(整理)HE4的臨床應(yīng)用課件

1、(最新整理)HE4的臨床應(yīng)用2021/7/261(最新整理)HE4的臨床應(yīng)用2021/7/261新的卵巢癌標(biāo)志物HE4的臨床應(yīng)用2021/7/262新的卵巢癌標(biāo)志物HE4的臨床應(yīng)用2021/7/262主要內(nèi)容第一部分：概述1、腫瘤標(biāo)志物的定義、分類2、腫瘤標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)室檢測3、腫瘤標(biāo)志物檢測的應(yīng)用原則第二部分：HE4的臨床應(yīng)用1、卵巢癌研究現(xiàn)狀2、HE4的生物學(xué)特性3、HE4臨床應(yīng)用進(jìn)展3、HE4參考值調(diào)查及應(yīng)用評價(jià)2021/7/263主要內(nèi)容第一部分：概述2021/7/263思考題1、腫瘤標(biāo)志物的定義2、請寫出敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值的計(jì)算公式3、HE42021/7/264思考

2、題1、腫瘤標(biāo)志物的定義2021/7/264一般腫瘤細(xì)胞在癌前病變時(shí)，會產(chǎn)生表達(dá)腫瘤異常蛋白質(zhì)，多數(shù)腫瘤從癌前病變發(fā)展到0.5 cm 以上的占位性病變需要 510年的時(shí)間。如果能夠在這段時(shí)間內(nèi)運(yùn)用腫瘤標(biāo)志物檢測技術(shù)，早期檢測到患者血液中腫瘤所表達(dá)的異常蛋白質(zhì)，就可以早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷，并獲得早期治療的良好效果。概述2021/7/265一般腫瘤細(xì)胞在癌前病變時(shí)，會產(chǎn)生表達(dá)腫瘤異常蛋白質(zhì)，多數(shù)腫瘤人們對腫瘤標(biāo)志物的檢測寄予了極大的希望。那么腫瘤標(biāo)志物測定能否達(dá)到早期診斷的目的？能否對一般人群進(jìn)行篩查？其臨床意義到底有多大？評價(jià)有多高？目前對腫瘤標(biāo)志物在腫瘤診斷中的作用認(rèn)識和評價(jià)不一致。概述2021/

3、7/266人們對腫瘤標(biāo)志物的檢測寄予了極大的希望。那么腫瘤標(biāo)志物測定能腫瘤標(biāo)志物（ tumor marker ，TM）是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞的基因表達(dá)而合成分泌的或是由機(jī)體對腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生和/或升高的,反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)，它包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等。TM存在于腫瘤患者的血液、體液、細(xì)胞或組織中，可用生物化學(xué)、免疫學(xué)及分子生物學(xué)等方法測定，且對腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、觀察療效、監(jiān)測復(fù)發(fā)以及預(yù)后評價(jià)具有一定的價(jià)值。腫瘤標(biāo)志物-定義2021/7/267腫瘤標(biāo)志物（ tumor marker ，TM）是指在惡性腫腫瘤標(biāo)志物-歷史1846年

4、本-周蛋白1940年 酸性磷酸酶1960年 免疫測定法1963年 甲胎蛋白1965年 癌胚抗原1975年 單克隆抗體1980年 CA125，PSA，糖類抗原1970-1980年 腫瘤基因及抑癌基因2001年 芯片，神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，多參數(shù)分 析，生物傳感器，等Eleftherios P. Diamandis, et al. Tumor Markers: Physiology, Pathobiology, Technology, and Clinical Applications. AACC Press. 2002: p4.2021/7/268腫瘤標(biāo)志物-歷史1846年 1978年 Herberman在

