納米銀及含納米銀醫(yī)療器械安全性評價

1、納米銀及含納米銀醫(yī)療器械的安全性評價 中國食品藥品檢定研究院1 一、研究背景 古地中海時代和古亞洲文化時代，人們就已經(jīng)開始利用銀的抗菌性。波斯王用銀器裝水消毒；古埃及人用泡銀的紗布包扎傷口；本草綱目有“銀屑，安五臟，定心神，止驚悸，除邪悸，除邪氣，久服輕身長年”的記載；宋代人們學(xué)會了用銀針試毒。 在近代，銀在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用也十分廣泛。美國和加拿大，很多家醫(yī)院配備了銀基凈水系統(tǒng)，美國國家航天局還把銀用在宇宙飛船上，用來凈化水。2 銀離子具有很強(qiáng)的殺菌性,在所有金屬中其殺菌活性名列第二(汞名列第一,但有毒副作用、現(xiàn)已不用) 。多年來的研究表明,銀離子對12 種革蘭氏陰性菌、8 種革蘭氏陽性菌

2、、6 種霉菌均有強(qiáng)烈的殺滅作用。 但近年來的研究表明，納米銀顆粒的抗菌性能遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于傳統(tǒng)的銀離子殺菌劑,如硝酸銀和磺胺嘧啶銀，具有更好的殺菌效果。所以納米銀在醫(yī)學(xué)上也得到了廣泛應(yīng)用。 3 銀是一種安全的廣譜抗菌材料。銀被納米化后，其抗菌作用產(chǎn)生了質(zhì)的飛躍，極少量的納米銀即可產(chǎn)生強(qiáng)力的殺菌作用，于是含銀的醫(yī)療器械成為近年來研究的熱點。新型的納米銀抗菌纖維、納米銀敷料、納米銀凝膠、納米銀抗菌導(dǎo)管，納米銀避孕套不斷地被開發(fā)出來。 2004年以來，已有29種含納米銀的醫(yī)療產(chǎn)品取得了省級食品藥品監(jiān)督管理局的注冊批件 ，進(jìn)入臨床應(yīng)用。 4目前，納米銀抗菌凝膠、納米銀敷料、納米銀抗菌纖維、納米銀骨水泥、納米銀

3、燒燙傷貼，納米銀導(dǎo)尿管、納米銀眼藥、納米銀心臟瓣膜、納米銀隱形避孕套等納米銀醫(yī)藥產(chǎn)品不斷被研制和開發(fā)出來。其中，納米銀凝膠和納米銀敷料在臨床上的使用最為廣泛。它是利用了納米銀廣譜、強(qiáng)效、持久的殺菌能力來控制感染、加速傷口愈合等。5 但是，2003年以來，已有很多研究報告了納米材料具有特殊的生物學(xué)性質(zhì)：（1）從生物體整體而言，納米材料在生物體內(nèi)的分布途徑及靶器官具有特殊性 （2）從細(xì)胞水平來講，與常規(guī)材料不同，納米顆?？梢酝ㄟ^各種方式直接進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致細(xì)胞功能的改變甚至喪失，影響細(xì)胞的正常工作。6納米材料這些生物學(xué)特性可能會導(dǎo)致生物負(fù)效應(yīng)。（1）納米材料在生物體內(nèi)的分布途徑及靶器官具有特殊性，

4、可以分布和蓄積在常規(guī)材料無法到達(dá)的靶器官。所以，其毒性發(fā)生的部位、引起的毒性反應(yīng)、造成的病理變化和毒性作用機(jī)理與常規(guī)材料有明顯差異。（2）納米顆?？梢酝ㄟ^各種方式直接進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致細(xì)胞功能的改變甚至喪失，影響細(xì)胞的正常功能。7納米科學(xué)只有十幾年的歷史，人們對其的認(rèn)識還不完全，因其具有宏觀物質(zhì)所不具備的特性，過去宏觀物質(zhì)的安全性評價結(jié)果及評價方法有可能不適用于納米材料。Wise JP Sr, Goodale BC, Wise SS et al. Silver nanospheres are cytotoxic and genotoxic to fish cells. Aquat Toxicol

