性的抗體人工轉(zhuǎn)移給

4、一個(gè)未經(jīng)抗原直接免疫的機(jī)體，使機(jī)體也獲得了特異免疫性5.過繼”免疫(adoptive immunity)：細(xì)胞介導(dǎo)的獲得免疫性也可以轉(zhuǎn)移給未受抗原刺激的個(gè)體或者通過輻照個(gè)體，使這些個(gè)體也具有相同特異性的免疫性。但轉(zhuǎn)移的是淋巴細(xì)胞而不是抗體。這種方法稱為“過繼”免疫(adoptive immunity)，實(shí)際上也是屬于被動(dòng)的獲得性免疫。第一章 免疫學(xué)緒論5(一) 中樞免疫器官：免疫細(xì)胞產(chǎn)生、發(fā)育、接受抗原刺激和分化、成熟的場所1、骨髓和法氏囊： 1)造血干細(xì)胞生成、分化發(fā)育的場所 2)B細(xì)胞(bone marrow derived cell )、NK細(xì)胞生成、分化、成熟的部位 3)提供各種免疫細(xì)

5、胞的前體細(xì)胞2、胸腺： T細(xì)胞(thymus derived cell )分化、成熟的場所免疫器官及其功能第一章 免疫學(xué)緒論7(二) 外周免疫器官： 免疫細(xì)胞定居的場所 接受抗原刺激發(fā)生應(yīng)答的場所1、淋巴結(jié)2、脾臟3、黏膜相關(guān)淋巴組織 第一章 免疫學(xué)緒論8五、免疫應(yīng)答體液免疫細(xì)胞免疫第一章 免疫學(xué)緒論101.用人痘苗接種預(yù)防天花。（中國民間）2.接種牛痘苗預(yù)防天花。 Jenner 免疫學(xué)發(fā)展簡史第一章 免疫學(xué)緒論11一、抗原(Antigen，Ag):是一類能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物（抗體和致敏淋巴細(xì)胞）在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。二、抗原的基本特性 1.

6、免疫原性(immunogenecity) ：抗原能刺激特異性免疫細(xì)胞，使之活化、增生、分化，最終產(chǎn)生免疫效應(yīng)物質(zhì)的特性。即引起機(jī)體免疫應(yīng)答的特性。 2.抗原性(antigenicity，又稱免疫反應(yīng)性) ：指抗原可在體內(nèi)外與相應(yīng)的免疫效應(yīng)物質(zhì)(抗體或免疫效應(yīng)細(xì)胞)發(fā)生特異性結(jié)合的特性。即抗原與免疫應(yīng)答產(chǎn)物結(jié)合反應(yīng)的特性。第二章 抗原四、抗原決定簇(antigenic determinant又稱抗原表位 (epitope)：抗原分子存在的能與TCR/BCR或抗體Fab部分特異性結(jié)合的特殊化學(xué)基團(tuán)，是被免疫細(xì)胞識(shí)別的靶結(jié)構(gòu)，也是免疫應(yīng)答特異性的分子基礎(chǔ)?？乖Y(jié)合價(jià)：抗原分子表面抗原決定簇的數(shù)目，又

7、稱抗原價(jià)（antigen valence）第一章 免疫學(xué)緒論14疫苗疫苗的本質(zhì)是利用減毒或殺死的病原物甚至是抗原表位的肽段刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體或激活免疫細(xì)胞以抵御強(qiáng)毒性的病原物的侵襲.我國11世紀(jì)開始接種人痘，18世紀(jì)后葉，Jenner發(fā)明牛痘,為了紀(jì)念他的工作,稱為Vaccine.疫苗的本質(zhì)是利用減毒或殺死的病原物甚至是抗原表位的肽段刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體或激活免疫細(xì)胞以抵御強(qiáng)毒性的病原物的侵襲 疫苗的種類：常規(guī)疫苗：活疫苗、死疫苗、多聯(lián)多價(jià)疫苗重組活疫苗多肽疫苗：基因工程表達(dá)活性多肽、化學(xué)合成多肽疫苗DNA疫苗第一章 免疫學(xué)緒論15 免疫球蛋白的結(jié)構(gòu) “Y”型，四肽鏈結(jié)構(gòu)，鏈間二

