羅氏試劑盒說明書 Rubella IgM- 04819900001-en-t

1、風(fēng)疹病毒IgM檢測試劑盒IgM antibodies to Rubella virus04819900001V4風(fēng)疹病毒IgM檢測試劑盒IgM風(fēng)疹病毒抗體 Elecsys 和 cobas e 分析儀 6/62008-05, V 4中文2008-05, V 4中文 5/6 Elecsys 和 cobas e 分析儀04618831 190 100測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601中文注意：風(fēng)疹病毒IgG抗體的高低與所采用的檢測方法密切相關(guān)。因此檢測報告應(yīng)注明所采用的方法。用兩種方法測出的含量不能

2、相互直接比較，以免出錯。因此實驗室向臨床醫(yī)師報告的結(jié)果應(yīng)包括“以下結(jié)果采用Elecsys風(fēng)疹病毒IgG抗體測定法。不能與其它制造商提供的測定結(jié)果互換。”主要用途用免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中風(fēng)疹病毒IgM抗體含量。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys和cobas e免疫測定分析儀。臨床應(yīng)用1、2、3、4、5、6、7風(fēng)疹病毒是風(fēng)疹的致病病原體，一種常見的以輕度皮疹為特征的疾病，通常發(fā)生于兒童期。它通過小飛沫從呼吸道傳播。后天獲得性感染很少發(fā)生并發(fā)癥。不過，當孕婦特別是在孕早期感染風(fēng)疹病毒可導(dǎo)致嚴重疾病。風(fēng)疹病毒可通過胎盤傳播，導(dǎo)致胎兒死亡或?qū)е聡乐靥夯?，通常被稱為先天性風(fēng)疹綜

3、合癥（CRS）。CRS是導(dǎo)致失明、失聰、先天性心臟病和精神發(fā)育遲緩的重要原因。目前對易感風(fēng)疹病毒的嬰兒和育齡期婦女接種疫苗已明顯降低了急性風(fēng)疹病毒感染和CRS的發(fā)生率。通過檢測風(fēng)疹病毒特異性抗體判斷個體的免疫狀態(tài)，有助于診斷急性風(fēng)疹病毒感染。風(fēng)疹病毒IgG抗體的存在提示以前曾接種疫苗或曾發(fā)生風(fēng)疹病毒感染，提示存在免疫性。通過檢測風(fēng)疹病毒特異性IgM抗體可輔助診斷急性風(fēng)疹病毒感染。從第一份樣本至第二份樣本血清特異性風(fēng)疹病毒抗體陽轉(zhuǎn)或血清IgG抗體滴度明顯升高可支持急性風(fēng)疹病毒感染的診斷。已經(jīng)證明重組風(fēng)疹樣顆粒（RLP）可代替真的風(fēng)疹病毒作為診斷測定法中的抗原。檢測原理捕獲原理，總檢測時間：18分

4、鐘第一次孵育：使用Elecsys通用稀釋液按1：20自動稀釋10l標本。加入生物素化的抗人IgM單克隆抗體和風(fēng)疹病毒特異性重組抗原，與樣本種的風(fēng)疹病毒IgM抗體形成復(fù)合物。第二次孵育：添加釕（Ru）a標記的風(fēng)疹病毒特異性抗體和包被鏈霉親和素的磁珠微粒后，該復(fù)合物通過生物素和鏈霉素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強度。儀器自動通過2點校正的定標曲線計算得到檢測結(jié)果。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II) -com

5、plex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作溶液M包被鏈霉親和素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml；包被鏈霉親和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1 生物素化的抗h IgM抗體，風(fēng)疹病毒特異性重組抗原（灰蓋），1瓶，10mL：生物素化抗h IgM單克隆抗體（小鼠）500ng/mL，風(fēng)疹病毒樣顆粒（ELP）約0.1U/mL；磷酸鈉緩沖液，pH 7.7；防腐劑。R2 Ru(bpy)32+標記的抗方針病毒抗體（黑蓋），1瓶，10mL；釕標記的風(fēng)疹病毒抗體復(fù)合物400ng/mL；磷酸鈉緩沖液，pH值7.7；防腐劑。Cal1 陰性定標液1（白蓋），2瓶，每瓶1.0mL：人血清，針對風(fēng)疹病