5、美國國立癌癥研究所召開的 人類腫瘤免疫診斷會上提出了TM的概念1979 英國第7屆腫瘤發(fā)生生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會議 TM 被確認(rèn)并應(yīng)用臨床 腫瘤標(biāo)志物-歷史2021/7/2691978年 Herberman在美國國立癌癥研究所召開的腫腫瘤標(biāo)志物-分類 1、按腫瘤標(biāo)志物的來源2、按腫瘤標(biāo)志物本身的化學(xué)性質(zhì)和免疫學(xué)特性3、按存在部位分類由于腫瘤標(biāo)志物的來源和性質(zhì)非常復(fù)雜至今尚未有一個(gè)統(tǒng)一的分類方法，目前的分類方法有：2021/7/2610腫瘤標(biāo)志物-分類 由于腫瘤標(biāo)志物的來源和性質(zhì)、由腫瘤細(xì)胞分泌的標(biāo)志物、宿主反應(yīng)標(biāo)志物1、腫瘤的特異性標(biāo)志物 ，指僅有某一種腫瘤所 產(chǎn)生的特異性物質(zhì) 。2、腫瘤輔助標(biāo)志物

6、，在一類組織類型相似而性 質(zhì)不同的腫瘤發(fā)生時(shí)，其水平都有升高 。腫瘤標(biāo)志物-分類：按來源分類2021/7/2611、由腫瘤細(xì)胞分泌的標(biāo)志物、宿主反應(yīng)標(biāo)志物1、腫瘤的特.由腫瘤細(xì)胞分泌的標(biāo)志物）分化抗原標(biāo)志物）胚胎抗原標(biāo)志物（AFP、CEA等）糖脂或糖蛋白類 (CA19-9、CA15-3、CA242等）。）同工酶類標(biāo)志物（NSE,PAP,CK-BB等） 5）激素類標(biāo)志物（HCG,ACTH等） 6）腫瘤相關(guān)抗原（PSA，TPA等） 7）基因類標(biāo)志物（P53、C-MYC、BCL2） 8）其它：多胺、唾液酸等腫瘤標(biāo)志物-分類：按來源分類2021/7/2612.由腫瘤細(xì)胞分泌的標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物-分類：按

7、來源分.宿主反應(yīng)標(biāo)志物 血清鐵蛋白、免疫復(fù)合物、同工酶、 白細(xì)胞介素受體、腫瘤壞死因子等 SF、-MG、IL-2R、TNF腫瘤標(biāo)志物-分類：按來源分類2021/7/2613.宿主反應(yīng)標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物-分類：按來源分類2021蛋白類標(biāo)志物糖類標(biāo)志物酶類標(biāo)志物激素類標(biāo)志物基因類標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物-分類：按性質(zhì)分類2021/7/2614蛋白類標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物-分類：按性質(zhì)分類2021/7/臨床常用腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）2-微球蛋白（ 2-MG）鐵蛋白（SF）細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）鱗狀上皮癌相關(guān)抗原（SCC-Ag）前列腺特異抗原（PSA）組織多肽抗原（TPA）糖

8、類抗原（CA50、CA125、CA15-3、 CA199、CA242、CA72-4）神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）前列腺酸性磷酸酶（PAP）激素類腫瘤標(biāo)志物(-HCG、ACTH)蛋白類腫瘤標(biāo)志物糖脂類腫瘤標(biāo)志物酶及同工酶類腫瘤標(biāo)志物激素類腫瘤標(biāo)志物2021/7/2615臨床常用腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）蛋白類腫瘤標(biāo)志物糖脂類腫腫瘤標(biāo)志物-分類：按存在部位分類組織腫瘤標(biāo)志物血漿/血清腫瘤標(biāo)志物2021/7/2616腫瘤標(biāo)志物-分類：按存在部位分類組織腫瘤標(biāo)志物2021 組織腫瘤標(biāo)志物：位于細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi) 1、分化標(biāo)志,激素受體：如 ER, PR2、增殖標(biāo)志：端粒酶，生長因子及其受體，CD 抗