8、硫鍵連接兩條重鏈(H) 兩條輕鏈(L)氨基端 羧基端可變區(qū)（V區(qū)） 恒定區(qū)（C區(qū)） 鉸鏈區(qū)第一章 免疫學(xué)緒論17Ig的兩條長鏈稱為重鏈（Heavy chain, H鏈） 重鏈可分為、鏈Ig的兩條短鏈稱為輕鏈（Light chain, L鏈） 可分為、型。 第一章 免疫學(xué)緒論18 免疫球蛋白的生物學(xué)活性一、特異結(jié)合相應(yīng)抗原（ V區(qū)的功能）二、激活補(bǔ)體三、結(jié)合Fc受體四、穿過胎盤五、免疫調(diào)節(jié)第一章 免疫學(xué)緒論19一、IgG二、IgM三、IgA四、IgE五、IgD 各類免疫球蛋白的特性及功能第一章 免疫學(xué)緒論20 單克隆抗體和多克隆抗體多克隆抗體： 用抗原免疫動(dòng)物后獲得的免疫血清（抗血清）由不同克隆

9、的B細(xì)胞針對(duì)不同抗原決定簇所生。單克隆抗體：一個(gè)B細(xì)胞針對(duì)一個(gè)抗原決定簇所產(chǎn)生的一種特異性抗體，稱為單克隆抗體。特點(diǎn)：高特異性、高均一性第一章 免疫學(xué)緒論21 免疫應(yīng)答及其特點(diǎn) 免疫應(yīng)答（immune response)是指免疫活性細(xì)胞對(duì)抗原分子的識(shí)別、自身活化（或失去活化潛能）、增值、分化及產(chǎn)生效應(yīng)的過程。免疫應(yīng)答的特點(diǎn)(1)特異性(2)適應(yīng)性(3)區(qū)別“自身”與“非自身” (4)記憶性(5)自我調(diào)節(jié)性第一章 免疫學(xué)緒論22第一節(jié) 概 述 免疫應(yīng)答：是指機(jī)體受抗原剌激后，免疫活性T、B細(xì)胞識(shí)別抗原、自身發(fā)生活化、增殖、分化，并發(fā)揮特異性免疫效應(yīng)的過程。一、免疫應(yīng)答的類型細(xì)胞免疫體液免疫二、免

10、疫應(yīng)答的過程免疫細(xì)胞對(duì)抗原分子的識(shí)別階段免疫細(xì)胞活化、增殖、分化階段效應(yīng)階段三、免疫應(yīng)答的特點(diǎn)特異性記憶性放大性MHC限制性第一章 免疫學(xué)緒論24將抗原肽與MHC分子結(jié)合成肽-MHC分子復(fù)合體，并表達(dá)在細(xì)胞表面遞呈給TCR識(shí)別和結(jié)合，稱為抗原遞呈(提呈）（antigen presenting）APC將抗原分子降解為一定大小的多肽片段，稱為抗原處理或抗原加工（antigen processing）抗原提呈細(xì)胞（APC）：能攝取、加工、處理并將抗原信息提呈給淋巴細(xì)胞的一類細(xì)胞。APC的種類：專職性抗原提呈細(xì)胞：單核吞噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞非專職性抗原提呈細(xì)胞：內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞第一章 免疫學(xué)緒

11、論25第7章 抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用第一章 免疫學(xué)緒論27抗血清的制備是將制備好的免疫原按照一定的免疫程序接種給所選擇的動(dòng)物，該動(dòng)物在含有多種抗原表位的抗原刺激下，體內(nèi)多個(gè)B細(xì)胞克隆被激活并產(chǎn)生針對(duì)某一抗原多種不同表位的抗體，其混合物為多克隆抗體(polyclonal antibody,pcAb) 。1.抗原的制備 2.免疫佐劑 3.免疫動(dòng)物 4.抗血清的處理和保存免疫佐劑（immunoadjuvant）：預(yù)先或與抗原同時(shí)注入體內(nèi)，可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答的類型的物質(zhì)稱為免疫佐劑,簡稱佐劑（adjuvant）。第一章 免疫學(xué)緒論28 單克隆抗體制備技術(shù)(一) 單抗的原理和優(yōu)點(diǎn)(二

