丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

1、.資料丙型肝炎病毒核糖核酸測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則一、前言本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人關(guān)于丙型肝炎病毒（ hepatitis 核糖核酸(ribonucleic , ) 定量檢測試劑注冊申報(bào)本指導(dǎo)原則是關(guān)于丙型肝炎病毒核糖核酸定量檢測試劑的一般要 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定 原則相關(guān)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。二、適用圍(一)HCV特點(diǎn)HCV 屬于黃病毒科(flaviviriae)，其基因組為單股正鏈 6 50 HCV 亞型1a、2b、3c 等1 型呈全球性分布，占一切HCV70以上。HCV基因組含有一個(gè)開放讀框(open frame,ORF)，編碼10余種結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)

2、/RNARNAHCVRNA 酶缺乏教正功能不能修正錯(cuò)配，多次復(fù)制后易導(dǎo)致HCV多種變異產(chǎn)生。(二)丙型肝炎感染分布HCV1.7 億人感染3.5 萬例。HCV1b 2a 1b 1a2b 3b 型報(bào)道；6 方邊境省份也可見此基因型。（三）HCV RNA定量檢測HCV RNA 定量檢測方法囊括實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反映reaction，qRT-PCR)、分枝等本指導(dǎo)原則所指的HCV 定量檢測試劑是指利用qRT-PCR 方法核酸檢測技術(shù)，以HCV 基因序列為檢測靶標(biāo)，關(guān)于人血清、血漿及他人體樣本中的HCV HCV癥感染的證據(jù)和抗病毒療效評估的觀察指標(biāo)。申報(bào)和相關(guān)許可事項(xiàng)變更的產(chǎn)品。本指導(dǎo)原則不適用于依

3、照藥品管理的用于血源篩查用途的 HCV RNA檢測試劑。三、基本要求（一）綜述資料（總局令第 4 號）和體外診斷試劑（食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2014 年第44 號）的相關(guān)要求。（二）主要原材料的研究資料應(yīng)提供主要原材料如引物、探針、酶、標(biāo)準(zhǔn)品或企業(yè)參考品等的企業(yè)部參考品應(yīng)詳細(xì)說明有關(guān)企業(yè)部參考品的原料選擇、制RNA）1-6 1b、2a 型別的臨床樣本，各型別參考品在同一濃度水平應(yīng)有多份樣本。陽性參考品：應(yīng)能至少覆蓋常見亞型 1b、2a，每個(gè)亞型設(shè)置三需經(jīng)過可靠方法進(jìn)行確認(rèn)。陰性參考品：可采用經(jīng)確認(rèn)無 HCV感染的臨床樣本。20）的陽性檢出率作為最低檢測6 建議同時(shí)設(shè)置陰性參考品關(guān)于精密度進(jìn)

4、行驗(yàn)證。試劑盒關(guān)于照品（質(zhì)控品）試劑盒的質(zhì)控體系經(jīng)過設(shè)置各種試劑盒關(guān)于照品來實(shí)現(xiàn)，質(zhì)控體系需考慮關(guān)于樣本核酸分離/ 純化、配液及加樣、試劑及儀器性能、擴(kuò)增反映克制物（管克制）、交叉污染、靶核酸降解等因素可能造成的假 RNA定量檢測試劑的質(zhì)控品應(yīng)至少設(shè)置三個(gè)量級水平的系列質(zhì)控品 弱陽性質(zhì)PCR反映進(jìn)程、試劑/設(shè)備、交叉污染等環(huán)Ct 試劑盒質(zhì)控體系主要考慮以下幾方面： 陽性關(guān)于照品（質(zhì)控品）（質(zhì)控品及弱陽性關(guān)于照品，陽性關(guān)于照品應(yīng)參與樣本核酸的平行提?。ㄈ缬斜匾?，本核酸分離/ 純化、試劑及儀器性能、擴(kuò)增反映進(jìn)程等環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制，企業(yè)應(yīng)關(guān)于各種陽性關(guān)于照品（質(zhì)控品）Ct 值做出明確的圍要求。如，