9、原3、轉(zhuǎn)移潛在性標(biāo)志：蛋白酶，基因產(chǎn)物，粘附因子4、癌基因及抗癌基因：myc，H-ras，P53，等腫瘤標(biāo)志物-分類：按存在部位分類2021/7/2617 組織腫瘤標(biāo)志物：位于細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)腫瘤標(biāo)志物-血漿/血清腫瘤標(biāo)志物1、胚胎類抗原；如 CEA, AFP2、腫瘤相關(guān)糖脂及糖蛋白 糖決定簇：CA19-9，CA242 上皮粘蛋白：CA15-3 糖蛋白：CA125, PSA3、激肽，酶，蛋白等 激肽：ACTH，GH 酶：NSE 蛋白：B-微球蛋白，CYFRA-21-1腫瘤標(biāo)志物-分類：按存在部位分類2021/7/2618血漿/血清腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物-分類：按存在部位分類2根據(jù)示蹤劑的不同可分

10、為1、化學(xué)發(fā)光免疫分析2、放射免疫分析3、酶免疫分析：4、金標(biāo)記免疫分析(免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng) + 物理吸附)基本原理：示蹤物的標(biāo)記技術(shù)+免疫學(xué)技術(shù)腫瘤標(biāo)志物-實(shí)驗(yàn)室檢測：標(biāo)記免疫學(xué)2021/7/2619根據(jù)示蹤劑的不同可分為基本原理：示蹤物的標(biāo)記技術(shù)+免疫學(xué)技術(shù)標(biāo)記免疫技術(shù)-酶免法（EIA）優(yōu)點(diǎn)費(fèi)用較低 ，應(yīng)用較廣固相分離干擾小無放射污染試劑有效期長有酶標(biāo)儀即可開展缺點(diǎn)需要孵育結(jié)果受環(huán)境及人為因素影響2021/7/2620標(biāo)記免疫技術(shù)-酶免法（EIA）優(yōu)點(diǎn)2021/7/262標(biāo)記免疫技術(shù)-發(fā)光法優(yōu)點(diǎn)標(biāo)記物分子小，穩(wěn)定性好，發(fā)光強(qiáng)度高，時(shí)間長高靈敏度,最高檢測限值可達(dá)10-15g/ml-10-1

11、8g/ml標(biāo)準(zhǔn)化程度高, 快速、簡便、重復(fù)性好無放射污染缺點(diǎn)儀器昂貴檢測成本高封閉系統(tǒng)，開展項(xiàng)目受試劑供應(yīng)的制約2021/7/2621標(biāo)記免疫技術(shù)-發(fā)光法優(yōu)點(diǎn)2021/7/2621其它檢測技術(shù)：蛋白芯片/基因芯片具有高通量、大信息量的特點(diǎn)主要應(yīng)用于藥物篩選，基因測試，基因定位等方面蛋白芯片在臨床應(yīng)用尚需時(shí)日產(chǎn)業(yè)化仍然有技術(shù)障礙目前基因芯片主要用于研究2021/7/2622其它檢測技術(shù)：蛋白芯片/基因芯片具有高通量、大信息量的特點(diǎn)2免疫測定法的臨床特性敏感性陽性結(jié)果在腫瘤患者中的比例 敏感性 =特異性在非腫瘤患者個(gè)體中(如健康人或良性疾病患者),陰性實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比例 特異性 =真正陽性結(jié)果數(shù)患病人

12、群總數(shù)真正陰性結(jié)果數(shù)對照組人群總數(shù)2021/7/2623免疫測定法的臨床特性敏感性真正陽性結(jié)果數(shù)患病人群總數(shù)真正陰性免疫測定法的臨床特性預(yù)測值（Predictive Value） 陽性預(yù)測值：在陽性結(jié)果的病人中，癌癥存在的可能性 PPV 陰性預(yù)測值：在陰性結(jié)果病人中, 非癌癥存在的可能性 NPV=真正的陽性結(jié)果數(shù) / 陽性結(jié)果總數(shù)真正的陰性結(jié)果數(shù) /陰性結(jié)果總數(shù)2021/7/2624免疫測定法的臨床特性預(yù)測值（Predictive Value 濃度腫瘤患者 真陰性 真陽性界值假陽性假陰性正常人群敏感性 = TP/(TP+FN)特異性 = TN/(TN+FP)免疫測定法的臨床特性陽性預(yù)測值 =