5、. 2010 Apr 1;97(1):34-41. Kumari M, Mukherjee A, Chandrasekaran N. Genotoxicity of silver nanoparticles in Allium cepa. Sci Total Environ. 2009 Sep 15;407(19):5243-6. AshaRani PV, Low Kah Mun G, Hande MP et al. Cytotoxicity and genotoxicity of silver nanoparticles in human cells. ACS Nano. 2009 Feb

6、24;3(2):279-90. 8二、體外細(xì)胞毒性和對細(xì)胞周期的影響9 材料納米銀顆粒（nano-Ag): 30-100nm Sigma公司，產(chǎn)品號為：576832微米銀顆粒 (micro-Ag): 2-45mSigma公司，產(chǎn)品號為：327107利用TEM和SEM分別觀測納米銀和微米銀的形態(tài)和尺寸。10 微米銀顆粒SEM照片(2-200um)300nm納米銀顆粒TEM照片(50-100nm)納米銀顆粒結(jié)構(gòu)圖111 .體外細(xì)胞毒性試驗 傳代4872h處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，消化后調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1105個/ml，均勻接種到24孔板內(nèi)，每孔500l。細(xì)胞貼壁后，吸棄原培養(yǎng)液。將納米銀粉和微米銀粉滅菌后

7、加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中配制成一系列濃度的含銀培養(yǎng)液，與L929細(xì)胞接觸培養(yǎng)24小時。通過倒置相差顯微鏡觀察其形態(tài)，采用MTT（四唑鹽）比色法量化細(xì)胞毒性，計算相對增值率（RGR），并進(jìn)行毒性評價。12 微米銀試驗組（見表2）經(jīng)各鐘濃度的納米銀作用后的細(xì)胞與對照組細(xì)胞的RGR值均無顯著差異（P0.05），RGR75，毒性為01級。銀濃度(g/ml)0(對照)50025010050251052.5RGR(%)1004.42*4.54*4.59*48.17*72.7381.3886.4294.02毒性評級44432111表1 納米銀組MTT試驗結(jié)果銀濃度(g/ml)0(對照)50025010050251

8、052.5RGR(%)10099.8693.7483.5187.8698.60104.2105.6103.9毒性評級11111000表2 微米銀C組MTT試驗結(jié)果各試驗組與陰性對照組組間差異比較，a p 0.05132. 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡 Annexin V-FITC/PI 雙染色法的基本原理是細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面。以熒光素FITC標(biāo)記了的Annexin V作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所獨特的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。碘化丙啶（PI）是一種核酸染料，將Annexin V 與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞

9、以及死細(xì)胞區(qū)分開來。14納米銀和微米銀顆粒對細(xì)胞周期的影響 Fig.3. Effects of SNPs / SMPs on cell cycle. *represents P0.0515Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡Fig.6. Rates of cells in different SPs groupsA small part of them were apoptosis and necrosisMost of the cells were livingHowever, the apoptosis was dose-dependent with SNPs concen

10、tration At the same concentration, apoptosis of SNPs obviously higher than SMPs16Apoptosis Analysis by Annexin-V / PI StainingFig.7. Apoptosis of different SNP and SMP concentrationsFig.8. Apoptosis of SNP and SMP groups17Transmission Electron Microscopy (TEM) of SNPs treated Cell SectionsFig.9. Dif

11、ferent cells in SNPs group.Bar=3000nmFig.10. SNPs around and inside cells. Bar=400nm18Transmission Electron Microscopy (TEM) of SNPs treated Cell SectionsFig.9. SNPs being phagocytized Bar=400nmFig.10. SNPs phagocytized into the cell Bar=400nm19 400nm納米銀顆粒被細(xì)胞吞噬形成的吞噬小泡20三、納米銀的遺傳毒性試驗21 遺傳毒性試驗(in vitro

12、 Micronuclei Test) 試驗條件：HeLa 細(xì)胞, 播種濃度為：5 x10*4 cells/60cm-dishCytochalasin B (+), S9 (-)受試物暴露24小時試驗結(jié)果：n = 3mean SDP 0.05P 0.01P 0.001 NC (NaCl sol.)Ag-NPs-gelHydrogelPC (MMC)Ag-NPs-solutionFMN (%)Dose0.05ug/ml2ug/ml4ug/ml6ug/ml20mg/ml40mg/ml60mg/ml60mg/ml50ul2.5 0.799.5 0.35.07 0.517.0 0.828.67 0.32