5、可采用陰性人血漿+假病毒制備，應(yīng)使用權(quán)威方法確認(rèn)陰性人血漿的生物安全性及無干擾性：抗-HCV、抗1/2、等檢測陰性，HCV 等檢測陰性。陰性關(guān)于照（質(zhì)控品）：性關(guān)于照品應(yīng)參與樣本核酸的平行提取。校準(zhǔn)品：基質(zhì)應(yīng)采用血漿或血清，并且能溯源至/ 國際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)單位應(yīng)使用 表示。提交完整溯源性文件，可參照GB/T 21415-2008 體外診斷醫(yī)療器械生物樣本中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性。及不同基因型的陽性樣本均應(yīng)能夠溯源至參考品/ 國際參考品。使用參考品/國際參考品為校準(zhǔn)品，應(yīng)用多臺(tái)儀器關(guān)于企業(yè)一級參考品進(jìn)行校核酸分離/ （如有證資料。聚合酶鏈反映組分的主要材料（各種酶及其他主要原料

6、）的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)研究資料， 主要囊括以下容：脫氧三磷酸核苷（NTP）核酸的組成成分，囊括： ATP、UTP、GTP、CTP、TTP， 關(guān)于純度、濃度、保存穩(wěn)定性等的詳細(xì)驗(yàn)證資料。引物結(jié)果或高效液相色譜法分析圖譜。探針（標(biāo)記物（寡聚核苷酸片段能與互補(bǔ)核酸序列退火雜交，用于特定核酸序列的探測。合成后經(jīng)PAEG5- 端標(biāo)記熒光素報(bào)告基團(tuán)或其他發(fā)光3- HPLC 或其他適宜方法純化純度應(yīng)達(dá)到高效液相色譜純。如為外購，應(yīng)提供合成機(jī)構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì)檢表明(HPC分析圖譜的熒光素或化學(xué)發(fā)光物進(jìn)行核實(shí)，并且作HPLC分析。RT-PCR反映所需酶通常囊括以下幾種活性：NA 聚合酶活性: RNA

7、 為模板， 催化聚合成NAH（RNase H）由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的 cNA 與模板 RNA 形成的雜交分子，將由RNase H 從RNA5RNA分子。NA指導(dǎo)的NA聚合酶NA 為底物， 再合成第二條NA 分子。熱穩(wěn)定性。化酶（UN，該酶應(yīng)具有尿嘧啶糖基化活性，無核酸外切酶及核酸切酶活性。應(yīng)關(guān)于酶活性有合理驗(yàn)證，應(yīng)提供有關(guān)保存穩(wěn)定性、活性及功能性實(shí)驗(yàn)等的研究資料。關(guān)于照（標(biāo)、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品的原料選擇、制備、定值進(jìn)程及試Ct 通常選擇假病毒。核酸類檢測試劑的包裝材料和耗材應(yīng)無脫氧核糖核酸酶（nase ）和核糖核酸酶（Rnase）污染。（三）主要工藝及反映體系的研究資料配制工作液的各種原材料及其配比

8、應(yīng)契合要求，原材料應(yīng)混合均勻， 配制進(jìn)程應(yīng)關(guān)于pH、電導(dǎo)率等關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行有效控制。和有效期提供確切的依據(jù)，主要囊括以下容：控步驟。反映原理介紹?；蛭稽c(diǎn)選擇、PCR方法學(xué)特性介紹。確定最佳 PCR 反映體系的研究資料，囊括酶濃度、引物/濃度、 200 系中，加樣量和反映體積參考相應(yīng)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)研究驗(yàn)證后確定。確定PCR各階段溫度、時(shí)間及循環(huán)數(shù)的研究資料。關(guān)于于基線閾值（threshol ）和閾值循環(huán)數(shù)料。不同適用機(jī)型的反映條件的關(guān)于比分析，如果有差異應(yīng)訣別詳述，并且提供驗(yàn)證資料表明差異性關(guān)于試驗(yàn)結(jié)果的影響。（四）分析性能評估資料申請人應(yīng)提交生產(chǎn)者在產(chǎn)品研制或成品驗(yàn)證階段關(guān)于試劑盒進(jìn)行 、適用儀

