藥物分析第七章芳香胺類(lèi)藥物的分析

1、第七章 芳香胺類(lèi)藥物的分析1常見(jiàn)的芳胺類(lèi)藥物 對(duì)氨基苯甲酸酯類(lèi)藥物的基本結(jié)構(gòu)第一節(jié) 芳胺類(lèi)藥物的分析2苯佐卡因3鹽酸氯普魯卡因4鹽酸丁卡因鹽酸普魯卡因胺5酰胺類(lèi)藥物的基本結(jié)構(gòu)6對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）7醋氨苯砜8鹽酸利多卡因9鹽酸布比卡因10鹽酸羅哌卡因 11鹽酸妥卡尼 12一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì) （一） 具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。 （二） 酯鍵或酰胺鍵易水解 13 （三）具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量。 14（四）游離堿多為堿性油狀液體或低熔點(diǎn)固體，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽酸鹽具有一定的熔點(diǎn)，

2、易溶于水和乙醇，難溶于有機(jī)溶劑。 15（六） UV （七） IR （五） 某些特征取代基（如酚羥基）的反應(yīng) 16二、鑒別試驗(yàn) （一）重氮化偶合反應(yīng) 芳香第一胺類(lèi)鑒別反應(yīng) 17 直接：鹽酸普魯卡因、對(duì)氨基水楊酸鈉 、鹽酸氯普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺18鹽酸普魯卡因 Ch.P（2005）【鑒別】 （4）本品顯芳香第一胺類(lèi)的鑒別反應(yīng)（附錄） 取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。 19 間接：對(duì)乙酰氨基酚、醋氨苯砜、貝諾酯 20對(duì)乙酰氨基酚 Ch.P（2005）【鑒別】

3、 （2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。 2122（二）三氯化鐵反應(yīng) 對(duì)乙酰氨基酚 23（三）與重金屬離子反應(yīng) 1. 鹽酸利多卡因的鑒別方法 （1）與銅離子的反應(yīng)24（2）與鈷離子的反應(yīng)（3）與汞離子的反應(yīng) 252鹽酸普魯卡因胺的鑒別方法羥肟酸鐵鹽反應(yīng) 26（四）水解產(chǎn)物反應(yīng) 1. 鹽酸普魯卡因 Ch.P（2005）【鑒別】 （1）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊

4、試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。 27282. 苯佐卡因 Ch.P（2005）【鑒別】 （1）取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。 29（五）氯化物的反應(yīng) 藥典附錄“一般鑒別試驗(yàn)”。 1. 沉淀反應(yīng) 302. 氧化還原反應(yīng) 31 （六）制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)1三硝基苯酚衍生物 鹽酸利多卡因 Ch.P（2005）【鑒別】 取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄C），熔點(diǎn)為228232，熔融時(shí)同時(shí)分

5、解。鹽酸布比卡因 Ch.P（2005）322. 硫氰酸鹽衍生物 鹽酸丁卡因 Ch.P（2005）【鑒別】 （1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80干燥，依法測(cè)定（附錄C），熔點(diǎn)約為131。33 鹽酸布比卡因 Ch.P（2005）【鑒別】（2）取本品，精密稱(chēng)定，按干燥品計(jì)算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法（附錄A）測(cè)定，在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸光度分別為0.530.58與0.430.48。（七）UV 34（八）IR 鹽酸布比卡因 C

6、h.P（2005）【鑒別】（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜（光譜集324圖）一致。35三、特殊雜質(zhì)檢查（一）對(duì)乙酰氨基酚 1. 有關(guān)物質(zhì) 雜質(zhì)來(lái)源 中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物 對(duì)氯苯乙酰胺 雜質(zhì)對(duì)照品法 檢查方法 TLC 其他雜質(zhì) 參比雜質(zhì)對(duì)照品法 36 取本品的細(xì)粉1.0g，置具塞離心管或試管中，加乙醚5ml，立即密塞，振搖30分鐘，離心或放置至澄清，取上清液作為供試品溶液；另取每1ml中含對(duì)氯苯乙酰胺1.0mg的乙醇溶液適量，用乙醚稀釋成每1ml中含50g的溶液，作為對(duì)照溶液。吸取供試品溶液200l與對(duì)照溶液40l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上。以三氯甲烷丙酮甲苯（1352）為展

7、開(kāi)劑，展開(kāi)，晾干，置紫外光（254nm）燈下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。372. 對(duì)氨基酚 雜質(zhì)來(lái)源 中間體、水解產(chǎn)物 反應(yīng)原理 38檢查方法 對(duì)照法 取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1m1，搖勻，放置30min；如顯色，與對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品1.0g加對(duì)氨基酚50g用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.005）。 39 對(duì)乙酰氨基酚咀嚼片、泡騰片、顆粒及滴劑等均需檢查對(duì)氨基酚。方法為反相高效液相色譜法，以O(shè)DS為固定相；0.05molL醋酸銨溶液甲醇（8515）為流動(dòng)相。限度為0.1。 40（二）鹽酸普魯卡因注射