13、7.23 1.918.7 0.629.3 2.7920.6 2.47224824h48hHydrogelAg-NPs-GelAg-NPsHydrogelAg-NPs-GelAg-NPsUnique probe41,00041,00041,00041,00041,00041,0005Log2624Log2571093Log2411161313412Log23310185192211511Log222,6282,3252,3351521,080141Log2119,66321,31820,76823,54722,29125,4512Log212,2131,8971,9171,2861,922233

14、Log221531381061672824Log23514145Log24116Log25Total24,94825,89125,34225,16025,75125,490 Gene expression profiling (Micro-array) 表達(dá)增加或減少的基因數(shù)目23 基因表達(dá)變化的定量分析(real-time PCR) RNA：來源于納米銀凝膠(Ag-NPs-Gel)及不含納米銀的水凝膠(Hydrogel)添加48h后的HeLa細(xì)胞(與DNA微陣列分析同一樣品)Relative mRNA expression(%GAPDH copy number)24納米銀具有潛在的遺傳毒性已

15、有文獻(xiàn)報道，如：Ag-NPs(25ug/ml)處理的IMR-90(正常人肺纖維細(xì)胞)顯示了染色體畸變率達(dá)10%，對照組為0。AshaRani, PV et al., BMC Cell Biology, 2009.納米銀溶液和納米銀凝膠誘發(fā)Hela細(xì)胞微核形成率較對照組明顯增高，提示有潛在的遺傳毒性；不含納米銀的凝膠其微核形成率和陰性對照組略有增加，而納米銀溶液所誘發(fā)的微核形成率明顯增加，證明納米銀凝膠誘發(fā)的微核形成主要由納米銀引起。這一結(jié)果提示在本試驗條件下，本試驗所用的納米銀凝膠對HeLa細(xì)胞有一定的潛在遺傳毒性。結(jié)果討論：Ag-NPs(1.0ug/ml)處理的HepG2顯示了誘發(fā)微核形成率

16、達(dá)47.93.2%，對照組為2.10.4%。Kawata, K. et al. PV et al., Environ. Sci. Technol, 2009.天津科學(xué)技術(shù)大學(xué)系統(tǒng)生物技術(shù)Teda Bio-X Center張教授發(fā)現(xiàn)了納米銀直接阻礙遺傳物質(zhì)DNA的復(fù)制忠實性 , Nanotechnology, 2009.細(xì)胞毒性和遺傳毒性的機(jī)理？25 四、納米銀的生殖毒性 試驗26In vivo toxicity of silver NPs-based hydrogel in reproductive organsMaterials:Rabbit, adult, female, bodyweig

17、ht: 2.0-2.4kgSilver-NPs-based hydrogel, gifted from co-laboratory partner, Silver-NPs conc.: 0.38g/mg (ICP-MS) Size: 3-5nm, 47.9%; 5-10nm, 50.8%; 10-30nm, 1.3% (TEM) PH：5-8 hydrogel was composed of sterile water, glycerine, carbomer and triethanolamine (TEA). Dosing:To monitor a long-time and high-d

18、ose exposure, a ten-times dosing was selected by 6 days continuously exposure of Ag-NPs-hydrogel by vaginadirectly administrating. Dose in rabbit = g/kg (human) x 2.3 x 15 = 2.0g/kg/day, 27Distribution of silver in reproductive organsThe contents of silver accumulated in reproductive organs after da

19、y 1, 3, 6 exposure. Day0: non-treatment control; Y-axis: Related fold-changes to the control. The silver contents were detected by ICP-MS. the silver contents showed higher than control as 5 to 25-fold at 6 days exposure in all reproductive organs. ICP-MS測定結(jié)果顯示，納米銀凝膠陰道內(nèi)給入后第1天和連續(xù)給入后第6天，血液、陰道粘膜、子宮組織、輸