9、器、試劑規(guī)格、批號、臨床樣文件或國有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導(dǎo)原則進(jìn)行。關(guān)于于HCVRNA測定試劑，建議著重關(guān)于以下分析性能進(jìn)行研究。HCV提取純化由于 RNA 酶的廣泛存在，血樣的保存運(yùn)輸以及 RNA 的提取純化均應(yīng)注意避免RNA酶的污染。RNA提取主要有以下目的：富集目的基因濃度、保證目的PCRPCR克制物， 是決定PCR成敗的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。因此，無論申報(bào)產(chǎn)品是否含有RNA分離/純化的組分，企業(yè)都應(yīng)關(guān)于核酸提取的環(huán)節(jié)做詳細(xì)的驗(yàn)證。臨床標(biāo)本中可能含有各式各樣的PCR克制物，因此，關(guān)于于RNA提取試劑的選RNA 外，還應(yīng)有純化步驟（如磁珠提取法，盡可能去除PCR克制物，避免使用無純化步驟的簡易方

10、法。申請人應(yīng)接合申報(bào)產(chǎn)品的特性，合理選擇優(yōu)化RNA分離/純化試劑，建議最低檢出限與定量限最低檢出限與定量限的確定建議使用國際參考品/參考品進(jìn)行梯度稀釋并且多次檢測，將具有陽性檢出率的病毒水平作為最低檢出限。根據(jù)詢證醫(yī)學(xué)中有關(guān)關(guān)于HCV感染者進(jìn)行抗病毒治療效果及預(yù)后評估的需要，建議HCV20IU/ml。定量限應(yīng)高于或等于檢出限，將多次（20 次）契合試劑準(zhǔn)確度要求的最低病毒水平作為定量限。血清、血漿應(yīng)訣別進(jìn)行最低檢測限的驗(yàn)證。最低檢出限和定量限的驗(yàn)證申報(bào)試劑應(yīng)在最低檢出限或接近最低檢出限的丙型肝炎病毒濃 60 于 40 次。企業(yè)應(yīng)能夠提供用于最低檢出限/定量限驗(yàn)證的病毒株的來源、型別確認(rèn)及滴度確

11、認(rèn)試驗(yàn)等信息。線性圍線性圍確定的研究應(yīng)使用高值臨床樣本（由可溯源至參考品 / 國際參考品的方法定量9 （的臨界值濃度，使用至少 3 圍的線性關(guān)系及各水平的準(zhǔn)確度確定該產(chǎn)品的線性圍。應(yīng)訣別關(guān)于血清、血漿、不同適用機(jī)型的加樣體積（如適用同基因型進(jìn)行線性分析及定量上、下限的確認(rèn)。準(zhǔn)確度關(guān)于測量準(zhǔn)確度的評判依次囊括：與參考品（和/ 或國際參考品） 擇合理方法進(jìn)行研究。/國際參考品驗(yàn)證此類檢測試劑有相應(yīng)的/ 國際參考品，應(yīng)使用/ 國際參考品關(guān)于試劑進(jìn)行驗(yàn)證，重點(diǎn)觀察關(guān)于相應(yīng)參考品檢測結(jié)果的契合情況。35 次回收試驗(yàn)，取回收試驗(yàn)注意事項(xiàng)：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般應(yīng)小于樣本體積的 10%；盡快使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本