8、液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查 檢查方法 TLC 雜質(zhì)對(duì)照品法 雜質(zhì)來(lái)源 水解產(chǎn)生 41 精密量取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液，作為供試品溶液。取對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 l，分別點(diǎn)于含有羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（141 1 4）為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，取出晾干，用對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液（2對(duì)二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）噴霧顯色。供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。

9、4243（三）鹽酸氯普魯卡因注射液中有關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查 USP（30）采用HPLC法（四）鹽酸羅哌卡因的對(duì)映體純度檢查 USP（30）采用CE法44（一）亞硝酸鈉滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的藥物四、含量測(cè)定 45 具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。 46472. 主要測(cè)定條件（1）加入適量KBr加速反應(yīng) KBr為催化劑NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為： 4849（1）K1（2）K2 K1 300

10、 K2 加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度50（2）加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng)在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBrHCl H2SO4 HNO351鹽酸 1:2.56； 加入鹽酸： 重氮化反應(yīng)速度加快； 重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果5253（3）反應(yīng)溫度 室溫條件下滴定 1030（4）滴定速度 滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定 543. 指示終點(diǎn)的方法（1）永停滴定法 Ch.P（2005）、BP（2005）55永停滴定法（附錄A） 用作重氮化法的終點(diǎn)指示時(shí)，調(diào)節(jié)R1使加于電極上的電壓約為50mV

11、。取供試品適量，精密稱(chēng)定，置燒杯中，除另有規(guī)定外，可加水40ml與鹽酸溶液（12）15ml，而后置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。56（2）電位法 USP（30）（3）外指示劑法 KI淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）內(nèi)指示劑法 中性紅 不可逆指示劑574. 測(cè)定

12、方法 鹽酸普魯卡因 Ch.P（2005） 取本品約0.6g，精密稱(chēng)定，照永停滴定法（附錄A），在1525，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2HCl58（二）非水溶液滴定法 脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性 59鹽酸利多卡因的含量測(cè)定 Ch.P（2005） 取供試品約0.2g，精密稱(chēng)定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞試液5ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1 mol/L）相當(dāng)于27.08mg的鹽酸利多卡因（C14H22

13、N2OHCl）。60（三）紫外-可見(jiàn)分光光度法 對(duì)乙酰氨基酚在0.4氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。 61 對(duì)乙酰氨基酚原料、片劑、咀嚼片、注射液、栓劑、膠囊劑。 62對(duì)乙酰氨基酚 Ch.P（2005） 取本品約40mg，精密稱(chēng)定，置25ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù) 為715 計(jì)算，即得。63例 精密稱(chēng)取對(duì)乙酰氨基酚42mg，置250ml量瓶中，加0.

14、4氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度為0.594，按C8H9NO2的吸收系數(shù) 為715 計(jì)算百分含量。64W=42mgV=250ml5ml100ml D=100/565例 取標(biāo)示量為0.3g/片的對(duì)乙酰氨基酚片10片，總重為3.3660g，稱(chēng)出44.9mg，置250ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液50ml及水50ml，振搖15min，加水至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過(guò)。棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液5m1，置100ml量瓶中，加0.4氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在

15、257nm的波長(zhǎng)處測(cè)的吸收度為0.583，按C8H9NO2的吸收系數(shù) 為715 計(jì)算本片劑的標(biāo)示量%。66片劑，吸收系數(shù)法67（四）熒光法熒光探針技術(shù) 使熒光衍生化試劑與本身無(wú)熒光或熒光效率低的化合物反應(yīng)，其產(chǎn)物具有強(qiáng)熒光，從而使檢測(cè)靈敏度大大提高。68激發(fā)波長(zhǎng)：ex400nm發(fā)射波長(zhǎng)：em485nm 測(cè)定熒光強(qiáng)度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。69（五）HPLC 對(duì)乙酰氨基酚泡騰片、滴劑及凝膠劑采用高效液相色譜法測(cè)定含量。 離子抑制色譜法，外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法定量7098：133鹽酸普魯卡因胺常用的鑒別反應(yīng)有（AB）A. 重氮化偶合反應(yīng)B. 羥肟酸鐵鹽反應(yīng)C. 氧化反應(yīng)D. 磺化反應(yīng)E. 碘化反應(yīng) 7197：1