20、卵管組織及卵巢組織內(nèi)銀含量均較對照組明顯增高。Standard materials of pure silver : GBW08610 28Tissue morphological changesD6-CD0-CD0-UD0-VD6-VD6-U100 m100 m100 m100 m100 m100 mD6-OD6-TD0-OD0-T100 m100 m100 m100 mTissue morphological changes (HE stain) after 6 days exposure of silver NPs-hydrogel.D0: non-treatment control;

21、D6: silver NPs-hydrogel exposure for 6 days;.納米銀凝膠陰道粘膜給藥6天后各生殖器官組織HE染色圖像D0: 正常對照組；D6:納米銀凝膠陰道粘膜連續(xù)給藥6天；V: 陰道粘膜;C: 宮頸 U: 子宮；T: 輸卵管；O: 卵巢the vagina mucus-membrane shrinkage vascular expansion in the cervix of the uterus mucus-membrane shrinkage of uterine tube 29Ultra-structural pathology (TEM)A. Vagina

22、 mucous membrane, X 20 000; B. Cervical tissues, X80 000; 2 m A500nmB2 mDC500nmC. Ovary tissues, X80 000; D. Ovary tissues, X20 000納米銀凝膠陰道粘膜連續(xù)給藥6天后透射電鏡觀察顯示，陰道粘膜層許多細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)邊聚濃縮、核固縮、呈現(xiàn)明顯的凋亡特征, 可見微核形成。輸卵管粘膜內(nèi)圓形高密度的納米銀顆粒，細(xì)胞核形狀異常、碎裂。Silver-NPs-like round particle Silver-NPs-like round particle Nucleus disr

23、uptionChromosome concentrationMicronucleus,Chromosome concentration30小結(jié)納米銀凝膠陰道粘膜持續(xù)大量給藥后會在生殖器官組織內(nèi)造成不同程度的納米銀蓄積，引起陰道粘膜組織和子宮內(nèi)膜組織，乃至卵巢組織不同程度的超微病理變化。子宮內(nèi)膜及卵巢組織內(nèi)許多凋亡細(xì)胞的存在，提示納米銀凝膠可能存在遺傳毒性及生殖毒性風(fēng)險?；虮磉_(dá)譜分析提示，ROS信號通道相關(guān)的金屬結(jié)合蛋白家族基因的顯著增高，細(xì)胞周期及有絲分裂信號通路的激活可能是納米銀凝膠引起細(xì)胞毒性的主要作用機(jī)制。31 五、全身亞慢性毒性試驗32wistar品系大鼠70只，雌、雄各半,體重10

24、0-120g。 大鼠在實驗動物室飼養(yǎng)7天后。按體重隨機(jī)分為7組，每組10只，雌、雄各半，3組大鼠分別皮下植入納米銀0.06mg/cm2,0.018 mg/cm2,0.006 mg/cm2 ，另3組大鼠分別皮下植入微米銀0.06mg/cm2,0.018 mg/cm2,0.006 mg/cm2 ，對照組只做手術(shù)，不給藥。給供試品期間密切觀察各組動物的外觀體征、糞便性狀，每周稱體重一次。每14天植入一次供試品，共植入6次。90天后，眼眶靜脈叢取血，測定血紅蛋白濃度（HGB）等血清生化學(xué)指標(biāo)。并于次日處死，系統(tǒng)尸解，稱取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、腦、子宮（卵巢）、睪丸的重量并計算臟器系數(shù)，另取部分組

25、織，肉眼觀察后，將上述組織全部放入中性10甲醛溶液中固定，石蠟切片、HE染色、顯微鏡下觀察各臟器的病理組織學(xué)變化。33 大鼠皮下植入納米銀粉和微米銀粉90天后，大鼠一般狀況良好，體重增加。血液學(xué)指標(biāo)和生化學(xué)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)，無明顯臨床意義。各臟器系數(shù)均在正常值范圍內(nèi)，與對照組比較無顯著性差異。病理組織學(xué)檢查未見與受試物毒性作用有關(guān)的病理組織學(xué)改變。給予不同劑量納米銀粉大鼠未見與劑量有關(guān)的毒性反應(yīng)。納米銀和微米銀在亞慢性毒性實驗中未見明顯毒性反應(yīng) 34六、納米銀在體內(nèi)的代謝和分布35 1.皮下植入試驗 將120只雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為4組，分別為空白對照組、納米銀1次組、納米銀10次組

