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1、黃肉桃果實發(fā)育階段類胡蘿卜素的變化植物類胡蘿卜素大量存在于黃色、 橙色和紅色的果實中, 其含量和組成不僅決定果實外觀色澤和商品性, 且類胡蘿卜素作為小分子特殊代謝物, 在清除自由基、 提高人體免疫力、 延緩衰老、 防癌抗癌 5-6等保護人類健康方面起著重要的作用。目前,類胡蘿卜素的化學合成已取得了長足的發(fā)展, 但由于人體自身不能合成類胡蘿卜素, 且人體補充化學合成的&胡蘿卜素對防病抗癌沒有效果,因此從自然界中尋找富含天然類胡蘿卜素的植物資源尤為重要。黃肉桃果實成熟后含有比較豐富的類胡蘿卜素,其含量為1223 wg-1g,且含量的高低與果肉的顏色相關,隨著其含量的增加,果 肉顏色由黃到橙黃。 為
2、進一步探討類胡蘿卜素成分及其含量與果肉黃顏色深淺的關系, 我們通過對3 種不同程度黃顏色果肉桃發(fā)育過程中的類胡蘿卜素含量及成分進行測定, 旨在尋找桃果肉顏色差異與類胡蘿卜素含量及其成分的關系。材料和方法材料與試劑試驗樣品 以果肉黃顏色深淺不同的 香金蟠 、 獨立 、 弗雷德里克 為試驗材料,果實采自江蘇省科學院國家果樹種質(zhì)南京桃資源圃。花后 82 d 開始采樣,每隔 8 d 采 1 次樣,最后 1 次為果實成熟期, 香金蟠 、 獨立 和 弗雷德里克 的果實成熟期分別是花后110 d、115 d 、 115 d 。每個品種每次采集果實 10 個,將果肉和果皮液氮冰凍后 -70 保存?zhèn)溆?。試?丙
3、酮為分析純,甲醇、 甲基叔丁基醚為色譜純;標樣葉黃素、伊隱黃質(zhì)、&胡蘿卜素、&阿樸-8 -胡蘿卜醛購自Sigma公 司;-胡蘿卜素購自Wako公司;玉米黃素購自百迪信科技有限公司。儀器 紫外 - 可見分光光度計;高效液相色譜儀;冷凍離心機;電子天平。方法桃類胡蘿卜素的提取和純化 桃果實類胡蘿卜素的提取方法經(jīng)過篩選后得:稱取樣品2 g,液氮研磨,加入8 mL的丙酮(0.1% BHT+內(nèi)標),于4 C冰箱避光浸提,24 h后取出于4 c 10 000 g離 心5 min,取上清液于新的10 mL離心管,殘渣加入7 mL的丙酮(0.1% BHT+內(nèi)標),重復提取3次,合并上清液,用丙酮(0.1% B
4、HT+3標) 定容至 25 mL ,過 0.22 mm 有機濾頭,備用。每個樣重復3次。桃類胡蘿卜素總含量測定取提取液 10 mL ,采用 UV755B型紫外-可見分光光度計在波長450 nm 下進行掃描,根據(jù)公式計算桃果實類胡蘿卜素總含量。類胡蘿卜素總含量(wg-1)二V 提取液體積,單位為 mL; A 樣品在 450 nm 波長下的吸光值;N 稀釋倍數(shù);2500 類胡蘿卜素的平均吸光系數(shù)。標準曲線的制備 以10 mcg- L1的混合標樣溶液為標準儲 備溶液,制備序列質(zhì)量濃度為0.005、 0.01、 0.05、 0.1、 0.25、 0.5、0.75、1.0、5.0 mgB的標準使用溶液,
5、過 0.22 mm有機濾頭,備 用。桃類胡蘿卜素的HPLC檢測 桃果實類胡蘿卜素的檢測采用 HPLC,經(jīng)過篩選得到最佳檢測方法如下:采用 Aligent 1100系統(tǒng)及 YMC-C30 色譜柱對桃果實類胡蘿卜素進行分析, 流動相 A: MeOH , 流動相B: H2O,流動相C: MTBE;進行梯度沖洗,沖洗條件為:0 90 min, 81% A/ 4% B/ 15%6% A / 4% B / 90% 流速為 1.0 mL - m-n 1;柱溫為25 C;紫外450 nm檢測;進樣20采用以上方法對桃果實樣品進行預檢測, 結果表明葉黃素、 玉米 黃素、&隱黃質(zhì)、-胡蘿卜素和&胡蘿卜素等是桃果實類胡蘿卜素 的 5 個主要成分。數(shù)據(jù)分析 采用Excel和SPSS進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。2 結果與分析桃果皮顏色在果實發(fā)育階段的變化82隨著果實的生長發(fā)育,不同品種果皮的色澤不斷變化?;ê?2d , 3 種黃肉桃果皮均為深綠色; 自花后 90 d 起, 果皮綠色逐漸褪去?;ê?98 d, 香金蟠 果皮底色為淡綠色,有少量著色; 獨立 果皮底色為黃色,80%- 90嘴深紅色;弗雷德里克果皮底色為淺黃色,有少量著色。 隨著果實的生長發(fā)育, 香金蟠 、 獨立 、 弗雷德里克 果皮的紅色均逐漸
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