16、37采用亞硝酸鈉法測(cè)定含量的藥物有（CD）A. 苯巴比妥B. 鹽酸丁卡因C苯佐卡因D. 醋氨苯砜E. 鹽酸去氧腎上腺素 7295：85下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量者（A）A. 乙酰水楊酸B. 對(duì)氨基水楊酸鈉C. 對(duì)乙酰氨基酚D. 普魯卡因E. 苯佐卡因 7396：81（99：72）. 亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是（B）A. 添加BrB. 生成NO+Br C生成HBrD. 生成Br2 E. 抑制反應(yīng)進(jìn)行 7495：75中國(guó)藥典（1990年版）所收載的亞硝酸鈉滴定法中指示終點(diǎn)的方法為（B）A. 電位法 B. 永停法C. 外指示劑法 D. 內(nèi)指示劑法E. 自身指示劑法 7596：12

17、7亞硝酸鈉滴定法中，可用于指示終點(diǎn)的方法有（BCDE）A. 自身指示劑法B. 內(nèi)指示劑法C. 永停法D. 外指示劑法E. 電位法 76例1. Ch.P（2005）亞硝酸鈉滴定法測(cè)定對(duì)氨基水楊酸鈉的含量時(shí)，指示滴定終點(diǎn)的方法為（C）A. 自身指示終點(diǎn)法B. 電位法指示終點(diǎn)C. 永停滴定法D. 氧化還原指示劑法E. 酸堿指示劑法 77例2. 以下那種藥物中應(yīng)檢查對(duì)氨基苯甲酸（E）A. 鹽酸普魯卡因B. 鹽酸普魯卡因胺C. 注射用鹽酸普魯卡因D. 鹽酸普魯卡因胺片E. 鹽酸普魯卡因注射液 78例3. 鹽酸普魯卡因采用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量時(shí)的反應(yīng)條件是（ABCDE）A. 強(qiáng)酸B. 加入適量溴化鉀C.

18、 室溫（1030）下滴定D. 滴定管尖端深入液面E. 永停法指示終點(diǎn) 79第二節(jié) 苯乙胺類(lèi)藥物的分析 苯乙胺類(lèi)藥物的基本結(jié)構(gòu)*80常見(jiàn)的苯乙胺類(lèi)藥物81828384鹽酸苯乙雙胍85鹽酸克侖特羅86鹽酸麻黃堿87硫酸沙丁胺醇88一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 1. 脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性 2. 酚羥基，易氧化變色，可發(fā)生三氯化鐵反應(yīng) 3. 具手性碳原子，具旋光性89 4. 溶解性 游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水 5. UV 6. IR 7. 取代基：具芳伯氨基的藥物，可用重氮化偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。 90二、鑒別試驗(yàn)1. 三氯化鐵反應(yīng)2. 氧化反應(yīng)3. 與甲醛硫酸反應(yīng)4. UV與I

19、R 915. 與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)（Rimini反應(yīng)） 脂肪族伯胺的專(zhuān)屬反應(yīng)926. 雙縮脲反應(yīng) 側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)的鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、鹽酸去氧腎上腺素可用此反應(yīng)鑒別 93三、特殊雜質(zhì)檢查 雜質(zhì)來(lái)源 原料殘存 檢查方法 UV （一）酮體的檢查94 檢查原理 利用酮體在310nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而藥物本身在此波長(zhǎng)處幾乎沒(méi)有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長(zhǎng)處的吸收度限制酮體的量。 95例 中國(guó)藥典（2005年版）規(guī)定腎上腺素中檢查酮體的方法為：取本品，加鹽酸溶液（92000）制成每1ml中含2.0mg的溶液，于310nm波長(zhǎng)處測(cè)定，吸光度不得過(guò)0.05，已知酮體在310nm波長(zhǎng)處的

20、百分吸收系數(shù)為453，腎上腺素在該波長(zhǎng)處無(wú)吸收。計(jì)算腎上腺素中酮體的限量。9697（二）有關(guān)物質(zhì)檢查 1. 鹽酸氨溴索 HPLC 982. 鹽酸苯乙雙胍中有關(guān)雙胍的檢查 檢查方法：紙色譜法（PC）分離后，甲醇萃取，紫外-可見(jiàn)分光光度法于232nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，控制吸光度以控制有關(guān)雙胍的量 993. 硫酸特布他林 TLC中高低濃度對(duì)比法100四、含量測(cè)定 （一）非水溶液滴定法 原料藥 脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性 101（二）溴量法 鹽酸去氧腎上腺素及其注射液、重酒石酸間羥胺 反應(yīng)摩爾比為13 102（三）紫外分光光度法與比色法 鹽酸克侖特羅栓 具芳伯氨基，可發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)103對(duì)照法定量104 偶合劑N-（1-萘基）-乙二胺遇亞硝酸也能顯色，干擾比色測(cè)定，所以在重氮化后，應(yīng)加氨基磺酸銨將剩余的亞硝酸分解除去，再加偶合