26、、微米銀組；每組分別注射1ml細(xì)胞培養(yǎng)液（空白對照溶液）、納米銀混懸液和微米銀混懸液，其中納米銀10次組分10次注射，每次注射0.1ml；銀的注射總量均為62.8mg/kg，注射方式為皮下注射。分別在2周、4周、8周、12周、18周、24周時，每組任選5只動物，轉(zhuǎn)移到代謝籠中飼養(yǎng)，收集動物24h糞便和尿液；之后分別從這些動物股動脈取約3ml血液；然后斷髓處死動物，解剖取注射部位、腦、心、肝、脾、肺、腎、一根股骨、卵巢、子宮、腎上腺。36將所有臟器、血液和排泄物，用HNO3和HClO4消解，利用ICP-MS測試消解液中的Ag含量，再根據(jù)測試結(jié)果計算每個臟器中的Ag含量。分別在2周、12周、24周

27、時，每組任選3只動物，解剖后用手術(shù)刀從取出動物的注射部位皮膚、腎、肝、脾、腦、肺中取一小塊，處理后進(jìn)行超微病理分析。 37結(jié) 果注射后的納米銀和微米銀在大鼠體內(nèi)的分布代謝主要可分為3個部分：（1）蓄積在注射部位（2）被代謝排泄到體外（3）從注射部位遷移出并分布到體內(nèi)其它臟器。 38納米銀：這兩部分總和99.85%微米銀：這兩部分總和99.98%注射部位 排泄物39（1）注射部位 納米銀微米銀 納米銀和微米銀組動物注射部位病理照片（200）40圖1-16 糞便中銀含量變化曲線圖41遷移到體內(nèi)的銀納米銀更易分布到體內(nèi)其它臟器4243圖4.5 腎臟銀含量變化曲線圖44圖4.6 肝臟銀含量變化曲線圖4

28、5圖4.8 腦部銀含量變化曲線圖46圖4.9 肺部銀含量變化曲線圖472周 12周 24周 20000 Bar300nm 20000 Bar300nm 40000 Bar100nm腎小管上皮細(xì)胞中的納米銀顆粒48 2周 12周 24周 40000 Bar100nm 20000 Bar300nm 40000 Bar100nm 超微病理照片顯示在肝細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)有納米銀顆粒。推測是部分納米銀顆粒依然會以單分散的形式存在，并進(jìn)入了肝細(xì)胞內(nèi)。 49The silver content in brain versus time curves502周 12周 24周20000 Bar300nm 40000

29、Bar100nm 40000 Bar100nmsilver nanoparticle in neuron51（1）血腦屏障體外模型的構(gòu)建 BMVECs/ACs共同培養(yǎng)血腦屏障體外模型BMVECs/ACs共同培養(yǎng)血腦屏障體外模型血腦屏障示意圖52（1）納米銀顆粒通過血腦屏障的研究53 a b c血腦屏障血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的納米銀顆粒 a, b 納米銀組血管內(nèi)皮細(xì)胞中有納米銀顆粒 c 微米銀組血管內(nèi)皮細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn)顆粒物（2）納米銀顆粒通過血腦屏障機(jī)理的研究54進(jìn)入體內(nèi)的納米銀顆?？赡苁且詢煞N狀態(tài)分布到全身第一，納米銀在體內(nèi)可能被體液溶解，產(chǎn)生Ag，這些Ag再分布于全身。第二，因為納米銀表面帶負(fù)電荷，可