12、中的被測物濃度接近醫(yī)學(xué)決定水平；標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高，以得到不同濃度的回收樣本；注意基質(zhì)效應(yīng)，盡快采用與臨床待測樣本一致的基質(zhì)方法學(xué)比關(guān)于采用參考方法或國/ 國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類試劑作為關(guān)于比擬申報(bào)試劑與關(guān)于比方法相比不會(huì)產(chǎn)生顯著差異結(jié)果。果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（置信區(qū)間。精密度實(shí)驗(yàn)方法可以參考相關(guān)的美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)批準(zhǔn)指南（CLSI-EP）或國有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行。企業(yè)應(yīng)關(guān)于每項(xiàng)精密度指標(biāo)的評判標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)的圍等。針關(guān)于本類產(chǎn)品的精密度評判主要囊括以下要求：（ 囊括提取組分和聚合酶鏈反映組分）本身的影響外，還應(yīng)關(guān)于 PCR 分20 天的連

13、續(xù)檢測，2 2 / 用于精密度評判的質(zhì)控品應(yīng)至少囊括三個(gè)水平:陰性質(zhì)控品：不含丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）的質(zhì)控品，不得檢出陽性（n20。（1 個(gè)數(shù)量級100（C（n20強(qiáng)陽性質(zhì)控品：待測物濃度呈中度至強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100且CV契合標(biāo)準(zhǔn)要求（n20。HCV不同基因型的覆蓋：應(yīng)關(guān)于丙型肝炎病毒預(yù)期用途聲稱可以檢測的不同基因型進(jìn)行以 上性能的全部評估，每個(gè)基因型的病毒樣本稀釋成至少 3 平，關(guān)于每水平樣本進(jìn)行反復(fù)測定。特異性交叉反映用于HCV RNA癥狀（推薦種類見表1。106cfu/ml 105pfu/ml 或更高。屬/型別和濃度確認(rèn)等試驗(yàn)資料。有關(guān)交叉反映驗(yàn)證的信息應(yīng)以列表的方

14、式在產(chǎn)品說明書的【產(chǎn)品性能指標(biāo)】項(xiàng)中有所體現(xiàn)。微生物黃病毒科（如：西尼羅病毒等） 登革熱病毒人巨細(xì)胞病毒1微生物黃病毒科（如：西尼羅病毒等） 登革熱病毒人巨細(xì)胞病毒E-B E-B 病毒人類免疫缺陷病毒 1、2乙型肝炎病毒甲型肝炎病毒梅毒6 型1 型單純皰疹病毒 2 型甲型流感病毒金黃色葡萄球菌白色念珠菌干擾物質(zhì)潛在的干擾物質(zhì)主要囊括：源性物質(zhì)（見表2）和常用的治療藥物如普通干擾素和聚乙二醇干擾素行驗(yàn)證。條件下進(jìn)行評判。關(guān)于于物濃度添加相應(yīng)藥物進(jìn)行干擾驗(yàn)證。建議在病毒的檢測臨界值水平關(guān)于每種干擾物質(zhì)的干擾影響進(jìn)行檢測。物質(zhì)膽紅素*表物質(zhì)膽紅素*游離血紅蛋白游離血紅蛋白甘油三酯*系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者

15、血抗核抗體類風(fēng)濕因子總G 型免疫球蛋白（IgG）*為必需驗(yàn)證的干擾物質(zhì)。使用HCV 陰性樣本（血清、血漿）特異性。臨床9.其他需注意問題關(guān)于于適用多個(gè)機(jī)型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項(xiàng)（五）陽性判斷值確定資料關(guān)于于此類試劑，正常人群中不應(yīng)檢出 HCV RNA，參考值確定資料主要是指Ct 的確認(rèn)資料，建議申請人采用受試者工作特征（ROC） 曲線的方式關(guān)于申報(bào)產(chǎn)品用于結(jié)果判斷的臨界值予以確認(rèn)。（六）穩(wěn)定性研究資料應(yīng)關(guān)于樣本穩(wěn)定性進(jìn)行研究，主要囊括關(guān)于不同樣本類型（漿），每間隔一定的時(shí)間段即關(guān)于儲(chǔ)存樣本進(jìn)行全試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要