6、毒IgM抗體沒有反應(yīng)；防腐劑。Cal2 陽性定標液2（黑蓋），2瓶，每瓶1.0mL：緩沖液中的風(fēng)疹病毒IgM抗體近似為700U/mL（羅氏單位）；防腐劑。警告和注意事項僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時必需遵循所有試驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物必需按照當?shù)胤ㄒ?guī)進行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報告。所有人源性材料應(yīng)被視為具有潛在感染性。陰性定標液（Cal1）：采用獻血者血液制備，所有個體都經(jīng)過測試并且HbsAg、抗HIV和抗HCV為陰性。陽性定標液（Cal2）：采用人源性材料制備，經(jīng)HIV和丙型肝炎測試。結(jié)果為陰性。所用的測試方法均通過FDA的審核，或經(jīng)歐洲指令98/79/EC附錄，列表

7、A的批準。但是，任何檢測方法都不能絕對確認排除潛在的感染危險，因此應(yīng)該按照檢測病人標本的處理要求一樣使用本產(chǎn)品。一旦發(fā)生暴露，應(yīng)遵循負責(zé)醫(yī)療機構(gòu)的指示。8、9不可使用過期試劑。避免試劑和樣本（樣本、定標液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒為瓶裝即用型，適用于該系統(tǒng)。Elecsys 2010和cobas e 411分析儀：定標液Cal1和Cal2只能在2025在定標期間放置在儀器上。使用后，盡可能快的關(guān)閉試劑瓶并儲存在28條件下。請確保開啟的帶拉環(huán)蓋上MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀：除非需要在分析儀上使用總量定標液定標，將分裝即用型定標液轉(zhuǎn)移至帶拉環(huán)蓋

8、的空試劑瓶（定標液組小瓶）中。將供應(yīng)信息標簽粘貼在這些額外的試劑瓶上。將這些分裝定標液儲存在28每份分裝定標液僅執(zhí)行一個定標步驟。可通過各試劑條形碼讀入正確操作所需的全部信息。儲存及穩(wěn)定性存放于28請垂直擺放Elecsys風(fēng)疹病毒IgG抗體試劑盒，確保使用前儀器通過自動攪拌能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用M、R1、R2開封試劑，2-12周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e2周或如果交替在冰箱和分析儀上可儲存12周（長達84小時）Cal1、Cal2開封試劑，288周放置分析儀Elecsys 2010 和

9、cobas e 411上，2025最多5小時在MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601上一次性使用請垂直擺放定標品！請確保開啟的帶拉環(huán)蓋上沒有定標液。樣本的采集和準備僅以下羅列的足量樣本通過檢測要求。血清樣本須用標準試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、K3-EDTA和枸櫞酸抗凝的血漿都適用。請勿使用氟化鈉和草酸鉀抗凝的血漿。標準：陽性樣本的平均回收率在血清值的80-120%以內(nèi)。穩(wěn)定性：2-8保存3周，25保存3天，-20保存樣本可冰凍6次。選擇合適的試管進行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會影響檢

10、測結(jié)果。如果使用原始管進行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本和冰凍樣本檢測前必須先作離心處理?？墒褂玫蛪簝龈傻臉颖疽约疤砑盈B氮化合物（高達1）的樣本和質(zhì)控品。避免使用熱滅活的樣本。檢測前，樣本、定標液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。26瓶標簽需要的物品（未提供）貨號04618840，PreciControl風(fēng)疹病毒IgM抗體，規(guī)格41，分別為PreciControl風(fēng)疹病毒IgM 1和2貨號11732277，Diluent Universal，216ml樣本

11、稀釋液，或者貨號03183971，Diluent Universal，236ml樣本稀釋液貨號11776576，CalSet Vials，256空的帶拉環(huán)蓋小空瓶實驗室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 2010、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號11662988，ProCell，6380 mL，系統(tǒng)緩沖液貨號11662970，CleanCell，6380mL，測量池洗液 貨號11930346，Elecsys SysWash，1500mL，附加洗液貨號11933159，SysClean適配器貨號117068

12、02，Elecsys 2010分析杯，6060反應(yīng)管貨號11706799，Elecsys 2010分析吸頭，30120移液管吸頭MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號04880340，ProCell M，22L系統(tǒng)緩沖液貨號04880293，CleanCell M，22L測量池洗液貨號12135027，CleanCell M，12L測量池洗液（美國專用）貨號03023141，PC/CC杯，12個用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M貨號03005712，ProbeWash M，1270mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑

13、時清洗試劑針貨號12102137，反應(yīng)杯/吸頭組合裝84反應(yīng)杯/吸頭組合裝48盒，廢物袋 貨號03023150，WasteLiner，廢物袋 貨號03027651，系統(tǒng)清潔適配器M所有分析儀需要：貨號11298500，Elecsys SysClean，5100mL系統(tǒng)清洗液 檢測要優(yōu)化檢測性能，請遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動讀取條碼信息時，請輸入條碼標簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas

14、 e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（將定標液Cal1和Cal2放在分析儀的樣本區(qū)。只在定標期間開啟。有關(guān)定標的所有必要信息都編碼在試劑瓶條形碼標簽上并被自動讀入。定標后，將Cal1和Cal2儲存在28下或丟棄（MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀）定標溯源性：該檢測方法可溯源至羅氏標準。單位任選。定校頻率：新批號Elecsys風(fēng)疹病毒IgM Cal1、Cal2和新鮮試劑必須進行定標（新試劑盒注冊后在分析儀上放置不能超過24小時）。以下情況建議重新進行定標：使用同一批號試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）根據(jù)需

15、要：如失控。有關(guān)規(guī)章要求可增加定標頻率。定標液的電化學(xué)發(fā)光信號（計數(shù)）的范圍：陰性定標液（Cal1）：5002700（Elecsys 2010、MODULAR ANALYTICS E170和cobas e分析儀）。陽性定標液（Cal2）：550030000（Elecsys 2010、MODULAR ANALYTICS E170和cobas e分析儀）。質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl風(fēng)疹病毒IgM抗體。質(zhì)控1和2至少每24小時內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標后也須進行質(zhì)控。每個實驗室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個試驗室必須

16、采取相應(yīng)的糾正措施。如有必要，請重復(fù)檢測相關(guān)樣本。質(zhì)控需遵循適用的政府規(guī)章和當?shù)刂敢Ｓ嬎銉x器會根據(jù)Cal1和Cal2的檢測結(jié)果自動計算臨界值。樣本結(jié)果以臨界指數(shù)（信號樣本/臨界值）的形式被記為有活性或無活性。結(jié)果解釋使用Elecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法可按如下解釋：無活性：0.8 COI不確定：0.8 COI至1.0 COI有活性：1.0 COIElecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法中臨界指數(shù)0.8 COI的樣本是無活性樣本。臨界指數(shù)在0.8至1.0 COI之間的結(jié)果被視為不確定。這些樣本應(yīng)重新接受測試。如果結(jié)果還是不確定，應(yīng)測試例如隨后1周內(nèi)收集的第二份樣本。如果第二份樣本中風(fēng)疹病毒IgG抗

17、體滴度較第一份樣本明顯升高，則支持急性風(fēng)疹病毒感染的診斷。Elecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法中臨界指數(shù)1.0的樣本被視為有活性。樣本結(jié)果中超出臨界值的部分不代表樣本中存在的抗體總量。由于使用的測定法和試劑不同，不同制造商測定法得出的給定樣本中風(fēng)疹病毒 IgM結(jié)果可以不同。干擾因素陰性風(fēng)疹病毒IgM檢測結(jié)果，結(jié)合陽性風(fēng)疹病毒 IgG檢測結(jié)果，也不能完全排除急性風(fēng)疹病毒感染的可能性。處于急性感染早期的個體可能檢測不到風(fēng)疹病毒 IgM抗體。風(fēng)疹病毒感染后的免疫應(yīng)答個體差異很大。急性感染后期的無活性結(jié)果可能被Elecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法首先發(fā)現(xiàn)。單個樣本中風(fēng)疹病毒IgM抗體的檢出不足以支持急性風(fēng)

18、疹病毒感染。自然感染和接種疫苗后升高的IgM抗體水平可能持續(xù)，持續(xù)時間不等。應(yīng)執(zhí)行其它實驗室檢查或聯(lián)合試驗方法進了解情況。第二份樣本中風(fēng)疹病毒IgG抗體滴度較第一份樣本的滴度升高可支持急性風(fēng)疹病毒感染的診斷。應(yīng)謹慎判斷HIV病人、接受免疫抑制治療的病人或患有其它可導(dǎo)致免疫抑制的疾病的病人的檢測結(jié)果。沒有檢測來自新生兒、臍血、移植前病人的標本或除血清和血漿之外的其它體液，例如尿液、唾液或洋水。本測定法不受黃疸（膽紅素428mol/L或25mg/dL）、溶血（血紅蛋白1.49mmol/L或2.4g/dL）、脂血（脂肪乳劑Intralipid1500mg/dL）和生物素5mg/天），必須在末次生物素