30、與蛋白質(zhì)的正電荷因靜電吸附而形成的牢固結(jié)合，所以納米銀顆粒具有良好的親蛋白性，可與血漿蛋白或其它生物蛋白反應(yīng)，材料表面覆有一層生物蛋白膜或者血漿蛋白膜，這些覆蛋白膜的納米銀流動性更好，通過蛋白的代謝，分布于全身。 55 2. 敷料(II度燙傷)新西蘭雌兔48只 ，隨機(jī)分為4大組（空白對照組、II度燙傷普通劑量組、II度燙傷高劑量組、III度燙傷高劑量組）及16小組，每小組3只。在給藥后的2天、4天、1周、2周、1月及2月處死并測量各組織中的銀含量。燙傷模型：根據(jù)童亞林的不同深度兔耳燙傷創(chuàng)面模型的研究，制作兔耳燙傷模型：每只耳朵背部4個直徑2.5cm大小的燙傷創(chuàng)面。用阿希米納米銀醫(yī)用敷料覆蓋于燙

31、傷表面后包扎固定。 56II度燙傷高劑量組結(jié)果 血液中銀含量變化圖肝臟中銀含量變化圖腎臟中銀含量變化圖脾臟中銀含量變化圖57II度燙傷普通劑量組結(jié)果 血液中銀含量變化圖肝臟中銀含量變化圖腎臟中銀含量變化圖脾臟中銀含量變化圖583.婦科用(陰道粘膜)試驗材料:阿希米納米銀婦女外用抗菌器，納米銀凝膠型。生產(chǎn)批號:09060，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號：YZB/粵0329-2003。生產(chǎn)許可證：粵食藥監(jiān)械生產(chǎn)許。生產(chǎn)廠家：深圳市源興納米醫(yī)藥科技有限公司。給藥劑量:按藥品使用說明書, 成人給藥劑量為1支/天，藥品規(guī)格為3g0.3g/支,連續(xù)5天為一療程。根據(jù)動物與人體的每公斤體重劑量折算系數(shù)表,折算得兔的用藥量為3/

32、60*2.30=0.115g/(kg.天）,本試驗采用5倍的臨床劑量，實際給藥劑量為0.1155=0.575 g/(kg.天）59 各臟器、血液在不同時間點上的Ag含量(g/g) 血液-0.500.511.522.58小時24小時1周1月3月銀含量(ug/g)空白組試驗組肝臟00.511.58小時24小時1周1月3月銀含量(ug/g)空白組試驗組腎臟00.511.522.538小時24小時1周1月3月銀含量(ug/g)空白組試驗組脾臟00.511.522.538小時24小時1周1月3月銀含量(ug/g)空白組試驗組60 注射凝膠后24小時，納米銀在所測的各個器官中均有分布，陰道是納米銀主要的分

33、布器官，其銀含量高于其它組織達(dá)3倍以上。但到注射1周后，各組織中的銀含量均大幅度下降，到注射1個月和3個月后，各試驗組臟器中的銀含量已與空白組無顯著性差異。 子宮 00.511.522.58小時24小時1周1月3月銀含量(ug/g)空白組試驗組陰道0246810128小時24小時1周1月3月銀含量(ug/g)空白組試驗組61各組織中的銀含量測試結(jié)果表明，納米銀可以通過血液循環(huán)系統(tǒng)遷移，并在體內(nèi)肝、腎、脾、子宮、陰道等主要臟器中分布，其中經(jīng)陰道粘膜的局部吸收量較高。 結(jié)合各主要器官的病理切片觀察結(jié)果，可以看出：在模擬臨床給藥途徑，采用5倍臨床給藥劑量1療程（5天）的情況下，納米銀凝膠1月后在這些

34、組織中無明顯蓄積。62總結(jié)1.細(xì)胞毒性與劑量成正相關(guān);2.有潛在的遺傳毒性和遺傳毒性;3.可進(jìn)入細(xì)胞器, 隨血循環(huán)到各臟器, 穿透血腦屏障。在皮下植入，0.1-0.2%進(jìn)入其他臟器，約40%通過糞便排出，約60%在原位 ；用于燒傷，2月后代謝到正常水平；用于粘膜，1月后代謝到正常水平。63七. 納米銀的安全性評價風(fēng)險分析原則：體內(nèi)大于體外體內(nèi)的吸收分布安全劑量64Papers were published1. Jinglong Tang, Ling Xiong, Guofeng Zhou, Shuo Wang, Jianyu Wang, Li Liu, Jiage Li, Fuqiang Yu

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