13、TP/(TP+FP)陰性預(yù)測值 = TN/(TN+FN)2021/7/2625 濃度腫瘤患者 真陰性 理想的腫瘤標(biāo)志物特異性100%靈敏度100%器官特異性與腫瘤大小或分期有關(guān)能進(jìn)行療效監(jiān)測與預(yù)后有關(guān)具有可靠的預(yù)測價(jià)值 陳允碩.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志2000年;23(1)至今沒有任何腫瘤標(biāo)志物能滿足所有這些標(biāo)準(zhǔn)但如正確合理使用，仍有很大臨床價(jià)值，關(guān)鍵是要正確評價(jià)和應(yīng)用。 2021/7/2626理想的腫瘤標(biāo)志物特異性100%陳允碩.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志20影響TM免疫測定結(jié)果的因素體內(nèi)因素 ： -肝、腎功能異常致AFP，CEA升高 -強(qiáng)烈的治療作用(手術(shù)、放療、化療)和連續(xù)的細(xì)胞死亡 -腫瘤部位供血障礙

14、-藥物 -存在嗜異性抗體 -抗原異質(zhì)性體外因素 -血液的稀釋作用 -污染 ：唾液污染致SCC升高；溶血致NSE升高試劑盒因素 -使用的抗體作用位點(diǎn)不同 -HOOK效應(yīng)陳允碩.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志2000年,23(1). 2021/7/2627影響TM免疫測定結(jié)果的因素體內(nèi)因素 ：陳允碩.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜腫瘤標(biāo)志物臨床檢測的基本原則腫瘤標(biāo)志物的檢測能否達(dá)到早期診斷的效果？在人群中進(jìn)行普查或篩查的價(jià)值？其臨床意義如何解釋？怎樣規(guī)范與合理應(yīng)用？目前存在諸多爭議。2002年至2004年時(shí)，中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會腫瘤標(biāo)志物專家委員會分別召開3次專家研討會，起草制定了“腫瘤標(biāo)志物臨床檢測的基本原則（建議稿）。2

15、021/7/2628腫瘤標(biāo)志物臨床檢測的基本原則腫瘤標(biāo)志物的檢測能否達(dá)到早期診斷TM臨床檢測的基本原則1、TM對腫瘤的輔助診斷價(jià)值：2、TM的器官定位價(jià)值：3、TM在判斷腫瘤的大小和臨床分期的價(jià)值：4、 TM在腫瘤監(jiān)測中的價(jià)值：5、 TM的聯(lián)合檢測原則：6、 同一患者在治療前后及隨訪中，應(yīng)采用同一種方法 和試劑；在更換檢測方法和試劑時(shí)，應(yīng)作比對。 7、應(yīng)用TM對高危人群進(jìn)行篩查時(shí)應(yīng)遵循的原則： 2021/7/2629TM臨床檢測的基本原則1、TM對腫瘤的輔助診斷價(jià)值：2021TM臨床檢測的基本原則 治療后TM濃度變化，常有三種類型： （1）TM濃度下降到參考范圍，提示腫瘤治療有效。 （2）TM

16、濃度下降但仍持續(xù)在參考范圍以上，提示有 腫瘤殘留和/或腫瘤轉(zhuǎn)移。 （3）TM濃度下降到參考范圍一段時(shí)間后，又重新升 高，提示腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。TM濃度變化對腫瘤的療效判斷價(jià)值：2021/7/2630TM臨床檢測的基本原則 治療后TM濃度變化，常有三種類型：T療效觀察可參照下列標(biāo)準(zhǔn)： 無效： TM濃度與治療前相比下降 50 改善： TM濃度與治療前相比下降50 有效： TM濃度與治療前相比下降90 顯效： TM濃度下降至臨界值以下。TM臨床檢測的基本原則2021/7/2631療效觀察可參照下列標(biāo)準(zhǔn)：TM臨床檢測的基本原則2021/7/術(shù)后腫瘤標(biāo)志物水平的變化02550751001251501752

