分子生物學實驗技術斑馬魚胚胎顯微注射實驗步驟_第1頁
分子生物學實驗技術斑馬魚胚胎顯微注射實驗步驟_第2頁
分子生物學實驗技術斑馬魚胚胎顯微注射實驗步驟_第3頁
全文預覽已結束

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

斑馬魚胚胎顯微注射實驗步驟：(如細)或外源物質(DNA)通過玻璃毛細管拉成的細針，注射到細胞質或細胞核內。是研究各種生（體外細胞受精技術至分子和細胞基本組分的轉運都需使用/或監(jiān)測某種特定的、蛋白質、mRNADNA等等。運（皮升至毫升藥劑或藥物的精確輸送（微灌注，例如藥理學的藥物檢驗。斑馬魚個體小，養(yǎng)殖成的開展顯微注射的材料。1、主要試劑的配制胚胎培養(yǎng)液的配制0.8gNaCl、0.04gKCl、0.00358gNa2HPO4、0.006gKH2PO4、0.144gCaCl2、0.246gMgSO4?7H2O、0.35gNaHCO3、0.06g青霉素、0.1g800mL1L1L。顯微注射指示劑的配制0.15ml21mm0.22mm的濾膜再次過濾，然后儲存在-20℃冰箱里備用。2、顯微注射操作1mm的毛細管，擰緊左右兩側的Heat-600,Pull-55,Velocity-80,0.4g30ml胚胎培養(yǎng)液中，在微波爐中加熱溶解后，先倒入約10ml6cm后將注射槽模型輕輕放置于膠面上，再倒入約20ml。瓊脂糖凝固后，取出注射量滅菌水，4℃保存，可反復使用。顯微注射用的胚胎收集：注射前天晚上挑選健康性成熟的斑馬魚按雌1128pH值為6.5～7.51020100枚為基準。注射體積的確定：打開顯微注射儀的電源，打開氮氣罐的閥門，調整601μl0.050%酚紅的同源或異源核酸45度角剪0.05mm30psi，在此壓力下調節(jié)注射時間為20～80msec（以10msec為間隔）的注射劑量（一般注射針頭越大越能提高注嘗試發(fā)現(xiàn)30msec為最佳注射時間用物鏡測微尺測量液滴直徑(d)為0.1-0.2mm，Vπd3/6500pl-1000pl。顯微注射：用巴斯德吸管將剛剛受精的胚胎緊密排布在瓊脂糖注射槽1005cm處，在目鏡下降下針頭，把針頭調入到視野的中心，10秒培養(yǎng)觀察：注射后的胚胎，用巴斯德吸管吸取幾滴胚胎培養(yǎng)液滴加到注射槽

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論