外源基因的獲取課件_第1頁
外源基因的獲取課件_第2頁
外源基因的獲取課件_第3頁
外源基因的獲取課件_第4頁
外源基因的獲取課件_第5頁
已閱讀5頁，還剩10頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、外源基因的獲取構建基因組文庫，篩選目的基因 基因組文庫(gene library)：將某種生物的基因組DNA切割成一定大小的片段，并與合適的載體重組后導入宿主細胞，進行克隆。這樣每一個細胞接受了含有一個基因組DNA片段與載體連接的重組DNA分子，而且可以繁殖擴增，這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合，即基因組文庫，它包含了該生物的所有基因。構建流程抽提基因組DNA鳥槍法制備DNA片段DNA片段與載體重組轉化宿主菌篩選目的基因（核酸探針法、免疫結合法）特點及應用：包含所有遺傳信息構建難度大（單拷貝基因、長片段基因）篩選難度大用于研究基因在基因組中的情況構建cDNA文庫，篩選目的基因 c

2、DNA文庫(complementary DNA library)以組織細胞中的mRNA為模板，反轉錄合成雙鏈cDNA ，各cDNA分子分別插入載體形成重組子，再導入宿主細胞克隆擴增。這些在重組體內(nèi)的cDNA的集合即cDNA文庫。 基因組含有的基因在特定的組織細胞中只有一部分表達，而且處在不同環(huán)境條件、不同分化時期的細胞其基因表達的種類和強度也不盡相同，所以cDNA文庫具有組織細胞特異性。cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得細胞特異表達的基因。但對真核細胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶有含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA。 PCR擴增目的基因片段 如果已經(jīng)知道目的基因的序列，就能很方便地用PCR聚合酶鏈式反應，polymerase chain reaction，從基因組DNA或cDNA中獲得目的基因，可不必要經(jīng)過復雜的DNA文庫構建過程。 人工合成較短的DNA差

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論