17、002252500369121518212427術(shù)后時(shí)間（月）患者D患者C患者B患者A正常水平手術(shù) 化療32腫瘤標(biāo)志物水平2021/7/2632術(shù)后腫瘤標(biāo)志物水平的變化025507510012515017TM臨床檢測的基本原則TM的定期隨訪原則： 惡性腫瘤治療結(jié)束后，應(yīng)根據(jù)病情對治療前升高的TM作定期隨訪監(jiān)測。不同的TM半壽期不同，所以監(jiān)測的時(shí)間和周期也不同。 2021/7/2633TM臨床檢測的基本原則TM的定期隨訪原則：2021/7/26主要腫瘤標(biāo)志物經(jīng)手術(shù)后半壽期腫瘤標(biāo)志物半壽期參考范圍CEA34天5ng/mLCA19-98.5天37UmlAFP45天10.9ng/mLPSA2.33.2

18、天4ng/mLHCG1220小時(shí)2.9mIU/mLCA15-3815天28U/mlCA1254.8天35U/mlSCC20分1.5g/LCYFRA21-14天80% 晚期卵巢癌病人水平升高也見于卵巢癌臨床前期無癥狀患者CA125與超聲檢查聯(lián)合使用能提高檢測特異性和陽性預(yù)測值CA125 的局限性良性婦科疾病患者也有CA125 水平升高某些其它惡性腫瘤患者也有CA125 水平升高檢測I 期卵巢癌的靈敏度較低CA1252021/7/2647為卵巢癌檢查常用標(biāo)志物CA1252021/7/2647其它CA125升高的情況良性平滑肌瘤 子宮內(nèi)膜異位原發(fā)性免疫缺陷病 懷孕出血性囊腫肝病或充血性憩室炎 惡性結(jié)

19、腸癌乳腺癌胰腺癌膽管癌肝癌肺癌子宮內(nèi)膜癌2021/7/2648其它CA125升高的情況良性惡性2021/7/2648Cancer Antigen 125（ CA125）Bast等人在1981年用卵巢癌細(xì)胞株OVCA433免疫小鼠，通過雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體（monoclonal antibody，McAb）OC125，該抗體可識別卵巢癌相關(guān)抗原CA125，用這種單克隆抗體制備的試劑盒隨后用于卵巢癌的臨床監(jiān)測。2001年Lloyd研究小組克隆了CA125抗原，證實(shí)CA125是含有5797個(gè)堿基對的跨膜糖蛋白MUC16，定位于染色體19p13.2區(qū)。正常人血清CA125（RIA）的陽性臨界值為3

20、5ku/L。二十多年來，CA125作為上皮性卵巢癌標(biāo)志物，在臨床上得到廣泛應(yīng)用 2021/7/2649Cancer Antigen 125（ CA125）202HE4是卵巢癌的一種常見標(biāo)志物血清HE4 是卵巢癌的早期診斷標(biāo)志物HE4 和CA125 組合有助于預(yù)報(bào)匿患卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)性2021/7/2650HE42021/7/2650HE4的生物學(xué)特性HE4：人類附睪蛋白4（Human epididymis protein 4）1、基因：WFDC2，編碼蛋白為含有4個(gè)2硫鍵核心的酸性乳清蛋白，屬于Whey酸性蛋白家族。2、最初在人的附睪上皮細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)3、可能具有抗蛋白酶活性目標(biāo)蛋白酶尚未確認(rèn)4、在正常的附睪中與精子成熟相關(guān)5、在腫瘤的發(fā)展中可能具有抗炎作用2021/7/26