12、) 單抗的制備技術(shù)1.動(dòng)物的選擇與免疫 2.細(xì)胞的選擇 3.細(xì)胞融合 4.抗體檢測及雜交瘤細(xì)胞的選擇 5.克隆化 6.單克隆抗體的制備 7.雜交瘤細(xì)胞的保存 第一章 免疫學(xué)緒論29單抗和多抗的概念單克隆抗體（MAb）與抗血清（又稱多克隆抗體，PAb）最主要的區(qū)別是單抗是由單一種B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的一種均一的免疫球蛋白分子。所以單抗是B細(xì)胞克隆的標(biāo)志，是一種獨(dú)特型的抗體。它的特異性是針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的。制備單抗不能用化學(xué)分離的方法從多抗中去分離純化得到它，而是分離產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞克隆的方法得到它。第一章 免疫學(xué)緒論30用分泌抗體但不能長期培養(yǎng)的B細(xì)胞與能在體外長期培養(yǎng)并可低溫保存的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行雜

13、交。篩選得到的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)該是既能分泌抗體又有瘤細(xì)胞的特性，可長期傳代培養(yǎng)，又可在液氮中保存的細(xì)胞。再用這種單克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)。雜交瘤技術(shù)的基本原理第一章 免疫學(xué)緒論31B淋巴細(xì)胞1.小鼠免疫2.細(xì)胞融合注射特定抗原單克隆抗體制備過程示意圖B淋巴細(xì)胞兩兩融合B淋巴細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合瘤細(xì)胞兩兩融合.生產(chǎn)單克隆 抗體四步曲3.篩選雜交瘤 細(xì)胞兩兩融合體外培養(yǎng)單克隆抗體注射到小鼠體內(nèi)獲得某個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得雜交瘤細(xì)胞第一章 免疫學(xué)緒論32第一章 免疫學(xué)緒論33免疫分析方法內(nèi)容: 免疫分析方法是利用抗原與抗體特異性反應(yīng)這一特性對(duì)抗原和抗體進(jìn)行量和質(zhì)的測定

14、分析特點(diǎn): 1.特異2.靈敏3.快速應(yīng)用領(lǐng)域: 1.醫(yī)學(xué) 2.食品 3.生命科學(xué)研究原理：不論天然的還是人工合成的分子，只要能被機(jī)體的免疫系統(tǒng)識(shí)別的都可以誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。大多數(shù)抗體和抗原本身是既有免疫原性(誘發(fā)產(chǎn)生特異抗體)，又有反應(yīng)原性(與特異的抗體相結(jié)合)?？乖c抗體的特異性反應(yīng)不僅可以在體內(nèi)進(jìn)行，而且可以在體外進(jìn)行。一切利用血清學(xué)技術(shù)方法所進(jìn)行的各種測試都是基于這一根本的特性?？贵w反應(yīng)技術(shù)的應(yīng)用之廣泛已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、甚至生命科學(xué)的范圍，成為一類微量，靈敏，快速的檢測分析方法。 第一章 免疫學(xué)緒論34免疫分析方法內(nèi)容: 免疫分析方法是利用抗原與抗體特異性反應(yīng)

15、這一特性對(duì)抗原和抗體進(jìn)行量和質(zhì)的測定分析特點(diǎn): 1.特異2.靈敏3.快速應(yīng)用領(lǐng)域: 1.醫(yī)學(xué) 2.食品 3.生命科學(xué)研究常見的免疫分析方法：1.免疫凝集（agglutination） 2.免疫沉淀（preciptation ） 環(huán)狀沉淀實(shí)驗(yàn) 、單向免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)、雙向免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)、免疫電泳、 火箭電泳 3.酶聯(lián)免疫分析技術(shù)(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 直接ELISA 間接ELISA 夾心ELISA 4.免疫印跡 5.免疫親和層析 6.免疫磁珠 7.免疫熒光技術(shù)第一章 免疫學(xué)緒論35酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（P347）(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) 原理：先將抗體或抗原包被到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。測定時(shí)，將待檢樣本和酶