16、求】兩項(xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說明。（六）產(chǎn)品說明書說明書裝載了產(chǎn)品預(yù)期用途、試驗(yàn)原理、試驗(yàn)方法、檢測結(jié)果解（食品藥品監(jiān)督管理總局通 2014 17 號）RNA定量檢測試劑說明書的重點(diǎn)容進(jìn)行詳細(xì)說明。/ 血漿樣本的HCV 用于需進(jìn)行HCV感染診斷的患者和接受抗病毒治療的測關(guān)于病情進(jìn)行綜合分析并且明確說明該檢測試劑不得用于血源篩查 。應(yīng)關(guān)于丙型肝炎病毒感染及治療臨床背景進(jìn)行簡介?！局饕M成成分】說明試劑盒所包含組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信息， /活性及其他特性；說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。相關(guān)試劑/耗材的名稱、注冊證號（如有）及其他相關(guān)信息。如果試劑盒中不包含用于核酸分離/ 純化的試劑組分，

17、則應(yīng)在此注明經(jīng)驗(yàn)證后推薦配合使用的商品化核酸分離/ 產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱、注冊證號（如有）以及配套儀器等詳細(xì)信息?！緝?chǔ)存條件及有效期】說明試劑盒的效期穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性、凍融次數(shù)要求等，應(yīng)標(biāo)明具體的儲(chǔ)存條件及效期?！緲颖疽蟆繕颖臼占螅航雍吓R床需要并且參照丙型肝炎防治指南（ ）推薦的采樣要求。提取前的預(yù)處理、運(yùn)送條件、保存條件及期限（短期、長期）藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復(fù)至室溫，凍融次數(shù)的要求。如有需要應(yīng)關(guān)于高于檢測圍的樣本稀釋方法進(jìn)行規(guī)則。重要信息以指導(dǎo)用戶操作。【試驗(yàn)方法】詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，囊括：試劑準(zhǔn)備及配制方法、注意事項(xiàng)。詳述待測樣本、相關(guān)校準(zhǔn)品及質(zhì)

18、控品核酸提取的條件、步 核酸提取/純化方法的詳細(xì)介紹。擴(kuò)增反映前準(zhǔn)備：加樣體積、順序等。PCR各階段的溫度、時(shí)間設(shè)置、循環(huán)設(shè)置及相關(guān)切意事項(xiàng)?；€、循環(huán)閾值（Ct值）的選擇方法。校準(zhǔn)方法的描述。/Ct值要求?！驹囼?yàn)結(jié)果的解釋】【試驗(yàn)方法的局限性】其癥狀/ 體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反映等情況綜合考慮。可靠的結(jié)果取決于樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、儲(chǔ)存及處理程序。明確該試劑僅限于規(guī)則的樣本類型及適用機(jī)型。的突變可能會(huì)導(dǎo)致檢測到的病毒含量偏低或者檢測不到病毒。HCV的定量取決于樣本中存在的病毒顆粒數(shù)，而這會(huì)受到樣本收集方法，病人因素（如年齡，是否存在癥狀）和/ 等因素的影響?！井a(chǎn)品性能指標(biāo)】詳述以下性能指