19、治療8小時后采集樣本。濃度高達6210 IU/ml的類風(fēng)濕因子對檢測無影響。在Elecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法中高劑量鉤鐮效應(yīng)沒有導(dǎo)致假陰性結(jié)果。體外對18種常用藥物外加葉酸進行試驗，未發(fā)現(xiàn)會影響檢測結(jié)果。聯(lián)合捕獲測定法時，可觀察到非特異性的人IgM的干擾。增加非特異性人IgM的量可能導(dǎo)致Elecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法的陽性樣本回收率降低。對于所有含小鼠單克隆抗體的試驗，在測試那些接受單克隆抗體治療或接受單克隆抗體用于診斷目的的病人樣本時可能得出錯誤結(jié)果。少數(shù)病例中極高濃度鏈霉素抗體和釕抗體會影響檢測結(jié)果。作為診斷指標，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評估檢測結(jié)果。特殊的性

20、能指標試劑在各分析儀上的性能試驗數(shù)據(jù)如下。各實驗室得出的數(shù)據(jù)可能會稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人血清樣本和質(zhì)控品驗證重復(fù)性（批內(nèi)n21，批間n10）；MODULAR ANALYTICS E170分析儀上的總體精密度按照CLSI（臨床和實驗室標準研究所，以前被稱為NCCLS）的改良協(xié)議（EP5-A）執(zhí)行：每天6次，共10天(n=60)。下面是獲得的結(jié)果。b）HS人血清c）PCPreciControl分析特異性390份可能存在交叉反應(yīng)性的樣本采用Elecsys風(fēng)疹病毒IgM抗體測定法和市售的對照測定法進行測試，這些樣本包括：含對抗HAV、HBcAg、CMV*、EBV、HSV、Parv

21、o B19*、VZV、鼠弓形體、麻疹病毒和腮腺炎病毒的IgM抗體HIV（早期感染）、HCV（早期感染）、梅毒螺旋體抗體、淋球菌抗體和衣原體抗體陽性自身抗體（AMA、ANA*、SMA*）和類風(fēng)濕因子滴度升高接種過乙肝疫苗和流感疫苗陽性和不確定結(jié)果采用Elecsys風(fēng)疹病毒IgG親和力試驗和第三種市面上有售的風(fēng)疹病毒IgM抗體試驗進行驗證。檢測發(fā)現(xiàn)Elecsys風(fēng)疹病毒IgM抗體試驗得出7個假陽性結(jié)果和5個不確定結(jié)果。本組中的特異性（COI0.8）為96.9。置信區(qū)間下限為95.1。*CMV IgM陽性：30份樣本中有1個假陽性結(jié)果和1個不確定結(jié)果，Parvo B19 IgM：30份樣本中有2個不

22、確定結(jié)果；含自身抗體的病人：ANA：47份樣本中2個假陽性結(jié)果和2個不確定結(jié)果，SMA：12份樣本中1個假陽性結(jié)果，RF：48份樣本中3個假陽性結(jié)果。分析靈敏度急性風(fēng)疹病毒感染在兩個研究中心采用Elecsys風(fēng)疹病毒IgM測定法測試了109份早期期風(fēng)疹病毒感染的樣本，87份樣本檢出陽性結(jié)果。4份樣本結(jié)果不確定（活性），18份樣本檢出陰性結(jié)果。急性風(fēng)疹病毒感染早期的靈敏度（60）。在計算特異性時排除了采用風(fēng)疹病毒IgG抗體親和力試驗得出不確定結(jié)果的3份樣本和不能進一步檢測的3份樣本。參考文獻1. Pustowoit B, Liebert UG. Predictive Value of Serol

23、ogical Tests in RubellaVirus Infection during Pregnancy. Intervirology 1998;41:170-177.2. Cooper LZ, Alford CA. Rubella, in Infectious Diseases of the Fetus & Newborn Infant,: 5th Ed 2001, pp 347-88, ed Remington JS & Klein JO, Philadelphia: W.B. Saunders.3. Banatvala JE, Brown DWG. Rubella. Lancet

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