19、標(biāo)：評估方法、數(shù)據(jù)、結(jié)果/ 定量限的確定方法以及關(guān)于最低檢出限/定量限驗(yàn)證所采用的基因型。線性圍：確定線性圍的方法、濃度圍、相關(guān)系數(shù)等信息。HCV測效果。特異性：信息。白、甘油三酯、膽紅素等，應(yīng)注明可接受的最高限值。藥物影響：常用抗病毒藥物、干擾素等關(guān)于檢測結(jié)果的影響，如未進(jìn)行相關(guān)研究也應(yīng)提供相關(guān)警示說明。臨床關(guān)于比試驗(yàn)研究：簡要介紹關(guān)于比試劑（方法）采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少囊括以下容：由于本試驗(yàn)涉及到病毒的提取及擴(kuò)增，應(yīng)小心避存在的方法及步驟。應(yīng)提示提取擴(kuò)增進(jìn)程中的注意事項(xiàng)有關(guān)人源組分（如有）品或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)過乙肝炎表面抗原（抗-HIV1/2

20、（抗-HCV）等項(xiàng)目的檢測為陰性，但截止目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以在傳染源的處理方式。腐劑如有疊氮鈉等的風(fēng)險(xiǎn)警示及處理方式。備設(shè)備及操作人員，應(yīng)嚴(yán)格依照說明書要求進(jìn)行操作。（七）產(chǎn)品技術(shù)要求（總局4 號（2014 44 號（2014 9 號）另外，關(guān)于于第三類產(chǎn)品，應(yīng)參考中國生物制品規(guī)程（現(xiàn)行版產(chǎn)品分類項(xiàng)中引出該附錄容。附錄中應(yīng)將待測靶基因區(qū)域，引物/ 探針來源及驗(yàn)證情況，各種酶的來源、特性以驗(yàn)證情況等信息的重點(diǎn)容予以明確。HCV RNA 定量檢測試劑的注冊檢測應(yīng)契合相應(yīng)參考品檢測要求，產(chǎn)品的性能指標(biāo)應(yīng)與說明書容相符。如果擬申報(bào)試劑已有相應(yīng)的/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，則企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求不得低于上述標(biāo)準(zhǔn)要求

21、。可參考YY/T1182-2010 試劑盒（八）注冊檢測根據(jù)總局第 5 號令要求，首次申請注冊的第三類產(chǎn)品應(yīng)在食品藥采用參考品進(jìn)行檢測并且契合要求。（九）臨床評判資料研究方法品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。建議預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇兩種關(guān)于比試劑同時(shí)進(jìn)行驗(yàn)證，考察其誤差圍，選（議在此關(guān)于第三方試劑的選擇原則作簡單介紹。關(guān)于比試劑的適用樣本（檢測值差異較大的第三方試劑進(jìn)行驗(yàn)證。強(qiáng)調(diào)：臨床試驗(yàn)研究應(yīng)使用說明書配套使用的提取純化試劑盒， 并且在方案中明示。臨床研究單位的選擇（器、試劑、質(zhì)控及操作程序等，熟悉評判方案。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，考臨床試驗(yàn)方案試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病歷納入/ 排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的時(shí)方案中應(yīng)明確寫明

22、關(guān)于測定結(jié)果不符的樣本進(jìn)行確認(rèn)的第三方試劑 或方法。病歷選擇及樣本類型臨床試驗(yàn)樣本數(shù)應(yīng)不少于 500 例，其中應(yīng)主要選擇丙型肝炎患者樣本（陽性樣本，不少于450 例。在病歷選擇時(shí)應(yīng)考慮到地域性的1b 2a 10 例， 50 例的陰性樣本進(jìn)行比關(guān)于（HIV病毒以及其他良性或惡性肝臟疾病患者（疫性肝炎，以從臨床角度考察其特異性。臨床試驗(yàn)中所涉及的樣本類型應(yīng)為實(shí)際臨床檢測中常用的樣本 型不少于 500 例的前提下，可增加關(guān)于另一種臨床試驗(yàn)樣本數(shù)至少為200 2 家（2 家）臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)完成的臨床試驗(yàn)；或50 例同一丙型肝炎患者訣別采集的血清和血漿樣本進(jìn)行比關(guān)于試驗(yàn)研究，陽性樣本（30 例）應(yīng)囊括強(qiáng)、中、弱陽性。試劑或測序方法。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析關(guān)